低分子肝素抑制肾小球系膜细胞增生机制的研究

目的：低分子肝素是肾脏疾病治疗中常用药物,能抑制肾小球系膜细胞的增生,其机制常不清楚,本研究探讨低分子肝素(LMWH)对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生水平的影响及其机制。方法：GMCs细胞共设3组:①GMCs组;②LPS组:即GMCs+LPS;③LMWH组:即GMCs+LPS+LMWH,而LMWH终浓度分别为2.5 IU/ml,25 IU/ml和250 IU/ml。采用MTT法于培养24 h和48 h观察各组中GMCs增生水平,选择药物的最佳GMCs增生抑制浓度及时间;采用免疫细胞化学方法观察培养48 h后3组(LMWH终浓度为250 IU/ml)GMCs涂片中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核转录因子-κB(NF-κB)的表达;采用ELISA方法观察培养的上清液中MCP-1浓度。结果：LMWH 250 IU/ml组对GMCs增生的抑制最为显著,其GMCs增生水平低于LPS组和LMWH 2.5 IU/ml,25 IU/ml组(P<0.05);各浓度LMWH对GMCs增生的抑制作用48 h强于24 h(P<0.05)。LMWH 250 IU/ml组48 h的MCP-1阳性率明显低于LPS组(P<0.01),而与GMCs组差异无显著性(P>0.05);LPS组48 h的MCP-1阳性率明显高于GMCs组(P<0.01)。LMWH 250 IU/ml组48 h的NF-κB表达阳性率与LPS组和GMCs组比较差异均无显著性(P>0.05);LPS组的NF-κB表达阳性率明显高于GMCs组(P<0.01)。LMWH 250 IU/ml组GMCs培养上清液中MCP-1浓度明显低于LPS组(P<0.01),与GMCS组差异无显著性(P>0.05)。结论：LMWH能抑制大鼠GMCs增生,明显下调GMCs中MCP-1的异常表达及分泌,而对NF-κB活性无明显抑制。     

一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤

目的 探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。 方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3（iCORM3）组;LPS组、CORM3组和iCORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和iCORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素 伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。 结果 ①与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;iCORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。②与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多［(37.3±4.5)% vs (3.0±1.0)%］;A549细胞活力下降,凋亡率明显升高［(29.6±4.1)% vs (3.6±1.0)%］,差异均有统计学意义 （P<0.05）。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少［（19.3±4.6）%］;A549细胞活力回升,凋亡率［（15.3±4.5）%］明显降低,差异均有统计学意义 （P<0.05）。LPS组与iCORM3组间上述指标差异均无统计学意义。 结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI     

脂多糖干预小胶质细胞后细胞内促血小板生成素与炎症因子的表达

目的 探讨脂多糖(LPS)干预小胶质细胞后细胞内促血小板生成素(TPO)及炎症因子的表达.方法将BV2细胞分为6组.1.空白12 h组:BV2细胞正常培养12 h,不添加任何干预因素;2.LPS 0.5 mg·L-1 12 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;3.LPS 1.0 mg·L-112 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1;4.空白 24 h组:BV2细胞正常培养24 h,不添加任何干预因素;5.LPS 0.5 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;6.LPS 1.0 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1.采用ELISA法检测BV2细胞内炎症因子(IL-1、IL-6、NF-κB)和TPO的表达;实时荧光定量PCR法检测细胞内IL-1 mRNA、IL-6 mRNA、NF-κB mRNA及TPO mRNA表达水平.结果 LPS 0.5 mg·L-1和1.0 mg·L-1干预BV2细胞后12 h和24 h,IL-1、IL-6、NF-κB和TPO表达水平及其mRNA水平均较空白组升高,且12 h组高于24 h组,但其差异均无统计学意义(Pa>0.05).TPO表达水平与IL-1、IL-6、NF-κB及其mRNA水平的表达均呈显著正相关(Pa<0.01).结论 LPS干预小胶质细胞后IL-1、IL-6、NF-κB和TPO表达升高,参与炎症、凋亡和神经元保护等多种调控机制.     

