丙型肝炎病毒F蛋白结合蛋白1基因的克隆化与序列分析

目的 对命名为F蛋白结合蛋白1(FBP1)的未知基因,克隆其全长基因并进行生物信息学分析.方法 应用酵母双杂交技术得到FBP1,应用分子生物学技术克隆FBP1的基因编码序列.结果 经酶切和测序鉴定,结果完全正确,成功克隆了FBP1的基因编码序.结论 FBP1通过与F蛋白结合,在病毒蛋白与宿主细胞蛋白相互作用过程中发挥重要作用.     

miRNA介导的病毒-人相互作用研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA）是一类内源性,长度约为22核苷酸的单链RNA分子,可通过5′端的种子区与靶标转录本mRNA的3′UTR配对,导致靶mRNA的降解或翻译抑制。越来越多的研究发现,miRNA在介导病毒-人相互作用过程中发挥着重要的作用,作用模式包括病毒miRNA靶向人及自身的转录本、人miRNA靶向病毒及自身的转录本、病毒的miRNA介导人miRNA调控的网络、RNA干扰（RNAi）相关和干扰素相关的宿主对病毒的抑制及反抑制。miRNA介导的病毒-人相互作用的研究对于全面理解病毒-宿主相互作用的机制、开发抗病毒的药物具有重要意义。     

层粘连蛋白受体研究进展

层粘连蛋白受体（LR），是重要的细胞外基质成分层粘连蛋白的受体。它是一个多功能蛋白，与肿瘤细胞的转移密切相关，能够介导病毒和朊蛋白与宿主细胞的相互作用，并且参与细胞的信号转导。本文就层粘连蛋白受体的生物学功能以及在疾病治疗方面的研究进展进行综述。     

黄病毒衣壳蛋白研究进展

黄病毒科病毒是一类单股正链RNA病毒,其基因组包含一个长的开放读码框.编码约含3 400个氨基酸残基的聚蛋白分子.聚蛋白经蛋白酶剪切加工得到衣壳(capsid,C)蛋白、prM蛋白和包膜E蛋白三种结构蛋白以及至少7种非结构蛋白.黄病毒的衣壳蛋白是病毒颗粒的构成成分之一,以多拷贝的形式与单拷贝的病毒基因组RNA共同构成病毒的核衣壳结构.近年来对C蛋白的研究取得了一定进展,已发现其除形成核衣壳结构外,还具有其他功能,这些功能涉及病毒RNA复制、病毒与宿主的相互作用等方面.本文综述了C蛋白结构与功能研究的最新进展.     

乙型肝炎病毒的病毒学特点及其临床意义

乙型肝炎病毒(HBV)为嗜肝双链DNA病毒,病毒基因组特点如下:①病毒的多聚酶/反转录酶(RT)缺乏校对功能,使HBV较其他DNA病毒更易产生变异;②病毒基因组开放读码框架重叠,1个基因位点上的突变有可能同时引起2种病毒蛋白突变;③生命周期中存在稳定的共价闭合环状DNA(cccDNA);④可以整合到宿主细胞染色体DNA中;⑤病毒蛋白对某些宿主细胞基因表达具有反式调节作用.HBV的这些病毒学特点与乙型肝炎的慢性化和疾病进展密切相关.多位点检测HBV RT基因耐药突变对临床监测病毒耐药、合理进行抗病毒治疗十分重要,分析病毒基因组变异和检测cccDNA对深入了解HBV致病机制与疗效评价有积极意义.技术方法 的创新与改进是进行HBV临床病毒学特点研究的基础.     

HIV-1B亚型假病毒的制备与鉴定

目的：制备携带增强绿色荧光蛋白（ EGFP）基因和ENV包膜蛋白的HIV-1 B亚型假病毒用于感染研究,并建立可行的鉴定方法。方法双质粒共转染HEK293 T细胞后收获病毒上清, TRIzol法提取病毒基因组并采用RT-PCR进行报告基因扩增,Western印迹和ELISA法检测病毒P24抗原。假病毒感染HIV-1允许细胞,进行报告基因检测、病毒滴度测定以及单轮感染活性实验研究。结果与结论建立了HIV-1假病毒制备与鉴定方法,制备获得了B型HIV-1假病毒,经鉴定具备感染SupT1和TZM-bl细胞能力,为HIV-1与宿主细胞相互作用研究奠定了基础。     

铜绿假单胞菌凝集素PA-ⅠL的纯化表达及活性评价

目的 构建铜绿假单胞菌凝集素PA-ⅠL基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并评价其生物学活性.方法 以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板设计引物,构建pET-28a (+)-PA-ⅠL重组表达质粒,转化至大肠杆菌中诱导表达,用Ni 亲和层析法对目的蛋白进行纯化.流式细胞术评价重组表达的PA-ⅠL蛋白对细胞表面Gb3/CD77的结合活性,菌落平板计数法评价重组蛋白在细菌黏附宿主细胞过程中的功能.结果与结论 SDS-PAGE电泳显示,纯化后的PA-ⅠL蛋白具有较高的纯度,重组表达的PA-ⅠL蛋白能与细胞表面的糖鞘脂Gb3/CD77结合,且呈浓度依赖性抑制PA的PAO1对宿主细胞的黏附.     

