嗅鞘细胞移植联合督脉电针治疗大鼠前脊髓综合征

背景：电针在脊髓损伤的康复过程中有其一定的临床作用,同时以嗅鞘细胞为代表的细胞治疗在部分患者的康复过程中亦起到了一定的作用,两者是否具有协同应用尚不清楚。 目的：观察督脉电针联合嗅鞘细胞移植对前脊髓综合征大鼠神经营养因子3水平及P75NTR表达的影响。 方法：将40只成年大鼠随机分为对照组、督脉电针组、嗅鞘细胞移植组、督脉电针+嗅鞘细胞移植组,经嗅鞘细胞移植和督脉电针治疗2周后 ELISA法检测脊髓组织神经营养因子3水平,免疫组化检测P75NTR的表达。 结果与结论：督脉电针+嗅鞘细胞移植组神经营养因子3水平较对照组及其他实验组高(P < 0.05);嗅鞘细胞移植组和督脉电针+嗅鞘细胞移植组的脊髓损伤部位以及相邻的组织内均有P75NTR表达,且督脉电针+嗅鞘细胞移植组阳性表达明显较嗅鞘细胞移植组多。实验证实督脉电针联合嗅鞘细胞移植能够明显增高大鼠前脊髓综合征邻近组织的神经营养因子3水平;督脉电针可以有效促进移植的嗅鞘细胞在宿主内存活。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床验证

背景: 一系列基础研究证实在动物脊髓损伤的模型中,嗅鞘细胞移植能够促进脊髓损伤的再生和恢复脊髓的部分神经功能。部分临床实验证明嗅鞘细胞的移植的确能改善脊髓损伤患者的神经功能,从而改善其生活质量。 目的：验证嗅鞘细胞移植对脊髓损伤患者神经功能修复的作用及安全性。 方法：取流产胚胎嗅球并消化成为单个嗅鞘细胞,培养纯化2周左右,制成嗅鞘细胞悬液。选择脊髓损伤患者213例,全麻下将制备好的嗅鞘细胞悬液采用区域性多靶点注射方法移植于损伤脊髓的周围。采用ASIA量表对患者移植前1d及移植后3周~2个月进行评分,评价患者脊髓恢复状况。 结果与结论：所有患者的脊髓神经功能于术后3周均有不同程度的改变,脊髓功能评分及感觉与运动功能均较移植前明显提高(P < 0.001),且随时间延长呈不断改善趋势;最长患者随访5年,未见已恢复的神经功能 减退及移植不良反应。证实嗅鞘细胞移植对脊髓损伤患者的神经功能恢复有促进作用,可以部分恢复及改善其部分脊髓神经功能,且治疗方法安全。     

神经干细胞与嗅鞘细胞联合移植的研究进展

神经干细胞（NSCs）能分化成神经元替代坏死,凋亡神经元,嗅鞘细胞（OECs）是一种特殊类型的胶质细胞,两种细胞联合移植能在中枢神经系统修复过程中起到互补作用,更好地修复损伤组织,改善宿主运动及认知功能。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤的研究一直是神经科学界探讨的热点,而脊髓损伤后的神经修复和功能重建也一直困扰着临床医学界。既往认为中枢神经细胞的轴突损伤在自然条件下几乎不能再生,其原因是中枢神经环境不利于轴突再生、中枢神经细胞本身的再生能力低下、以及神经轴突不能穿越损伤瘢痕区到达靶细胞。脊髓损伤包括原发性损伤和继发性损伤,二者均可引起部分神经元的丢失和神经纤维的断裂;而继发性损伤可导致原发性损伤范围的扩大,使更多的神经元凋亡和神经纤维的变性、脱髓鞘改变等,从而导致相应部位的感觉、运动和神经反射功能的丧失。近年来,随着神经科学…     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床研究现状

目的：对嗅鞘细胞生物学特性、培养纯化、嗅鞘细胞移植的可能机制及嗅鞘细胞移植在临床的应用等方面进行分析,介绍嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状。 资料来源：以olfactory ensheathing cells,spinal cord injury,嗅鞘细胞,脊髓损伤为检索词检索PubMed数据库(2000/2009),中国期刊全文数据库(2000/2009)。 资料选择：纳入标准：①文章所述内容应与嗅鞘细胞及脊髓损伤密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准：①重复性研究。②Meta分析。 结局评价指标：嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展。 结果：嗅鞘细胞具有与许旺细胞和星形胶质细胞相似的特征。目前嗅鞘细胞移植的动物实验主要致力于提高轴突再生能力、替代细胞成分、阻止脱髓鞘病变和促进髓鞘再生等方面,移植的嗅鞘细胞具有促进感觉及运动功能恢复的客观结果,有些移植研究甚至已经进入了临床试验阶段。不过嗅鞘细胞移植由动物实验转化到临床应用还受到很多因素的影响,诸如移植剂量、细胞生长因子的活力,细胞移植的风险等,尤其是嗅鞘细胞移植后的近期及远期效果还需要进一步深入研究、评价,并且需要长时间的随访。有研究已经把用基因转染的嗅鞘细胞用于移植,在动物试验身上已经取得了满意的效果。 结论：随着基因工程技术发展以及嗅鞘细胞移植修复神经机制的深入研究,嗅鞘细胞移植必将为临床治疗脊髓损伤的患者带来康复的希望。     

