rIL－2对长期训练小鼠免疫功能的影响

本文就注射ｒＩＬ－２对大强度游泳训练时小鼠免疫功能的影响进行了研究。结果发现：训练可使小鼠脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ．ＬＰＳ分裂原的增殖应答，及ＰＦＣ反应明显减弱（Ｐ＜０．０５）；训练配合腹腔注射ｒＩＬ－２则可消除这种减弱，而使其应答反应明显强于安静对照组（Ｐ＜０．０５）；训练配合腹腔注射ｒＩＬ－２还可使Ｔ＿４／Ｔ＿８之比值明显高于单纯训练小鼠的（Ｐ＜０．０５）。这说明用ｒＩＬ－２纠正大强度训练对小鼠免疫系统功能的副作用有一定意义。     

头低位(-6°)卧床对人细胞免疫功能的影响

目的探讨头低位（－６°）卧床对人淋巴细胞增殖能力和某些细胞因子产生的影响。方法６名健康男性青年头低位（－６°）卧床６ｄ,卧床前１ｄ、３ｄ、６ｄ各采血一次,测定免疫指标。结果卧床３ｄ,α干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎα,ＩＦＮα）产生明显降低（Ｐ＜０．０５）,ＮＫ细胞（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｅｒｃｅｌ,ＮＫ）杀伤活性明显增强（Ｐ＜０．０５）,γ干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎγ,ＩＦＮγ）的产生和白细胞介素２受体（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＩＬ２Ｒ,又称ＣＤ２５）表达功能均呈降低趋势。卧床６ｄ,ＩＦＮα产生和ＮＫ杀伤活性均恢复至卧床前的水平,ＩＦＮγ产生和ＣＤ２５则明显降低（Ｐ＜０．０５）。随着卧床时间的延长,Ｔ淋巴细胞增殖能力和ＩＬ２的产生则逐渐降低,而ＩＬ６的产生则逐渐增加。结论头低位（－６°）卧床对细胞免疫功能有一定的影响。     

运动训练对小鼠NK细胞杀伤功能和脾细胞IL－2产生能力的影响

本文对游泳训练三个月后的Ｃ＿（５７）ＢＬ／６小鼠ＮＫ细胞杀伤功能和脾细胞ＩＬ－２产生能力进行了研究。观察到ＮＫ细胞杀伤活性在每日训练３０分钟和６０分钟组分别较对照组上升２０．１％（ｐ＜０．００１）和１６．５％（ｐ＜０．０１），每日训练２小时组有降低趋势；脾细胞ＩＬ－２产生能力在６０分钟组明显增强，３０和１２０分钟组无显著性差异；ＮＫ细胞杀伤活性和脾细胞ＩＬ－２产生水平的改变有一定的相关性（ｒ＝０．２２）。     

高压氧影响荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖及天然杀伤细胞活性的研究

目的探讨ＨＢＯ对荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖、天然杀伤细胞（ＮＫ）活性和脾指数的影响。方法将Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠接种Ｓ－１８０瘤细胞,制成荷瘤鼠动物模型;经ＨＢＯ暴露（压力为０．２４ＭＰａ,氧浓度为８７％,每次暴露６０分钟,每日１次,共２０次后）,用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察脾Ｔ淋巴细胞增殖能力和用３Ｈ－ＴｄＲ靶细胞释放法观察ＮＫ细胞杀伤活性。结果淋巴细胞增殖在ＨＢＯ组比正常对照组低（Ｐ＜０．０１）;肿瘤组比对照组低（Ｐ＜０．０１）;ＨＢＯ＋肿瘤组比肿瘤组低（Ｐ＜０．０１）;ＨＢＯ＋肿瘤组比ＨＢＯ组低（Ｐ＜０．０１）;肿瘤组比ＨＢＯ组低（Ｐ＜０．０１）。ＮＫ活性在对照组比肿瘤组高（Ｐ＜０．０５）;ＨＢＯ＋肿瘤组比肿瘤组高（Ｐ＜０．０５）。脾指数在各组之间无明显的变化（Ｐ＞０．０５）。结论ＨＢＯ暴露可降低正常鼠和荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖能力。ＨＢＯ暴露对免疫功能的影响是多方面的,不能简单地说增强或减弱。本实验提示,ＨＢＯ暴露可能会使肿瘤接种引起的免疫功能低下程度减轻。     

