丁基苯酞对老龄大鼠慢性脑缺血后HO-1和VEGF表达的影响

目的 研究丁基苯酞(Dlbutylphthalide ,NBP)对大鼠慢性脑缺血后大脑皮层和海马中VEGF和HO-1表达的影响.方法 用免疫组织化学SP法在光镜下观察各组皮层和海马VEGF和HO-1的表达.结果 B组皮质和海马VEGF和HO-1表达与A组相比明显增多.C组、D组和B组相比VEGF和HO-1表达明显增多,D组和C组相比VEGF和HO-1表达明显增多,差异有统计学意义.结论 丁基苯酞对慢性脑缺血的保护作用可能通过上调脑组织中的VEGF和HO-1的表达而实现.     

丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NMDA受体亚单位NR2B及突触素表达的影响

目的 观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚单位(NR2B)及突触素表达的影响.方法 采用免疫组化方法观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NR2B及突触素表达的影响.结果 B组与A组比较,海马CA1区、CA3区及齿状回NR2B及突触素的表达明显减少(P＜0.05),C、D组大鼠海马各区NR2B及突触素的表达与单纯缺血组比较均不同程度增加(P＜0.05);D组与C组比较,NR2B及突触素的表达增加更明显(P＜0.05).结论 慢性缺血3个月后,大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回中NR2B 及突触素的表达明显减少,而丁基苯酞能改善这种缺血改变,增加NR2B 及突触素的表达.     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠海马区NO表达的影响

目的研究丁基苯肽对慢性脑缺血大鼠海马区一氧化氮（NO）表达的影响。方法 80只大鼠随机分为假手术组、模型组、预处理组、处理组。根据硝酸还原酶法和β-NADPH组织化学染色法,又将每个小组分为两个亚组。模型组、预处理组和处理组利用双侧颈总动脉永久结扎术制备动物模型,假手术组不结扎双侧颈总动脉。预处理组在造模前及造模后均给予丁基苯酞,处理组在造模后给予丁基苯酞,假手术组和模型组在造模后给予同等剂量的生理盐水,4组分别在造模后1个月处死大鼠取材。用硝酸还原酶特异性还原NO产物的方法测定大鼠前脑缺血模型中海马NO释放量的异常变化。β-NAD-PH组织化学染色显示一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元,光镜下观察。结果模型组、预处理组及处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目与假手术组相比均有明显增加。与模型组相比,预处理组和处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目减少。与处理组相比,预处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目减少更明显。结论慢性脑缺血缺氧能使大鼠海马区NO含量明显增加,丁基苯肽（NBP）能减轻这种变化。     

慢性间断性缺氧后一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶的表达及维生素E和左旋丁基苯酞对其影响

目的 研究慢性间断性缺氧后一氧化氮 (NO)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在皮层和海马的表达及不同剂量维生素E(VitE)和左旋丁基苯酞 (L NBP)对其影响。方法 将 6 0只SD大鼠随机分成 6组 ,建立慢性间断性缺氧模型 ,并给予大、小剂量L NBP和VitE。其中 ,大剂量VitE和L NBP的剂量为 5 0mg/kg。小剂量VitE和L NBP的剂量为 2 5mg/kg。用免疫组织化学方法和生化方法分别检测皮层iNOS的表达和海马NO的水平。 结果对照组可检测到微弱的iNOS阳性染色。缺氧组大脑iNOS阳性染色显著增加 (P <0 .0 1)。与缺氧组相比 ,各治疗组阳性细胞均明显减少 (均P <0 .0 1)。与对照组相比 ,缺氧组NO的生成显著增多 (P <0 .0 1)。各治疗组与缺氧组相比 ,VitE大剂量组与缺氧组相比NO的生成无显著性差异 (P >0 .0 5 )。L NBP大剂量与L NBP小剂量及VitE小剂量组的NO含量均显著减少 (P <0 .0 1)。结论　 慢性间断性缺氧后iNOS表达增多 ,同时NO的合成增多。治疗性给予L NBP和VitE能够显著抑制iNOS表达。治疗性给予大、小剂量L NBP和小剂量VitE能够显著抑制NO的合成。大剂量VitE对于NO的合成无影响。     

