Netrin-1对大鼠实验性脑梗死后同侧丘脑血脑屏障保护作用

目的观察脑梗死后同侧丘脑是否出现血脑屏障破坏,Netrin-1对血脑屏障破坏是否具有保护作用及其能否促进神经功能恢复。方法 Sprague-Dawley大鼠36只,建立右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,假手术(sham)组仅暴露右侧大脑中动脉,分为sham组、MCAO+PBS组及MCAO+netrin-1组,每组6只。通过改良大鼠神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,m NSS)评价神经功能,造模后第8天及第14天取材,HE染色观察梗死灶,免疫荧光检测occludin及albumin表达与分布,Western blot检测occludin及ZO-1表达水平。结果m NSS评分见予以Netrin-1后于梗死后第8天及第14天评分降低(P0.05)。HE染色见右侧皮层梗死灶。Western blot见梗死后第8天开始出现occludin减少(P0.05),第14天occludin及ZO-1均明显减少(P0.05),免疫荧光见梗死后第8天及第14天occludin减少伴albumin血管外渗出;予以Netrin-1后,western blot及免疫荧光见梗死后第14天occludin增多(P0.05),伴albumin渗出增多,ZO-1无明显变化。结论Netrin-1对大鼠实验性脑梗死后同侧丘脑血脑屏障破坏具有保护作用,并可促进梗死后神经功能恢复。     

神经突起诱向因子Netrin-4受体的初步研究

目的研究神经突起诱向因子Netrin-4的受体，并分析Netrin-1已知受体DCC和UNC5H1作为Netrin-4共受体的可能性。方法以碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4为配体，分别以原代培养神经元及转染DCC和UNC5H1的COS7细胞为对象，采用亲和细胞化学技术检测Netrin-4的受体，并分析Netrin-4的受体结合动力学及受体竞争结合动力学特征。结果通过载体转染表达已知Netrin-1受体DCC和UNC5H1的COS7细胞既能被Netrin—1结合，也能被Netrin-4结合；受体结合饱和实验显示Netrin-4与其受体快速结合(15min达高峰)后缓慢解离；受体结合竞争实验显示Netrin—1能竞争Netrin-4与其受体的结合。结论DCC和UNC5H1可能是Netrin—1与Netrin-4的共受体。由于Netrin-4受体结合动力学及受体竞争结合实验显示Netrin—1与受体的亲和力高于Netrin-4，提示Netrin-4可能还存在自身独特的受体。     

丘脑不同区域梗死的神经心理学研究

目的 探讨和总结丘脑损害的神经心理学障碍.方法 用精神科最表评定72例分别为丘脑前部、丘脑内侧部、丘脑外侧前部和丘脑外侧后部梗死患者的情感、认知、语言、记忆和综合感知等神经心理状况和其他临床症状.结果 丘脑前部损害以淡漠和抑郁等精神活动减退为主,丘脑内侧部主要表现情绪紊乱、意识障碍和视觉症状,丘脑外侧前部以失语和共济失调为主,而丘脑外侧后部主要为各种类型的感觉障碍.结论 丘脑不仅是感觉的中继核团,丘脑的不同区域还参与不同类型的神经心理功能.     

实验性大鼠大脑皮层梗死后继发丘脑损害与DNA氧化损伤

目的观察大鼠大脑皮层梗死后丘脑腹后外侧核(ventroposterior nucleus of the thalamus,VPN)的继发性损害是否有DNA氧化损伤,并研究抗氧化剂依布硒啉(ebselen,EB)对这种远隔部位损伤是否具有改善作用。方法采用易卒中型肾血管性高血压大鼠(stroke-prone renovascular hypertensive rats,RHRSP),建立大脑中动脉皮层支闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型后分为:①假手术组,②模型组,③溶剂组,④抗氧化剂EB10mg.kg-1组,⑤抗氧化剂EB30mg.kg-1组,每组5只大鼠。2周后行肢体运动神经功能评估并取VPN后行尼氏染色,免疫组化检测VPN的8-羟基-2-脱氧马苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-ohdG)表达。结果EB10mg.kg-1组和EB30mg.kg-1组神经功能评分优于假手术组(1.80±0.56,1.72±0.48vs2.28±0.33,P<0.05)。尼氏染色可见假手术组同侧VPN细胞形态规整。而梗死同侧VPN神经细胞出现细胞体积变小,胞核固缩,尼氏体退变为萎缩的深色细胞。EB30mg.kg-1组尼氏染色观察到改善作用。溶剂组同侧VPN的8-ohdG阳性细胞数目(0.1mm2)显著增加(146.8±12.1vs108.4±19.2,P<0.05);与溶剂组相比,EB10mg.kg-1组和EB30mg.kg-1组阳性细胞数目显著下降(123.6±14.7,123.4±17.4vs146.8±12.1,P<0.05)。结论实验性大脑皮层梗死后2周,同侧VPN存在DNA氧化性损伤。抗氧化剂EB对VPN的DNA氧化损伤有抑制作用,并可改善神经功能。     

