810nm弱激光对M1型骨髓源性巨噬细胞的作用及其机制

目的 :体外建立M1型骨髓源性巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)-弱激光照射模型,探讨弱激光照射对M1型BMDM炎症因子分泌的影响及其可能机制。方法:体外分离BALB/c小鼠BMDM,应用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)条件性培养基培养,流式细胞术检测巨噬细胞标志物F4/80的表达,确定所获得细胞为纯度较高的BMDM。应用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激24h诱导原代BMDM向M1型BMDM方向极化。将细胞随机分为弱激光治疗(low level laser therapy,LLLT)组和对照组,LLLT组采用810nm波长激光照射,光斑面积4.5cm2,照射功率密度2m W/cm2,照射持续440s,最终获得照射能量为4J,对照组置于暗箱,不进行照射。应用CCK8实验测定细胞活性,RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interlukin-1β,IL-1β)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthases,i NOS)的m RNA表达情况,ELISA检测TNF-α及IL-1β蛋白分泌,Western blot测定i NOS和M1型巨噬细胞极化的重要转录因子核因子-κB p65(nuclear factor-kappa B,NF-κB p65)的表达。组间比较采用独立样本t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果:LPS刺激后,使用弱激光照射的M1型BMDM细胞活性显著提高,升高至对照组的2.313±0.630倍(P0.05)。LLLT组IL-1βm RNA表达为0.586±0.145,对照组为1.000±0.022,两组比较有统计学差异(P0.05);LLLT组TNF-α的m RNA表达为0.862±0.152,对照组为1.000±0.082,两组比较无统计学差异(P=0.082);LLLT组i NOS的m RNA表达为0.720±0.039,对照组为1.000±0.024,两组比较有统计学差异(P0.05)。对照组TNF-α为270.478±26.831pg/ml,LLLT组为209.365±5.600pg/ml,两组比较有统计学差异(P0.05);对照组的IL-1β为98.941±12.430pg/ml,LLLT组为77.076±2.023pg/ml,两组比较有统计学差异(P0.05)。对照组的i NOS蛋白表达为1.005±0.075,LLLT组为0.210±0.010,两组比较有统计学差异(P0.05);对照组NF-κB p65蛋白表达为1.006±0.260,LLLT组为0.428±0.169,两组比较有统计学差异(P0.05)。结论:810nm LLLT M1型BMDM可抑制其炎性因子IL-1β及i NOS的m RNA表达,下调炎性因子IL-1β及TNF-α的分泌,降低M1型BMDM表面标志物i NOS的表达,同时显著下调M1型巨噬细胞经典极化转录因子NF-κB p65的表达。810nm LLLT可调控M1型巨噬细胞的极化状态,抑制其炎性因子分泌,该调控作用和其下调M1型巨噬细胞经典极化转录因子NF-κB p65有明显相关性。     

泽泻原三萜、降三萜和倍半萜的分离及其抗炎活性研究＊

目的 对泽泻中原三萜、降三萜和倍半萜化学成分分离和鉴定及其抗炎活性进行研究；方法 采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高速逆流色谱、中压制备色谱和半制备色谱法对泽泻中各类化合物进行分离，利用¹H和¹³C NMR对分离化合物进行结构鉴定；通过测定各单体对LPS（1 μg·mL^-1）诱导Caco-2细胞中NO生成的抑制作用评价其抗炎活性。结果 从泽泻中分离得到19个化合物，包括8个原三萜类成分：alisol A 23 acetate （1），alisol G （2），16-oxo-11-anhydroalisol A （3），16-oxo-11-anhydroalisol A 24 acetate （4），alisoma A （5），alisoma B （6），alismanol J （7），alismanol B （8）；1个降三萜类成分：17-nor-protostane （9）；9个倍半萜类成分：orientalol L （10），orientalol M （11），orientalol N （12），orientalol O （13），orientalol P （14），alismanoid A （15），heyneanones D （16），leptocladol B （17），chabrolidione B （18）；1个木脂素类成分：pnoresinol （19）。原三萜类成分均具有显著的抑制活性，化合物1-8的IC₅₀分别为2.1、0.9、7.3、10.0、11.0、16.0、13.5和10.5 μmol·mL^-1，降三萜及倍半萜活性较弱，化合物10、11、13、15、16和17的IC₅₀分别为24.0、26.2、30.6、15.7、17.2和15.2 μmol·mL^-1。结论 化合物16、17、18和19为该植物首次分离得到。首次报道了倍半萜类成分对LPS诱导Caco-2细胞中NO生成的抑制作用，其中alisol A 23 acetate和alisol G的抑制活性最强。     

