缺血性脑血管病患者趋化因子受体CX3CR1基因T280M多态性的研究

目的探讨缺血性脑血管病(ICVD)患者趋化因子受体CX3CR1基因T280M的多态性及其频率。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法检测165例ICVD患者(脑梗死85例,腔隙性脑梗死40例,短暂性脑缺血发作40例)与150名健康对照者(正常对照组)CX3CR1基因T280M的多态性,比较两组及ICVD亚组的基因频率。结果正常对照组CX3CR1基因T280M只有TT和TM基因型,ICVD组有TT、TM和MM3种基因型,两组间基因型的差异有统计学意义(P<0.05);ICVD组M等位基因频率(8.7%)明显高于正常对照组(2.3%)(P<0.01);不同ICVD亚组之间基因型及M等位基因频率的差异无统计学意义(均P>0.05)。结论ICVD患者趋化因子受体CX3CR1基因T280M有MM基因型,并且M等位基因的频率明显增高,提示CX3CR1基因T280M多态性可能与ICVD有关。     

CX3CR1对缺血性白质的损伤作用

目的明确CX3CR1在缺血性白质中的分布与表达及与缺血性白质损伤的关系。方法将150只成年雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组及缺血组,采用双侧颈总动脉永久结扎法制备缺血性白质损伤模型,造模28 d后Morris水迷宫观察学习记忆功能,同时于术后1 d、3 d、7 d、14 d、28 d观察胼胝体、内囊及视神经的病理学变化和CX3CR1表达量的变化。结果 (1)造模后28 d,逃避潜伏期、探索路径长度及跨越平台次数缺血组较正常组和假手术组明显增加,有显著性差异(P0.01);(2)随着缺血时间的延长,Luxol Fast Blue(LFB)染色可见髓鞘崩解范围扩大,分层明显,部分髓鞘空泡状;CX3CR1表达量逐渐增加,与CD11b标记的小胶质细胞数目逐渐增多相一致且高于正常组和假手术组。结论 CX3CR1通过介导小胶质细胞的变化对缺血性白质产生损伤,进而影响空间学习记忆功能。     

低氧对人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX3CR1表达的影响

背景：移植的骨髓间充质干细胞能向损伤病灶部位定向迁移,进而发挥治疗作用,但关于其向病灶定向迁移的具体机制还不十分清楚。 目的：观察低氧对人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX3CR1表达的影响。 设计、时间和地点：细胞学体外观察,于2008-02/2009-02在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室进行。 材料：骨髓标本取自解放军第三军医大学附属新桥医院血液科收治的15~40岁正常或原发病未累及骨髓患者。 方法：穿刺采集骨髓,密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化人骨髓间充质干细胞。取生长良好的第3代细胞接种于25 cm2培养瓶中,培养至70%~80%融合后,置于 37 ℃、体积分数分别为3%O2、5%CO2、92%N2的饱和湿度孵育箱内培养48 h,以常氧培养作为对照。 主要观察指标：相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面标记物,Real time荧光定量PCR法检测CXCR4和CX3CR1 mRNA的表达,免疫细胞化学和Western blot法检测CXCR4和CX3CR1蛋白的表达。 结果：体外分离纯化的人骨髓间充质干细胞呈成纤维细胞样,培养12~14 d达90%汇合,呈极性排列,集落呈漩涡状;CD105和CD29阳性率分别为99.38%和99.13%,而CD14,CD45均呈阴性表达。在体积分数为3%的O2培养条件下,人骨髓间充质干细胞CXCR4和CX3CR1 mRNA的表达分别是常规培养条件下的2.130倍和2.361倍,CXCR4和CX3CR1蛋白的表达分别是常规培养条件下的1.69倍和1.93倍,CXCR4和CX3CR1主要表达于人骨髓间充质干细胞的胞膜和胞浆。 结论：体积分数为3%的O2低氧条件能够促进人骨髓间充质干细胞趋化因子受体CXCR4和CX3CR1 mRNA及蛋白的表达,这可能是体内移植的骨髓间充质干细胞向损伤病灶定向迁移的机制之一。     