不同部位丘脑梗死的临床特点分析

目的分析不同部位丘脑梗死的临床特点。方法分析33例丘脑梗死患者的头颅磁共振(MRI)图像与临床特征,根据解剖学与临床的关系进行分析。结果 10例丘脑结节动脉梗死患者主要表现为偏瘫、偏身感觉障碍和构音障碍;13例丘脑膝状体动脉梗死主要表现为偏瘫和偏身感觉障碍;7例丘脑旁正中动脉梗死主要表现为偏瘫、动眼神经麻痹;3例脉络膜后动脉梗死主要表现为偏瘫和意识障碍。结论不同类型的丘脑梗死表现为不同的临床特征,具体症状与梗死发生的责任动脉区域有关。     

丘脑结节动脉梗死的神经心理学障碍

目的探讨丘脑结节动脉梗死的神经心理学障碍及其机制。方法回顾性分析9例丘脑结节动脉梗死患者的临床资料。结果9例患者主要临床表现为:意志缺乏和行为障碍、丘脑性失语和左侧空间忽视及视空间功能障碍、记忆障碍,而均无脑神经损害及运动、感觉障碍。结论丘脑结节动脉梗死患者的临床表现主要为神经心理学障碍。     

大鼠皮层梗死后同侧丘脑胶质细胞活化和炎性介质动态变化北大核心CSCD

目的观察大鼠皮层局灶性梗死后早期阶段同侧丘脑继发的胶质细胞活化与炎性介质表达的动态变化,探讨远隔损害可能的干预靶点。方法采用雄性SD大鼠,建立易卒中型肾血管性高血压大鼠(strokeprone renovascular hypertensive rat,RHRSP)模型。随机分为假手术组和右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组,假手术组和MCAO组于术后1 d、4 d及8 d取材,每组各时间段9只。改良神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,mNSS)评价神经功能,HE染色以确定MCAO造模成功,免疫荧光检测GFAP、Iba-1、NeuN观察星形胶质细胞、小胶质细胞活化程度及神经元数目,western blot和免疫荧光检测炎性介质ICAM-1、IL-6和TNF-α的表达情况。结果 mNSS评分提示MCAO术后出现神经功能缺损,术后1 d最严重,术后8 d内缓慢恢复。HE染色确认梗死灶局限于右侧皮层。同侧丘脑星形和小胶质细胞自1 d起开始活化,活化增强至8 d更加明显(P<0.001)。术后1 d仅ICAM-1表达增多(P<0.05);4 d时IL-6和TNF-α也增多(P<0.05);至8 d时IL-6表达降低,而ICAM-1和TNF-α仍维持高水平。神经元数目在8 d明显减少(P<0.001)。结论皮层梗死后早期阶段同侧丘脑继发的胶质细胞活化和各炎性介质表达的动态变化具有差异性,对炎性反应进行多靶点的调控可能是神经保护的有效途径。     

丘脑动静脉畸形致双侧丘脑病变后痴呆1例

1 病例介绍 患者女性,29岁,因"性格改变,记忆力减退3天"于2019年10月29日入院.患者于入院前3?d无明显诱因出现性格改变,以淡漠为主,伴记忆力减退;伴有前额部持续性胀痛、恶心、非喷射性呕吐;无肢体无力、麻木、抽搐等症状;自发病以来,睡眠明显增多.为求进一步诊治收入我科.     

