甘草总黄酮通过调控MAPK/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应的抑制作用

摘要：目的:探讨甘草总黄酮通过调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的抑制作用。方法:体外分离培养原代HGF,以5μg·ml-1?LPS处理后,采用CCK-8实验检测0,1.5,3,6,12,24μg·ml-1甘草总黄酮对HGF细胞活力的影响,筛选出甘草总黄酮适合的剂量和作用时间。体外培养原代HGF,随机分为对照组(不进行任何药物处理)、LPS组(5μg·ml-1)、甘草总黄酮低剂量(6μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)组、甘草总黄酮高剂量(12μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)组、甘草总黄酮高剂量(12μg·ml-1)+LPS(5μg·ml-1)+C16-PAF(MAPK激活剂,4μmol·L-1)组。采用CCK-8实验、划痕实验分别检测各组细胞活力和迁移率;酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测各组细胞炎性因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、环氧合酶-2(COX-2)释放水平;免疫印迹法检测各组细胞IL-6、IL-8、COX-2、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、趋化因子2(CCL2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-8(MMP-8)及MAPK/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:甘草总黄酮可提高LPS诱导的HGF细胞活力,与药物剂量及作用时间呈正相关。与对照组相比,LPS组细胞活力和迁移率显著降低(P<0.05),IL-6、IL-8及COX-2的释放量、IL-6、IL-8、COX-2、ICAM-1、CCL2、MMP-2及MMP-8蛋白表达、p-细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)/ERK1/2、p-c-Jun N-末端激酶(JNK)/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达显著升高(P<0.05)。与LPS组相比,甘草总黄酮低、高剂量+LPS组细胞活力和迁移率均显著升高(P<0.05),IL-6、IL-8及COX-2的释放量、IL-6、IL-8、COX-2、ICAM-1、CCL2、MMP-2及MMP-8蛋白表达、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65及TNF-α表达均显著降低(P<0.05),且甘草总黄酮低、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05)。与甘草总黄酮高剂量+LPS组相比,甘草总黄酮高剂量+LPS+C16-PAF组细胞活力和迁移率显著降低(P<0.05),IL-6、IL-8及COX-2的释放量、IL-6、IL-8、COX-2、ICAM-1、CCL2、MMP-2及MMP-8蛋白表达、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65及TNF-α显著升高(P<0.05)。结论:甘草总黄酮可通过抑制MAPK/NF-κB信号通路而降低炎性因子表达,并下调ICAM-1、CCL2、MMP-2、MMP-8蛋白表达,抑制LPS诱导的炎症,促使HGF生长和迁移。     

穴位埋线联合坤泰胶囊治疗绝经过渡期早期月经过少临床观察

目的:观察穴位埋线联合坤泰胶囊治疗肾阴虚型绝经过渡期早期月经过少的疗效.方法:68例按随机数字表法分为对照组35例和观察组33例,对照组用克龄蒙治疗,观察组用坤泰胶囊联合穴位埋线治疗.结果:观察组总有效率较对照组高(P＜0.05).两组治疗3个月经周期后FSH/LH均低于治疗前(P＜0.05).结论:穴位埋线联合坤泰胶...     

冲牙器辅助对口腔正畸患者牙龈龈沟液炎性因子及牙周健康状况的影响

目的 观察冲牙器辅助对口腔正畸患者牙龈龈沟液炎性因子及牙周健康状况的影响。方法选取2020年01月至2021年12月于我院口腔科就诊的口腔正畸患者80例。随机数字表法分为对照组和观察组，每组40例；对照组采用声波震动牙刷早、中、晚饭后清洁口腔3 min，观察组采用声波震动牙刷联合冲牙器清洁口腔，冲牙器使用时间3 min；分别于清洁前后检测两组牙周情况[出血指数（BI）、菌斑指数（PLI）、牙龈指数（GI）、菌斑百分率、探诊深度（PD）]和龈沟液炎性因子[检测龈沟液中白细胞介素-6(IL-6)、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]。结果 清洁后观察组BI、PLI、GI、菌斑百分率低于对照组（P<0.05），观察组牙齿邻面（颊侧近中、颊侧远中、舌侧近中、舌侧远中）和光滑面（颊侧正中、舌侧正中）的BI低于对照组（P<0.05），观察组IL-6、hs-CRP、IL-1β及TNF-α均低于对照组（P<0.05）。结论 冲牙器辅助能有效减少口腔正畸患者的牙龈龈沟液炎性因子水平，改善牙周健康状况。     

miR-153-3p靶向调控CHI3L1对LPS所致人牙周膜干细胞炎症反应的影响

目的:探索miR-153-3p是否能通过靶向调控几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)改善脂多糖(LPS)所致人牙周膜干细胞(hPDLSCs)炎症反应。方法:分离培养hPDLSCs,采用LPS处理建立炎症细胞模型，并进行miR-NC、miR-153-3p mimics、si-NC、si-CHI3L1以及miR-153-3p mimics+pc-NC、miR-153-3p mimics+pcDNA-CHI3L1转染。转染48h后qRT-PCR法检测各组细胞中miR-153-3p、CHI3L1 mRNA表达，ELISA法检测细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western Blot法检测细胞中CHI3L1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-153-3p与CHI3L1的靶向关系。结果:LPS处理后hPDLSCs中miR-153-3p表达下调(P<0.05),CHI3L1 mRNA与蛋白表达均显著上调(P<0.05);过表达miR-153-3p或抑制CHI3L1表达可降低LPS诱导的hPDLSCs中IL-6、IL-1β、TNF-α水平...