91合剂加速放射损伤小鼠免疫功能的恢复

小鼠于一次全身γ射线（ＳＧｙ）照射前１周或者照射后３周内连续服用９１合剂，可加速小鼠免疫功能的恢复．９１合剂的作用表现为：①加速骨髓造血功能的恢复，给药组小鼠的ＣＦＵ－Ｓ／５×１０４ＢＭＣ和ＣＦＣ／５×１０４ＢＭＣ分别高于未给药组１．４～２倍和１．４～３．１倍．骨髓细胞对ＬＰＳ的增殖反应及Ｂ细胞含量都明显增高．②增强脾细胞对有丝分裂素（ＣｏｎＡ，ＬＰＳ）的反应性（Ｐ＜０．０５～０．０１）。③提高照射小鼠的免疫应答能力．抗体水平及ＤＴＨ反应性显著高于对照组。④用药组小鼠Ｔ淋巴细胞亚群的比值恢复正常．     

从IL-2和Bcl-2基因转录水平探讨模拟失重鼠T淋巴细胞功能改变的机制

为探讨模拟失重条件下Ｔ淋巴细胞功能改变的机制，观察了小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖能力（ＭＴＴ比色法）、ＩＬ－２产生（生物学测定法）、ＩＬ－２基因（点杂交）和Ｂｃｌ－２癌基因（逆转录ＰＣＲ）转录的变化。结果显示：（１）模拟失重７、１４ｄ小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖能力和ＩＬ－２的产生降低，１４ｄ时有显著性（Ｐ＜０．０１）。表明模拟失重降低Ｔ淋巴细胞功能。（２）模拟失重７、１４ｄ小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２和Ｂｃｌ－２基因转录水平降低，１４ｄ时有显著性（分别为Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。表明模拟失重通过抑制ＩＬ－２基因转录抑制ＩＬ－２的产生，ＩＬ－２和Ｂｃｌ－２基因对模拟失重引起的Ｔ淋巴细胞功能的降低起一定的作用。     

dsRNA对X射线照射小鼠脾细胞增殖反应和UDS的影响

本文报道了不同浓度ｄｓＲＮＡ对１．５ＧｙＸ射线照射后小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导增殖反应和ＵＤＳ的影响。结果表明，当受照小鼠皮下注射ＲＮＡ浓度大于６．２５ｍｇ／ｋｇ体重时与单纯照射组相比脾细胞对ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的增殖反应明显增强（Ｐ＜０．０５），ＵＤＳ亦明显的增加（Ｐ＜０．０５）。提示，ｄｓＲＮＡ可以增强受照细胞对ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的增殖反应能力，并能抑制Ｘ射线诱发程序外ＤＮＡ合成的下降。     

高压氧对Lewis肺癌小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨高压氧（ＨＢＯ）暴露对Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。方法９０只患Ｌｅｗｉｓ肺癌的Ｃ５７小鼠被随机分为常压空气组（ＮＡ）、高压常氧氮（Ｎ２－Ｏ２）组和ＨＢＯ组。ＮＡ组置于舱内常压空气下,Ｎ２－Ｏ２组和ＨＢＯ组则分别暴露在含１０％氧的高压常氧氮和医用纯氧环境下,暴露的压力时程为绝对压２５０ｋＰａ－９０分钟,每日１次,每周暴露６天,共暴露两周;加压速度为１００ｋＰａ／ｍｉｎ,减压采用匀速减压法,以１０分钟减至常压。实验中检测了各组小鼠的自然杀伤细胞（ＮＫ）、非特异杀肿瘤细胞（ＬＡＫ）、细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）水平和巨噬细胞（Ｍφ）杀伤活性;同时还对各组小鼠荷瘤的体积、溃破率及动物致死率进行了观察。结果与ＮＡ组相比,ＨＢＯ组小鼠体内ＮＫ、ＬＡＫ、ＣＴＬ及Ｍφ活性显著升高（Ｐ＜０．０１）;实验动物肿瘤体积显著减小,荷瘤溃破率则明显增高（Ｐ＜０．０１）;且实验组小鼠的存活时间显著延长（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＢＯ暴露显著提高了Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠体内ＮＫ、ＬＡＫ、ＣＴＬ的活性和增强Ｍφ细胞杀伤效率,从而解释了ＨＢＯ能抑制Ｌｅｗｉｓ肺癌生长的原因     

