外源性肝细胞生长因子对肝癌细胞p16基因表达水平影响

目的 探讨外源性肝细胞生长因子(HGF)能否调控肝癌细胞HEPG2 p16基因的表达水平.方法 以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,根据培养基中HGF的浓度不同,实验分组为:对照组、实验1组和实验2组,采用流式细胞仪(FCM)检测HGF的肝癌细胞生长周期;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测HGF对肝癌细胞p16基因表达的影响.结果 HepG2细胞在10 pg/L和50 μg/L HGF的作用下,细胞周期出现明显改变,其中G0/G1期细胞明显多于对照组,而S期细胞减少.经HGF作用后肝癌细胞的p16基因表达上调.结论 HGF通过上调p16表达阻滞细胞分裂于G0/G1期,可能为其抑制人肝癌细胞HepG2的生长作用的重要机制之一.     

60Co γ射线对肝癌细胞株HepG2增殖和细胞周期的影响

目的观察^60Coγ射线对肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡和细胞周期的影响，并探讨γ射线对细胞周期改变与p27^kip1蛋白表达和分布之间的关系。方法以不同剂量的γ射线照射培养的HepG2细胞，观察细胞形态和生长曲线变化，同时应用流式细胞计数仪观察细胞周期和凋亡的改变，并应用免疫荧光方法观察p27^dip1蛋白的表达和分布改变。结果^60Coγ射线照射细胞引起HepG2细胞株剂量依赖性的生长抑制和凋亡增加。^60Coγ射线可引起细胞G2／M期阻滞，同时p27^kip1表达明显抑制，并主要分布于细胞浆。结论^60Coγ射线所导致的肝癌细胞株HepG2细胞的G2／M阻滞可能与细胞内D27^kip1“pl的表达抑制和细胞浆的分布比例增加有关。     

辐射表达载体Egr1-survivin shRNA联合放疗对食管鳞癌ECA109细胞放疗敏感性的影响

 目的 探讨辐射表达载体Egr1-survivin shRNA联合放疗对食管鳞癌ECA109细胞凋亡及放射敏感性的影响。方法 将合成的辐射表达载体Egr1-survivin shRNA经Lipofectamine^TM2000转染ECA109细胞后给予放疗,并以YM155联合放疗为主要对照,对比通过qPCR、Western-Blot检测处理后24 h各组细胞survivin的mRNA及蛋白表达,用流式细胞仪检测处理后48 h细胞周期及凋亡率变化。结果 ECA109细胞经Egr1-survivin shRNA质粒转染联合放疗处理后,survivin mRNA及蛋白的表达量不但明显低于空白对照组和空载体对照组,也明显低于YM155处理联合放疗。经Egr1-survivin shRNA联合放疗处理后,ECA109细胞的G2与S期细胞比例明显增加,产生明显G2与S期阻滞;凋亡率明显增高,高于YM155联合放疗组,更明显高于空白对照组和空载体对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01)。结论 辐射表达载体Egr1-survivin shRNA联合放疗可进一步增加食管鳞癌ECA109细胞凋亡,增强其放射敏感性,是一种值得探索的辅助放疗途径。     

环氧合酶2基因沉默诱导人肝癌细胞凋亡的作用观察

目的 观察作用于环氧合酶2(COX-2)mRNA的发卡状COX-2(COX-2 shRNA)真核表达质粒对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计靶向COX-2基因的RNA干扰序列,构建COX-2 shRNA表达载体,用阳离子脂质体Lipofectamine 2000转染体外培养的HepG2细胞.半定量RT-PCR检测COX-2 mRNA表达水平的变化,筛选有效抑制COX-2基因表达的序列.采用CCK-8细胞计数法检测COX-2 shRNA对细胞增殖的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期,Western blotting检测细胞内COX-2和Bcl-2蛋白表达水平.结果 测序结果显示成功构建了2个表达COX-2shRNA的质粒载体,转染HepG2细胞后COX-2 mRNA表达下降至阴性对照组的41.66％和77.79％.选择沉默效率较佳者转染细胞并经G418筛选,获得稳定表达COX-2 shRNA的细胞,胞内COX-2 mRNA表达水平下降了75.30％,细胞增殖活性下降了 29.33％.在稳定表达COX-2 shRNA、错义序列以及未转染的细胞中,细胞凋亡率分别为17.83％、4.63％和4.47％,G0/G1期细胞比例分别为73.93％、61.2％和57.630％,而S期细胞比例分别为13.43％、26.03％和26.90％.Westernblotting检测显示,表达COX-2 shRNA的HepG2细胞内COX-2蛋白水平下降至表达错义序列组的31.25％(P＜0.01),Bcl-2蛋白水平下降至表达错义序列组的54.93％(P＜0.01),而转染错义质粒组与未转染组之间比较差异无统计学意义.结论 构建的真核表达载体pSilencer 2.1-U6-COX-2 shRNA能有效沉默人肝癌HepG2细胞内COX-2基因的表达,并具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和细胞周期阻滞、降低胞内抗凋亡蛋白(H)Bcl-2水平的作用.     

