大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡及七氟醚对细胞凋亡及 NF-κBp65的影响

目的：探讨七氟醚预处理对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡的影响。方法24只Wister大鼠随机分为3组（n＝8）：假手术组,缺血再灌注组,七氟醚组,阻断肝门30 min后建立大鼠70％肝缺血再灌注模型。假手术组（ S组）仅游离肝门,但不阻断;肝缺血再灌注组（ IR组）采用阻断肝门30 min,再灌注1 h的方法制备大鼠肝缺血再灌注损伤模型;七氟醚预处理组（ SP组）吸入2．1％七氟醚30 min,停止吸入10 min后制备肝缺血再灌注模型。于再灌注1 h时处死动物,留取肺组织,测定湿／干重比（ W／D比）,采用比色法检测超氧化物歧化酶（ SOD）活性及丙二醛（ MDA）含量,采用原位末端转移酶法（ TUNEL）检测细胞凋亡,计算细胞凋亡指数（ AI）,采用Western blot法测定核蛋白NF-κBp65表达,光镜下观察肺组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和SP组再灌注各时点肺组织W／D比值、细胞凋亡指数（ AI）和NF-κB 活性水平及MDA含量均显著增高（均P＜0．05）;SOD活性显著降低（P＜0．05）;与IR组比较,SP组W／D比值、细胞凋亡指数（AI）、NF-κB表达水平与MDA含量显著降低（均P＜0．05）;而SOD活性显著增加（P＜0．05）;SP组肺组织损伤较IR组减轻。结论细胞凋亡可能在肝缺血再灌注肺损伤发生过程中具有重要意义;七氟醚对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡具有抑制作用,其作用机制可能通过降低肺组织NF-κB的活性,从而清除自由基、抑制脂质过氧化有关。     

二甲基乙二酰甘氨酸对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)对大鼠肺缺血-再灌注损伤(IRI)的保护作用。方法成年SD大鼠24只均分为三组。采用阻断左肺门60min、再灌注120min制备肺IRI模型(IRI组)。DMOG组予腹腔注射DMOG 60mg/kg后制备肺IRI模型,假手术组(S组)仅游离左肺门,但不阻断。处死大鼠,计算肺组织肺湿干重比(W/D),分光光度法检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平,RT-PCR和Western blot检测肺组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA和蛋白表达量。结果与S组相比,IRI组肺组织W/D、MDA、MPO及TNF-α、IL-1β、IL-6、HIF-1α蛋白相对表达量均升高(P<0.05),而SOD降低(P<0.05)。与IRI组相比,DMOG组W/D、MDA、MPO及TNF-α、IL-1β、IL-6水平均降低(P<0.05),而SOD、HIF-1α蛋白相对表达量均升高(P<0.05)。结论 DMOG预处理可以减轻大鼠早期肺IRI,其调控作用主要发生在HIF-1α基因转录后的蛋白水平。     

七氟烷处理对肺缺血-再灌注损伤大鼠氧自由基的影响

目的 探讨七氟烷处理对肺缺血-再灌注(I-R)损伤大鼠氧自由基的影响.方法 SD大鼠54只随机分为三组,每组18只.MC组和ST组建立I-R损伤模型,SO组为假手术组.ST组于肺缺血前和再灌注期给予2.1％七氟烷处理.在再灌注30、60和120 min时各组随机处死6只大鼠,测得肺组织湿/干重比(W/D),羟胺法检测血浆SOD活性,比色法检测血浆丙二醛(MDA)含量.结果 与SO组相比,ST组和MC组再灌注30、60和120min肺组织W/D和血浆MDA水平均升高,SOD活性下降(P＜0.05).与MC组相比,ST组再灌注30、60和120 min时肺组织W/D和MDA水平均下降,血浆SOD活性升高(P＜0.05).ST组再灌注30、60和120 min时肺组织病理损伤程度与MC组相比均有所减轻.结论 大鼠肺I-R损伤期七氟烷处理能减轻肺损伤,其机制可能与抑制氧自由基释放有关.     

