ob/ob鼠肠系膜脂肪、肝脏、骨骼肌miR-143表达变化及其临床意义

目的:观察miR-143在具有肥胖及糖尿病表型的ob/ob小鼠与正常对照组C57/BL6J小鼠肠系膜脂肪、肝脏组织及骨骼肌中的表达情况。方法:选择16周龄的ob/ob小鼠与C57/BL6J小鼠各12只,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)检测两组小鼠肠系膜脂肪、肝脏组织及骨骼肌的表达水平。结果:miR-143在ob/ob小鼠肠系膜脂肪、肝脏组织中表达上调(P<0.05),而在骨骼肌中无显著性差异(P>0.05);ob/ob小鼠肠系膜脂肪miR-143的表达与HOMA-IR呈正相关。结论:miR-143可能参与了ob/ob小鼠肥胖及胰岛素抵抗(IR)的发生。     

ABCA1在卵巢癌中的表达及临床意义

 目的 探讨ATP结合盒转运体A1 (ABCA1)在卵巢癌(ovarian cancer)中的表达及临床意义。方法 选择2016-01至2020-12首都医科大学附属北京妇产医院患者212例,其中106例卵巢癌患者为卵巢癌组,另106例良性卵巢上皮性肿瘤患者为对照组。常规收集患者空腹肘静脉血,用酶氧化法分析两组之间血脂含量[三酰甘油(CHO)、总胆固醇(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)]并进行差异分析;采用免疫组化及Western-blot检测组织中ABCA1的表达情况并进行差异分析;采用Kaplan-Meier生存分析方法估计ABCA1表达情况及卵巢癌患者生存之间的关系,并应用Log-rank方法进一步验证。结果 与对照组相比,卵巢癌组患者外周血中血脂水平(CHO、TG、HDL、LDL)显著降低(P<0.01); ABCA1在两组中均存在表达,而卵巢癌组的表达量(0.15±0.02)明显高于对照组(0.06±0.01),差异有统计学意义(P<0.01);生存分析结果显示,ABCA1阳性表达组的中位总生存期为48.0个月(95%CI: 45.9~51.5个月),而ABCA1阴性表达组的中位总生存期为57.0个月(95%CI: 54.7~58.9个月),ABCA1表达量与卵巢癌患者生存期之间存在负相关(P<0.01)。结论 ABCA1与卵巢癌发病密切相关,可能通过调控卵巢癌的脂质代谢从而参与卵巢癌的发生发展,进而影响患者预后。     

miRNA-143-3 p与Ki-67在人脑胶质瘤中表达及相关性

目的探讨miRNA-143-3p与Ki-67在人脑胶质瘤的表达及相关性。方法收集上海中医药大学附属龙华医院神经外科切除后经病理证实的人脑胶质瘤标本120例为研究组,另收集同期因脑外伤获取的正常脑组织标本40例为正常组。采用免疫组化SP法检测miRNA-143-3p、Ki-67在人脑胶质瘤和正常脑组织中的表达水平;采用Spearman秩相关分析miRNA-143-3p、Ki-67在胶质瘤组织中表达水平的相关性。结果正常脑组织中miRNA-143-3p与Ki-67均为阴性表达。高级别胶质瘤中miRNA-143-3p与Ki-67的阳性率均明显高于低级别胶质瘤,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-143-3p与Ki-67蛋白在胶质瘤组织中呈正相关(r=0.964,P<0.05)。结论 miRNA-143-3p可有效反映胶质瘤的病变程度,并且miRNA-143-3p与Ki-67联合检测可反映胶质瘤的恶性程度,可能成为胶质瘤生物标记的新指标。     