西妥昔单抗对人肝癌细胞HepG2的体外效应

目的探讨西妥昔单抗（爱必妥,cetuximab,Erbitux）对人肝癌细胞HepG2的体外效应。方法流式细胞术检测HepG2细胞表面表皮生长因子受体（EGFR）的表达。细胞划痕及Transwell实验检测西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力的影响。Western印迹检测西妥昔单抗对HepG2细胞EGFR、AKT及ERK表达及活化的影响。碘化丙啶（propidium lodide,PI）染色检测西妥昔单抗对细胞周期的影响。结果流式细胞分析结果显示,HepG2细胞表面存在较高水平的EGFR表达;细胞划痕及Transwell结果表明,西妥昔单抗对HepG2细胞迁移能力具有明显的抑制效应;Western印迹结果证明西妥昔单抗能显著降低HepG2细胞内EGFR、AKT及ERK的磷酸化水平;细胞周期分析显示西妥昔单抗作用24 h剂量依赖性影响HepG2细胞周期进程,并将其阻抑在G0/G1期。结论西妥昔单抗可以抑制高表达EGFR的肝癌细胞系HepG2胞内关键信号蛋白的活化,阻滞其细胞周期,抑制肝癌细胞的迁移能力。     

反义核酸抑制放疗诱导的肝癌细胞VEGF高表达

目的：探讨放疗过程中放疗患者血清血管内皮生长因子（VEGF）升高的机理，以及VEGF反义硫代寡核苷酸（Antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODNs）对肝癌细胞VEGF表达分泌的抑制作用。方法。动态观察肿瘤患者放疗期间血清VEGF变化，体外培养肿瘤细胞，观察放疗对肿瘤细胞VEGF表达分泌的诱导作用及反义寡核苷酸的抑制效应。结果：肿瘤患者血清VEGF浓度在放疗期开始后逐渐升高，1－2周达到峰值后开始下降，到第6周时基本恢复到正常，肝癌细胞受X射线照射后VEGF的分泌量较对照组明显升高，VEGF反核组癌细胞VEGF蛋白表达水平较单纯照射组显著下降（P＜0．01）。结论：放射可诱导肿瘤细胞中VEGF的表达分泌。放疗患者放疗过程中血清VEGF浓度升高可能是由于癌细胞受照射后VEGF表达，分泌增加所致，VEGF反义寡核苷酸对放疗诱导的VEGF高表达有较好的抑制作用。     

LM-1685对人肺腺癌细胞A549的放射增敏作用

目的 观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂对肺癌细胞的放射增敏作用。方法COX-2抑制剂LM-1685作用于体外培养的肺癌细胞A549,噻唑蓝(MTT)法检测其对肺癌细胞的抑制效果,克隆形成法检测放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期变化。结果COX-2抑制剂LM-1685具有明显的抑制A549细胞增殖的作用,其效应呈时间和剂量依赖性,50 μmol/L LM-1685在有或没有IL-1β作用下对A549细胞均有放射增敏作用,其放射增敏比分别为1.12、1.06。50 μmol/L LM-1685能去除X射线导致的A549细胞G₂/M期阻滞。结论COX-2抑制剂对肺癌细胞A549具有放射增敏作用,放射增敏机制可能与去除G₂/M期阻滞有关。     

