大蒜素对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察大蒜素对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马凋亡相关蛋白表达的影响,进一步探讨大蒜素的脑保护机制。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为5组:假手术组(Sham组);缺血再灌注组(IR组);缺血再灌注+大蒜素10 mg/kg(All-10 mg)、20 mg/kg(All-20 mg)、30 mg/kg(All-30 mg)组,夹闭两侧颈总动脉8 min再灌注24 h建立大鼠全脑缺血再灌注模型,取海马组织硫堇染色观察海马组织学改变及存活神经元密度;免疫组织化学染色测定海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果与Sham组相比,IR组海马CA1区神经元密度明显降低,Bax蛋白表达明显增加(均P0.05);与IR组相比,大蒜素处理各组海马CA1区神经元密度明显增多,Bcl-2蛋白表达明显增加,Bax蛋白表达明显减少,其中以All-20 mg组变化最显著(均P0.05)。结论大蒜素可以通过影响凋亡相关蛋白的表达而抑制细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。     

全脑缺血后海马区单胺类神经递质的变化

目的观察全脑缺血后大鼠海马区单胺类神经递质的变化规律,探讨其在缺血后迟发性神经元死亡中的作用。方法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,观察全脑缺血再灌注后酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺-β-羟化酶(DβH)的表达并对海马区去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺(5-HT)和单胺类神经递质代谢产物高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-H IAA)的含量进行测定。结果对照组TH及DβH呈阴性表达。全脑缺血再灌注后1 d,3 d缺血组海马CA1区神经元TH及DβH表达阴性。5 d后神经元TH及DβH呈阳性表达;全脑缺血再灌注后6 h,缺血组海马区单胺类神经递质含量显著上升,NE、肾上腺素、多巴胺及5-HT分别为对照组的232.5%、347.3%、336.1%和210.1%,1 d后开始回落,3 d已明显低于对照组,5 d后又有回升并接近对照组;缺血组,海马区单胺类神经递质的代谢产物HVA、5-H IAA含量于全脑缺血再灌注后6 h开始上升,1 d依然保持较高的水平,至3 d回落,5 d接近对照组。结论全脑缺血再灌注后早期海马区单胺类神经递质含量显著上升;单胺类神经递质含量显著上升可能是导致迟发性神经元死亡的主要因素之一。     

吗啡预处理与脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡：抑制效应的途径？

[摘要] 背景：大量研究已经证明凋亡是脑缺血再灌注损伤后神经元损伤的重要形式,且这一过程可以人为干预以改善预后。药物预处理对缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响是脑缺血研究的热点。吗啡是临床常用药,几项研究显示其对某种形式的脑损伤有保护作用,但吗啡预处理对脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响尚未见报道。 目的: 探讨吗啡预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡及相关基因表达的影响。 设计、时间及地点：2008年6月-2009年8月在青岛大学医学院脑血管病研究所完成分子生物学水平的随机对照实验。 材料：神经元凋亡及免疫组化检测试剂盒均由武汉博士德公司提供 方法: 健康雄性成年Wistar大鼠72只,随机分成4组：假手术组;脑缺血/再灌注组;吗啡预处理1mg/kg组;吗啡预处理7mg/kg组,18只/组。依再灌注时间不同,各组又分为再灌注1d、3d、7d 三个亚组,6只/亚组。以Pusinelli方法为标准建立四动脉阻断法全脑缺血模型,假手术组仅暴露第一颈椎双侧翼孔和双侧颈总动脉而不烧灼,不夹闭动脉;脑缺血组缺血前60min腹腔注射生理盐水2mg/kg;吗啡预处理1mg/kg组及吗啡预处理7mg/kg组分别在脑缺血前60min腹腔内注射吗啡1mg/kg及7mg/kg。在脑缺血8分钟后恢复血流,再灌注1d、3d、7d后断头取脑制作石蜡切片。 主要观察指标： HE染色观察海马CA1区组织病理学改变,TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡,免疫组化检测海马CA1区Casepase-3蛋白表达。 结果：HE染色：假手术组海马CA1区神经元结构正常;脑缺血组则出现大量的肿胀、核固缩及胞浆空泡样变异常细胞并神经元数量显著减少;吗啡预处理组细胞肿胀、核皱缩及细胞缺失的病理学改变显著轻于脑缺血再灌注组。凋亡细胞计数：与假手术组比较,缺血组和吗啡预处理组海马CA1区神经元凋亡数明显增加(P<0.01) ;与缺血再灌注组比较, 吗啡预处理组神经元的凋亡数明显减少(P<0.01);与吗啡预处理1mg/kg组比较,吗啡预处理7mg/kg组神经元凋亡数显著降低(P< 0.05 或P< 0.01)。Casepase-3蛋白表达：缺血组和吗啡预处理组Casepase-3表达明显高于假手术组(P<0.01);吗啡预处理组Casepase-3表达显著低于缺血再灌注组(P<0.01);吗啡预处理7mg/kg组Casepase-3表达明显低于吗啡预处理1mg/kg组(P< 0.05 )。应用吗啡后,在1d、3d、7d三个时点,神经元凋亡的减少趋势与Casepase-3降低的趋势一致。 结论： 吗啡预处理可减轻缺血性脑损伤,提高脑缺血耐受性,且大剂量吗啡效果优于小剂量;吗啡抗凋亡作用机制与Casepase-3密切有关。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护研究