皮质梗死大鼠丘脑腹后核继发性损害及其机制研究

目的 探讨易卒中型肾血管性高血压大鼠(SPRHR)大脑皮质梗死后丘脑腹后核继发性损害及其机制,以为脑梗死临床康复治疗提供理论依据.方法 采用易卒中型肾血管性高血压大鼠制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,应用尼氏染色TUNEL法和免疫组织化学染色检测大鼠梗死侧丘脑腹后核神经元形态、凋亡细胞数目,以及微管相关蛋白-2、胶质纤维酸性蛋白和少突胶质细胞特异性标志蛋白RIP的表达水平.结果 与假手术组比较,手术后1周,MCAO组大鼠梗死侧丘脑腹后核正常神经元数目减少38.3l%(P<0.01);至手术后4周减少73.49%(P<0.01).与假手术组比较,手术后1周,MCAO组大鼠梗死侧丘脑腹后核即可见凋亡细胞(P<0.01),至手术后2周和4周,凋亡细胞持续存在,并可见坏死细胞.与假手术组比较,手术后1周,MCAO组大鼠梗死侧丘脑腹后核微管相关蛋白-2表达水平无明显变化(P>0.05),而胶质纤维酸性蛋白和少突胶质细胞特异性标志蛋白RIP表达水平明显升高(均P<0.01);至手术后2周和4周,微管相关蛋白-2表达水平逐渐降低(P=0.000,0.000),而胶质纤维酸性蛋白(P=0.000,0.000)和少突胶质细胞特异性标志蛋白RIP(P=0.012,0.047)表达水平则逐渐升高且呈持续高表达.结论 大脑皮质梗死后同侧丘脑腹后核神经元呈进行性死亡.梗死侧丘脑神经元凋亡、延迟性星形胶质细胞反应性增生、少突胶质细胞增生及其磷脂蛋白持续高表达可能是造成梗死侧丘脑腹后核继发性损害的重要原因.     

大脑 丘脑 脑干弥漫性病变

患者女性,38岁。主因多笑2月余,言语不清、饮水呛咳1月余,行走不稳4d,于2012年4月17日入当地医院就诊。患者于入院前2月余无明显诱因出现不能控制的发笑,未就诊;入院前1月余出现言语不清、左侧口角流涎、吞咽困难、饮水呛咳,且双侧下肢沉重。当地医院头部MRI检查显示,双侧额叶、脑桥T1WI低信号、T2WI高信号,扩散加权成像(DWI)高信号;头部磁共振动脉血管造影术(MRA)未见明显异常,拟诊为"脑梗死"。予以对症治疗,但症状仍呈渐进性加重,一周后出现眼神发呆、胡言乱语、迷路,复查头部MRI     

Temporal profile of apoptosis at ipsilateral ventroposterior thalamic nucleus and substantia nigra in adult hypertensive rats after cortex infarction

研究背景：已有研究发现,在正常血压的脑梗死模型中,凋亡可发生在远离梗死灶的同侧丘脑和黑质等部位。但是,在高血压脑梗死模型中,这种远隔部位的继发性损害发生情况和相关机制仍不清楚。 研究目标：目前研究验证如下假说：在成年高血压大鼠,神经元凋亡与皮层梗死后丘脑和黑质的神经元丢失和继发性改变有关。 设计、时间和设施：本研究所应用的动物模型、免疫组化和凋亡检测等实验手段均在中山大学附属第一医院神经科实验室完成,完成时间在2006年10月至2008年7月之间。 材料：单克隆小鼠抗大鼠微管相关蛋白（MAP2）和胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）分别购自美国Sigma公司和BD Pharmingen公司;生物素结合的山羊抗小鼠IgG和Cy3结合的驴抗小鼠IgG分别购自丹麦DAKO公司和美国Jackson免疫研究实验室;凋亡检测试剂盒则购自瑞士Roche公司和美国Upstate公司。 方法：32只肾血管性高血压大鼠通过电凝法制作右侧大脑中动脉闭塞（MCAO）模型。MCAO后1,2,3和4周,使用免疫组化检测梗死灶同侧丘脑和黑质的MAP2（神经元特异性标记物）和GFAP（神经胶质细胞特异性标记物）表达,同时使用凋亡检测试剂盒检测凋亡细胞。 主要结果分析方法：通过使用Kontron IBAS 2.5自动图像分析系统（德国）分析梗死灶同侧丘脑和黑质5个随机视野中（10×40）MAP2、GFAP阳性细胞,以及TUNEL染色细胞的阳性单位信号值并进行定量分析。 结果：肾血管性高血压大鼠MCAO后4周内,梗死灶同侧丘脑和黑质内MAP2表达逐渐降低而GFAP表达逐渐增加,均以4周为明显;而神经元凋亡明显增加,以2周为明显。 结果：肾血管性高血压大鼠MCAO后梗死灶同侧丘脑和黑质的神经元丢失可能为凋亡的继发性结果。目前关于凋亡动态变化的研究为抗凋亡治疗提供了可能的时间窗     

Late thalamic atrophy in infarction of the middle cerebral artery territory in neonates

We report four cases of progressive thalamic atrophy following ipsilateral cerebral infarction in the territory of the middle cerebral artery in neonates, with prospective radiological and clinical follow-up. This type of atrophy appears within 6 months after the onset of cerebral infarction. In the short term, this atrophy has no action on sensory and memory function and/or on sensory evoked potentials. This atrophy is not the result of secondary ischemic neuronal damage. Judging from several other experimental studies, thalamic atrophy may primarily result from retrograde degeneration. It would be interesting to observe the consequences of this atrophy on sensory and memory function over a long period.     