大运动量训练对排球运动员淋巴细胞亚群的影响

本文研究了大运动量训练对上海男子排球运动员ＮＫ细胞活性和淋巴细胞亚群分布的影响。结果指出大运动量训练后即刻ＮＫ细胞活性显著地低于训练前测定值（Ｐ＜０．０１），运动后１小时及１５小时ＮＫ细胞活性恢复到了训练前水平。Ｔ３（ＣＤ３）和Ｔ８（ＣＤ８）淋巴细胞百分数在运动不同时期均无显著改变，但Ｔ４（ＣＤ４）淋巴细胞百分数在运动后１小时及１５小时显著地低于训练前水平，因而ＣＤ４／ＣＤ８细胞比率也相应地显著降低，至于大运动量训练对细胞免疫功能影响的机理有待进一步研究。     

吴氏太极拳对老年人外周血NK细胞活性的影响

对８名多年练习吴氏太极拳的老人练拳前后外周血ＮＫ细胞活性和ＮＫ细胞数量进行了动态观察，同时观察了白细胞介素２（ＩＬ－２）及皮质醇的变化。通过它们与ＮＫ活性的相关分析讨论了吴氏太极拳练习影响ＮＫ活性的机理。研究结果显示，练拳后即刻ＮＫ活性升高６７．２９±３２．６１％（Ｐ＜０．０５），ＮＫ细胞数升高４７．８±１４．６９％（Ｐ＜０．０５）。ＩＬ－２活性升高４０．８８±１１．３０％（Ｐ＜０．０１），血浆皮质醇则下降１５．８２±４．０５‰（Ｐ＜０．０５），运动后２小时各项指标都有相当程度的恢复，ＮＫ活性虽高于安静值但差异无显著性意义。相关分析显示，ＮＫ活性的变化与ＮＫ细胞数的变化有一定程度的相关（ｒ＝０．７３，Ｐ＜０．０５，Ｃ．Ｖ＝０．３３），与ＩＬ－２活性呈高度相关（ｒ＝０．９６，Ｐ＜０．００１，Ｃ．Ｖ＝０．０４２），与皮质醇的变化也呈高度负相关（ｒ＝－０．９７，Ｐ＜０．００１，Ｃ．Ｖ＝０．０４９）。     

重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞体外增殖的影响

目的检测基因工程免疫毒素hIL-2-LuffinP1的体外生物学活性。方法采用分离的C57和BALB/c小鼠脾细胞进行混合淋巴细胞反应,刀豆球蛋白A(ConA)刺激BALB/c小鼠脾细胞进行淋巴细胞增殖实验,以LuffinP1毒素分子作为对照。3H-TdR核素掺入法检测hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用。以CTLL-2细胞检测hIL-2-LuffinP1对IL-2依赖细胞株的杀伤作用,实验共设6组:PBS、IL-2、LuffinP1、LuffinP1 IL-2、hIL-2-LuffinP1、hIL-2-LuffinP1 IL-2,CTLL-2细胞加入各组试剂培养12h,台盼蓝染色,计数每100个细胞中的死亡细胞数。结果随剂量增加,hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用逐渐增强,在10-6mol/L浓度时,抑制率可达到97%,而LuffinP1对淋巴细胞增殖无明显抑制作用。hIL-2-LuffinP1对Con A刺激的脾细胞活化也有抑制作用,与在混合淋巴细胞体系中一致,而LuffinP1对上述两个反应体系中的淋巴细胞增殖均无明显抑制作用。加入hIL-2-LuffinP1 IL-2和hIL-2-LuffinP1后CTLL-2细胞的死亡率分别为29.6%和47.4%,明显高于IL-2组(5.6%,P<0.01)。结论重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1在体外能够抑制淋巴细胞增殖,对表达IL-2R的活化淋巴细胞产生定向杀伤作用。     

人参皂甙Rg3促进同系小鼠外周血干细胞移植后免疫恢复研究

目的研究人参皂甙Rg3对小鼠外周血干细胞移植（PBSCT）后免疫恢复的促进作用。方法首先建立PBSCT小鼠模型，然后将90只接受移植的小鼠随机分成6组，分别从移植后第15天起腹腔注射不同剂量Rg3、IL-2及生理盐水。淋巴细胞转化实验观察T淋巴细胞功能的恢复；抗体形成实验（溶血素分光光度法）观察B淋巴细胞功能的恢复；杀伤实验观察NK细胞的功能恢复；流式细胞计数观察T亚群、B和NK细胞的恢复。结果9mg／kg＋IL-2联合治疗组显现出了良好的协同免疫增强作用，对细胞及体液免疫恢复的促进作用明显好于其他实验组及盐水组。NK细胞的恢复，各实验组之间无明显差异，但都要好于盐水组。结论人参皂甙Rg3与IL-2联合应用可明显加快移植后小鼠的免疫恢复过程，具有显著的免疫增强作用。两者的联合治疗要明显好于IL-2或Rg3单药治疗效果。     

Differential effects of exercise and housing condition on murine natural killer cell activity and tumor growth.