目的观察亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后海马CAI区神经元凋亡的影响,探讨亚低温对缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法SD大鼠30只随机分为对照组（n=10）,常温缺血组（n=10）,亚低温组（n=10）,采用改良的Pulsinelli-Brierley4血管法建立全脑缺血再灌注动物模型,缺血30min后再灌注72h,尼氏体染色观察海马区存活锥体细胞数,TUNEL法检测缺血后海马CAI区神经元凋亡情况,电镜下观察神经细胞形态学改变。结果与对照组比较,常温缺血组的海马CAI区存活的锥体细胞数目减少（P〈0.01）;与常温缺血组比较,亚低温组海马CAI存活的锥体细胞数目明显增多（P〈0.01）。对照组、亚低温组的海马CAI区神经元凋亡数目和凋亡指数明显低于常温缺血组。在电镜下观察亚低温能明显减轻缺血后脑组织病理形态学的损害程度。结论亚低温可以抑制脑缺血再灌注后的神经细胞凋亡,对神经细胞有保护作用。     

全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达的影响及意义

目的探讨全脑缺血-再灌注对成年大鼠海马CA1区GAD65表达的影响及意义。方法成年雄性SD大鼠24只,随机分为3组:假手术组(SH)、缺血-再灌注3d组(IR-3)及缺血-再灌注7d组(IR-7),每组8只。采用四动脉阻断法制作全脑缺血-再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测海马CA1区谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)同工酶GAD65的表达变化。结果与假手术组相比,IR-3组GAD65的表达明显增多,IR-7组恢复正常。结论GABA能中间神经元对缺血相对耐受;全脑缺血-再灌注3dGAD65的表达增多可能是一种代偿性的机制,以减轻脑缺血后的高兴奋性。     

γ-氨基丁酸在大鼠急性脑缺血再灌注损伤中的作用

为了探讨GABA在大鼠急性脑缺血再灌注损伤中的作用,本实验采用Pulsinelli的4VO法制备了大鼠脑缺血灌注模型,利用高效液相色谱法观察脑缺血再灌注大后大鼠海马区GABA.GLU含量变化。发现缺血后GABA.GLU含量增高,再灌注后GABA含量明显下降。提示:再灌注后GABA含量减少,海马内源性抑制降低可能是脑缺血再灌注后神经元损伤加重的原因之一。     