高效表达的NO对肺腺癌细胞A549放射敏感性的影响

目的 研究同步、高效表达的一氧化氮（NO）对肺腺癌细胞A549放射敏感性的影响,探寻增强肿瘤放射敏感性的新途径.方法 利用前期构建的可调控目的 基因高效表达的载体pfos-iNOS/GFP转染肺腺癌细胞A549,将阳性转染细胞和未转染细胞给予2 Gy X线照射后,检测细胞照射前后不同时相点NO的产量;给予不同剂量的X线照射后,检测照射后各组细胞的存活率,根据细胞存活率分别绘制各组细胞的辐射剂量-存活曲线,并进一步通过计算Do值及放射增敏比（SER）分析各组细胞放疗敏感性的变化.结果 转染载体pfos-iNOS/GFP的细胞照射后,NO浓度较照射前明显增高,其中照射后16 h较照射前增强10倍.转染治疗载体组Do值（1.16 Gy）明显低于未转染组（3.93 Gy）,治疗载体组的放疗敏感性是对照组的3.5倍.结论 高效表达的NO使体外肺腺癌细胞的放射敏感性明显增强,为肿瘤放疗增敏提供了新的模式.     

对乙酰氨基酚对不同脑胶质瘤细胞的放射增敏作用及其机制研究

目的 探讨对乙酰氨基酚联合放射对人恶性脑胶质瘤细胞2种细胞的放射增敏效应及其可能的机制。 方法 以人恶性脑胶质瘤细胞株SHG-44及其接受10Gy 6MV X射线照射后的存活后代细胞SHG-44_10Gy为研究对象,采用免疫细胞化学和RT-PCR检测2株细胞COX-2的表达,集落形成实验测定对乙酰氨基酚对细胞的放射增敏作用。结果 HG-44_10Gy较SHG-44的放射敏感性低(P<0.01);免疫细胞化学染色SHG-44和SHG-44_10Gy细胞的胞质及胞膜均有COX-2蛋白的表达,且后者明显高于前者;RT-PCR检测SHG-44_10Gy中COX-2 mRNA表达水平明显高于SHG-44细胞,与放射敏感性有显著的相关性(r=0.976,P<0.01);对乙酰氨基酚联合放疗分别作用于SHG-44和SHG-44_10Gy细胞,与单纯照射组相比,显示了放射增敏作用,SHG-44细胞D₀值和D_q值增敏比分别为1.09和1.11,SHG-44_10Gy的SER分别为1.12和3.01。结论 人恶性脑胶质瘤细胞株SHG-44及其照射存活后代细胞均有COX-2表达,且对辐射耐受的存活后代细胞中COX-2明显增高;对乙酰氨基酚可通过抑制COX-2的表达增加人脑胶质瘤SHG-44细胞尤其是其照射后代细胞的放射敏感性。     

过表达miR-29c靶向抑制AKT2增强肝癌HepG2细胞放射敏感性的实验研究

目的 探讨miR-29c靶向AKT2对肝癌细胞HepG2放射敏感性的影响。方法 RT-PCR检测人正常肝THLE-3细胞和肝癌HepG2细胞中miR-29c表达。给予不同剂量（0、2、4、6和8 Gy）的X射线照射后,RT-PCR检测HepG2细胞中miR-29c表达变化。经生物信息学预测并采用双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测miR-29c与AKT2的靶向关系。采用脂质体2000将miR-29c mimic/AKT2基因重组质粒和miR-29c inhibitor/慢病毒载体AKT2 shRNA转染至HepG2细胞中,并给予不同剂量X射线照射后,克隆形成实验和MTT实验检测miR-29/AKT2对HepG2细胞存活率和细胞活力的影响。结果 与THLE-3细胞相比,HepG2细胞中miR-29c明显降低,差异有统计学意义（t=17.816,P<0.05）;HepG2经2、4、6和8 Gy X射线照射后,细胞存活率较THLE-3细胞显著降低（t=4.541、6.823、7.218、9.363,P<0.05）,HepG2细胞中miR-29c表达显著下降（t=5.599、9.262、10.470、10.873,P<0.05）。miR-29c过表达可降低HepG2细胞存活率和细胞活力（t_存活率=4.307、7.668、7.668、6.894,P<0.05;t_细胞活力=3.443、8.116、13.434,P<0.05）;反之,抑制miR-29c表达则升高HepG2细胞存活率和细胞活力（t=4.003、6.713、7.141,P<0.05;t_细胞活力=4.282、5.113,P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验表明,AKT2是miR-29c的靶基因,Western blot检测结果显示,miR-29c可负向调控AKT2蛋白表达。沉默AKT2后,HepG2细胞的存活分数及细胞存活率趋势与miR-29c过表达相一致;反之,AKT2过表达则与抑制miR-29c表达相一致。结论 miR-29c可通过靶向AKT2增加肝癌细胞HepG2放射敏感性。     