HSP70在小鼠睾丸巨细胞病毒感染中的表达及作用

 目的 研究鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染的不同时期细胞因子热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)在小鼠睾丸组织中的表达,探讨HSP70在MCMV致病机制及机体抵御MCMV感染中的可能作用.方法 建立小鼠睾丸MCMV急性感染模型,采用免疫组织化学SP法检测不同感染时段的睾丸组织内HSP70的表达与定位,分析其表达情况与病毒增殖及睾丸病变程度的相关性.结果 接种病毒后不同时期的睾丸组织中HSP70表达程度不同,MCMV感染第1天起其表达开始增加(P＜0.01),感染的第6～9天增至高峰(P＜0.01),此时MCMV增殖程度最重,睾丸组织发生最为严重的病理性炎性改变.随感染时间延长,HSP70表达水平下降,病毒增殖减少,睾丸组织病损程度减轻.结论 MCMV感染时,HSP70在睾丸组织中的表达与MCMV增殖及睾丸组织病变程度相关,提示HSP70可能参与MCMV感染的致病机制及机体抵御MCMV感染机制.     

老年男性患者超重/肥胖特点及与代谢综合征的关系

 目的 研究老年男性住院患者超重/肥胖的临床特点及代谢综合征的关系,为武警部队老年患者疾病的防治提供依据.方法 以2003～2005年在武警总医院住院的武警部队老年男性住院患者的病例为研究对象,对其超重/肥胖临床特点及代谢综合征的关系进行分析.结果 (1)武警部队老年男性住院患者存在较高的超重/肥胖患病比例,随着年龄增长,超重/肥胖患病比例有增加趋势,但在不同年龄组呈现不同特点.(2)按体重指数(BMI)分层,不同BMI组高血压、血糖升高、血脂紊乱及代谢综合征的检出率不同(P＜0.05),随着BMI的增加,代谢综合征及各组分的检出率逐渐升高(P＜0.05).(3)与正常BMI组比较,超重/肥胖组老年男性患者的收缩压、舒张压、空腹及餐后2小时血糖、甘油三脂明显升高,高密度脂蛋白明显降低(P＜0.05).(4)与正常BMI组比较,超重/肥胖组老年患者的颈动脉硬化、高血压、冠心病、脂肪肝、血糖及血脂紊乱的患病比例较明显增加(P＜0.05).(5)非条件Logistic回归分析显示,高血压及甘油三脂升高与武警老年男性老年超重/肥胖呈正相关.结论 武警部队老年患者存在较严重的超重/肥胖状况,是导致老年患者代谢综合征及相关疾病的重要危险因素.因此,防治肥胖对预防老年人的代谢综合征发生具有重要意义.     

间歇性无氧运动对小鼠脑、心肌、骨骼肌抗氧化能力及脂质过氧化损伤的影响

目的:观察间歇性无氧运动对小鼠脑、心肌、骨骼肌抗氧化能力和脂质过氧化损伤的影响.方法:选用96只昆明雄性小鼠,建立间歇无氧运动模型,观察运动后脑、心肌、骨骼肌SOD活性、T-AOC能力及MDA含量的变化及间歇性无氧运动对小鼠行为能力的影响.结果:间歇运动后,小鼠骨骼肌SOD活性、T-AOC及MDA含量显著高于对照组(P<0.05).心肌SOD和T-AOC变化与骨骼肌大致相同,显著高于对照组(P<0.05),但MDA差异不显著(P>0.05).脑组织T-AOC升高显著(P<0.05).结果显示:间歇运动使小鼠体重自然增长速度延缓.间歇性无氧运动对小鼠抗氧化能力及脂质过氧化水平的影响存在较明显的组织差异.     

KAI1/CD82基因在鼻咽癌中的表达及意义

目的 探讨不同转移潜能的人鼻咽癌细胞株中KAI1/CD82蛋白表达水平的差异,检测非肿瘤性鼻咽部组织和鼻咽癌KAI1/CD82蛋白的表达情况.方法 应用免疫组化和Western blotting检测5种人鼻咽痛细胞株中KAI1/CD82蛋白的定位及表达水平;采用免疫组化法检测70例鼻咽癌和30例非肿瘤性鼻咽部组织中KA...     