大鼠脑缺血再灌流后海马区一氧化氮合酶活性的变化

目的 :观察鼠全脑缺血再灌流后海马区NOS活性的变化。方法 :采用大鼠 4血管关闭方法制作全脑缺血再灌流模型。实验动物分为假手术组、缺血 10min组、再灌注 1、2、3d组 ,测定脑缺血再灌流后海马区NOS活性的变化。结果 :全脑缺血再灌注后海马组织NOS活性被激活上调。结论 :NO可能参与了海马CA1区迟发性神经元死亡 (DND)的发生。     

GM1对大鼠脑缺血再灌注损伤的谷氨酸、天门冬氨酸、乳酸及葡萄糖含量的影响

目的探讨GM1对脑缺血再灌注损伤的神经细胞的保护作用。方法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,观测外源性GM1对脑缺血再灌注损伤后脑细胞外液谷氨酸、天门冬氨酸、乳酸及葡萄糖含量的影响。结果再灌注组、治疗组谷氨酸、天门冬氨酸、乳酸基础水平与假手术组基本相同,缺血后迅速升高,再灌注30分钟达高峰,其后逐渐下降。再灌注组在30～120min内显著高于对照组(P(0.05),治疗组在30～90min内显著高于对照组,但低于再灌注组(P(0.05);再灌注组、治疗组葡萄糖缺血后迅速降低,再灌注30min达低谷,其后逐渐上升。再灌注组在30～120min内显著低于对照组,治疗组在30～90min内低于对照组,但显著高于再灌注组(P(0.05)。结论缺血再灌注损伤引起的神经损害与兴奋性氨基酸有关,早期使用GM1治疗,明显减轻脑组织中乳酸的堆积,增加葡萄糖含量,增强神经元细胞的存活。     

缺血再灌注损伤小鼠中枢神经系统细胞凋亡及白介素1-β转化酶表达变化

背景：短暂的脑缺血损伤后,经过数天的潜伏期会出现一些神经元的坏死,即迟发性神经元坏死。细胞凋亡是迟发性神经元坏死的一种主要形式,脑缺血后再灌注加重了细胞凋亡的发生。白介素1-β转化酶（interleukin 1β-converting enzyme,ICE）基因家族在细胞凋亡中起主要作用,ICE基因的表达可以诱导神经细胞凋亡。 目的：观察缺血再灌注不同时期神经细胞凋亡情况以及ICE基因表达变化,探讨ICE在缺血再灌注损伤及细胞凋亡中的作用。 设计、时间及地点：完全随机分组对照动物实验,于2008/2009在吉林大学第二医院实验动物中心实验室和吉林大学第二医院中心实验室完成。 材料：ICE基因引物序列由大连TaKaRa公司合成。 方法：将健康成年雄性昆明小鼠随机分为2组：对照组和缺血再灌注组。对照组小鼠5只,缺血再灌注组根据再灌不同时间又分成7组,即术后1h、1d、3d、7d、14d、28d、42d,每小组各5只。缺血再灌注组：用12%乌拉坦按1.0g/kg,腹腔注射麻醉后,将小鼠仰卧固定,经颈正中切口,分离双侧颈动脉并套以“0”号丝线,将双侧颈动脉同时结扎阻断并确定无血流通过,30min后切断丝线灌流10min,再次阻断30min后,放开线,使血流再通。阻断的同时,在距尾尖1.5cm处剪断放血,放血量小于体重的6%,以造成全脑低灌流,放血后热凝止血。假手术组：麻醉及手术和实验过程与缺血再灌组完全相同,但不阻断颈总动脉亦不放血。 主要观察指标：缺血再灌注不同时期额叶、海马区细胞凋亡情况以及ICE基因表达的变化。 结果：缺血再灌注3d流式细胞仪检测额叶皮质、海马神经细胞凋亡百分率最高（P<0.05）,随着再灌注时间的延长,海马神经细胞凋亡数逐渐下降至42d最低点。对照组额叶皮层有少量ICE mRNA表达,缺血再灌注1d ICE mRNA表达增多（P<0.05）,再灌注 3d 以后呈降低趋势,再灌注14d 时再次形成转录高峰,与对照组比较有显著性差别（P<0.05）。ICE mRNA在海马区神经细胞转录水平高峰略迟于皮层,早期于再灌注3d已有较高表达（P<0.05）,再灌注7d达峰值,与对照组比较有显著差异（P<0.05）,以后逐渐下降,28d下降至对照组水平。 结论：脑缺血再灌注损伤可引起神经细胞凋亡,细胞凋亡的高峰期在缺血再灌注后的第3天左右,而脑缺血再灌注早期（2周内）细胞凋亡的增加与ICE mRNA表达的增多有关。     