丁基苯酞对脑出血大鼠血管内皮生长因子、血管生成素-2蛋白表达及血管新生的影响

目的 通过观察大鼠脑出血后脑组织中血管内皮生长因子（vaseular endothelial growth factor， VEGF）、血管生成素-2（angiopoietin-2，Ang-2）蛋白在不同时间点的动态表达及不同剂量丁基苯酞干 预后其与新生血管数量的变化，探讨丁基苯酞对脑出血大鼠可能的神经保护作用及机制。 方法 通过自体血注入法制备SD大鼠脑出血模型并随机分为脑出血模型组、丁基苯酞低剂量组 及丁基苯酞中剂量组，以及对照的假手术组。丁基苯酞低、中剂量组大鼠分别予以丁基苯酞10 mg/kg、 25 mg/kg灌胃给药（每日2次），假手术组及脑出血模型组大鼠则在相同时间用同等体积大豆油代替 灌胃。分别在术后1 d、3 d、7 d、15 d评估大鼠神经功能缺损，采用免疫组化法检测各时间点CD34的表 达并进行新生血管计数及血管场面积测定，检测各时间点VEGF、Ang-2蛋白的表达，测定脑出血大鼠 血肿体积。 结果 与脑出血模型组比较，丁基苯酞中剂量组在术后各时间点，低剂量组术后7 d、15 d VEGF蛋 白表达上调；丁基苯酞低、中剂量组术后各时间点An g-2蛋白表达均上调，血管计数均增多；丁基苯酞 低剂量组术后3 d的神经功能缺损评分较低，丁基苯酞中剂量组术后3 d、7 d、15 d的神经功能缺损评 分较低，上述差异均有统计学意义。丁基苯酞低、中剂量组与脑出血模型组，在术后7 d、15 d血肿体 积差异无统计学意义。 结论 丁基苯酞可以显著减轻脑出血大鼠的神经功能缺损，其作用机制可能与上调VEGF、Ang-2蛋 白的表达，增加脑出血血肿周围新生血管密度有关，同时未增加血肿增大的风险。     

丁基苯酞对肌萎缩侧索硬化转基因小鼠神经保护作用的初步探讨

目的 观察丁基苯酞对肌萎缩侧索硬化(ALS)转基因小鼠腓肠肌运动单位及脊髓前角运动神经元数目的影响,并初步探讨其神经保护作用.方法 将雌性ALS-SOD1G93A转基因小鼠分为溶剂对照组和丁基苯酞组,野生型同窝ALS-SOD1G93A小鼠为野生组.丁基苯酞组自小鼠发病日起每天按体质量60 mg/kg给予丁基苯酞灌胃,溶剂对照组和野生组予等同体积的植物油灌胃.应用统计学法运动单位数目估计测定腓肠肌运动单位的数目.焦油紫染色观察脊髓前角运动神经元.结果 野生型组、溶剂对照组和丁基苯酞组小鼠腓肠肌复合肌肉动作电位(CMAP)平均波幅分别为(24.30±0.30)、(12.80±7.15)和(18.20±7.27)mV,野生型组与溶剂对照组间比较有统计学差异(P＜0.01),丁基苯酞组与溶剂对照组比较无统计学差异(P=0.209);野生型组、溶剂对照组和丁基苯酞组小鼠腓肠肌的运动单位数目分别为(135.80±8.64)、(63.20±31.87)、(110.50±9.68)个,脊髓前角大的运动神经元数目分别为(28.50±6.36)、(9.50±2.92)、(14.80±2.64)个,溶剂对照组小鼠腓肠肌的运动单位数目和脊髓前角大的运动神经元数目均较野生型组明显减少,与溶剂对照组相比,丁基苯酞治疗能延缓腓肠肌和脊髓前角运动单位丢失的速度(均P＜0.01).结论 丁基苯酞对ALS转基因小鼠的保护作用可能是通过减缓脊髓前角运动神经元和腓肠肌运动单位的丢失而实现.     

丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后caspase-3表达的影响

目的:观察丁苯酞(NBP)对脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用及caspase-3表达的影响。方法:SD大鼠46只随机分成假手术组(n=6)、缺血再灌注组(n=10)、NBP大剂量组(80mg·kg-1,n=10)、NBP中剂量组(40mg·kg-1,n=10)和NBP小剂量组(20mg·kg-1,n=10),采用ZeaLonga法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,观察NBP对大鼠脑缺血再灌注后的神经功能症状、组织形态学改变、以及对caspase-3表达的影响。结果:与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠出现严重的神经功能缺失症状,光镜下脑组织出现明显的梗死缺血灶,皮质和海马区caspase-3表达增强;与缺血再灌注组比较,NBP治疗组能显著改善大鼠神经功能缺失症状,减少脑组织的梗死缺血损伤,降低caspase-3的表达,其中以NBP大剂量组的神经保护作用最为显著(P<0.001)。结论:NBP对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制caspase-3表达相关。     

丁苯酞预处理对缺血再灌注损伤后大鼠海马神经元的保护作用

目的探讨丁苯酞(NBP)预处理对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马神经元的保护作用。方法将120只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、NBP低剂量预处理组(低剂量组)、NBP中剂量预处理组(中剂量组)和NBP高剂量预处理组(高剂量组),每组24只大鼠。低、中、高剂量组大鼠分别给予20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg NBP预处理。采用改良Zea Longa线栓法制备脑缺血再灌注模型。2%氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量梗死体积,免疫组织化学法观察5-羟色胺(5-HT)阳性细胞数,免疫印迹法检测5-HT蛋白水平。结果 NBP低剂量组、中剂量组、高剂量组脑梗死体积显著小于缺血再灌注组(均P0.05)。中剂量组与高剂量组脑梗死体积显著小于低剂量组(均P0.05)。与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠海马中5-HT阳性细胞数及蛋白表达明显降低(均P0.01)。与缺血再灌注组比较,NBP低、中、高剂量组的5-HT阳性细胞数及蛋白表达显著增加(均P0.05)。中剂量组与高剂量组5-HT阳性细胞数及蛋白表达显著高于低剂量组(均P0.05),高剂量组与中剂量组差异无统计学意义。结论丁苯酞预处理具有脑保护作用,其机制可能为上调缺血海马半暗带区5-HT表达。     

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注大鼠内质网应激的影响

目的 探讨丁苯酞预处理对脑缺血再灌注大鼠内质网应激的影响.方法 30只SD大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注组、丁苯酞预处理组,每组10只大鼠.丁苯酞预处理组大鼠给予丁苯酞80 mg/kg灌胃,1次/d;缺血再灌注组和假手术组大鼠给予等量生理盐水替代.灌胃7d后,采用Zea Longa法制备大鼠脑缺血再灌注模型.假手术组不插入线栓.采用TTC染色检测脑梗死面积;RT-PCR法测定脑组织葡萄糖调控蛋白78(GRP78) mRNA、C/EBP同源蛋白(CHOP) mRNA的表达.结果 假手术组大鼠脑组织未见梗死灶;丁苯酞预处理组大鼠脑梗死面积明显小于缺血再灌注组(P＜0.05).缺血再灌注组和丁苯酞预处理组大鼠脑组织GRP78 mRNA、CHOP mRNA的表达量明显高于假手术组(均P＜0.05);丁苯酞预处理组大鼠脑组织GRP78 mRNA、CHOP mRNA的表达量明显低于缺血再灌注组(均P＜0.05).结论 丁苯酞可能通过抑制内质网应激而起到脑保护作用.     