胚胎嗅鞘细胞移植治疗Friedreich共济失调：疗效分析及安全性评价*

摘要：选择2005-08/2007-04收治的根据Geoffroy和Harding等制定的标准及DNA检测确诊的Friedreich共济失调患者6例，男1 例，女5 例,年龄14~28岁，病程5-14年。患者及家属对治疗知情同意，并经医院伦理委员会批准。4例于全麻下手术，选取脊髓变细处上、中下3点或2点为细胞注射部位，每例注射嗅鞘细胞2×106。2例于局麻下手术，选取双顶放射冠为注射细胞靶点，每侧注射嗅鞘2×l06。术前和术后2~4周采用世界神经病联合会国际合作共济失调量表比较其治疗结果，分数越高表示神经功能损害越严重。采用SPSS13.0统计软件进行数据处理及分析，2~4周后患者均有不同程度的神经功能改善，6例患者世界神经病联合会国际合作共济失调量表评分较术前下降（P =0.009），改善主要表现在行走能力、步态、站立平衡方面。术后无发热、头痛、头晕、恶心及呕吐等神经系统并发症发生。对2例患者进行半年以上的远期随访，平衡及行走功能继续改善，例1共济失调量表评定总分术前38分降至35分，术后随访7个月，共济失调量表评分降至22分。     

嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤临床试验初步报告

目的　开展嗅鞘细胞移植治疗晚期脊髓损伤的临床试验研究 ,探讨其移植是否安全可行 ,对晚期脊髓损伤患者是否有帮助脊髓神经功能恢复的作用。方法　取胚胎嗅球 ,消化成单个嗅鞘细胞后 ,培养 2～ 3周 ,然后将其移植到脊髓损伤部位的上下处。共治疗 171例伤后时间为 6个月至 18年 ,脊髓损伤部位没有压迫性病变的脊髓损伤患者 ,其中男 139例 ,女 32例 ,年龄为 2 .5～ 6 4岁。结果　嗅鞘细胞移植后两周～两个月时随访 ,按ASIA脊髓损伤神经功能分类国际标准评价 ,171例患者的脊髓功能均有部分恢复 ,其中运动功能由术前 34.5± 2 0 .3提高到 4 2 .0± 2 0 .0 ,轻触觉由术前 4 7.2± 2 4 .0提高到 6 1.8± 2 2 .9,痛觉由术前 4 8.6± 2 3.5提高到 6 4 .0± 2 2 .8。自身术前术后对照t检验 ,P <0 .0 0 1。患者无术后长期发热、脊髓感染和功能恶化等并发症 ,无与手术有关的死亡。结论　嗅鞘细胞移植安全可行 ,能帮助晚期脊髓损伤患者恢复部分脊髓神经功能。     

不同来源嗅鞘细胞移植治疗脑出血的比较

背景：嗅鞘细胞是目前已知用于移植细胞中惟一可以跨越周围神经系统与中枢神经系统边界的细胞。在众多的国内外文献中,大多以嗅球来源嗅鞘细胞作为观察对象;但采用嗅黏膜嗅鞘细胞移植具有来源方便、损伤小、可自体取材等优势。 目的：比较嗅球来源嗅鞘细胞和嗅黏膜嗅鞘细胞移植对脑出血后神经功能损伤恢复作用的差异。 设计、时间及地点：免疫组织化学水平的随机对照动物实验,于2005-10/2007-10在无锡市第三人民医院细胞实验室完成。 材料：选用健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组,对照组、嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组各10只。 方法：分别获取人鼻中隔黏膜、人胚嗅球,进行嗅鞘细胞的分离培养纯化,取培养10 d的细胞用作细胞移植。取SD大鼠制备尾状核出血模型,嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组各取10μL细胞悬液在立体定向下引导微量注射器向大鼠脑组织内匀速注射(1 μL/min),对照组注入等量培养基,注射点为右侧尾状核。 主要观察指标：观察两种来源嗅鞘细胞的体外培养情况。嗅鞘细胞移植后对动物行定期行为学评定,功能损伤越重,得分越高;并观察组织切片靶区域免疫细胞化学分析结果。 结果：从体外培养结果看,无论在形态上还是表型上,两者无明显区别。嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组大鼠的Longa 5分制法及前肢放置试验评分在移植后第14,28,56天显著低于对照组（P < 0.05）,两移植组差异无显著性意义（P > 0.05）,移植组各时间段差异无显著性意义（P > 0.05）。 结论：用于移植修复神经功能的两种嗅鞘细胞在细胞特性、移植效果方面均无明显差异。     