胰岛素对脑缺血后鼠海马CA1区神经元凋亡及记忆影响

目的　观察胰岛素对全脑缺血后海马CA1区神经元凋亡及大鼠学习记忆力改变的影响 ,探讨胰岛素对全脑缺血后海马CA1区神经元产生中枢直接保护作用的机理。方法　利用 4 VO法制作大鼠全脑缺血模型。造成脑缺血 15min后行再灌注 ,于再灌注后即刻经脑室注入 1U胰岛素 ,利用免疫组化及原位标记法分别于全脑缺血后 1、3d观察海马CA1区Bcl 2、Bcl xl蛋白表达及神经元凋亡的情况 ;缺血后 8周 ,利用“Y”型迷宫测试大鼠的学习记忆功能。结果　全脑缺血后 3d ,缺血组大鼠海马CA1区Bcl 2、Bcl xl蛋白的表达呈阴性 ,海马CA1区原位标记阳性细胞计数为 14 3.5± 11.6。治疗组大鼠海马CA1区Bcl 2、Bcl xl蛋白呈阳性表达 ,海马CA1区原位标记阳性细胞计数为 75 .6±6 .7。全脑缺血后 8周 ,治疗组大鼠学习记忆力明显好于缺血组。结论　全脑缺血后脑室内注入胰岛素可促进海马CA1区Bcl 2、Bcl xl蛋白表达 ,减少神经元的凋亡 ,进而减轻脑缺血后大鼠的学习记忆力损害 ,这可能是其对全脑缺血后海马CA1区神经元产生中枢直接保护作用主要机理之一     

Effects of propofol on amino acid neurotransmitter levels and neuronal apoptosis in the hippocampus in a rat model of ischemia/reperfusion injury

BACKGROUND： Excitatory amino acids including glutamic acid and aspartic acid play a neurotrophic role during early development of the central nervous system but go on to promote toxic effects. Inhibitory amino acids include γ-aminobutyric acid and glycine. Changes in their concentration can reflect the degree of injury to brain tissue after cerebral infarction. OBJECTIVE： To investigate the effects of propofol on amino acid neurotransmitter levels and neuronal apoptosis in the hippocampus in a rat model of ischemia/reperfusion injury. DESIGN： Randomized controlled animal study. MATERIALS： Sixty male Wistar rats were randomly divided into a sham operation group, model group and propofol （50, 100 and 150 mg/kg） groups （n = 12）. METHODS： Global brain models of ischemia/reperfusion injury were established in the model group and the propofol groups. The vertebral artery and common carotid artery were merely isolated in the sham operation group. Ten minutes before ischemia, rats in the propofol groups were induced with an intraperitoneal injection of propofol （50, 100 or 150 mg/kg）; rats in the model and sham operation groups were induced with an intraperitoneal injection of saline （5 mL）. MAIN OUTCOME MEASURES： Content of amino acids, neuronal apoptotic index and density of apoptotic neurons in the hippocampal CA1 region. RESULTS： After a 10-minute ischemia / 60-minute reperfusion, the content of glutamic acid and aspartic acid was significantly decreased in the propofol （50, 100 and 150 mg/kg） groups compared with the model group （P 〈 0.05 or P 〈 0.01）; but the content of γ-aminobutyric acid was significantly increased in the propofol （100 and 150 mg/kg） groups （P 〈 0.05）. After a 72-hour reperfusion, the neuronal apoptotic index was significantly decreased in the propofol （50, 100 and 150 mg/kg） groups compared with the model group （P 〈 0.05 or P 〈 0.01 ）, and the decrease was remarkable in the propofol （100 and 150 mg/kg） groups. After a 72-hour     