急性淋巴细胞白血病患儿WAVE1和p22phox的表达及WAVE1与氧化应激的关系

目的：研究儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）患者外周血单个核细胞(PBMCs)中WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1（WAVE1）及NADPH氧化酶亚基p22phox的表达并探讨WAVE1表达与白血病病程及氧化应激的关系。方法：实时定量PCR法测定41例ALL儿童及10例正常对照儿童PBMCs中WAVE1和p22phox的表达水平。黄嘌呤氧化酶法（羟胺法）和二硫代二硝基苯甲酸法（DTNB法）分别测定外周血血浆总超氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果：①儿童ALL活动期组（初治+复发）PBMCs中WAVE1,p22phox的表达水平与正常对照组和完全缓解组相比均显著增高(P< 0.01); ALL完全缓解组中,WAVE1,p22phox表达高于正常对照组(P<0.05);②正常对照组、活动期组和缓解组血浆SOD活力分别为166.35±27.93, 22.62±7.39, 107.11±28.57 U/mL; GSH-Px活力分别为490.94±39.38,91.73±28.88,267.56±82.64 μmol/L。ALL活动期组外周血血浆总SOD,GSH-Px活性较完全缓解和正常儿童明显降低（P<0.01）;③ 随着WAVE1和p22phox的高表达,血浆中SOD, GSH-Px活性呈现下降趋势。WAVE1的表达水平与p22phox表达水平呈正相关（r=0.34,P< 0.05）,与血浆SOD,GSH-Px活性呈负相关（r分别为-0.336和-0.408,P<0.05）。结论：与正常对照组相比,WAVE1和p22phox在儿童ALL PBMCs中表达增高,而且其变化与ALL病程相关。ALL患儿氧化应激可能参与了WAVE1表达的调控。［中国当代儿科杂志,2009,11（2）：88-92］     

骨髓基质细胞在脂多糖诱导的肺损伤小鼠肺组织的定植研究

目的：探讨静脉输注骨髓基质细胞（BMSCs）在脂多糖（LPS）诱导的肺损伤小鼠肺组织定植并向肺泡上皮细胞分化的可能性。方法：绿色荧光蛋白（GFP）转基因C57BL/6J小鼠作为BMSCs移植供体,同种野生型小鼠为移植受体。气道滴入LPS诱导肺损伤。受体分为以下几组：(1) PBS+BMSCs移植（CM）; (2) LPS+BMSCs 移植（LM）; (3) PBS+全身放射+BMSCs移植（CIM）; (4) LPS+全身放射+BMSCs移植（LIM）。移植14 d后,以免疫荧光双标染色检测BMSCs在受体肺组织的定植情况,流式细胞仪检测体外培养的肺泡II型上皮细胞（AEC II）GFP阳性率,荧光定量PCR法检测肺组织表面活性物质蛋白（SP）-A、SP-C和水通道蛋白（AQP）-5 mRNA的表达。结果：移植后14 d,免疫荧光双标染色可见CIM和LIM组有少量肺泡上皮细胞呈GFP和角蛋白双染阳性,而且LIM组较CIM组有较多阳性细胞。与CM和LM组（分别为2.82±1.03%和3.81±0.93%）比较,CIM和LIM组的AEC II GFP阳性率更高（分别为11.10±3.19% 和14.40±2.40%; P<0.05）。LIM组SP-C mRNA表达较CM组增高(2.09±0.18 vs 1.38±0.30;P<0.05)。结论：供体来源的BMSCs能在LPS诱导的受损肺组织定植分化,提示静脉输注BMSCs可能有助于肺损伤的修复。［中国当代儿科杂志,2009,11（5）：321-327］     