Acute exercise and exercise conditioning have been shown to affect the activity of natural killer (NK) cells as well as the growth of experimentally induced tumors in animals. Since psychosocial factors are also known to alter NK activity and tumor growth, isolation, a known psychosocial stressor of mice, was also investigated to see if housing condition could alter exercise-induced changes in NK cell activity and tumor growth. NK cell activity and concentration of asialo GM1 (ASGM1) positive splenocytes were measured in male C3H mice inoculated i.v. with CIRAS 3 tumor cells. Mice were housed individually or in groups of four and trained to run for eight weeks on a rodent treadmill; controls remained sedentary throughout the experimental period. At four weeks into the training protocol, mice were injected with the tumor cells and continued to run for four weeks after tumor exposure. There was a significant effect of physical activity (p less than 0.019) but not of housing on splenic NK cytotoxicity against tumor targets in vitro. When the data were analyzed by presence or absence of lung metastases, only those animals without visible lung tumors had significantly higher NK activity as a function of exercise relative to sedentary controls. There were no significant differences in the frequency of ASGM1+ splenocytes between trained and untrained animals, irrespective of presence or absence of lung tumor colonies. There was a significant effect of housing (p less than 0.02), but not of physical activity, in mice with successful tumor takes with greater numbers of group housed animals (29/59) with tumor relative to individually housed animals (13/60).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

IL-21通过 SENP1调控 NK细胞生物学特性

目的 探讨IL-21对小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)表达的影响及其对NK细胞生物学特性的调控作用.方法 以NK92细胞系为模型,采用慢病毒介导的Senp1基因干涉策略,抑制NK92细胞SENP1的表达.实时荧光定量PCR和Western印迹检测SENP1表达水平;利用CCK-8细胞增殖检测试剂盒测定细胞增殖活性;Annexin Ⅴ-APC/PI标记检测细胞凋亡.将K562细胞与NK92细胞共培养,荧光素酶报告基因方法检测NK92细胞的杀伤活性.结果 IL-21处理上调NK92细胞SENP1的表达;慢病毒介导Senp1-shRNA转染显著降低NK92细胞内Senp1 mRNA和蛋白表达水平.Senp1干涉组NK92细胞增殖能力较对照组明显降低.同时,干涉Senp1能促进NK92细胞凋亡,但对NK92细胞杀伤K562活性无显著影响.结论 IL-21上调NK92细胞SENP1的表达;干涉Senp1能抑制NK92细胞增殖,促进细胞凋亡,同时影响穿孔素表达和对肿瘤细胞的杀伤活性.     

IL-15与IL-21细胞因子组合优化临床级人NK细胞培养体系

目的探讨IL-15、IL-21细胞因子组合建立的临床级人NK细胞培养体系对NK细胞增殖、免疫细胞表型和细胞毒作用的影响。方法分离9例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs),根据以下3组进行扩增培养:(1)对照组(我科临床级人NK细胞培养体系),(2)IL-15组(对照组+IL-15),(3)IL-15/IL-21组(对照组+IL-15+IL-21)。台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力;流式细胞术分析免疫细胞表型和NK细胞活化受体表达;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果培养至14 d,IL-15/L-21组细胞总数明显升高,NK细胞增殖倍数达到(761.68±449.30)倍,明显高于IL-15组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-15/IL-21组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。3组培养物中CD3~-/CD56~+细胞百分率比较,IL-15/IL-21组和IL-15组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但IL-15/IL-21组和IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0.05);3组中CD3~+/CD4~+细胞百分率均呈下降趋势,且IL-15/IL-21组和IL-15组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但IL-15/IL-21组和IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0.05);3组中总CD3~+细胞百分率比较,IL-15组明显低于对照组(P<0.05),但IL-15/IL-21组和IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IL-15/IL-21组NKG2D活化受体表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但与IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组中CD3~+/CD56~+细胞百分率、CD3~+/CD8~+细胞百分率以及NKp46活化受体的表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。相同的效靶比,3组细胞的细胞毒作用比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论采用IL-15/IL-21组合优化人NK细胞培养体系,可以选择性地扩增NK细胞,提高培养物中NK细胞数量和细胞总数,以及活化受体NKG2D的表达水平,这将为优化临床级人NK细胞制备体系提供科学依据。