硫酸镁对脑缺血再灌注大鼠脑组织Bcl-2表达的影响及神经保护作用

目的探讨硫酸镁对脑缺血再灌注大鼠脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达的影响及脑保护作用。方法将32只大鼠随机分为缺血组(n=15)、硫酸镁组(n=15)和正常对照组(n=2)。采用改良的Pulsinelli法建立脑缺血再灌注大鼠模型;制模后分别给予缺血组和硫酸镁组大鼠腹腔注射生理盐水(1.5 ml/d)及硫酸镁(90 mg/kg.d)。缺血再灌注第1、3、7 d分别观察各组大鼠海马CA1区病理学改变和Bcl-2的表达水平。结果正常对照组大鼠海马CA1区神经细胞数量多,排列整齐。缺血再灌注1 d时,缺血组及硫酸镁组大鼠海马CA1区神经元均未见明显死亡;3 d时,缺血组海马CA1区神经元可见少量死亡,残存神经细胞呈较严重缺血性改变,硫酸镁组海马CA1区神经元无明显死亡;7 d时,缺血组海马CA1区神经元大部分死亡,伴有小胶质细胞增生,硫酸镁组仅见部分神经元死亡。与缺血组相比,硫酸镁组神经元受损程度较轻,坏死区较小。硫酸镁组缺血再灌注各时间点大鼠Bcl-2阳性细胞较缺血组均明显增加(均P<0.05)。结论硫酸镁能上调脑组织Bcl-2的表达,对缺血再灌注大鼠的脑组织有明显的保护作用。     

亚低温对大鼠短暂全脑缺血后神经元凋亡的影响

目的 探讨亚低温对大鼠脑缺血后神经元凋亡的影响，揭示亚低温的部分神经保护机制。方法 采用“双侧颈总动脉阻断＋全身低血压”方法来建立大鼠短暂性全脑缺血模型。用神经元尼氏体亚甲兰特殊染色法观察大鼠脑缺血后海马CA1区神经元损害情况；原位细胞凋亡检测法（TUNEL染色）及电镜观察脑缺血后CA1区神经元凋亡情况。结果 与假手术组、低温缺血组相比，常温缺血组海马CA1区神经元缺失明显（P＜0．01）。常温及低温缺血组海马CA1区均存在神经元凋亡，但低温缺血组海马CA1区凋亡神经元数明显少于缺血组（P＜0．01）。结论 经“双侧颈总动脉阻断＋全身低血压”方法建立的大鼠短暂全脑缺血模型证实了亚低温的脑保护作用。全脑缺血后的迟发性神经元死亡很可能经由凋亡途径，而亚低温可通过抑制缺血性神经元凋亡而发挥一定的神经保护作用。     

葛根素对大鼠全脑缺血再灌注后学习记忆障碍保护作用及其机制的研究

目的 探讨葛根素对大鼠全脑缺血再灌注后学习记忆能力的影响及其机制。方法 采用四血管阻断法建立SD大鼠全脑缺血再灌注损伤模型，暗回避反应法测定学习记忆能力，并应用免疫组织化学法、原位末端标记法，检测大鼠全脑缺血再灌注海马CA，区的bcl-2阳性细胞数、凋亡细胞数的动态变化。结果 (1)与再灌注组相比，葛根素组大鼠潜伏期明显延长；(2)脑缺血再灌注后，海马CA1区bcl-2蛋白的表达随再灌注时间不同而变化，缺血20min后再灌注24h达高峰，葛根素组bcl2蛋白的表达于相应的时间点明显增多；(3)脑缺血再灌注后海马CA1区神经元凋亡损伤在再灌注72h损伤最重，葛根素组可减少相应时点神经细胞凋亡数。结论 葛根素对全脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力具有明显的改善作用，其作用机制可能与通过上调bcl-2基因表达从而抑制或延迟脑缺血再灌注后细胞凋亡有关。     