CX3CR1基因多态与颈动脉狭窄的相关性

目的 探讨fractalkine受体CX3CR1基因多态V249I和T280M与颈动脉狭窄的相关性.方法 经颈部彩色多普勒超声检查诊断颈动脉狭窄患者318例,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和基因测序确定CX3CR1基因V249I和T280M多态性,并与292例无颈动脉狭窄者比较.结果 CX3CR1基因T280M多态中基因型MM和TM在颈动脉狭窄组明显低于对照组(分别为22.6%和31.2%,OR=0.646,95%CI 0.451～0.928,P=0.017),颈动脉狭窄组M等位基因频率明显低于对照组(分别为13.8%和19.2%,OR=0.677,95%CI 0.499～0.918,P=0.010).CX3CR1基因V249I多态中基因型Ⅱ和Ⅵ在颈动脉狭窄组和对照组差异无统计学意义(分别为39.0%和43.8%,OR=1.012,95%CI 0.731～1.403,P=0.940),颈动脉狭窄组Ⅰ等位基因频率明显低于对照组(分别为28.6%和32.7%,OR=0.842,95%CI 0.660～1.076,P=0.034).颈动脉狭窄组Ⅵ和Ⅱ在稳定斑块组明显增高(OR=0.610,95%CI 0.387～0.962,P=0.033).多因素Logistic回归分析显示MM和TM基因型是颈动脉狭窄的独立危险因素(OR=1.847,95%CI 1.091～3.127,P=0.022).结论 CX3CR1基因T280M多态中MM和TM基因型是颈动脉狭窄的一个独立危险因素,而V249I多态中Ⅱ和Ⅵ基因型与颈动脉粥样硬化斑块稳定性有关.     

新生大鼠海马神经干细胞表达趋化因子受体CX3CR1的体外研究

目的 探讨体外培养神经干细胞是否表达趋化因子受体CX3CR1.方法 采用无血清方法分离、培养新生大鼠海马神经干细胞,细胞免疫荧光方法检测神经干细胞标志巢蛋白(nestin)表达及干细胞多向分化为神经元及胶质细胞的能力,后通过细胞免疫荧光及RT-PCR方法检测神经干细胞表达趋化因子受体CX3CR1的情况.结果 体外培养新生大鼠海马神经干细胞呈nestin阳性.可分化为神经丝蛋白200(NF200)阳性的神经元、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性的星形胶质细胞及2',3'-环核苷酸-3'-磷酸二酯酶(CNP)阳性的少突胶质细胞,细胞免疫荧光及RT-PCR证实神经干细胞表达趋化因子受体CX3CR1.结论 新生大鼠海马神经干细胞表达趋化因子受体CX3CR1.为进一步研究其体内外迁移提供理论依据.     

趋化因子受体CCR2b基因G190A多态性与脑梗死关系的研究

目的 探讨趋化因子受体CCR2b基因G190A多态性与中国福建地区汉族人群脑梗死(cerebral infarction,CI)的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)和DNA序列测定法检测200例CI及200名健康对照者趋化因子受体CCR2b基因G190A多态性分布,对两组之间的基因型频率和等位基因频率进行比较.结果 CI组趋化因子受体CCR2b基因G190A多态位点的基因型和等位基因频率分布与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).脑梗死组GG、GA、AA基因型频率分别为83.5%、15.0%、1.5%;G、A等位基因频率分别为91.0%、9.0%.正常对照组GG、GA、AA基因型频率分别为73.0%、22.5%、4.5%;G、A等位基因频率分别为84.3%、15.7%.脑梗死组GG基因型和G等位基因频率高于对照组(P<0.05).结论 趋化因子受体CCR2b基因G190A多态性与脑梗死的发病具有相关性,G等位基因可能是中国福建地区汉族人群脑梗死发病的遗传易感基因.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between chemokine receptor CCR2b gene G190A polymorphism and cerebral infarction(CI)of Han population in Chinese Fujian district.Methods The G190A polymorphism in ccr2b gene was detected by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism analysis(PCR-RFLP)and DNA sequencing in 200 patients with CI(CI group)and 200 normal controls(NC group).Results There were significant differences in frequencies of allele and genotype of CCR2b G190A gene polymorphism between CI and control groups(P<0.05).In CI group,genotypic frequency of GG Was 83.5%,GA wag 15.0%,AA Was 1.5%.The allele frequency of G Was 91.0%and A was 9.0%.In NC group,genotypic frequency of GG WaS 73.0%,GA was 22.5%,AA was 4.5%.The allele frequency of G was 84.3%and A was 15.7%.The frequencies of CCR2b 190GG genetype and G allele in CI group were siginificantly higher than that in NC group(P<0.05).Conclusions There was association between CCR2b gene G190A polymorphism and cerebral infarction(CI)in Chinese Fujian district Han populations.The CCR2b G190 allele may be a genetic risk factor for cerebral infarction of Hart populations in Chinese Fujian district.     