L4/5单节段融合对不同腰椎Roussouly分型腰椎骨盆矢状位参数和临床疗效的影响

目的 :探讨腰椎单节段(L4/5)融合对不同腰椎Roussouly分型腰椎骨盆矢状位参数和临床疗效的影响。方法:回顾我院2008年3月~2012年3月行L4/5节段融合的患者317例,共纳入具有健康相邻节段、随访≥3年、资料齐全者51例。男25例,女26例,平均年龄43.45岁。依据腰椎前凸顶点位置将腰椎矢状位曲线分为四型(Roussouly分型):Ⅰ型,顶点位于L5椎体或者L4/5椎间隙;Ⅱ型,顶点位于L4底部或者中部;Ⅲ型,顶点位于L4上部或者L3/4椎间隙;Ⅳ型,顶点位于L3椎体及其以上。术前、术后和末次随访时行视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)、JOA评分,测量腰椎前凸角(LL)、上半圆(UP arc)、L4/5椎间前凸角(IVA4-5)、骨盆入射角(PI)、骨盆倾斜角(PT)、骶骨倾斜角(SS)、C7垂线骶骨距离/股骨头骶骨距离比值(C7PL/SFD ratio),术前相邻节段评估应用MRI Modified Pfirrmann Scale(Modic)量表分析,随访应用UCLA量表结合脊柱退变稳定性标准评估影像学相邻节段退变(r ASD)情况。结果:本组腰椎Roussouly分型的分布如下:Ⅰ型10例(19.61%),Ⅱ型15例(29.42%),Ⅲ型20例(39.22%),Ⅳ型6例(11.76%)。平均随访42.58个月(36~67个月)。Ⅰ型:术后和末次随访时的LL、UP arc、和SS较术前显著提高,PT减小,具有统计学差异(P0.01)。Ⅱ和Ⅲ型:LL末次随访时较术前显著提高(P0.05),而SS、PT、PI无显著性变化,Ⅱ型末次随访时UP arc较术前和术后显著提高。Ⅳ型:LL、UP arc、SS、PT和PI手术前和术后对比无显著性差异。各型术后及随访时的IVA4-5较术前提高,而C7PL/SFD比值减小,各型术后及末次随访时的VAS、ODI和JOA评分与术前相比显著改善。本组病例中r ASD发病率为17.64%,r ASD相关危险因素分析发现:年龄、随访时间、IVA4-5、PI是显著危险因素。结论:单节段融合可显著增加节段前凸角,但在不同腰椎Roussouly分型中对脊柱-骨盆参数的影响有所不同。节段椎间角度是ASD的显著危险因素,年龄越大,随访时间越长,PI值较高时较容易发生r ASD。     

复合全氟三丁胺携氧材料的嗅鞘细胞移植促进大鼠周围神经损伤修复的研究

目的探究复合全氟三丁胺（perfluorotributylamine,PFTBA）的嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）移植能否更进一步促进外周神经损伤后神经再生以及功能恢复。方法从大鼠嗅球分离并纯化OECs并鉴定。制作大鼠坐骨神经缺损模型。将60只坐骨神经缺损大鼠随机分为3组：自体神经移植组,OECs神经导管组,PFTBA-OECs神经导管组。在体内环境下分别测试术后3、7、14、28 d PFTBA对OECs存活率的影响。术后4周,对再生神经进行免疫荧光染色以及超薄切片,确定PFTBA-OECs对再生神经的作用。并在术后2、4、8周分别对各实验组大鼠坐骨神经功能指数值进行测量,以确定神经功能恢复情况。结果分离纯化的原代OECs纯度为(95.8±2.1)%;体内条件下,PFTBA能够大幅提高OECs的存活率（P<0.05）;与OECs神经导管组比较,PFTBA-OECs神经导管组极大地促进了神经轴突的再生（P<0.05）;再生神经透射电镜显示,PFTBA-OECs神经导管组再生神经轴突数量明显多于OECs神经导管组,髓鞘厚度明显优于OECs神经导管组（P<0.05）;术后坐骨神经功能指数值显示,PFTBA-OECs神经导管组大鼠功能恢复情况明显优于OECs神经导管组（P<0.05）。结论PFTBA能够明显提升OECs的促神经修复能力,明显提升神经损伤后的轴突再生能力以及髓鞘化程度,为解决细胞移植后面临的缺氧微环境提供了解决方案。     