运动过程中骨骼肌FAT/CD36表达及分布的变化及影响

运动过程中,骨骼肌消耗能量,底物包括细胞内的糖原、三酰甘油及外源性的葡萄糖、脂肪酸。传统观点认为,运动增加骨骼肌脂肪酸的摄入是通过增加细胞膜脂肪酸的被动扩散来完成的;而近年来的研究表明,运动还能够通过增加脂肪酸转移酶(FAT/CD36)的表达、改变其分布区域,增加骨骼肌脂肪酸的主动运输。本文首先介绍了FAT/CD36在骨骼肌脂肪酸摄取及氧化中的作用,进一步综述了在运动过程中FAT/CD36的蛋白表达及分布两方面的变化,由此增加脂肪酸的摄入及氧化代谢,且FAT/CD36机制可能是独立于线粒体机制以外的另一种机制。     

MiR-92a及其靶抑癌基因BCL11b在辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤中的作用

目的 采用电离辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤动物模型,检测抑癌基因BCL11b和miR-92a的表达变化,探讨miR-92a对BCL11b基因的调控作用.方法 BALB/c小鼠采用γ射线全身照射,单次照射剂量和剂量率分别为1.75 Gy和0.382 Gy/min,每周1次,连续照射4周,计算电离辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤发生率.采用实时定量PCR法检测miR-92a表达变化情况,Westernblot方法检测BCL11b蛋白表达变化情况;将miR-92a序列插入载体pcDNA-DEST-47中构建真核表达质粒;构建BCL11b基因3'UTR-荧光素酶报告质粒,与pcDNA-DEST-miR-92a质粒共转染至EL-4细胞,分析miR-92a对BCL11b表达的调控作用.结果 辐射诱导的BALB/c小鼠胸腺淋巴瘤的发生率为58.51％.胸腺淋巴瘤细胞中BCL11b表达下调,而miR-92a表达上调,两者之间存在显著的负相关(r=-0.827,P＜0.05).psiCHECK 2-BCL11b和pcDNA-DEST-miR-92a两种质粒共转染组的荧光素酶表达明显低于单独转染的空载体和靶基因BCL11b组(t=3.42,P＜0.05).结论 电离辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤中miR-92a与BCL11b表达的负相关,提示miR-92a可能参与了辐射诱发肿瘤中BCL11b蛋白表达的调控作用.     

Smad基因异常表达在银屑病发病机制中的临床意义

目的探讨银屑病皮损中Smad3、Smad4和Smad7的表达特点及其意义,进一步探讨TGF-β信号转导途径异常引起银屑病表皮过度增殖形成的机制。方法应用反转录（RT）聚合酶链式反应（Real ti me PCR）和免疫组织化学（I HC）技术分别检测银屑病皮损区与正常皮肤中Smad3、Smad4和Smad7的mRNA与蛋白表达水平。结果 RT-PCR和I HC分析显示,银屑病皮损区Smad3和Smad4表达水平较对照正常皮肤显著下降,而Smad7的表达水平较对照正常皮肤显著升高。（P〈0.01）结论银屑病皮损表皮中TGF-β受体、活化Smad3和共有Smad4的表达下调,抑制性基因Smad7表达上调导致了TGF-β信号转导障碍,从而导致表皮角质形成细胞失去抑制作用,增殖活跃,加速其病理改变的形成。     

miR-122在非酒精性脂肪肝病患者血清中的表达及其临床意义

 目的 探讨microRNA-122(miR-122)在非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)患者血清中的表达及其临床意义。方法 采用荧光定量RT-PCR技术检测健康人、高脂血症患者、非酒精性单纯性脂肪肝(non-alcoholic simply fatty liver, NAFL)及非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)患者血清中miR-122的表达。结果 各组miR-122的表达水平分别为5.94±1.21(2^-△△Ct), 5.99±1.03(2^-△△Ct), 8.67±0.72(2^-△△Ct), 10.55±0.83(2^-△△Ct)。高脂血症患者和健康人血清中miR-122的表达量差异无统计学意义(P＞0.05)。与前两组相比, NAFL和NASH患者血清中miR-122的表达明显逐渐升高, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 非酒精性脂肪肝病患者血清中miR-122的表达量明显升高, 提示miR-122参与了非酒精性脂肪肝的形成及进展过程, 可作为诊断和评估组织学病变严重性的一种新的生物学指标, 同时有望成为一个潜在的治疗靶点。     

