17 老年学习记忆减退大鼠海马和新皮质小白蛋白阳性神经元的丢失

<正>小白蛋白(Parvalbumin,pv)是一种细胞内钙调节蛋白,存在于GABA能神经元的一个亚型中,有研究报道它与学习记忆有密切关系.本文研究了衰老脑PV阳性神经元的变化及其与老年性学习记忆缺陷的关系.实验以青年鼠在Morris水迷宫测试中平均逃避潜伏期99%和95%正常值范围,将老年鼠分为学习记忆损害组和学习记忆正常组.用免疫组化方法显示海马结构、额皮质和颞皮质的PV阳性神经元,并对其进行定量分析.结果发现老年正常、损害组海马CAI区PV阳性神经元数量较青年组均明显减少(P<0.01),CA3区和齿状回老年正常、损害组PV阳性神经元数量较青年组显著减少(P<0.01),此外,老年损害组也较老年正常组明显减少(P<0.05),颞皮质只有老年损害组PV阳性神经元较青年组明显减少(P<0.05).相关分析结果表明被检脑区PV阳性神经元数量与大鼠在Morris水迷宫的平均逃避潜伏期、原平台象限游泳距离百分比分别呈显著正相关和负相关关系(P<0.01,r=-0.68;P<0.01,r=0.70).本研究结果提示在老年大鼠颞叶皮质和海马结构,尤其是海马CA3区和齿状回的PV阳性神经元的丢失可能与老年性学习记忆缺陷有关.     

老年学习记忆减退大鼠齿状回突触的定量研究

据老年大鼠在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫中的行为表现，将其分为老年学习记忆减退和学习记忆正常两部分，采用透射电镜观察、拍片，对齿状回中分子层触的数量和大小进行体视学定量分析。     

重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备

目的 以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原，制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子，构建hbFGF’原核表达载体并在大肠杆菌(E．coli)中表达，以纯化的hbFGF、免疫新西兰兔，制备高效价抗血清，用于重组hbFGF、的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在E．coli中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95％以上的重组hbFGF，以该重组蛋白免疫兔子，在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1：512000。免疫印迹分析显示该抗血清与E．coli中表达的重组hbFGF、和标准hbFGF、均有特异性反应，但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应，经E．coli菌体蛋白吸附的抗血清，与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清，经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。     

神经元烟碱乙酰胆碱受体受阻滞所致早老型痴呆动物模型的建立

海马区内注射Ｋ－银环蛇毒素（Ｋ－ＢＧＴ）可造成小鼠学习记忆明显障碍,以建立早老性痴呆（ＡＤ）患者学习记忆缺损模型。对小鼠的损害作用随Ｋ－ＢＧＴ剂量增加而明显增加。水迷宫多项指标测试结果表明,Ｋ－ＢＧＴ损害组小鼠与对照组小鼠相比,空间学习和记忆能力显著下降。明暗回避反应实验结果也表明,Ｋ－ＢＧＴ损害小鼠潜伏期明显缩短,错误次数增多;两种检测方法均表明Ｋ－ＢＧＴ可导致小鼠学习记忆明显障碍,而且这种损害具有持久的作用。     

一种有效分离人尿激肽释放酶和人尿胰蛋白酶抑制剂的方法

人尿激肽释放酶和人尿胰蛋白酶抑制剂是存在于尿中的酸性蛋白.本文通过ZnCl2胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的方法可有效分离两者,得率高、活性保留好.     

C2C12细胞体外微型灌注生物反应器培养初探

目的 研究组织工程种子细胞C2C12在微型灌注生物反应器中培养的特点,以期探索一种有效的种子细胞体外培养方法.方法 在自行研制的微型灌注生物反应器中以20%换液量/天、30%换液量/天两种条件进行C2C12细胞培养,通过细胞形态、生长曲线、细胞群体倍增时间及生化代谢离线检测等对培养情况进行研究.结果 微型灌注生物反应器培养较传统的细胞培养瓶培养,培养基使用效率提高;在细胞形态无显著性变化的情况下,细胞群体倍增时间显著缩短.而且,C2C12细胞的生化代谢在20%换液量/天灌注条件下较30%换液量/天的为佳.结论 C2C12细胞的灌注生物反应器培养方式较传统的细胞培养瓶培养方式优越,同时,20%换液量/天的灌注条件较30%换液量/天为佳.该灌注培养体系值得进一步深入研究.     

猪卵透明带-3β蛋白核心片断在E.coli中的表达

目的:探讨通过基因工程的方法在大肠杆菌中表达猪卵透明带蛋白pZP3b的核心片断。方法:采用PCR方法扩增原cDNA中编码第44-306个氨基酸的pZP3β核心片断的DNA序列,克隆入pET-3c载体进而在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pLysS中表达。结果:表达的pZP3β核心蛋白占菌体总蛋白的15%,并经Western-blot鉴定为目的蛋白。结论:pZP3β核心片断在大肠杆菌中获得较高的表达,有利于产物的纯化,为后续阐明pZP3β核心区域的性质和相关抗生育研究打下了基础。     

bFGF与皮肤创面修复过程中瘢痕形成的关系研究

碱性成纤维细胞生长因子（basicFibroblastGrowthFactor简称bFGF）是一种多肽类生长因子，主要作用于中胚层和神经外胚层起源的组织和细胞。也就是说来源于中胚层、神经外胚层的细胞表面分布有bFGF受体。bFGF与之结合进而启动细胞内合成过程，促使细胞生长、分裂和分化。皮肤由来源于外胚层的表皮和中胚层的真皮及皮下组织构成，在皮肤各层的组织和细胞中分布着bFGF受体。在表皮，基底层细胞可进行分裂，产生新生表皮细胞，并最终形成有角质蛋白的角质细胞。真皮则由胶原纤维、弹力纤维和基质等组成。成纤维细胞是分泌这三种成分的最…     

谷氨酸钠对新生豚鼠耳蜗螺旋神经节的毒性损伤

探讨谷氨酸钠不同给药时程及不同存活时程对新生豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞及听力损伤的程度。谷氨酸钠按 2g kg腹腔注射给予 ,每天一次。G2 1 0组 :连续用药 2 1d ;G7 14组 :连续用药 7d ,停药后饲养 14d ;G7 35组 :用药 7d ,后饲养 35d。随后检测其听力水平以及螺旋神经节细胞的形态变化。结果表明各组听阈均有升高 ,伴有神经节细胞的部分消失 ,G2 1 0组听阈为 :6 5 3± 2 1 5dB ,神经节细胞密度为 :1985 3± 10 2 1 7 mm2 ;G7 14组 :听阈 6 3 8±19 2dB ,细胞密度 314 5 4± 12 2 5 3 mm2 ;G7 35组 :听阈 5 4 6± 14 3dB ,细胞密度 2 990 4± 10 2 2 1 mm2 。提示谷氨酸钠对新生豚鼠螺旋神经节细胞毒性损伤程度与用药时程有关 ;受损细胞大部死亡 ,部分细胞随再存活时间逐渐自我修复 ;听力恢复与停药后存活时间及节细胞状态关联     

学习记忆减退老龄大鼠脑突触体内游离Ca^2＋浓度的改变

学习记忆减退老龄大鼠脑突触体内游离Ｃａ￣（２＋）浓度的改变洪岸，姚志彬，顾耀铭，陈以慈（中山医科大学解剖教研室脑研究室，广州５１００８９）由于Ｃａ２＋在突触传递中的重要作用使得研究者对神经系统Ｃａ２＋与学习记忆的相关研究日趋深入，如大量研究证实Ｃａ２...