维生素E对脂多糖诱导的大鼠系膜细胞增生的影响

目的　探讨维生素E(VitaminE ,VitE)对大鼠肾小球系膜细胞 (GMCs)增生的影响及可能机制。方法　应用不同剂量 ( 5 0mg/L、10 0mg/L、2 0 0mg/L)VitE在不同时间 ( 2 4h、48h、72h)对GMCs增生的影响 ;选定最佳剂量与最佳时间 ,将GMCs分为脂多糖 (LPS)组、对照组、VitE组、激素组与激素+VitE组共 5组分瓶培养 ,后三组加LPS诱导实验末 ,收集培养细胞 ,涂片 ,应用免疫组化法检测GMCs的增生细胞核抗原 (PCNA)阳性表达率 ,TUNEL法检测GMCs有效凋亡率 ;应用生化法对培养上清液进行羟自由基 ( OH)、总超氧化物歧化酶 (tSOD)、丙二醛 (MDA)的测定。结果　 10 0mg/LVitE组在 48h( 3 3 3± 2 3 )对GMCs增生的抑制效果好于其他浓度与时间组 ;VitE组细胞上清中 OH( 2 0 5±3 8)、MDA( 5 7± 0 6)低于LPS组 ( 2 93± 42 ,19 3± 6 0 ) ,tSOD( 10 4± 3 1)活性高于LPS组 ( 15 6± 2 1) (P均 <0 0 1) ;VitE组培养细胞PCNA阳性率 [( 3 3 3± 8 8) % ]低于脂多糖组 [( 46 8± 5 3 ) % ],有效凋亡率高于脂多糖组 (P均 <0 0 1)。PCNA阳性率与 OH、MDA正相关 (r =0 880 ,0 70 2 ,P均 <0 0 1) ,与tSOD活性负相关 (r=- 0 682 ,P <0 0 1)。结论　VitE可以上调tSOD的活性 ,抑制系膜细胞 OH的分泌与MDA的过度积聚     

炎症因子诱导星形胶质细胞凋亡及机制探讨

目的：探讨LPS,IL-1β,TNF-α所致星形胶质细胞(AC)凋 亡的机制及途径。方法：原代培养的新生SD大鼠前脑AC分为正常对照组、 炎症组(LPS+IL 1β+TNF α)与预处理组(L-NMMA预处理30 min后加入LPS+TNF-α+IL-1 β)。培养72h后,MTT测定AC活力;分光光度仪测定细胞培养上清中NO2-/NO3-含量;电镜、流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测胞浆内细胞色素C的表达;原位杂 交检测AC Caspase-3 mRNA表达。结果：预处理组细胞活力明显高于炎症 组(0.81±0.29 vs 0.46±0.15),差异有显著性(P<0.01)。炎症 组AC活力与其分泌的一氧化氮(NO)呈负相关(r=-0.604,P<0.05)。预处理 组凋亡率［(15.2±7.9)%］低于炎症组［(29.7±10.4)%］,P<0.0 5。预处理组胞浆内细胞色素C的含量较炎症组明显减少(14 784±2 096 vs 31 049± 3 784),P<0.01。炎症组的Caspase 3 mRNA表达强于预处理组。结论：①LPS,IL-1β,TNF-α可导致细胞活力下降。其细胞活力的下降与其分泌的NO增多有关。②增多的NO可导致AC凋亡;NO导致的AC凋亡可能与细胞色素C凋亡途径有关。     

超声微泡造影剂促腺病毒转染mdr1基因的体外实验

目的 研究体外超声微泡造影剂促腺病毒转染mdr1基因的效率.方法 扩增表达mdr1基因的重组腺病毒Ad5-mdr1并与微泡造影剂混合;密度梯度离心法分选兔骨髓单个核细胞,与腺病毒微泡造影剂混合,经超声辐照后常规培养;荧光显微镜下观察细胞内荧光强度表达;RT-PCR法检测骨髓单个核细胞基因组中外源性mdr1基因的表达;免疫组织化学法检测转染细胞中mdr1基因的表达产物.结果 ①转染后b(腺病毒转染组)、c(腺病毒转染+超声辐照组)、d(腺病毒微泡造影剂转染组)及e(腺病毒微泡造影剂转染+超声辐照组)组细胞内均有绿色荧光显示,a(常规培养组)组细胞内未见绿色荧光,e组细胞内荧光强度明显高于各对照组;②RT-PCR法显示,除a组外其余4组在157bp处分别观察到特异性mdr1电泳条带,证实外源性mdr1基因通过腺病毒作为载体整合到细胞基因组中;③免疫组织化学法检测e组细胞P-gp表达阳性率(24%)显著高于a、b、c、d(阳性率分别为0.5%、8.5%、10%、11.5%)各组(P<0.05).结论 体外实验证实,超声微泡造影剂能促进以腺病毒为载体的mdr1基因转染和表达.     