细胞间黏附分子-1在肝癌组织中表达及临床意义

目的探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在肝癌组织中的表达及临床意义。方法选取自2005年8月至2011年8月收治的68例原发性肝癌术后患者的肝细胞肝癌组织及癌旁组织标本为研究对象。采用免疫组织化学染色方检测肝癌患者的癌组织及癌旁组织中ICAM-1的表达。结合患者病理指标、病理分型分析ICAM-1分子表达的临床意义。结果免疫组化结果显示,肝癌组织ICAM-1表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。ICAM-1表达水平与分化程度、临床分期、肿瘤个数、甲胎蛋白、是否远处转移相关(P<0.05);与患者年龄、性别、乙肝表面抗原、肿瘤直径无关(P>0.05)。CAM-1低表达中位总体生存期为45个月,显著高于高表达患者的32个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ICAM-1在肝癌组织中呈高表达,且其表达水平与肝癌的临床分期、转移能力和临床预后密切相关,是肝癌潜在的预后判断指标。     

环氧化酶-2在腹部肠管火器伤后肝组织中的表达及意义

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)在腹部肠管火器伤后肝组织中表达的变化及其意义。方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和腹部肠管火器伤后1、2、4、8、12和24 h实验组。建立腹部肠管火器伤模型后,用免疫组化图像分析法测定各组肝组织COX-2的表达,同时测定血清ALT、AST水平,在光镜下观察各组肝脏组织学变化。结果:伤后各组肝组织COX-2表达明显高于对照组(P<0.05),并于伤后2 h和12 h出现2个高峰。伤后各组出现逐渐加重的肝细胞水肿、变性、坏死,血清ALT、AST水平在伤后也明显升高,也于伤后2 h和12 h出现2个高峰。相关分析表明,伤后肝组织COX-2与血清ALT、AST水平均呈正相关(r值分别为0.850、0.757,P<0.05)。结论:腹部肠管火器伤后肝组织COX-2表达增强,与肝脏结构和功能损伤基本一致,COX-2在腹部肠管火器伤后继发性肝损伤中具有重要意义。     

Nogo-A蛋白在小鼠中枢神经系统中的表达及其意义

目的　确定髓鞘关联蛋白Nogo -A在小鼠中枢神经系统 (CNS)细胞水平的分布特点 ,探讨Nogo -A蛋白在脊髓损伤后在CNS神经纤维再生中的作用。　方法　用成年C57BL/ 6小鼠的大脑、脊髓、周围组织以及自由落体致伤的脊髓组织作为研究对象 ,采用免疫组织化学方法观察Nogo -A蛋白的表达特点 ;培养鸡胚E12DRG神经元 ,测定在Nogo -A作用下神经元的生长锥萎陷值。　结果　在小鼠CNS中 ,Nogo -A蛋白的表达主要位于少突胶质细胞及其胞突包绕轴突所形成的髓鞘中 ,在周围组织中无表达。脊髓损伤后 ,在损伤灶的周围Nogo -A的表达呈中度增强 ;Nogo -A组的神经元生长锥萎陷率达 70 % ,明显高于空白对照组和载体对照组 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5)。　结论　Nogo -A蛋白在小鼠CNS细胞水平的分布特点对于调控CNS神经纤维轴突的再生可能起重要作用     

Nitric oxide synthase expressions in mice skeletal muscle subjected to ischemia/reperfusion injury

