基于神经血管单元稳态探讨巨刺法改善大脑中动脉闭塞大鼠运动功能机制的研究

摘要 目的：基于神经血管单元稳态探讨巨刺法改善大脑中动脉闭塞模型（MCAO）大鼠运动功能的机制。 方法：将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组（IS组）、模型组（IC组）、巨刺组（ON组）、非穴组（FON组）（各12只）。其中IC组、ON组及FON组大鼠制备MCAO模型,成模后ON组接受电针健侧“曲池”和“足三里”,FON组取穴位置的旁开5mm处电针干预7天,IS组和IC组不进行电针干预,仅进行模拟抓取。使用改良神经功能缺损评分（mNSS）评测各组大鼠神经功能;应用CatWalk步态分析对比各组大鼠运动功能;应用小动物磁共振成像系统行弥散张量成像（diffusion tensor imaging,DTI）扫描,使用DTI衍生参数测量运动皮质、纹状体神经传导束各向异性分数比值（ratio fractional anisotropy,rFA）;应用TTC染色观察脑梗死体积,应用免疫荧光法检测脑缺血侧运动皮质神经元核蛋白（neuronal nuclei,NeuN）的表达变化;应用免疫组织化学法检测血小板-内皮细胞黏附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule-1 ,PECAM-1/CD31）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、钙结合蛋白（ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1）表达变化;应用Western Blot法检测闭锁连接蛋白-1（zonula occludens 1,ZO-1）及闭合蛋白（Occludin）的表达变化。 结果：干预7天后,与IC组相比,ON组大鼠神经功能评分、mNSS评分降低（P<0.05）;与IC组、FON组相比,ON组的平均运动速度加快、足印最大接触面积增加（P<0.05）;与IC组、FON组相比,ON组的梗死体积减少、rFA值相对增加（P<0.05）;与IC组、FON相比,ON组的NeuN阳性细胞表达明显升高（P<0.05）;与IC组、FON组相比,ON组的CD31表达显著升高、GFAP和Iba1的表达显著降低（P<0.05）;与IC组、FON组相比,ON组的ZO-1、Occludin蛋白表达均显著升高（P<0.05）。CatWalk步态参数、免疫荧光、免疫组化与Western Blot检测结果改善有一致性。 结论：巨刺法改善MCAO大鼠运动功能,其机制可能与修复神经血管单元稳态有关。     

基于突触可塑性探讨电针改善大脑中动脉闭塞大鼠运动障碍的作用机制

目的：基于突触可塑性观察电针曲池、足三里对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠运动障碍的改善。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、穴位组、非穴组，每组15只。采用Zea Longa线拴法制备MCAO大鼠模型，电针曲池、足三里，干预14 d。通过神经功能评分判断大鼠的神经功能缺损情况；CatWalk步态分析比较各组大鼠运动功能，TTC染色观察脑梗死体积，透射电镜观察突触超微结构和数量，免疫荧光检测缺血侧运动皮层突触相关因子突触后致密物-95（PSD-95)、突触蛋白的表达情况。结果：干预14 d后，与模型组比较，穴位组大鼠神经功能评分降低(P<0.05)；步行速度提高、双足支撑时间缩短(P<0.05)；脑梗死体积减少(P<0.05)；突触超微结构改善明显，突触数量增加(P<0.05)，突触相关因子突触蛋白、PSD-95表达上调(P<0.05)。Catwalk步态参数、脑梗死体积与突触超微结构改善有一致性。结论：电针曲池、足三里穴可改善MCAO大鼠运动障碍，其机制可能与上调突触相关因子的表达，改善突触可塑性有关。