丁基苯酞对帕金森模型小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响

目的研究丁基苯酞(dl-3n-butylphthalide,NBP)对由MPTP诱导的C57BL/6小鼠帕金森模型中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响,进一步探讨其保护机制。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分成3组:正常对照组,MPTP组,NBP治疗组。MPTP腹腔注射法制备帕金森模型,免疫组织化学法观察中脑黑质TH阳性神经元细胞数,蛋白质印迹法观察中脑黑质TH、TNF-α蛋白含量的变化。结果 (1)与正常对照组比较,MPTP组可见帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元明显减少(P0.01);与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元数目明显增加(P0.01);(2)与正常对照组比较,MPTP组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达减少(P0.01),而TNF-α蛋白表达增加(P0.05);(3)与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达明显增加(P0.01),而TNF-α蛋白表达减少(P0.05)。结论丁基苯酞可能通过提高中脑黑质中TH的含量及减少TNF-α炎性介质表达发挥对MPTP所致C57BL/6小鼠帕金森模型的神经元保护作用。     

慢性脑缺血老龄大鼠海马中突触素的表达特征

目的 研究老龄大鼠慢性脑缺血后大脑海马中突触素表达特征.方法 应用免疫组化染色技术检测大鼠脑海马中CA1区、CA3区和齿状回中突触素的表达.结果 缺血组海马CA1区、CA3区和齿状回三处突触素灰度值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05.结论 老龄大鼠海马结构内CA1区、CA3区及齿状回内突触素和NR2B的表达明显减少.     

慢性脑缺血老龄大鼠海马区突触素及NMDAR2B表达的研究

目的 本实验旨在观察慢性脑缺血老龄大鼠海马区突触素及NR2B表达的变化.方法 健康Wistar大鼠100只,随机分为5组,A组(对照组)、B组(缺血4周组)、C组(缺血8周组)、D组(缺血12周组)、E组(缺血16周组),每组20只.造模方法采用手术结扎大鼠双侧颈总动脉.分别于手术后4周、8周、12周、16周,采用免疫...     

神经生长因子对脑缺血大鼠学习与记忆的影响

目的为了观察神经生长因子（NGF）对脑缺血大鼠学习与记忆的影响和海马内N-甲基-D-天门冬氨酸受体NR2A/B亚zhanghaopeng（NR2A/B）表达的变化。方法本研究将48只成年雄性SD大鼠分为正常组（n=12）、假手术组（n=12）、慢性脑缺血组（n=12）、NGF处理组（n=12）。于造模后开始腹腔注射0.25 ug/100 g NGF,假手术组和慢性脑缺血组腹腔注射等量生理盐水,均1次/d,共21 d。用Morris水迷宫和＂＂Y＂迷宫作业测试其空间学习与记忆成绩,再采用Western blot方法分析海马的NR2A、NR2B的表达。结果①Morris水迷宫测试：模型组大鼠寻找平台的潜伏期较假手术组明显延长,NGF处理组大鼠寻找平台的潜伏期较模型组明显缩短;＂Y＂迷宫测试：模型组大鼠学会躲避电击的正确次数较假手术组明显减少,NGF处理组大鼠学会躲避电击的正确次数较模型组明显增多;②模型组NR2A表达水平较假手术组明显降低,而NR2B明显升高;NGF处理组海马内NR2A表达水平较模型组明显上调,而NR2B明显下调。结论神经生长因子可增强学习与记忆,海马内N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体表达变化可能是影响学习与记忆的机制之一。     

慢性脑缺血老龄大鼠海马NMDA受体亚单位NR2B表达的特征

目的研究老龄大鼠慢性脑缺血后大脑海马中NR2B表达特征。方法应用免疫组化染色技术检测大鼠脑海马中CA1、CA3区和齿状回中NR2B的表达。结果缺血组海马CA1、CA3区和齿状回三处NR2B灰度值均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论老龄大鼠海马结构内CA1、CA3区及齿状回内NR2B的表达明显减少。     