七氟烷后处理联合七氟烷预处理对急性心肌缺血-再灌注大鼠血浆SOD及MDA的影响

目的探讨七氟烷后处理联合预处理是否能减轻再灌注损伤,其作用是否较单一作用更强及其机制,为临床应用提供实验依据。方法健康雄性Wistar大鼠50只,随机分为5组,假手术组（S组）：大鼠冠脉只穿线不结扎;缺血再灌注组（I/R组）：大鼠造模,缺血30 min,再灌注120 min;七氟烷预处理组（sevopre组）：缺血前30 min,吸入2.5%的七氟烷15 min,洗脱15 min,结扎左冠状动脉前降支,再灌注120 min;七氟烷后处理组（sevopo组）：大鼠再灌注前1 min吸入2.5%的七氟烷5 min,再灌注120 min;七氟烷后处理＋七氟烷预处理组（pre＋po组）：缺血前30 min,吸入2.5%的七氟烷15 min,洗脱15 min,结扎左冠状动脉前降支,再灌注前1 min吸入2.5%的七氟烷5 min,再灌注120 min。实验结束时取颈动脉血及心肌组织分别测定丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及心肌梗死面积。结果再灌注120 min后,pre＋po组与sevopre组、sevopo组比较心肌梗死面积显著减少（P〈0.05）,显著升高了SOD活性,降低了丙二醛含量（P〈0.05）。结论七氟烷后处理联合预处理能减少心肌梗死面积,提高再灌注后SOD活性,降低MDA含量,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。     

蒺藜总皂苷对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察蒺藜总皂苷(GSTT)对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能机制。方法:建立大鼠在体肺缺血再灌注模型,缺血45min,再灌120min,将雄性Wistar大鼠随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、GSTT小剂量组(L组)、GSTT大剂量组(H组),分别在再灌120min时,测定肺组织湿干质量比值(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,并进行肺组织病理学检查;结果:IR组肺组织W/D、MPO活性、血清MDA升高,而血清SOD降低。预先给予GSTT干预后,L、H组均可以不同程度减弱缺血再灌注诱导上述指标的变化。肺组织病理学检查显示GSTT预先给药可减轻肺缺血再灌注的损伤。结论:GSTT对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成和中性粒细胞浸润有关。     

阿霉素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察阿霉素对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠在体肺缺血再灌注模型。将健康Wistar大鼠54只随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、阿霉素组(A组)。每组分别在缺血45min,再灌注60、120min3个时点处死6只大鼠,留取血浆和右肺组织,测定血清丙二醛(MDA)含量、肺组织干湿质量比值(D/W)、髓过氧化物酶(MPO)活性及肺组织中细胞凋亡指数(AI),并进行肺组织病理学检查。结果再灌注期间IR组MPO活性、AI、血清MDA升高,D/W降低,而预先给予阿霉素干预后可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的变化。肺组织病理学检查显示阿霉素预先给药减轻肺缺血再灌注损伤。结论阿霉素对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成、中性粒细胞浸润及细胞凋亡有关。     

谷氨酰胺对肝缺血再灌注导致急性肺损伤肺组织MDA、SOD水平及预后的影响

目的 评价分析谷氨酰胺对肝缺血再灌注导致急性肺损伤肺组织MDA、SOD水平及预后的影响.方法 选取45例行肝肿瘤手术患者作为研究对象,根据随机数表法分为S组(假手术组)、I-R组(缺血-再灌注组)、G组(谷氨酰胺组),每组15例.I-R组完全阻断门静脉、肝动脉、胆总管持续缺血30 min后再进行灌注1 h,G组于全肝血流阻断前1 h静脉滴注0.75 mg/kg谷氨酰胺实施预处理.对3组患者组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肺湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性进行测定,并评估肺组织学评分.结果 与I-R组比较,G组患者肺组织MDA水平、MPO活性、W/D及TNF-α水平降低,SOD水平上升,差异有统计学意义(P<0.05);与S组比较,G组患者肺组织MDA、TNF-α水平、W/D上升,SOD水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);I-R组肺组织学评分高于G组、S组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 给予肝缺血再灌注导致急性肺损伤进行谷氨酰胺预处理能够有助于抑制炎性因子释放,从而显著增加肺组织表达,改善MDA、SOD水平,利于预后质量.     