血浆CX3CL1水平与急性脑梗死病情严重程度及预后的相关性

目的 探讨血浆CX3CL1水平与急性脑梗死患者病情严重程度及预后的关系.方法 收集139例急性脑梗死患者(病例组)及82名健康对照者(对照组)的临床资料及血浆,采用ELISA法测定其血浆CX3CL1水平.病例组患者于入院后24 h内行NIHSS评分,并于发病3个月后随访行mRS评分.将病例组患者根据NIHSS评分及mRS评分分别进行分组,比较各亚组间血浆CX3CL1水平有无差异.结果 病例组血浆CX3CL1水平明显低于对照组(P=0.009),经Logistic回归分析显示血浆CX3CL1水平与急性脑梗死发病密切相关(OR=0.387,P=0.020),且血浆CX3CL1水平与CRP呈负相关(r=-0.232,P=0.003).急性脑梗死患者血浆CX3CL1水平与其入院后24 h内NIHSS评分呈负相关(r=-0.179,P=0.034).预后不良组(mRS>2分)血浆CX3CL1水平显著低于预后良好组(mRS≤2分),白细胞计数及CRP显著高于预后良好组(均P<0.05),血浆CX3CL1水平与急性脑梗死后3个月mRS评分呈负相关(r=-0.263,P=0.002).Logistic回归分析提示血浆CX3CL1水平与急性脑梗死预后密切相关(OR=0.087,P=0.004).结论 急性脑梗死患者的血浆CX3CL1水平较低,且血浆CX3CL1水平与急性脑梗死患者的病情严重程度及预后密切相关.     

血管紧张素原基因与黎族原发性高血压并脑梗死的相关性

目的研究血管紧张素原基因（angiontensinogen,AGT）4个位点的单核苷酸多态及其构成的单倍型与海南黎族原发性高血压及原发性高血压并发脑梗死的相关性。方法选择海南黎族人群为研究对象,利用PCR直接测序法,在100例原发性高血压患者、100例原发性高血压并脑梗死患者和100例健康对照者中,对AGT基因启动子区域的-152（G—A）,-20（A—C）,-18（C—T）,-6（A—G）多态进行基因分型。结果C一18T多态的基因型和T等位基因频率分布在原发性高血压组（P=0．003,P=0．004）和原发性高血压并脑梗死组伊=0．002,P=0．002）均比健康对照组显著增高。-6（A—G）多态的G等位基因频率在原发性高血压并脑梗死组显著高于健康对照组（P=0．016）,而与原发性高血压组比较无显著性差异。单倍型分析提示,由-20C和-18T构成的H5单倍型在原发性高血压组中增加,与对照组相比有显著性差异（P=0．006）;而由-20C和-6G构成的H6单倍型在原发性高血压并脑梗死组中明显增加,与对照组相比有显著性差异（P=0．003）。结论在海南黎族人群中,AGT基因的-20（A—C）,-18（C—T）多态可能对原发性高血压的发病起了重要作用;-20（A—C）,-18（C-T）和-6（A—G）多态可能是原发性高血压并脑梗死发病的遗传危险因素。     