嗅鞘细胞移植治疗多发性硬化1例

作者在治疗晚期脊髓损伤的基础上[1],采用嗅鞘细胞移植治疗脊髓多发性硬化1例,取得较好效果.     

嗅鞘细胞移植治疗中枢神经系统损伤的理论研究及临床应用

进行中枢神经系统损伤修复的候选胶质细胞包括嗅鞘细胞、少突胶质前体细胞和许旺细胞。少突胶质前体细胞很难获得大量移植用供体细胞,许旺细胞很难穿透胶质瘢痕,从应用方面均不如嗅鞘细胞。离体培养中嗅鞘细胞极强的可塑性可能会使嗅鞘细胞适时改变自身形态,以适应体内复杂的微环境,有利于神经再生。嗅鞘细胞移植后对脊髓后根损伤后再生有一定作用,其作用大小可能与嗅鞘移植物的成分有关,细胞制备技术和混合细胞移植能影响嗅鞘细胞移植物的效果。虽然胎脑的免疫原性很低,但合理应用免疫抑制剂会使嗅鞘细胞的移植效果有所改观。嗅鞘细胞除了重建损伤通路外,还可能通过轴突发芽、在非突触部位释放单胺类物质、改善病变部位环境并帮助附近的残余神经纤维保存功能和活性等机制对中枢神经的功能发生作用。嗅鞘细胞的细胞生物学和移植后行为学的深入研究都会加快人们对脊髓损伤的理解,并对脊髓损伤的修复治疗产生重要的理论指导意义。     

The importance of olfactory ensheathing cells for spinal cord injury

<正>We have been conducting clinical trials on olfactory ensheathing cell(OEC)transplantation for incomplete chronic spinal cord injury(SCI)since 2005.Long-term follow-up results verified that sensory and motor functions improved in most patients to varying degrees.However,the main source of OECs     

嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤

背景：嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤在众多疗法中效果较佳,成为最有前景的治疗方法之一。目前移植方法为局部移植,存在操作复杂、创伤大、重复移植治疗困难等缺点。寻找一种简单易行且疗效好的移植方法成为各国学者研究的热点。 目的：分析嗅鞘细胞静脉移植治疗脊髓损伤的可行性和疗效。 方法：制备Wistar大鼠脊髓半切模型,随机分4组：嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组、D/F12静脉移植组和空白对照组。定期行CBS功能评分及组织学检查,评价脊髓修复情况。 结果与结论：嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组的功能恢复和组织学改变优于D/F12静脉移植组和空白对照组,嗅鞘细胞髓内局部移植组、嗅鞘细胞静脉移植组间无显著差别。说明嗅鞘细胞静脉移植可向脊髓损伤部位迁移并修复脊髓损伤,其疗效与嗅鞘细胞髓内局部移植相当。     

不同来源嗅鞘细胞修复脊髓损伤的效果比较

背景：研究表明嗅鞘细胞所分泌的细胞黏附分子和神经营养因子具有保护脊髓神经元和促进脊髓轴突再生的效应。 目的：比较嗅球及嗅黏膜固有层来源的嗅鞘细胞异体移植修复脊髓损伤的能力。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-06/2008-06在西电集团医院中心实验室完成。 材料：随机选取雄性3月龄及23月龄SD大鼠各6只,分为实验组(23月龄)和对照组(3月龄),用于嗅鞘细胞的体外培养和纯化;SD大鼠30只随机分为乳鼠嗅球嗅鞘细胞移植组、正常嗅黏膜嗅鞘细胞移植组、对照组,每组10只。 方法：30只SD大鼠制造脊髓损伤模型,分别将体外培养的乳鼠和SD大鼠嗅鞘细胞进行脊髓损伤模型的异体移植,对照组不做移植。 主要观察指标：术后4,8周,进行BBB神经功能评分,诱发电位,组织病理学观察。 结果：实验过程中大鼠死亡7只,各组死亡率大致相同。移植后第4,8周时,乳鼠嗅鞘细胞移植组、正常嗅黏膜嗅鞘细胞组评分差异无显著性意义(P > 0.05),均显著高于空白对照组(P < 0.001);嗅鞘细胞移植2组评分8周高于4周(P < 0.01)。术后4周,各组动物均未引出运动诱发电位,移植后8周时,2组嗅鞘细胞移植组动物均可引出运动诱发电位,2组差异无显著性意义(P > 0.05),空白对照组动物仍未引出运动诱发电位(P < 0.001)。移植后8周,2组嗅鞘细胞移植组脊髓损伤区有较多细胞浸润,对照组细胞数目较少。 结论：来源于嗅球与嗅黏膜的嗅鞘细胞对脊髓损伤修复均有促进作用,且两者作用无明显差异。     

