有氧运动经CNPY2调控PERK-CHOP信号通路改善小鼠非酒精性脂肪肝的机制研究

摘要 目的：采用冠层同源物2（CNPY2）基因敲除,结合运动干预,探讨CNPY2和有氧运动在高脂膳食诱导非酒精性脂肪肝（NAFLD）中的作用及机制。 方法：（12±1）周龄SPF级C57BL/6J雄性CNPY2基因敲除（KO）小鼠及其同系同龄同窝野生型（WT）小鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组、模型组和模型运动组。对照组予普通饲料喂养,模型组和模型运动组予高脂饲料喂养,连续17周。模型运动组从第10周开始进行连续有氧运动干预,直至第18周实验结束。HE和油红O染色观察肝组织病理形态;全自动生化仪检测小鼠血清高密度脂蛋白（HDL-c）、低密度脂蛋白（LDL-c）、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）水平;Western Blot法检测肝组织CNPY2、PERK、p-eIF2α、CHOP蛋白表达;qRT-PCR法检测肝组织PERK mRNA和eIF2α mRNA表达;Tunel法检测肝细胞凋亡。 结果：WT小鼠模型组CNPY2表达较对照组显著升高（P＜0.05）,WT小鼠模型运动组CNPY2表达较模型组显著降低（P＜0.05）。同时,与对照组比较,KO和WT小鼠模型组均可见明显肝细胞脂肪性变和脂滴,其血清ALT、AST、TC、TG和LDL-c水平、肝组织PERK、p-eIF2α、CHOP、PERK mRNA和eIF2α mRNA表达、肝细胞凋亡显著升高（P＜0.05）,血清HDL-c水平显著降低（P＜0.05）。与模型组比较,KO和WT小鼠模型运动组上述指标得到显著改善（P<0.05）。与WT小鼠比较,KO小鼠肝组织脂肪性变减轻,肝组织CNPY2、PERK、p-eIF2α、CHOP、PERK mRNA和eIF2α mRNA表达显著降低（P<0.05）。 结论：CNPY2基因缺失和有氧运动均可有效改善NAFLD,其机制可能与其下调CNPY2表达,抑制PERK-CHOP信号通路活性,降低PERK-CHOP信号通路相关分子表达,减少肝细胞凋亡有关。     

有氧运动对AKT/GSK3β介导非酒精性脂肪肝肝细胞凋亡的影响

目的 探讨有氧运动对蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β(AKT/GSK3β)通路介导非酒精性脂肪肝肝细胞凋亡的影响。方法 6周龄雄性C57BL/6J小鼠30只，随机分为对照组、模型组和模型运动组，对照组给予普通饲料，模型组与模型运动组给予高脂饲料，喂养18周。第10周，模型运动组进行有氧运动干预，连续8周。检测血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglycerides, TG)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol, LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)水平，油红O和HE染色观察肝脏病理形态，蛋白免疫印迹检测AKT、P-AKT^Ser473、GSK3β、P-GSK3β^Ser9、Caspase-3蛋白表达变化...