二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞凋亡及其对Fas、FasL及caspase-8表达的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（DADS）诱导白血病 K562 细胞凋亡的作用及其机制。方法：采用 Hoechst 33258 染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术分析不同浓度及不同作用时间 DADS 对 K562 细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR法检测DADS作用48 h后 Fas、FasL、caspase-8 mRNA的表达。结果：DADS可诱导K562 细胞凋亡。DADS(作用细胞24 h)浓度从10 mg/L增至40 mg/L时,其对K562细胞的凋亡率由（11.60±0.83）%增至（37.94±0.87）%;DADS(40 mg/L浓度组)作用时间从24 h增至72 h,其对K562细胞的凋亡率由（37.94±0.87）% 增至（47.02±0.66）%,各实验组随时间、浓度增加凋亡率明显增加 (P<0.05)。DADS作用48 h后,Fas、caspase-8 mRNA 表达水平较对照组上调;FasL mRNA 较对照组下调（P＜0.05）。结论：DADS 呈时间和浓度依赖性诱导白血病K562 细胞凋亡,其凋亡机制可能与上调 Fas、caspase-8,下调 FasL有关。     

严重惊厥发作过程中核因子-κB活化与神经元凋亡的关系

目的：探讨戊四氮(PTZ)所致大鼠严重惊厥发作模型中核因子κB(NFκB)活化与神经细胞凋亡的关系。方法：42只大鼠随机分为7组,即对照组、致惊后3h、6h、12h、24h、48h和吡咯啉烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)+PTZ组。免疫组织化学法检测海马CA1区NFκB亚基p65核移位;TUNEL和流式细胞仪检测海马细胞凋亡。结果：流式细胞仪和TUNEL法显示惊厥发作后有细胞凋亡的发生,24h达高峰,与对照组相比分别为(12.54±4.99)%vs(2.24±0.57)%和(61.62±4.99)个/gcsvs(3.35±0.89)个/gcs,P均<0.001;对照组大鼠海马未见p65核移位细胞,而致惊后p65核移位细胞显著上调,24h达高峰(32.30±4.71)个/gcs。PDTC预处理组与致惊24h组相比p65核移位及细胞凋亡明显减少。结论：NFκB活化在严重惊厥发作所致的细胞凋亡发生中发挥重要作用;PDTC可通过抑制NFκB的表达而减少惊厥后的细胞凋亡。     

地塞米松对大鼠肾小球系膜细胞增生水平的影响

目的：探讨地塞米松(DXM)对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生作用的影响。方法：培养大鼠GMCs细胞,分空白对照组、LPS组和DXM组。DXM选用3种浓度,分别为250 ng/孔、1 000 ng/孔和4 000 ng/孔。LPS终浓度为5 mg/孔。采用MTT掺入方法,于 24 h 和48 h观察3组中GMCs增生水平。结果：DXM组在浓度为4 000 ng/孔时48 h的增生水平为(0.251±0.056) ng/L,低于LPS组和GMCs组［(0.787±0.110),(0.678±0.101) ng/L］,差异有显著性(P<0.05)。DXM浓度为4 000 ng/孔时GMCs增生水平于48 h抑制最为显著。结论：DXM能抑制大鼠GMCs增生。     

甘氨酸对坏死性肠炎鼠血清IL-1和IL-6水平的影响(英文)