降钙素基因相关肽对鼠局灶性脑梗死的预防和保护作用

目的　进一步探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)对鼠局灶性脑梗死的脑细胞预防和保护作用。方法　采用光化学照射法致鼠局灶性脑梗死模型 ;用重量法评定脑水肿 ;采用Ohno、Bederson、LeWay的方法进行神经系统的评分 ;用TTC染色法观察鼠脑梗死部位和计算梗死体积。结果　CGRP对鼠局灶性脑梗死有明显的预防和保护作用 ,表现为神经系统评分好转 ,脑水肿减轻 ,梗死体积减小 ,而这种作用与给药时间、给药剂量和方式有关。即 1次投予CGRP(1 .33BU/gBW)没有显著作用 ,至少要连续给药 2天以上 ;CGRP对鼠局灶性脑梗死的保护作用在超过一定剂量后不再明显增加 ;在总剂量不变的情况下 ,较小剂量多次服用效果较好。结论　CGRP对鼠局灶性脑梗死有确切的预防和保护作用 ,对减轻脑水肿有良好的作用。但应掌握合适剂量     

脑梗死大鼠神经前体细胞增殖水平的研究

目的研究脑梗死病灶周围及海马处神经前体细胞增殖水平的动态变化。方法采用易卒中型肾性高血压大鼠(RHRSP)，电凝大脑中动脉(MCA)主干制成脑梗死(MCAO)模型。行大鼠神经功能评定，免疫组化观察并计数梗死灶边缘、对侧镜区及双侧海马5-溴脱氧尿核苷(Bromodeoxyuridine，BrdU)标记的细胞。结果MCAO后大鼠神经功能评分减低，5d时恢复正常。MCAO后梗死灶边缘、对侧镜区及双侧海马均有BrdU阳性细胞分布，且病灶侧多于病灶对侧，集中分布于病灶周围。结论脑缺血可诱导神经前体细胞增殖并移向病灶，可能成为脑梗死恢复的重要物质基础。     

PAI—1基因多态性与脑梗死及再梗死的关系

目的　探讨纤溶酶原激活物抑制物 - 1(PAI- 1)基因多态性与脑梗死及再梗死的关系。方法　对5 0例初次脑梗死 (FCI)患者、45例再次脑梗死 (RCI)患者及 6 0名健康对照者以发色底物分解法测定血浆PAI- 1活性、扩增片段长度多态性分析 PAI- 1基因启动子区 4G/ 5 G和第四内含子区 (CA) n序列多态性。结果患者血浆 PAI- 1活性 ,无论 FCI(1.13± 1.1AU/ ml)和 RCI(1.13± 0 .15 0 AU/ ml)均显著高于对照者 (0 .7±0 .2 5 AU/ m l) (均 P<0 .0 1) ;4G等位基因频率在两脑梗死组均显著高于对照者 (均 P<0 .0 1) ,且 RCI高于FCI(P<0 .0 5 ) ,并与血浆 PAI- 1活性升高及高血脂有关 ;短片段 (CA) n重复倾向于与血浆 PAI- 1活性升高相关联 ,长片段者在脑梗死特别是 RCI者中较少 ;4G等位基因的脑梗死患者中短片段 (CA) n频率较高。结论　 PAI- 1基因启动子区 4G等位基因及第四内含子区 (CA) n二核苷酸重复数少可致血浆 PAI- 1活性升高 ,从而参与脑梗死特别是 RCI的发病     

大鼠脑梗死后神经前体细胞的增殖及电针作用的实验研究

目的　研究脑梗死病灶周围及海马处神经前体细胞增殖水平的动态变化及电针治疗对其的影响。方法　采用易卒中型肾性高血压大鼠 (RHRSP) ,电凝法凝闭大脑中动脉 (MCAO)。用Garcia等的综合评分法评定大鼠的神经行为学功能 ,免疫组化观察梗死灶边缘、对侧镜区及双侧海马 5 溴脱氧尿核苷 (Bromodeoxyuridine,BrdU)标记细胞的变化。结果　MCAO后大鼠轻偏瘫 ,5天时神经行为学功能恢复正常。MCAO后梗死灶边缘、双侧镜区及双侧海马均有BrdU阳性细胞分布 ,且病灶侧多于病灶对侧 ,病灶周围分布密集。电针治疗促使梗死灶边缘BrdU阳性细胞增多 ,随着治疗时间增加细胞增多更明显。结论　脑梗死可诱导病灶周边及海马神经前体细胞增殖水平上调 ,2周内神经前体细胞随着电针治疗时间的增加而增多。神经前体细胞可能是脑梗死康复的重要物质基础。     