嗅鞘细胞的可塑性研究

2004年诺贝尔医学和生理学奖得主Richard Axel和Linda Buck证实：原来认为不具备分化能力的小鼠嗅感觉神经元能够再次进入细胞周期发生分裂．这一发现是嗅觉神经系统可塑性的典型体现。嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）作为嗅觉系统内一种特殊类型的胶质细胞．大量研究证实其可促进中枢神经系统（central nervous system．CNS）损伤的修复。但目前对OECs生物学特性的认识仍存在不同观点．其可塑性的研究近年来逐渐受到关注。可塑性指在变化的内外环境刺激下细胞改变自身特性．在形态、抗原表达和功能上呈现很大程度的可变性。目前被证实OECS表达的抗原有S100β、神经生长因子低亲和力受体（p751、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrill aryacidicprotein，GFAP）、神经肽Y（neuropeptide Y．NPY）、O4和神经细胞黏附分子（neural cell adhesion molecule，NCAM）等。     

嗅黏膜嗅鞘细胞与肌基膜管联合移植修复脊髓损伤

目的：观察嗅黏膜来源的嗅鞘细胞与肌基膜管联合移植后对脊髓损伤的修复效果。 方法：1只SD大鼠行背正中切口，顺椎旁肌纤维切除约1.5 cm×0.8 cm×0.6 cm的肌条，复温、漂洗并挤压肌条以排出肌浆，制成肌基膜管。4只SD大鼠麻醉后取出嗅黏膜，胶原酶消化法分离培养嗅鞘细胞，调整浓度至1011 L-1。取SD大鼠50只，随机分成5组：嗅鞘细胞+肌基膜管联合组、嗅鞘细胞组、肌基膜管组、模型组、正常组，10只/组。除正常组外，其余组均建立脊髓损伤模型，于T10横断脊髓并切除约2 mm，将培养7 d的嗅鞘细胞与肌基膜管按组别分别植入脊髓断端，模型组用浸有DMEM的凝胶海绵桥接横断的脊髓。 结果：移植后第8周，嗅鞘细胞+肌基膜管联合组、嗅鞘细胞组大鼠运动功能明显恢复，出现大关节大幅度运动，且前者运动功能BBB评分升高尤为显著（P < 0.01）；肌基膜管组大鼠仅见小关节轻微活动；模型组大鼠后肢挛缩重，无明显功能恢复。嗅鞘细胞+肌基膜管联合组后肢体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期显著低于其他各组（P < 0.01）。苏木精-伊红染色和核转录因子免疫组化染色结果显示，嗅鞘细胞+肌基膜管联合组、嗅鞘细胞组的移植物与损伤脊髓整合较好，未见明显空洞，有大量染色呈阳性的纤维，纤维较长，由近侧端长入远侧端；肌基膜管组有空洞形成，染色阳性的纤维数量少，纤维细小且排列紊乱；模型组端断间充满瘢痕组织，未见明显染色阳性纤维。 结论：嗅鞘细胞移植可促进脊髓损伤后的轴突再生，肌基膜管作为一种生物管道，两者联合应用可明显促进脊髓损伤后的轴突再生及功能恢复。     

Transplantation of olfactory ensheathing cells for promoting regeneration following spinal cord injury