慢性脑缺血大鼠海马PARP、MDA的表达及阿魏酸钠的抗氧化作用

目的研究慢性脑缺血大鼠海马聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的表达,并探讨阿魏酸钠在慢性脑缺血所致的氧化应激性损伤中的作用。方法28只成年大鼠用于实验,10只采用双侧颈总动脉结扎制备大鼠慢性脑缺血模型,10只在颈总动脉结扎后给立即予阿魏酸钠腹腔注射,另8只为假手术组。2月后取大鼠海马,采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,用免疫印迹的方法检测PARP蛋白的表达量。结果慢性脑缺血大鼠海马MDA及PARP蛋白含量明显增多,而经阿魏酸钠治疗后,MDA含量下降,PARP表达下调。结论慢性脑缺血可诱导内源性氧化应激使自由基增多,产生脂质过氧化损伤作用,并导致DNA链的断裂,激活PARP的表达;阿魏酸钠可减少MDA和PARP的生成,在慢性脑缺血氧化应激中起保护作用。     

Long-term effects of seizures in neonatal rats on spatial learning ability and N-methyl-D-aspartate receptor expression in the brain

For the purpose of investigating the long-term effects of seizures in neonatal rats on spatial learning ability and N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor expression in adult rat brain, a seizure was induced by inhalant flurothyl daily in neonatal Wistar rats from postnatal day 6 (P6). The authors assigned six rats each averagely into the single-seizure group, the recurrent-seizure group (seizures induced in six consecutive days), and the control group. During P60 to P65, the rats were tested for spatial learning ability with the Morris water maze task. On P75, the authors examined protein expression of the NMDA receptor (NR) subunits, NR1, 2A, 2B, 2C, and 2D, in the cerebral cortex and hippocampus by Western blotting analysis. On P65, the escape latencies from the water maze of the rats in the recurrent-seizure group were significantly longer than those of the control rats, but there was no difference between the single-seizure group and the control group. NR subunit expression in the cerebral cortex and hippocampus of the rats with single seizure was similar to those in the control rats. Compared with the control rats, the protein expressions of NR1, NR2A and NR2B in the cerebral cortex and NR2A in the hippocampus of the recurrent-seizure group was significantly decreased, but NR2C protein expression in the cerebral cortex and hippocampus significantly increased. Recurrent seizures induced in neonatal rats might cause long-term spatial learning ability deficit and modify NR expression in the cerebral cortex and hippocampus of adult rats. The results suggest that abnormal NR expression might play an important role in long-term spatial learning ability deficit induced by recurrent seizures in early life.     

慢性脑低灌注大鼠海马Arc低表达与其认知功能障碍的相关性研究

目的 探讨慢性脑低灌注大鼠海马活性调节的细胞骨架相关蛋白(activity-regulated cytoskeletal-associated protein,Arc)的低表达与其认知功能障碍的相关性。方法 大鼠慢性脑低灌注模型使用持久性双颈总动脉结扎术(2-vessel occlusion,2-VO); 大鼠随机分成假手术组和2-VO组,每组各6只。术后第8周行Morris水迷宫评价其认知功能; 实时定量聚合酶链式反应(Real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及蛋白免疫印迹法检测大鼠海马Arc mRNA及蛋白表达水平。结果(1)2-VO组大鼠第2～5 d的逃逸潜伏期比假手术组明显延长(P<0.01)及其在原平台区域游泳时间明显比假手术组短(P<0.01);(2)2-VO组大鼠海马Arc mRNA水平及免疫反应条带相对灰度值分别比假手术组明显降低(P均<0.01);(3)空间探索实验中2-VO大鼠在原平台区域游泳时间与海马Arc免疫反应条带相对灰度值呈正相关(r=0.7085,P<0.05)。结论 慢性脑低灌注大鼠的认知功能障碍可能与海马Arc的低表达相关。     

慢性脑缺血信号转导和转录激活因子-1的表达

目的 探讨慢性脑缺血大脑皮质及海马STAT-1的变化.方法 采用免疫组织化学和激光共聚焦方法观察慢性脑缺血大鼠脑中STAT-1蛋白表达变化.结果 STAT-1免疫反应阳性细胞在正常和假手术大鼠脑内发现有少量表达;缺血30d组,STAT-1蛋白阳性细胞分布于皮层及海马,细胞数量明显多于非缺血组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 STAT-1可能参与慢性脑缺血大鼠神经细胞死亡的诱导.