塞来昔布对正常脑胶质细胞和脑胶质瘤细胞放射增敏效应的比较及其机制

目的 探讨塞来昔布对正常少突胶质细胞（oln93）及脑胶质瘤细胞（u373）的放射增敏作用及其作用机制。方法 将两种细胞按空白处理、单独接受塞来昔布或X射线、塞来昔布联合X射线4种不同处理方式分为对照组、给药组、照射组和联合组,MTT法、克隆形成法对比两种细胞的增殖和放射敏感性,流式法测细胞的周期分布,Western blot法分析相关蛋白表达。结果 与未加药物相比,塞来昔布能抑制oln93细胞和u373细胞生长（t=2.215~30.996,P<0.05;t=0.383~11.732,P<0.05）,但相同药物浓度下抑制两种细胞差异无统计学意义。放射增敏比SER分别为1.13和1.21,并诱导G₀/G₁期阻滞（t=-6.1~5.141,P<0.05）。联合组与照射组比较,oln93细胞发生S期阻滞（t=-18.174,P<0.05）,CyclinA蛋白表达增加（t=-8.087,P<0.05）;u373细胞发生G₂/M期阻滞,Cyclin B1、DNA-PKcs、MRE11蛋白表达下降（t=-8.838~10.45,P<0.05）。结论 塞来昔布对u373的放射增敏作用比oln93细胞明显,其机制与调节细胞周期分布及DNA损伤修复有关。     

PI3KAktCOX-2途径在人宫颈癌HeLa细胞放射抗拒中的作用

目的 探讨PI3K/Akt/COX-2途径在人宫颈癌HeLa细胞放射抗拒中作用的分子机制。 方法 COX-2抑制剂塞来昔布单独及联合PI3K抑制剂LY294002作用HeLa细胞24 h,X射线不同剂量照射,利用克隆形成法计算细胞存活率,单击多靶模型拟合细胞存活曲线,计算D_q、D₀、SF₂值和放射增敏比(SER);应用Western blot方法检测Akt、磷酸化Akt、COX-2、Bad和磷酸化Bad蛋白的表达;应用RT-PCR检测COX-2和Bad mRNA的表达。结果 塞来昔布单独及联合LY294002作用HeLa细胞组D_q、D₀、SF₂明显低于单纯照射组;X射线照射后,能够活化HeLa细胞PI3K/Akt/COX-2途径,塞来昔布能够多靶点抑制PI3K/Akt/COX-2途径的活化。结论 PI3K/Akt/COX-2途径的活化是HeLa细胞放射抗拒的重要原因,PI3K/Akt与COX-2之间存在正反馈的调节,抑制PI3K/Akt/COX-2途径的活化能够提高HeLa细胞放射敏感性。     