Neuroprotection of gamma-aminobutyric acid receptor agonists via enhancing neuronal nitric oxide synthase (Ser847) phosphorylation through increased neuronal nitric oxide synthase and PSD95 interaction and inhibited protein phosphatase activity in cerebral ischemia

It is well documented that exitotoxicity induced by N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor activation plays a pivotal role in delayed neuronal death in the hippocampal CA1 region after transient global ischemia. However, the effect of gamma-aminobutyric acid (GABA) receptor activation is uncertain in ischemia brain injury. The aim of this study was to investigate whether the enhancement of GABA receptor activity could inhibit NMDA receptor-mediated nitric oxide (NO) production by neuronal NO synthase (nNOS) in brain ischemic injury. The results showed that both the GABA(A) receptor agonist muscimol and the GABA(B) receptor agonist baclofen had neuroprotective effect, and the combination of two agonists could significantly protect neurons against death induced by ischemia/reperfusion. Coapplication of muscimol with baclofen not only enhanced nNOS (Ser847) phosphorylation but also increased the interaction of nNOS with PSD95 at 6 hr and 1 day of reperfusion. Interestingly, the inhibitors of calcineurin and PP1/PP2A could enhance nNOS phosphorylation at Ser847 site at 1 day of reperfusion after ischemia but not at 6 hr of reperfusion. From these data, we conclude that GABA receptor activation could exert its neuroprotective effect through increasing nNOS (Ser847) phosphorylation by different mechanisms at 6 hr and 1 day of reperfusion. The increased interaction of nNOS and postsynaptic density-95 induced by GABA agonists is responsible for nNOS (Ser847) phosphorylation at both time points, but at 1 day of reperfusion the inhibition of protein phosphatase activity by GABA agonists also contributes to the neuroprotection. Our results suggest that GABA receptor agonists may serve as a potential and important neuroprotectant in therapy for ischemic stroke.     

亚硒酸钠对脑缺血再灌注损伤大鼠HIF-1α表达的影响

目的 研究亚硒酸钠对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马神经细胞凋亡的保护作用及其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 48只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)及亚硒酸钠治疗组,每组16只,采用线栓法建立脑缺血再灌注模型,治疗组于再灌注后给予亚硒酸钠0.625 mg/(kg·d)腹腔注射7 d.各组大鼠经组织处理后用亚甲兰尼氏体染色及TUNEL染色,分别观察大鼠海马CA1区神经元存活和凋亡情况,Western Blot实验测定缺血组织HIF-1α水平的表达.结果 脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元数目明显减少,凋亡细胞明显增加(P<0.001),亚硒酸钠治疗后海马神经细胞存活数目明显增多,凋亡细胞明显减少(P<0.01);与假手术组比较,模型组大鼠海马HIF-1α水平表达明显增加(P<0.01),而经亚硒酸钠治疗后大鼠海马HIF-1α水平表达较模型组明显降低(P＜0.05).结论 亚硒酸钠可减轻脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡,同时能抑制组织HIF-1α的过度表达.     