OBJECTIVE： To investigate the status of olfactory ensheathing cells （OECs） transplantation in facilitating the regeneration of spinal cord injury. DATA SOURCES： Articles about OECs transplantation in treating spinal cord injury were searched in Pubmed database published in English from January 1981 to December 2005 by using the keywords of ＂olfactory ensheathing cells, transplantation, spinal cord injury＂. STUDY SELECTION： The data were checked primarily, literatures related to OECs transplantation and the regeneration of spinal cord injury were selected, whereas the repetitive studies and reviews were excluded. DATA EXTRACTION： Totally 43 articles about OECs transplantation and the regeneration and repair of spinal cord injury were collected, and the repetitive ones were excluded. DATA SYNTHESIS： There were 35 articles accorded with the criteria. OECs are the olfactory ensheathing glias isolated from olfactory bulb and olfactory nerve tissue. OECs have the characters of both Schwann cells in central nervous system and peripheral astrocytes. The transplanted OECs can migrate in the damaged spinal cord of host, can induce and support the regeneration, growth and extension of damaged neuritis. Besides, transgenic technique can enable it to carry some exogenous genes that promote neuronal regeneration, and express some molecules that can facilitate neural regeneration, so as to ameliorate the internal environment of nerve injury, induce the regeneration of damaged spinal cord neurons, which can stimulate the regeneration potential of the damaged spinal cord to reach the purpose of spinal cord regeneration and functional recovery. CONCLUSION： OECs are the glial cells with the energy for growth at mature phase, they can myelinize axons, secrete various biological nutrition factors, and then protect and support neurons, also facilitate neural regeneration. OECs have been successfully isolated from nasal olfactory mucosa and olfactory nerve. Therefore, autologous transplantation of OECs and objective genes modified OECs carrying various neurotrophic factors may become an effective method to treat spinal cord injury in the future.     

Transplantation of olfactory ensheathing cells for promoting regeneration following spinal cord injury

OBJECTIVE: To investigate the status of olfactory ensheathing cells (OECs) transplantation in facilitating the regeneration of spinal cord injury. DATA SOURCES: Articles about OECs transplantation in treating spinal cord injury were searched in Pubmed database published in English from January 1981 to December 2005 by using the keywords of "olfactory ensheathing cells, transplantation, spinal cord injury". STUDY SELECTION: The data were checked primarily, literatures related to OECs transplantation and the regeneration of spinal cord injury were selected, whereas the repetitive studies and reviews were excluded. DATA EXTRACTION: Totally 43 articles about OECs transplantation and the regeneration and repair of spinal cord injury were collected, and the repetitive ones were excluded. DATA SYNTHESIS: There were 35 articles accorded with the criteria. OECs are the olfactory ensheathing glias isolated from olfactory bulb and olfactory nerve tissue. OECs have the characters of both Schwann cells in central nervous system and peripheral astrocytes. The transplanted OECs can migrate in the damaged spinal cord of host, can induce and support the regeneration, growth and extension of damaged neuritis. Besides, transgenic technique can enable it to carry some exogenous genes that promote neuronal regeneration, and express some molecules that can facilitate neural regeneration, so as to ameliorate the internal environment of nerve injury, induce the regeneration of damaged spinal cord neurons, which can stimulate the regeneration potential of the damaged spinal cord to reach the purpose of spinal cord regeneration and functional recovery. CONCLUSION: OECs are the glial cells with the energy for growth at mature phase, they can myelinize axons, secrete various biological nutrition factors, and then protect and support neurons, also facilitate neural regeneration. OECs have been successfully isolated from nasal olfactory mucosa and olfactory nerve. Therefore, autologous transplantation of OECs and objective genes modified OECs carrying various neurotrophic factors may become an effective method to treat spinal cord injury in the future.     

Combination of olfactory ensheathing cells with local versus systemic cAMP treatment after a cervical rubrospinal tract injury

The failure of CNS axons to regenerate following traumatic injury is due in part to a growth‐inhibitory environment in CNS as well as a weak intrinsic neuronal growth response. Olfactory ensheathing cell (OECs) transplants have been reported to create a favorable environment promoting axonal regeneration, remyelination, and functional recovery after spinal cord injury. However, in our previous experiments, OEC transplants failed to promote regeneration of rubrospinal axons through and beyond the site of a dorsolateral funiculus crush in rats. Rubrospinal neurons undergo massive cell atrophy and limited expression of regeneration‐associated genes after axotomy. Using the same injury model, we tested the hypothesis that treatment of the red nucleus with cAMP, known to stimulate the intrinsic growth response in other neurons, will promote rubrospinal regeneration in combination with OEC transplants. In addition, we assessed a systemic increase of cAMP using the phosphodiesterase inhibitor rolipram. OECs prevented cavity formation, attenuated astrocytic hypertrophy and the retraction of the axotomized rubrospinal axons, and tended to reduce the overall lesion size. OEC transplantation lowered the thresholds for thermal sensitivity of both forepaws. None of our treatments, alone or in combination, promoted rubrospinal regeneration through the lesion site. However, the systemic elevation of cAMP with rolipram resulted in greater numbers of OECs and axonal density within the graft and improved motor performance in a cylinder test in conjunction with enhanced rubrospinal branching and attenuated astrocytic hypertrophy. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.