COX-2抑制剂塞来昔布对诱导性肝癌Bax、Bcl-2表达影响的实验研究

目的探讨选择性COX-2抑制剂—塞来昔布对诱导性肝癌细胞凋亡基因Bax、Bcl-2表达的影响及其可能的机制。方法将25只雄性Wister大鼠随机分为对照组(n=5)、模型组(n=10)和塞来昔布组(n=10)。模型组和塞来昔布组大鼠均每周一次腹腔注射二乙基亚硝胺,同时塞来昔布组每天给与塞来昔布溶液灌胃,模型组每天给与相同体积的生理盐水灌胃,对照组不做任何处理。20周后行MRI扫描后处死大鼠,取大鼠肝组织行HE染色、免疫组化检测和Western blot检测。结果1)模型组大鼠存活率为40%(4/10),塞来昔布组大鼠存活率为70%(7/10);2)MRI平扫显示模型组肝脏肿瘤直径为(1.064±0.441)cm,塞来昔布组大鼠肝脏肿瘤直径为(0.415±0.154)cm(P<0.05),另有3只为重度肝硬化;3)免疫组化结果显示,正常组大鼠肝组织中COX-2、Bcl-2阳性细胞数(48.352±25.300)个/mm^2、(314.286±78.323)个/mm^2明显少于模型组(970.696±138.246)个/mm^2、(953.686±69.910)个/mm^2,而Bax阳性细胞数则降低(956.040±61.381)个/mm^2 VS(681.319±50.600)。应用塞来昔布后,COX-2、Bcl-2阳性细胞数明显降低(513.736±127.309)个/mm^2、(703.300±56.033)个/mm^2,Bax阳性细胞数则升高(767.399±53.120)个/mm^2,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果表明,正常组大鼠肝组织中COX-2、Bcl-2蛋白相对表达量(0.089±0.042)、(0.181±0.043)明显低于模型组(0.663±0.102)、(0.617±0.069),而Bax蛋白相对表达量则降低(0.768±0.180)VS(0.328±0.034)。应用塞来昔布后,COX-2、Bcl-2蛋白相对表达量明显降低(0.333±0.120)、(0.411±0.075),而Bax蛋白相对表达量明显升高(0.428±0.027),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论塞来昔布可以通过降低Bcl-2的蛋白表达,增加Bax的蛋白表达抑制肝癌的生成和促进HCC细胞的凋亡。     

Radiosensitization of human glioma cells by cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibition: independent on COX-2 expression and dependent on the COX-2 inhibitor and sequence of administration

PURPOSE: Patients with a malignant glioma have a very poor prognosis. Cyclooxygenase-2 (COX-2) protein is regularly upregulated in gliomas and might be a potential therapeutic target. The effects of three selective COX-2 inhibitors were studied on three human glioma cell lines. MATERIALS AND METHODS: The selective COX-2 inhibitors NS-398, Celecoxib and Meloxicam and three human glioma cell lines (D384, U251 and U87) were used. Cell growth was assessed by a proliferation assay, the interaction with radiation (0 - 6 Gy) was studied using the clonogenic assay and cell cycle distribution was determined by FACS (fluorescence-activated cell sorting) analysis. RESULTS: All COX-2 inhibitors reduced proliferation of the glioma cell lines irrespective of their COX-2 expression level. Incubation with 200 microM NS-398 24 h before radiation enhanced radiation-induced cell death of D384 cells and 750 microM Meloxicam resulted in radiosensitization of D384 and U87 cells. No radiosensitization was observed with COX-2 inhibitor administration after radiotherapy. Treatment of D384 with NS-398 (200 microM) or Celecoxib (50 microM) and U87 with NS-398 (200 microM) after radiation resulted even in radioprotection. CONCLUSIONS: Effectiveness of COX-2 inhibitors on cell proliferation and radio-enhancement was independent of COX-2 protein expression. The sequence of COX-2 inhibitor addition and irradiation is very important.     

塞来昔布对人肺腺癌细胞株A549的放射增敏效应及细胞迁移力的影响

目的 观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人肺腺癌细胞株A549的放射增敏效应及抑制细胞迁移力的作用。方法 选用人肺腺癌细胞株A549作为研究对象。选择适当浓度的塞来昔布,设置对照组、药物组、单纯放射组和放射加药组,成克隆分析法测定塞来昔布对细胞的放射增敏效应,细胞划痕试验观察A549细胞的迁移力,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2的含量。结果 细胞划痕试验结果显示,放射加药组比单纯放射组和药物组的无细胞划痕区均增宽,细胞迁移力均明显下降,且随着药物浓度的增加,抑制细胞迁移的能力增强。30和50 μmol/L 塞来昔布对A549细胞显示出浓度依赖性放射增敏作用,放射加药与单纯放射组相比, SF₂、D₀、D\-q出现不同程度的下调。ELISA检测发现,细胞培养上清液中MMP-2的含量,药物组较对照组,放射加药组较单纯放射组均明显下降(t=3.78、5.79,P<0.05),但单纯放射组和对照组对细胞分泌MMP-2的抑制效应不明显(t=2.73、2.38,P>0.05)。结论 塞来昔布在体外试验中对肺腺癌细胞株A549具有浓度依赖性放射敏感性,机制可能为降低了细胞对放射的亚致死损伤修复能力。塞来昔布可能通过抑制A549细胞分泌MMP-2,从而抑制细胞的迁移能力。     