CX3CL-1/CX3CR1信号调控的小胶质细胞活化在右美托咪定改善小鼠认知功能中的作用

目的 探究CX3CL-1/CX3CR1信号在右美托咪定(Dex)改善七氟醚诱导老龄小鼠认知功能障碍中的作用。方法 野生型(WT)小鼠与CX3CR1敲除(CX3CR1^-/-)小鼠各30只,各分为对照组,模型组,Dex组,每组10只。取模型组与Dex组小鼠以3%七氟醚麻醉,行肝脏切除术。术后每天腹腔注射20μg·kg^-1Dex,连续治疗7d,之后开展水迷宫实验与跳台实验。取小鼠脑组织分别开展苏木精-伊红染色、TUNEL染色、免疫组化染色、树突棘染色、电生理测试、Western blot实验。结果 与对照组相比,模型组小鼠水迷宫逃避潜伏期明显增加,穿越平台次数减少,第Ⅰ象限停留时间减少,跳台错误潜伏期明显减少,跳台错误次数明显增加。在WT小鼠中,Dex明显减少了小鼠逃避潜伏期,增加了穿越平台次数与第Ⅰ象限停留时间,提高了跳台错误潜伏期,减少了跳台错误次数。但在CX3CR1^-/-小鼠中,Dex对小鼠水迷宫测试和跳台实验中行为没有明显影响。此外,与模型组相比,WT小鼠经Dex治疗后,iba1表达明显减少,NLRP3表达降低,神经元...     

血管紧张素原基因与黎族原发性高血压并脑梗死的相关性(英文)

目的研究血管紧张素原基因(angiontensinogen,AGT)4个位点的单核苷酸多态及其构成的单倍型与海南黎族原发性高血压及原发性高血压并发脑梗死的相关性。方法选择海南黎族人群为研究对象,利用PCR直接测序法,在100例原发性高血压患者、100例原发性高血压并脑梗死患者和100例健康对照者中,对AGT基因启动子区域的-152(G-A),-20(A-C),-18(C-T),-6(A-G)多态进行基因分型。结果C-18T多态的基因型和T等位基因频率分布在原发性高血压组(P=0.003,P=0.004)和原发性高血压并脑梗死组(P=0.002,P=0.002)均比健康对照组显著增高。-6(A-G)多态的G等位基因频率在原发性高血压并脑梗死组显著高于健康对照组(P=0.016),而与原发性高血压组比较无显著性差异。单倍型分析提示,由-20C和-18T构成的H5单倍型在原发性高血压组中增加,与对照组相比有显著性差异(P=0.006);而由-20C和-6G构成的H6单倍型在原发性高血压并脑梗死组中明显增加,与对照组相比有显著性差异(P=0.003)。结论在海南黎族人群中,AGT基因的-20(A-C),-18(C-T)多态可能对原发性高血压的发病起了重要作用;-20(A-C),-18(C-T)和-6(A-G)多态可能是原发性高血压并脑梗死发病的遗传危险因素。     

高血压脑梗死患者血管紧张素Ⅱ-1型受体基因多态性的研究

目的:探讨血管紧张素II-1型受体基因多态性与高血压脑梗死发病的关系。方法:采用聚合酶链反应技术(PCR)对48名40岁及以上人群(对照组)人和39例原发性高血压、63例高血压脑梗死患者血管紧张素Ⅱ-Ⅰ型受体基因多态性进行检测,并用非条件Logistic回归筛选出与高血压脑梗死发病相关的因素。结果:AC基因型、C等位基因频率高血压脑梗死组高于人群对照组(x2=3.92、4.53,P<0.05)和高血压组(x2=6.59、11.8,P<0.05)。高血压组与人群对照组则无差别(x2=0.026,0.023,P>0.05)。AC基因型、C等位基因是高血压脑梗死独立的危险因素。结论:血管紧张素Ⅱ。1型受体基因型AC者发生高血压脑梗死的危险性增高。     

血栓素A2受体基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的 探讨上海地区汉族居民血栓素A2受体(TXA2R)基因位点单核苷酸多态性与脑梗死的关系.方法 运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测334例脑梗死患者和135例正常老年对照者TXA2R基因rs768963位点的单核苷酸多态性,计算等位基因的频率分布.结果 在脑梗死组与正常组之间,rs768963位点的基因型(T/T、T/C与C/C)频率分布差异均无统计学意义(P＞0.05),而等位基囚频率(T/C)分布差异有统计学意义(P＜0.05);Logistic回归分析示rs768963位点基囚突变与性别、年龄、血脂、血压、血糖均无关联.结论 TXA2R基因rs768963位点C等位基因可能是脑梗死的危险因素之一,携带C等位基因的患者具有更高的脑梗死发病易感性.     