肾性高血压大鼠脑梗死后期的基因表达谱分析

目的 利用基因芯片技术研究肾性高血压大鼠脑梗死后期梗死灶边缘区皮层基因表达谱的改变及其意义.方法 利用双肾双夹法复制肾性高血压大鼠模型,再采用线栓法复制成大脑中动脉闭塞模型,并设置假手术组,术后7 d取梗死灶边缘区域脑皮层,提取RNA,经过荧光标记后与含5705个基因的oligo芯片进行杂交、扫描,采集图像,经数据分析筛选出差异表达的基因.结果 差异表达基因共197个(包括表达序列标签12个),其中表达上调174个,下调23个.12类功能分组的基因均有上调,下调的基因仅包括运输、转录调控、信号、应激反应、代谢和细胞粘附组的基因.12类功能分组中有17个差异表达基因尚未有文献报道与脑缺血/梗死相关.结论 脑梗死后期基因表达仍然非常活跃,预示着损伤与修复的分子机制和可能的治疗靶点.     

急性脑梗死血清可溶性细胞间粘附分子的变化及意义

目的为了解急性脑梗死患者血清可溶性细胞间粘附分子（sICAM-1)的变化及临床意义。方法采用双抗体夹心ELSA法测定了68例脑梗死患者血清sICAM-1,并与31例TIA患者和30例正常人对照比较。结果脑梗死患者24小时内血清sICAM-1水平明显高于TIA和正常对照组(P<0.01)。大梗死灶组血清sICAM明显高于中梗死灶组和小梗死灶组。脑梗死患者血清sICAM-1水平在脑梗死发生24小时至7天呈现上升趋势,7至14天呈下降趋势。结论sICAM-1与急性脑梗死密切相关,参与了缺血后脑组织损伤的病理过程。实验证明,急性脑梗死早期大量白细胞聚集阻塞微血管,穿越内皮细胞进入组织,使局灶区组织受损。此时白细胞聚集与sICAM-1表达增强密切相关。     

小脑电刺激对脑梗塞患者抗凋亡蛋白的影响

目的:通过观察脑梗塞患者小脑顶核电刺激前后体内的抗凋亡蛋白sAPO-1/Fas及Bcl-2的含量变化,进一步探讨小脑顶核电刺激治疗脑梗塞的机制。方法:发病后3天内的急性脑梗塞病人40例,随机分为刺激组及对照组。采用SNSS评分表及ELISA方法测定小脑顶核电刺激前后的神经功能评分及血清、脑脊液中sAPO-1/Fas及Bcl-2含量。结果:(1)小脑顶核电刺激10天后的脑脊液sAPO-1/Fas含量较刺激前明显升高,也明显高于对照组;对血清sAPO-1/Fas含量也有一定的增高作用。(2)小脑顶核电刺激10天后的血清Bel-2含量均较入院时明显增高,并显著高于对照组;对脑脊液中的Bcl-2含量有一定的增高作用。(3)小脑顶核电刺激10天后的神经评分明显高于刺激前及对照组。结论:在脑梗塞急性期给予小脑顶核电刺激可明显改善神经功能评分、提高体内的抗凋亡蛋白sAPO-1/Fas及Bcl-2含量,并可能是小脑顶核电刺激治疗脑梗塞的机制之一。     

葡萄糖及胰岛素对高血压大鼠脑梗塞的影响

目的　为研究葡萄糖、胰岛素对高血压大鼠脑梗塞的不同影响。　　方法　采用易卒中型肾血管性高血压大鼠 ,在单侧大脑中动脉闭塞术前半小时分别腹腔注射葡萄糖、胰岛素和生理盐水 ,术后 2 4小时观察动物神经症状并处死动物 ,用光镜进行脑组织病理观察。　　结果　葡萄糖组脑缺血和脑水肿较对照组严重 ,并且伴有皮层下白质出血 ;而胰岛素组脑缺血和脑水肿较对照组轻微 ,未见皮层下白质出血现象。　　结论　葡萄糖可加重脑缺血性损害 ,而胰岛素具有防治脑缺血性损害的作用。