电刺激对背根神经节和雪旺细胞髓鞘化的影响

目的:建立体外的背根神经节（DRG）—雪旺细胞（SCs）—电刺激模型,为研究电刺激促周围神经成髓鞘机制提供基础。方法:以函数发生器和电刺激小室构建电刺激细胞培养系统,DRG/SCs共培养24 h后分为对照（Ctrl）组和电刺激（ES）组。ES组给予矩形波电刺激,6 Vp-p,10 Hz,1 h/d,7 d。Ctrl组无电刺激。利用CCK8观测电刺激对细胞毒性的影响,利用髓磷脂碱性蛋白（MBP）免疫荧光检测电刺激对DRG/SCs髓鞘化的影响。结果:CCK8细胞增殖毒性实验显示,ES组光密度值略高于Ctrl组,但两组之间无统计学意义。免疫荧光检测结果显示ES组MBP的荧光强度明显高于Ctrl组（P<0.01）。结论:本文设计的电刺激细胞培养系统对神经细胞安全无毒,连续7 d的电刺激可提高神经髓鞘化率。     

小剂量甲泼尼龙联合甲氨蝶呤和羟氯喹治疗系统性红斑狼疮的临床疗效及安全性分析

目的 评价小剂量甲泼尼龙联合甲氨蝶呤和羟氯喹治疗轻中度系统性红斑狼疮（SLE）患者的疗效及安全性。方法 96例轻到中度系统性红斑狼疮患者,按患者就诊时间分为观察组和对照组,各48例。两组患者均给予甲氨蝶呤和羟氯喹;对照组加用双氯芬酸钠（75 mg/次,2次/d）,观察组加用甲泼尼龙（4 mg/次,2次/d）,两组均治疗12周。比较两组患者的疗效和不良反应发生情况。结果 两组患者经过12周的治疗,观察组有效率为91.67%,明显高于对照组的64.58%,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前,两组患者间狼疮疾病活动指数（SLEDAI）、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、补体C3水平相比,差异均无统计学意义;治疗后,两组患者的SLEDAI积分、ESR、CRP、补体C3水平均较治疗前明显改善,同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）;且观察组比对照组改善更明显,两组间各指标相比差异均具有统计学意义（P<0.05）。治疗后两组相比,观察组的不良反应发生率低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 小剂量甲泼尼龙联合甲氨蝶呤和羟氯喹治疗系统性红斑狼疮疗效显著,安全性高,值得推广。     

老年患者跌倒检测系统的设计与实现

目的：设计老年患者跌倒检测系统用以解决老年患者因意外跌倒而未能被及时发现的问题,提高医疗护理效率。方法：基于实时流传输协议(RTSP),结合YOLOv5和Kalman算法,采用Vue及Flask等技术设计老年患者跌倒检测系统,搭建可视化后台系统管理,通过多路视频流综合处理为医疗工作者提供统一管理平台,实现人体跌倒行为的自主检测与报警。选取2020-2022年在空军军医大学西京医院进行跌倒检测的30名健康志愿者,根据模拟行为类别将其分为正常行走组、蹲起组和跌倒组,每组10名,采用检测准确率和检测速度两项评价指标对跌倒检测性能进行评估,验证判断老年患者跌倒检测系统能否达到及时准确的跌倒检测与报警要求。结果：正常行走组、蹲起组和跌倒组的总体跌倒检测速率可达29帧/s,准确率可达95.24%,系统能够及时响应跌倒警报。结论：老年患者跌倒检测系统可辅助医护工作者及时发现并处理跌倒行为的发生,提升老年患者跌倒检测效率,能够满足老年患者跌倒行为的实时检测和报警。     

ATF4靶向AKT1对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响

目的 探讨活化转录因子4(ATF4)靶向蛋白激酶B(AKT1)对膝关节软骨细胞凋亡及软骨退变的影响.方法 体外实验:①体外培养正常软骨细胞与骨关节炎(OA)软骨细胞,实时荧光定量PCR检测两组细胞内ATF4、AKT1的mRNA表达水平;②通过细胞转染法构建下调ATF4的OA软骨细胞;③MTT法及Annexin V/PI...