Fractalkine (CX3CL1) and fractalkine receptor (CX3CR1) distribution in spinal cord and dorsal root ganglia under basal and neuropathic pain conditions

Fractalkine is a unique chemokine reported to be constitutively expressed by neurons. Its only receptor, CX3CR1, is expressed by microglia. Little is known about the expression of fractalkine and CX3CR1 in spinal cord. Given that peripheral nerve inflammation and/or injury gives rise to neuropathic pain, and neuropathic pain may be partially mediated by spinal cord glial activation and consequent glial proinflammatory cytokine release, there must be a signal released by affected neurons that triggers the activation of glia. We sought to determine whether there is anatomical evidence implicating spinal fractalkine as such a neuron-to-glia signal. We mapped the regional and cellular localization of fractalkine and CX3CR1 in the rat spinal cord and dorsal root ganglion, under basal conditions and following induction of neuropathic pain, employing both an inflammatory (sciatic inflammatory neuropathy; SIN) as well as a traumatic (chronic constriction injury; CCI) model. Fractalkine immunoreactivity and mRNA were observed in neurons, but not glia, in the rat spinal cord and dorsal root ganglia, and levels did not change following either CCI or SIN. By contrast, CX3CR1 was expressed by microglia in the basal state, and the microglial cellular concentration was up-regulated in a regionally specific manner in response to neuropathy. CX3CR1-expressing cells were identified as microglia by their cellular morphology and positive OX-42 and CD4 immunostaining. The cellular distribution of fractalkine and CX3CR1 in the spinal circuit associated with nociceptive transmission supports a potential role in the mechanisms that contribute to the exaggerated pain state in these models of neuropathy.     

ABCA1基因R219K多态性与宁夏回、汉族脑梗死患者及血脂的关系

目的探讨宁夏回、汉族脑梗死患者与脂质代谢相关基因三磷酸腺苷结合盒转运子(ABCA1)的R219K多态性及血脂的关系。方法入选我院神经内科脑梗死住院患者266例,其中汉族患者185例(汉族脑梗死组)和回族患者81例(回族脑梗死组)。入院后检测血脂等生化指标,用PCR-RFLP方法测定R219K多态性,统计学方法分析酶切结果及其与血脂的关系。结果回、汉族脑梗死组ABCA1基因R219K基因型(RR、RK、KK)及等位基因频率(R、K)分别为28.4%、60.5%、11.1%,58.6%、41.4%;28.1%、46.5%、25.4%,51.4%、48.6%;汉族脑梗死组与回族脑梗死组等位基因频率分布无显著统计学差异(χ2=1.008,P=0.315),两组间基因型频率差异有统计学意义(χ2=7.647,P=0.022),与RK型比较,回族脑梗死组KK基因型较汉族脑梗死组低(χ2=7.657,P=0.006),将两组进行性别、年龄、高血压、糖尿病等因素亚组分析后,仅回族男性、高血压患者KK基因型较汉族脑梗死组低(χ2=6.725~7.127,P=0.008~0.010);各基因型间血脂水平无统计学差异(P>0.05...     

北方汉族人PLA2R1基因多态性与脑梗死关系的研究

目的探讨中国北方汉族人群PLA2R1基因多态性与脑梗死的关系。方法选取年龄、性别匹配的中国北方汉族脑梗死患者212人,健康对照组179人,采用PCR技术和限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)的方法检测基因型。结果PLA2R1基因SNP的等位基因和基因型在脑梗死组和对照组的频数分布差异无显著性(P>0.05)。结论中国北方汉族人群中PLA2R1基因多态性与脑梗死的发病可能无关。