Radiosensitization of human glioma cells by cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibition: Independent on COX-2 expression and dependent on the COX-2 inhibitor and sequence of administration

Purpose: Patients with a malignant glioma have a very poor prognosis. Cyclooxygenase-2 (COX-2) protein is regularly upregulated in gliomas and might be a potential therapeutic target. The effects of three selective COX-2 inhibitors were studied on three human glioma cell lines.

Materials and methods: The selective COX-2 inhibitors NS-398, Celecoxib and Meloxicam and three human glioma cell lines (D384, U251 and U87) were used. Cell growth was assessed by a proliferation assay, the interaction with radiation (0 – 6 Gy) was studied using the clonogenic assay and cell cycle distribution was determined by FACS (fluorescence-activated cell sorting) analysis.

Results: All COX-2 inhibitors reduced proliferation of the glioma cell lines irrespective of their COX-2 expression level. Incubation with 200 μM NS-398 24 h before radiation enhanced radiation-induced cell death of D384 cells and 750 μM Meloxicam resulted in radiosensitization of D384 and U87 cells. No radiosensitization was observed with COX-2 inhibitor administration after radiotherapy. Treatment of D384 with NS-398 (200 μM) or Celecoxib (50 μM) and U87 with NS-398 (200 μM) after radiation resulted even in radioprotection.

Conclusions: Effectiveness of COX-2 inhibitors on cell proliferation and radio-enhancement was independent of COX-2 protein expression. The sequence of COX-2 inhibitor addition and irradiation is very important.     

安多霖对微波辐射致大鼠心肌细胞半胱天冬酶-3表达的影响

目的探讨抗辐射中药复方安多霖对微波辐射后大鼠心肌细胞半胱天冬酶（caspase）-3表达的改变及其意义。方法将140只二级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射对照组、安多霖0.75 g/（kg.d）、1.5 g/（kg.d）及3 g/（kg.d）预防组。预防组每日1次灌胃给予安多霖溶液,连续给药2周。给药结束后即刻30 mW/cm2微波辐射大鼠1次,辐射时间为15 min。于停药后7 d和14 d,采用Western印迹法、免疫组织化学和图像分析技术,研究大鼠心脏细胞caspase-3表达的变化规律。结果停药后7和14 d,辐射对照组大鼠心肌细胞caspase-3主要位于胞浆,其蛋白表达显著升高（P〈0.01）;0.75 g/（kg.d）安多霖预防组大鼠心肌细胞caspase-3表达与辐射对照组相似;1.5 g/（kg.d）和3 g/（kg.d）安多霖预防组大鼠心肌细胞caspase-3表达比辐射对照组显著下降（P〈0.01）。结论 30 mW/cm2微波辐射可引起大鼠心肌细胞caspase-3表达增强;给予安多霖1.5和3 g/（kg.d）对微波辐射致大鼠心肌caspase-3表达升高有降低作用;安多霖对微波辐射引起心脏损伤的预防作用可通过下调caspase-3表达来实现。     

选择性COX-2抑制剂celecoxib对子宫肌瘤细胞的增殖抑制及其分子机制

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）选择性抑制剂塞来昔布（celecoxib）对子宫肌瘤细胞的增殖抑制作用和分子机制。方法给予原代培养的子宫肌瘤细胞不同浓度的celecoxib处理,MTT法测定细胞生长抑制率;半定量RT-PCR法检测子宫肌瘤细胞Wnt信号通路的关键基因Wnt5b、β-catenin、c-myc的表达及塞来昔布对子宫肌瘤细胞增殖活化的影响。结果塞来昔布可显著抑制体外培养的人子宫肌瘤细胞增殖,随着药物剂量的增加和时间的延长,子宫肌瘤细胞的增殖和活化明显抑制,呈剂量和时间依赖性,而这种作用是通过抑制Wnt信号通路实现的。结论子宫肌瘤细胞中存在Wnt信号通路且celecoxib在体外能抑制此通路活化,从而抑制肌瘤细胞的增殖。