目的：探讨甘氨酸对内毒素和缺氧诱导的坏死性肠炎(NEC)鼠血清炎性因子IL-1与IL-6的作用。方法：40只SD大鼠随机分为甘氨酸+LPS组和NS+LPS对照组。甘氨酸组大鼠静脉给予甘氨酸1 g/kg,5min后给予内毒素2 mg/kg,NS对照组用等量的生理盐水代替甘氨酸,内毒素剂量同前。所有大鼠注射LPS 90min后氧吸入浓度从21％降至5％,继续机械通气至鼠死亡或存活180 min,实验结束时采血样和小肠标本。用双抗夹心ELISA法测定血清IL-1与IL-6的含量,肠组织做病理检查并进行NEC分度。结果：甘氨酸组的存活时间(159.25±22.78)min长于NS对照组(138.75±19.05)min,差异有显著性(P<0.01)。甘氨酸组小肠病理损伤程度明显明显低对照组(P<0.01)。甘氨酸组血清IL-1的含量为(149.1±76.1)ng/L,显著低于对照组(472.1±505.6)ng/L(P<0.01);血清IL-6的含量为(204.8±163.5)ng/L,亦显著低于对照组(585.8±574.5)ng/L(P<0.01)。结论：甘氨酸可降低内毒素和缺氧诱导的坏死性肠炎(NEC)鼠血清IL-1和IL-6含量水平,减轻肠病理损伤。     

慢性扁桃腺炎患儿T淋巴细胞表型及功能分析

目的　探讨慢性扁桃腺炎患儿T淋巴细胞表型和功能障碍情况,为分析其病因和发病机制提供临 床和理论依据。方法　采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测了27例慢性扁桃腺炎患儿和21例健康儿童外 周血T细胞亚群、B细胞及NK细胞的表面标记和T细胞活化后表面分子(CD3+/HLA DR+T和CD3+/CD25+)的 表达;同时采用ELISA方法检测了患儿和对照组血清中Th1型细胞因子IL 2和IFN γ的水平。结果　与对照组比 较,慢性扁桃腺炎患儿CD4+T细胞和CD3+/HLA DR+T活化细胞的阳性率显著降低(28.6%±4.4%vs25.4% ±4.5%,P<0.05;5.7%±1.9%vs3.9%±1.6%,P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(1.17±0.30vs0.92± 0.18,P<0.01);但患儿CD3+T细胞、CD8+T细胞和CD3+/CD25+阳性的T细胞与对照组比较差异均无显著意 义。患儿CD19+B细胞阳性率、与Th1细胞功能有关的IL 2和IFN γ表达水平也较对照组显著降低(P<0.05或 P<0.05);而两组CD3 /CD(16+56)+NK细胞的阳性率无显著差异。结论　慢性扁桃腺炎患儿存在CD4+T细 胞减少,T细胞活化障碍,Th1细胞功能异常及B细胞减少,这可能是患儿反复感染和病程迁延的主要原因之一。     

脂多糖干预小胶质细胞炎症模型中血小板生成素与白细胞介素-6的表达及其相关性

目的 探讨脂多糖(LPS)干预后小胶质细胞内血小板生成素(TPO)与IL-6的表达及其相关性.方法 体外培养BV2细胞,以LPS干预小胶质细胞12～24 h,实验分为6组.空白12 h组:BV2细胞正常培养12 h,不添加任何干预因素;LPS 0.5 mg·L-1 12 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;LPS 1.0 mg·L-1 12 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1;空白 24 h组:BV2细胞正常培养24 h,不添加任何干预因素;LPS 0.5 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;LPS 1.0 mg·L-124 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1.采用ELISA法检测各组细胞内IL-6及TPO水平,免疫印迹法检测细胞内IL-6及TPO蛋白表达水平.结果 LPS处理后明显增加BV2细胞内TPO及IL-6蛋白表达水平,其中0.5 mg·L-1 LPS干预细胞12 h时,TPO及IL-6水平处于最高峰;1.0 mg·L-1 LPS干预细胞12 h时,TPO及IL-6蛋白水平增加最明显,且二者表达呈显著正相关(r=0.876,P<0.01).结论 TPO及IL-6参与LPS诱导的BV2细胞炎症损伤的病生理过程,且二者的表达存在明显正相关.     