异丙酚和咪唑安定预处理对大鼠全脑缺血损伤的保护及递质机制

目的阐明异丙酚及咪唑安定预处理是否具有脑保护作用及其神经递质机制。方法雄性SD大鼠18只,随机分组,每组6只。建立清醒全脑缺血模型(4血管闭塞法)。收集清醒、缺血及再灌注后微透析标本。记录再灌注后的BIS变化,并观察反正反射恢复的时间。于缺血再灌注后进行运动功能双盲评定。全脑缺血3d后,迅速开颅取脑,10%甲醛固定后进行HE染色,并用TUNEL法进行细胞凋亡检测。双盲计数海马CA1区神经细胞及细胞凋亡率。结果异丙酚及咪唑安定预处理组与对照组相比,脑电BIS恢复较快;缺血期间谷氨酸递质浓度明显降低(P<0.01);反正反射恢复时间明显缩短(P<0.05);海马CA1区神经细胞计数明显增高(P<0.01);海马细胞凋亡率明显降低(P<0.01);两预处理组间无明显差异(P>0.05)。结论异丙酚及咪唑安定预处理脑缺血再灌注损伤具有脑保护作用,与减少缺血期间谷氨酸递质的释放有关;两组脑保护效能相同。     

Effect of flunarizine on global brain ischemia in the dog: a quantitative morphologic assessment

The effects of flunarizine, a calcium antagonist, were evaluated in an experimental model of global brain ischemia produced by 15 min of cardiac arrest followed by resuscitation and reperfusion. One group of dogs received flunarizine (0.1 mg/kg intravenously during a 10-min period) at the onset of resuscitation. Another group of dogs underwent cardiac arrest, resuscitation, and reperfusion but did not receive flunarizine. A third group served as nonischemic control. In situ-fixed brains of all animals (nonischemic controls and the postischemic dogs after 8 h of reperfusion) were examined for anoxic ischemic injury. Quantitation of the ischemic neurons was carried out in parietal cortex, hippocampus, and cerebellum by using an image analysis system. Significant difference in the number of necrotic neurons between the flunarizine-treated group and the ischemic controls was noted in the hippocampus only; the mean percentage of necrotic neurons in the two groups being 14.8 +/- 9.6 and 29.3 +/- 12.1, respectively (P less than 0.05). These results indicate that flunarizine has an ameliorating effect on neuronal injury in the hippocampus that follows cardiac arrest in this experimental model of global brain ischemia. However, flunarizine was not found to be effective in reducing the ischemic neuronal damage in the cortex or the cerebellum.     

兴奋性氨基酸、氧自由基与缺血再灌注脑损伤关系的实验观察

目的：观察脑缺血再灌注过程中兴奋性氨基酸（Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ,ＥＡＡ）、氧自由基的变化,研究探索脑缺血再灌注损伤的机制。方法：测定假手术组、缺血３０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ生理盐水（ＮＳ）处理组和单唾液酸四已糖神经节苷脂（ＧＭ１,１０ｍｇ／ｋｇ,ＩＰ）处理组,鼠脑海马组织ＥＡＡ、丙二醛（Ｍａｌｏｎｄｉａｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）的含量。实验应用全脑缺血（４ＶＯ）模型,ＥＡＡ采用Ｈ     

细胞外信号调节激酶在NGF/VEGF介导的神经保护作用中的动态变化及其调控机制

目的探讨细胞外信号调节激酶1(ERK1)在局灶性脑缺血/再灌注不同时间、不同脑区的动态时空变化,以及其在NGF/VEGF介导的神经保护作用中的调控表达机制。方法采用兔大脑中动脉阻断(MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,所有动物随机分为假手术组(n=6)、缺血/再灌注组(n=60)、因子干预组(n=40)。应用免疫组化检测ERK1在脑缺血/再灌注损伤不同脑区的动态表达,同时,应用免疫组化、流式细胞术和电镜检测caspase-3表达、凋亡和超微结构的变化。结果免疫组化分析显示,再灌注损伤1hERK1首先在海马CA3和齿状回(DG)表达增加,6h后其它脑区也相继增加,随再灌注时间延长而加剧,1~3d达高峰。再灌注1hcaspase-3活性表达在各脑区迅速增加,3d达高峰。应用神经保护剂(NGF/VEGF)后各脑区ERK1表达呈明显抑制,caspase-3表达同时被抑制。结论ERK信号通路可能通过调节死亡受体途径介导神经保护作用,抑制ERK信号途径可能是减轻脑缺血损伤过程中神经细胞死亡的有效方法。