基于荧光素酶生物发光检测方法的研究及其应用进展

生物发光现象广泛存在于自然界中,不管是在陆地或是海洋都有发光生物的踪迹。其中基于荧光素酶的生物发光系统被广泛研究,启发着人类在基因、表观遗传等方面进行探索,并且开发出一系列相关的检测方法,用于体内体外各方面研究。本文从生物发光系统、荧光素酶的种类以及荧光素酶生物发光检测方法的开发与应用这几个方面进行总结,简要概括近年来基于荧光素酶生物发光检测的研究进展。     

卵巢浆液性囊腺癌中CAPN3的表达、预后及免疫浸润分析

目的 研究CAPN3在卵巢浆液性囊腺癌中的表达水平,明确其与卵巢浆液性囊腺癌预后及免疫浸润的关系。方法 通过GEPIA2、TIMER、TISIDB、Kaplan-Meier曲线分析CAPN3在卵巢浆液性囊腺癌中的表达谱、免疫浸润和预后价值。接着,利用STRING数据库构建了涉及CAPN3的蛋白质相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络,GEPIA数据库分析了10个基因与CAPN3的相关性。结果 CAPN3在卵巢浆液性囊腺癌患者中呈低表达,随着卵巢浆液性囊腺癌的恶化,CAPN3的表达量降低。CAPN3表达水平与卵巢浆液性囊腺癌中大多数免疫标志物呈显著相关,包括CD16、STAT5A、STAT3、LAG-3等。此外,CAPN3还与4种免疫抑制剂(BTLA、CD274、CSF1R和LGALS9)和7种免疫刺激剂(CD276、CXCL12、HHLA2、IL-6、TMEM173、TNFSF13和ULBP1)显著相关。高表达CAPN3mRNA水平在卵巢浆液性囊腺癌患者中显示出较好的总生存期,但在无进展生存期表现不明显。调控网络的分析表明,TTN与CAPN3相...     

生物信息学分析CHD3在卵巢癌中的作用

目的 本研究利用生物信息学分析CHD3基因在卵巢癌中的临床作用,探究卵巢癌的潜在肿瘤标志物。方法 通过Oncomine数据库检测健康卵巢样品和卵巢癌组织中CHD基因家族的mRNA表达,Kaplan-Meier plotter评估了卵巢癌患者的CHD3的预后值,并利用多种工具分析了与CHD3相关的临床作用,如突变、卵巢癌的临床分期、免疫亚型、药物敏感度和m⁶A相关基因等。利用R软件对CHD3的GSEA基因富集分析进行了分析。结果 卵巢癌患者的CHD3mRNA表达水平显著上调,且高表达CHD3mRNA水平在卵巢癌患者中显示出较好的总生存期和无进展生存期。此外,CHD3的表达水平在免疫亚型等方面比较,差异有统计学意义。CHD3与具有甲基转移酶(METL16、RBM15B)和RNA结合蛋白(YTHDC1)的调节相关基因呈显著正相关,CHD3的表达可考虑确定NSC319726化疗药物在卵巢癌患者中的治疗效果。最后,CHD3可能涉及通过Notch信号通路影响卵巢癌的发展。结论 CHD3基因可能是诊断卵巢癌和影响预后的肿瘤标志物。     

单细胞蛋白质成像方法进展

单细胞蛋白质的差异化表达及其亚细胞定位同机体的生理状态和病理机制密切相关。单细胞蛋白质原位成像方法的发展为空间单细胞蛋白质组学研究以及单细胞蛋白图谱绘制提供了强有力的工具。本文对近几年开发的基于抗体有序多轮孵育的循环免疫荧光成像、基于金属元素标签抗体的质谱成像、基于抗体DNA条形码的荧光成像、基于基因编码的荧光蛋白成像、基于拉曼光谱或X射线的光谱成像等单细胞蛋白质成像方法进行了总结,并对它们的成像原理作简要说明。文章重点关注了这些方法的多重性能、成像分辨率以及信号放大性能,并分析了它们在实际科研和临床工作中的应用特点,希望为新的单细胞蛋白质成像方法的开发提供参考,并为生物医学和精准医学的发展提供助力。     

PRPF19对肝癌细胞Huh7增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:探究PRPF19对肝癌细胞Huh7增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:基于生物信息学分析PRPF19在肝癌中的表达、预后及其药物敏感性，并通过实时荧光定量PCR和免疫组化法验证PRPF19在人体肝癌组织中的表达水平。采用瞬时转染技术在Huh7细胞中敲低PRPF19,并通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹试验验证敲低效果。CCK-8和集落形成试验检测敲低PRPF19对Huh7细胞增殖能力的影响。Transwell和划痕试验检测敲低PRPF19对Huh7细胞迁移和侵袭能力的影响。通过蛋白免疫印迹试验检测p-p53(Ser20)、p53等蛋白的表达水平。结果:PRPF19在肝癌中高表达并与患者的预后显著相关(P<0.05)。与对照组相比，敲低PRPF19后，肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及侵袭能力明显降低，p-p53(Ser20)、p53等相关蛋白表达量明显上升(P<0.05)。同时，PRPF19高表达的患者对索拉非尼和舒尼替尼有高敏感性(P<0.01)。结论:PRPF19在肝癌中具有良好的预后价值，敲低PRPF19可能通过激活p53通路抑制肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及...