Nitric oxide synthase (NOS) expressions in skeletal muscle subjected to ischemia/reperfusion (I/R) were studied using a hind limb tourniquet ischemia model in mice. A rubber band was applied to a hind limb for 3 h under isoflurane anesthesia followed by 1 or 4 h of reperfusion. Increased NADPH diaphorase activity and NOS immunoreactivity were histochemically detected in the cells of muscle that had been subjected to I/R. The results of RT-PCR of the muscle subjected to I/R showed that NOS mRNA expressions were not significantly increased until 4 h after the start of reperfusion. Since there was no significant difference between histochemical findings or between water contents of the hind limbs or organs in interleukin (IL)-6-deficient mice and the wild-type mice, IL-6 may not be involved in the early stage of I/R muscle injury such as that in this model. O(2)(-) production in the cells of muscle that had been subjected to I/R was observed using an in situ detection method with hydroethidine, and the O(2)(-) was inhibited by intravenous administration of L-NAME or L-NMMA, but not L-NIL, 30 min before tourniquet release. Further study is needed to evaluate the role of O(2)(-) produced by constitutive NOS in muscle subjected to I/R in the pathophysiology of tourniquet shock.     

荧光定量PCR验证大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢高通量芯片中miRNA-30a表达及意义

目的探讨miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢中的表达及意义。方法建立严重烫伤大鼠模型,将16只大鼠分为实验组与对照组,每组各8只,于伤后72 h留取胫骨前肌标本。应用TRIZOL法抽提胫骨前肌中总RNA,采用丹麦锁核苷酸技术Exiqon miRCURYTMLNA microRNA芯片(第七代),约700条捕获探针,数据库版本为v.18.0,分别检测实验组与对照组胫骨前肌标本中miRNA-30a的表达水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)验证以检验芯片数据的可靠性。结果芯片筛查结果显示,miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢中表达下调,而荧光定量PCR结果同样显示miRNA-30a表达降低。结论 miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢过程中表达下调明显,其作用机制需进一步研究证实。     

运动干预高血压小动脉平滑肌细胞表型转换中miR-143/145对蛋白激酶B信号的调节作用

目的:探讨运动对高血压小动脉平滑肌细胞(VSMC)表型转换的调节作用,并探索在VSMC表型转换过程中miR-143/145对蛋白激酶B(Akt)信号通路的调节机制。方法:3月龄正常大鼠(Wistar Kyo-to rats,WKY)和原发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)各分为安静对照组(WKY-C组和SHR-C组)和运动干预组(WKY-E组和SHR-E组)。运动组进行8周的正式有氧跑台训练(速度为20m/min,坡度为0,每周5天,每天60 min),并监测血压。于末次干预后48 h对肠系膜动脉的形态、VSMC表型标志蛋白、miR-143/145表达及Akt信号的激活状态进行检测。离体实验运用脂质体转染干扰miR-145在分离培养VSMC中的表达,对VSMC表型、miR-145表达、Akt信号活性及该通路上下游胰岛素样生长因子I受体(IGF-1R)、胰岛素受体底物(IRS-1)和p70核蛋白体S6激酶(p70S6K)的mRNA进行定量。结果:SHR-E组血压显著低于SHR-C组(P<0.05),SHR-E组动脉壁厚显著小于SHR-C组(P<0.05);SHR-E组收缩表型标志蛋白钙调蛋白(calponin)表达显著高于SHR-C组(P<0.05),而其合成表型标志蛋白骨桥蛋白(Osteoppontin,OPN)表达显著低于SHR-C组(P<0.05);SHR-E组miR-145表达显著高于SHR-C组(P<0.01),而miR-143未有明显变化;SHR-C组Akt磷酸化程度较WKY-C被显著抑制(P<0.01),SHR-E组Akt磷酸化程度与SHR-C比有显著性差异(P<0.05)。离体实验中,转染miR-145 mimic使VMSC中收缩表型标志蛋白α-actin在转染后表达显著高于NC(negative control)组(P<0.05),细胞形态呈长梭形;miR-145 inhibitor使VSMC在转染后α-actin表达显著低于NC组(P<0.05)。Akt磷酸化程度在VSMC转染miR-145 mimic后较NC组被显著抑制(P<0.05),下游IGF-1R和IRS-1 mRNA亦被显著抑制(P<0.05);细胞经转染miR-145 inhibitor后Akt磷酸化程度显著升高(P<0.05),miR-145 inhibitor使IGF-1R和IRS-1 mRNA在转染后表达显著高于NC组(P<0.05);miR-145干扰对Akt下游p70~(S6K)mRNA靶向抑制作用不显著。结论:运动改善高血压大鼠血压症状的同时使小动脉结构发生适应性变化,有助于维持小动脉中VSMC收缩表型;miR-145参与了VSMC表型转换过程中Akt信号通路的反馈调节,但运动后Akt的激活并不是miR-145过表达导致的,运动可能通过其它途径激活Akt信号并促进VSMC向收缩表型转换。     