人miRNA-埃博拉病毒相互作用的生物信息学研究

目的：初步探讨人微小RNA（ miRNA）与埃博拉病毒基因组5′尾标（ trailer）序列相互作用,为防治埃博拉病毒提供可能的靶向miRNA。方法运用Pita和RNAhybrid软件预测与埃博拉病毒5′尾标序列相互作用的人miRNA,并对其进行注释和分析。结果与结论发现人miRNA可能与埃博拉病毒5′尾标序列存在复杂的相互作用。根据以前关于宿主miRNA与病毒基因组相互作用的报道,我们认为,人miRNA与埃博拉病毒基因组5′尾标的相互作用可能会影响埃博拉病毒在人体内的复制以及人体细胞的正常功能。该研究将为埃博拉病毒的防治提供新的思考。     

酵母双杂交技术筛选与乙型脑炎病毒NS5相互作用的蛋白

目的 应用酵母双杂交技术筛选与乙型脑炎病毒NS5蛋白相互作用的宿主蛋白.方法 构建表达乙型脑炎病毒NS5蛋白的诱饵质粒pSos-NS5,经自激活和毒性实验后对人脐静脉内皮细胞cDNA文库进行筛选,挑取37℃条件下在缺失亮氨酸和尿嘧啶培养基上生长的克隆,利用一对一酵母回复性杂交实验进行验证,然后测定阳性克隆插入片段序列,...     

胃癌细胞中Rab25相互作用蛋白的鉴定及功能学研究

目的 通过串联亲和纯化联合质谱技术(TAP-MS)筛选胃癌细胞中Rab25相互作用蛋白.方法 利用慢病毒转染技术构建稳定表达StrepⅡ-6His-EGFP-Rab25融合蛋白的SGC7901细胞系;通过StrepⅡ-6His标签进行串联亲和纯化获得与Rab25相互作用的蛋白复合物,并通过质谱检测蛋白复合物的组成;随后构建了Rab25蛋白质相互作用网络,并通过免疫共沉淀技术验证其在胃癌细胞中相互作用的真实性.结果 通过TAP-MS技术共鉴定出26个Rab25的相互作用蛋白,主要参与癌症通路、微管运动、细胞凋亡、NOTCH通路等过程;运用免疫共沉淀方法验证了Itgb1与Rab25相互作用的真实性,并通过Transwell试验证实Rab25和Itgb1协同促进SGC7901细胞的侵袭.结论 通过鉴定胃癌细胞中Rab25的相互作用蛋白网络,为胃癌的治疗提供一个新的线索.     

Glutamine supplementation in vitro and in vivo,in exercise and in immunodepression

In situations of stress, such as clinical trauma, starvation or prolonged, strenuous exercise, the concentration of glutamine in the blood is decreased, often substantially. In endurance athletes this decrease occurs concomitantly with relatively transient immunodepression. Glutamine is used as a fuel by some cells of the immune system. Provision of glutamine or a glutamine precursor, such as branched chain amino acids, has been seen to have a beneficial effect on gut function, on morbidity and mortality, and on some aspects of immune cell function in clinical studies. It has also been seen to decrease the self-reported incidence of illness in endurance athletes. So far, there is no firm evidence as to precisely which aspect of the immune system is affected by glutamine feeding during the transient immunodepression that occurs after prolonged, strenuous exercise. However, there is increasing evidence that neutrophils may be implicated. Other aspects of glutamine and glutamine supplementation are also addressed.     

Temporal changes in the oxidation state in in vitro blood

The rates at which the paramagnetic compounds deoxyhemoglobin (Hb) and methemoglobin (MHb) form in vivo within an area of hemorrhage are unknown. The present experiment establishes the baseline concentrations and rates of change in paramagnetic hemoglobin concentrations, as well as the pH in normal heparinized and clotted human blood maintained in vitro at 37 degrees C under anaerobic conditions over 30 hours. There was a moderate increase in Hb concentration in normal heparinized blood (average increase was 15.5%, rate = 0.50%/hour) and a slight increase in MHb concentration in the heparinized blood and clots (average increase was 1.4%, rate = 0.044%/hour). A second experiment was done to verify the activity of the RBC systems responsible for maintaining the hemoglobin molecule in the reduced state. Conversion of MHb to Hb in these samples proceeded at a rate of 5.6%/hour. In a third experiment, blood from 11 normal subjects maintained at 4 degrees C 25 degrees C was analyzed for MHb concentration over the course of 28 days. The level of MHb formation remained in the range of normal for at least 11 days in all subjects. The authors conclude that at basal conditions created in vitro, the blood levels of both Hb and MHb remain at relatively low levels. Therefore, if the accumulation of Hb and/or MHb occurs in acute in vivo hematomas it must be driven by intrinsic tissue factors.     

Carcinoma in situ in cryptorchid testes in post-pubertal patients]

The pathohistologic analysis of testis sections of 37 postpuberty patients with different types of cryptorchism is performed. The tissue samples were taken during orchiopehy, fixed in Bouin's solution and treated by the standard histologic techniques. The morphologic criteria are presented for identification of the presence of the so called carcinoma in situ cells found in two cases. Besides, in 13 patients rare, mainly single, atypical germinative cells were found in a smaller number of the seminiferous tubules. It has been concluded that the presence of carcinoma in situ cells in undescended testes of some patients and considering the simple way of sampling, lack of complications and high reliability of the diagnostic procedure, it is absolutely justified to take routine biopsy of testes during orchiopexy in each postpuberty and perhaps prepuberty patient.     

我国医用辐射防护研究概况

医学放射学技术的迅速发展及介入放射学在临床广泛应用，使更多的人受到电离辐射的照射，同时也促进了医疗照射防护工作的发展。文中重点综述了我国医用辐射防护工作者近年来在Ｘ射线ＣＴ的医疗照射防护、对介入放射学工作者的剂量监测以及应用医疗照射防护体系，降低医疗照射剂量等方面所作出的成绩和研究进展