早期胰岛素泵注对脓毒症大鼠肝损害的影响

目的探讨早期胰岛素泵注对脂多糖（LPS）致大鼠脓毒症模型肝损害的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为LPS＋生理盐水组、LPS＋胰岛素组和生理盐水对照组,各组均为8只。各组大鼠在实验前1 d行右颈外静脉置管术。LPS＋生理盐水组腹腔注射LPS 10 mg·kg-1,同时持续静脉泵注生理盐水1 mL·h-1;LPS＋胰岛素组腹腔注射LPS 10 mg·kg-1,同时持续静脉泵注胰岛素生理盐水溶液1 mL·h-1 (胰岛素用量为0.25 U·kg-1·h-1)。生理盐水对照组腹腔注射生理盐水10 mg·kg-1,同时持续静脉泵注生理盐水1 mL·h-1。测定各组腹腔注射LPS或生理盐水前和注射后2、6、12、24 h的血糖水平,检测各组腹腔注射LPS或生理盐水后2、6 h的血清TNF-α、IL-6水平及24 h的血清ALT和AST水平,并观察各组腹腔注射LPS或生理盐水后24 h的肝脏组织病理学改变。结果LPS＋生理盐水组在腹腔注射LPS后各采样时间点,血糖水平较生理盐水对照组均显著升高（P<0.05）。注射LPS或生理盐水后2和6 h,LPS＋生理盐水组血清TNF-α和IL-6水平显著高于生理盐水对照组（P<0.05）。注射LPS或生理盐水后24 h,LPS＋生理盐水组血清ALT和AST水平均较生理盐水对照组显著升高（P<0.05）。LPS＋胰岛素组注射LPS后各采样时间点血糖、TNF-α、IL-6、ALT及AST水平均显著低于LPS＋生理盐水组（P<0.05）,LPS＋生理盐水组肝脏病理学检查示局灶性肝细胞坏死,炎性细胞浸润,小叶间静脉充血扩张;LPS＋胰岛素组肝脏病理学改变较LPS＋生理盐水组明显减轻。结论早期胰岛素静脉泵注可通过抗炎和降低应激性高血糖作用减轻LPS诱导的肝损害。     

Mucosal expression of p21, p27, p53, Bcl-2, and bax after small bowel resection and autotransplantation in pigs

Massive small bowel resection increases ileal villus height as part of normal adaptation. However, despite no gut loss, autotransplantation of the entire small intestine also increases ileal villus height. Our aim was to test whether similar modulation of enterocyte proliferation and apoptosis underpin these comparable increases in villus height. Fifteen pigs were randomly assigned for laparotomy (n=5), 75% proximal small bowel resection (n=5), or jejunoileal autotransplantation (n=5). Eight weeks postoperatively, full-thickness small bowel sections underwent routine immunohistochemistry for cell cycle inhibitors (p53, p21, and p27), antiapoptotic Bcl-2, and proapoptotic bax. The specimens were analyzed semiquantitatively, and the number of intensively positive epithelial cells for each group was compared from 20 digital images (0.32 mm²/image). Compared with laparotomy, small bowel resection decreased the number of p27-positive enterocytes in both jejunum and ileum, increased the number of bax-expressing cells in ileum, but decreased the number of bax-expressing cells in jejunum. In contrast, compared with laparotomy, jejunoileal autotransplantation altered neither mucosal bax nor p27 expression. In all groups, Bcl-2 expression was similarly confined to inflammatory cells of the lamina propria, while both p53 and p21 were negative. We conclude that long-term alterations in the enterocytic expression of certain cell cycle and apoptosis markers (p27 and bax) accompany small bowel resection. These changes differ between the jejunum and the ileum and are not seen after whole small bowel autotransplantation. Therefore, increased ileal villus height after autotransplantation, despite resembling postresectional intestinal adaptation, is underpinned by different regulation of enterocyte proliferation and apoptosis.