Training in hypoxia and its effects on skeletal muscle tissue

It is well established that local muscle tissue hypoxia is an important consequence and possibly a relevant adaptive signal of endurance exercise training in humans. It has been reasoned that it might be advantageous to increase this exercise stimulus by working in hypoxia. However, as long-term exposure to severe hypoxia has been shown to be detrimental to muscle tissue, experimental protocols were developed that expose subjects to hypoxia only for the duration of the exercise session and allow recovery in normoxia (live low–train high or hypoxic training). This overview reports data from 27 controlled studies using some implementation of hypoxic training paradigms. Hypoxia exposure varied between 2300 and 5700 m and training duration ranged from 10 days to 8 weeks. A similar number of studies was carried out on untrained and on trained subjects. Muscle structural, biochemical and molecular findings point to a specific role of hypoxia in endurance training. However, based on the available data on global estimates of performance capacity such as maximal oxygen uptake (V_O2max) and maximal power output ( P _max), hypoxia as a supplement to training is not consistently found to be of advantage for performance at sea level. There is some evidence mainly from studies on untrained subjects for an advantage of hypoxic training for performance at altitude. Live low–train high may be considered when altitude acclimatization is not an option.     

变应性鼻炎的规范诊断与治疗

 目的检测IL-23/IL-17轴在鼻息肉中的表达水平,探讨IL-23/IL-17轴在鼻息肉发病中的作用。方法收集在鼻内镜下慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉手术患者鼻息肉组织(鼻息肉组)45例,因鼻中隔偏曲行下鼻甲部分切除术患者(对照组)下鼻甲黏膜组织30例,分别采用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测两组IL-23和IL-17的表达情况,并对两组IL-23和IL-17表达水平之间的关系进行研究。结果RT-PCR显示,鼻息肉组IL-23p19mRNA和IL-17mRNA表达水平明显高于对照组[(0.676±0.077)vs(0.212±0.015);(0.681±0.044)vs(0.220±0.044)],两组比较差异均具有统计学意义(P＜0.01);免疫组化显示,鼻息肉组可见大量IL-23和IL-17阳性炎性浸润细胞,单位目标面积光密度均值明显高于对照组[(0.321±0.023)vs(0.199±0.011);(0.315±0.023)vs(0.211±0.029)],两组比较差异均有统计学意义(均为P＜0.01);IL-17表达水平与IL-23表达水平呈正相关关系(基因表达水平r＝0.723,P<0.01;蛋白表达水平r=0.991,P<0.01)。结论IL-23、IL-17可能参与了慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉的发病过程,并且IL-23可能通过调解鼻腔局部IL-17水平而发挥作用。     

组织蛋白酶D在霍奇金淋巴瘤组织的表达及意义

目的：探讨组织蛋白酶D(CaihepsinD，CathD)在霍奇金淋巴瘤(Hodgldn lymphoma，HL)组织中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学方法对霍奇金淋巴瘤进行CathD、CD34、CD45RO、CD20染色。探讨组织蛋白酶D在霍奇金淋巴瘤发病中的作用。结果：CathD主要表达于阻组织中的组织细胞和树突状细胞，其表达明显多于反应性增生淋巴组织；CathD不表达于RS／Variants(RS／V)细胞；其表达与血管生成无相关性；HL中主要的反应性增生淋巴细胞为T细胞。结论：CathD的表达与HL中微血管生成无相关性，可能与局部细胞免疫增强有关。