9.1C3单克隆抗体轻,重链可变区基因克隆及序列分析

９．１Ｃ３分子是一种参与ＮＫ、巨噬细胞及ＬＡＫ细胞杀伤过程的重要细胞表面分子，主要表达于外周血单个核细胞表面。本文运用分子生物学技术，从分泌９．１Ｃ３ＭＣＡｂ的杂交瘤细胞中提取总ＲＮＡ，经反转录、ＰＣＲ分另１１分离了９．１Ｃ３ＭｃＡｂ轻链可变区（ＶＬ）基因及重链可变区（ＶＨ）基因，并用全自动荧光ＤＮＡ序列分析仪对９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因序列进行了分析。结果表明：９．１Ｃ３ＶＨ基因为３５１ｂＰ，编码１１７ａａ残基，９．１３ＶＬ为３２４ｂＰ，编码１０８ａａ残基；从推导出的氨基酸序列分析证实９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ序列均符合小鼠ｌｇ可变区的氨基酸序列特征；根据Ｋａｂｂａｔ分类体系，９．１Ｃ３ＶＨ隶属Ｉｇ重链第Ⅱ（Ｃ）亚组，９．１Ｃ３ＶＬ隶属小鼠ＩｇＫ链第Ⅴ亚组。９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因的克隆成功为其单链抗体的构建、表达奠定了良好的物质基础。     

扁桃体细胞的表型及其自然杀伤功能

目的比较腭扁桃体细胞 (PTC)与外周血单个核细胞 (PBMC)的表型 ,观察IL 2刺激前后PTC的杀伤活性,探讨扁桃体的免疫功能。方法用流式细胞仪分别检测扁桃体与PBMC表面CD3,CD4 ,CD8 ,CD20,PTA1及9.1C3的表达情况。用4h51Cr释放实验检测静止时及IL 2刺激后PTC中NK细胞杀伤K562活性的改变。结果PTC中CD20的表达率为71.2 % ,PBMC为15.5 % ,且PTC中的平均荧光强度 (MFI)明显高于PBMC。静止的扁桃体细胞杀伤功能非常低 ,经IL 2刺激后杀伤功能显著提高 ,效靶比为200∶1时达到61.5 %。CD3阳性率在PTC和PBMC中分别为32.8%和57.7% ;CD4/CD8的比值分别为6.97和1.11。两种新分子血小板T细胞活化抗原1(PTA1)和9.1C3在扁桃体中均有表达。结论扁桃体单个核细胞中B细胞占多数 ,而且CD20的表达密度明显高于外周血B细胞 ;在T细胞中以CD4 细胞为主 ;IL 2活化后PTC有较高的自然杀伤活性 ;与CTL和NK细胞相关的膜标记PTA1和9.1C3均有表达。     

诱导性多能干细胞的研究进展

诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS)是通过基因转染技术(gene transfection)将某些转录因子导入动物或人的体细胞, 使体细胞直接重构成为胚胎干细胞(embryonic stem cell, ES)细胞样的多潜能细胞.iPS细胞不仅在细胞形态、生长特性、干细胞标志物表达等方面与ES细胞非常相似, 而且在DNA甲基化方式、基因表达谱、染色质状态、形成嵌合体动物等方面也与ES细胞几乎完全相同.     

基因免疫诱导9.1C3分子因影像类抗独特型抗体的产生

本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单隆抗全重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＶ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪表明，其因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像８类抗独特型抗体的产生。     

人颗粒蛋白前体F片段结构域单克隆抗体的制备与鉴定北大核心CSCD

目的制备抗人颗粒蛋白前体F片段(GrnF)的单克隆抗体(mAb),并初步鉴定其生物学特性。方法通过分子生物学技术构建含人GrnF编码序列的酵母表达载体,表达并纯化酵母来源的融合人血清白蛋白(HSA)的GrnF片段HSA-GrnF。用纯化的HSA-GrnF免疫BALB/c小鼠,然后将免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0进行融合,用ELISA筛选阳性克隆,并采用有限稀释法进行亚克隆;采用免疫荧光染色及Westernblot法对所获得的mAb的特异性进行鉴定,并用抗体亚类测定试剂盒检测所获得单克隆抗体亚类。结果成功获得2株可分泌特异性抗GrnF的杂交瘤细胞株(1G6及4E8),经鉴定这2株抗体重链亚类均为IgG1亚类。结论成功制备了抗人GrnF片段结构域的单克隆抗体。     

血管内皮细胞生长因子及其表达调控研究进展

现有研究表明血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在调节血管生成中发挥着重要作用。VEGF的表达调控受多种因素的影响,其异常表达与肿瘤及某些疾病的发生有着密切的关系。通过研究VEGF的表达调控及其参与的重要信号通路,寻找出调控VEGF表达及其生物学功能的药物作用靶点,对于肿瘤及某些疾病的治疗具有重要的理论意义和实际应用价值。本文将着重对VEGF家族及其受体、VEGF的表达调控等方面进行综述。     

免疫抑制因子的研究进展

免疫抑制因子是一类调节免疫应答的重要细胞因子,主要来源于T 细胞、B 细胞、单核细胞和巨噬细胞。目前采用饱和硫酸铵沉淀、凝胶过滤以及高效液相色谱等技术对大部分免疫抑制因子进行了纯化,其中少数几种抑制因子cDNA 克隆和表达成功。免疫抑制因子的作用机理较为复杂,主要是通过细胞表面相应受体以及影响其它的细胞表面标记和基因表达水平方面起作用。免疫抑制因子作为一类免疫应答的调节因子,不仅在基础免疫中有着重要意义,而且同临床免疫学的关系也十分密切。     

言息化条件下PDCA循环管控抗菌药物使用的方法

目的通过信息化条件下PDCA循环管控使得抗菌药物的合理应用达标。方法以医院信息管理系统为平台开发抗菌药物管理模块,在信息化条件下进行PDCA循环管控抗菌药物,采取每星期提取相关信息．通过OA系统滚动警示超标科室与医师,月底绩效奖惩。每半年对抗菌药物的使用进行统计分析,对遗留问题提出改进意见并转入下一个管理循环。结果对2011-2012年两年间的抗菌药物使用进行全样本统计,在信息化条件下多个PDCA循环管理与持续性改进,基本达到卫生部抗菌药物使用管理指标要求。结论利用信息化条件下PDCA循环管理,可准确、快速、有效地监控抗菌药物的使用,对每星期滚动警示提醒医师适时持续性改进．有较高的应用价值,同时PDCA循环管理方法还需不断完善,以适应抗菌药物使用管理的新需求。     

肿瘤血管生成调节与肿瘤治疗

肿瘤血管生成是一个非常复杂的过程，涉及到多种因子的调节。针对肿瘤血管生成的治疗对策在目前肿瘤治疗中具有十分重要的意义。本文就影响肿瘤血管生成的各种调节因子、抗血管生成的主要治疗靶标及研发现状作一综述，为肿瘤治疗的抗血管生成新靶标的设计研究提供信息。