缺血后处理对再灌注损伤鼠肺IL-17和IL-8的影响

目的研究缺血后处理对再灌注损伤鼠肺IL17和IL-8的影响,并分析其可能的肺保护作用机制。方法构建大鼠在体肺脏缺血再灌注损伤模型,30只SD大鼠随机分为假手术对照组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血后处理组(IPostC组),每组10只。在体大鼠IR损伤模型制备完成后,阻断左肺门,终止血供及通气,造成左肺缺血,达预定时间后松开阻断带恢复血供及通气形成再灌注损伤。Sham组开胸游离左肺门穿阻断带而不结扎持续180 min;IR组缺血60 min后再灌注120 min;IPostC组缺血60 min后给予重复三次的5 min灌注和5 min缺血的后处理,继以恢复血供行再灌注90 min。三组实验结束后均留取左肺组织、左支气管肺泡灌洗液标本,分别用于测定IL-17、IL-8的含量,留取小块肺组织测定肺湿/干重比(W/D)。结果Sham组支气管肺泡灌洗上清液中IL-17含量明显低于IR组和IPostC组(P0.05);IPostC组支气管肺泡灌洗上清液中IL-17含量明显低于IR组(P0.05)。Sham组支气管肺泡灌洗上清液中IL-8含量明显低于IR组和IPostC组(P0.05);IPostC组支气管肺泡灌洗上清液中IL-8含量明显低于IR组(P0.05)。Sham组肺组织中IL-17明显低于IR组和IPostC组(P0.05);IPostC组肺组织中IL-17明显低于IR组(P0.05)。Sham组肺组织中IL-8明显低于IR组和IPostC组(P0.05);IPostC组肺组织中IL-8明显低于IR组(P0.05)。Sham组肺组织W/D明显低于IR组(P0.05)和IPostC组;IPostC组肺组织W/D明显低于IR组(P0.05)。结论缺血后处理能明显减轻大鼠肺缺血再灌注损伤。其机制可能与抑制IL-17、IL-8活性从而减轻肺组织炎症损害有关。     

卡托普利后处理对再灌注损伤鼠肺血管紧张

目的探讨卡托普利后处理对大鼠肺缺血—再灌注时肺血管内皮血管紧张素转换酶(ACE)mRNA表达的影响,分析其可能的作用机制。方法实验大鼠24只,随机分为假手术组(Sham组,n=8只)、缺血—再灌注组(I/R组,n=8只)和卡托普利后处理组(CAP组,n=8只)。I/R组阻断左肺门1 h后,恢复通气再灌注1 h。Sham组开胸游离左肺门,通气及灌注2 h。CAP组于再灌注前20 min腹腔注射卡托普利(10 mg.kg-1)行药物后处理,恢复通气再灌注1 h。留取静脉血及左侧肺组织,分别测定肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量、ACE mRNA的表达量及静脉血中ET-1的含量,测肺湿/干重比(W/D)及光镜下观察肺组织病理变化。结果 CAP组肺组织MPO、MDA的含量及ACE mRNA的表达量、血清ET-1含量及肺W/D明显低于I/R组(P0.05);CAP组肺组织中SOD含量明显高于I/R组(P0.05);CAP组肺组织形态学损伤较I/R组明显减轻。结论卡托普利后处理可以明显减轻鼠肺缺血再灌注损伤,其机制可能与其抑制缺血再灌注损伤鼠肺组织中ACE mRNA的表达有关。     

脂氧素A_4对大鼠肺缺血再灌注损伤氧化损伤的影响

目的探讨脂氧素A_4对大鼠肺缺血再灌注损伤氧化应激的影响。方法取36只大鼠(体重220~280g)随机分为假手术组、缺血再灌注组和脂氧素A_4干预组。阻断左肺门45min后再灌注2h建立肺缺血再灌注损伤模型,脂氧素A_4干预组在大鼠恢复血供前5min股静脉注射脂氧素A4 0.1mg/kg。收集标本,检测肺组织的湿/干重量(W/D)比值、支气管肺泡灌洗液的蛋白总量(TP)、检测肺组织匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果缺血再灌注组肺组织W/D比值、MDA水平和支气管肺泡灌洗液中总蛋白均较假手术组明显升高,而SOD活性较假手术组明显降低(P0.05)。脂氧素A_4干预组的上述指标高于明显低于缺血再灌注组,而SOD活性较缺血再灌注组明显升高(P0.05)。结论脂氧素A_4对大鼠肺缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其机制可能是脂氧素A_4清除自由基抗氧化作用。     

山莨菪碱抗肺缺血再灌注损伤作用的实验研究

目的　探讨山莨菪碱 (6 5 4 - 2 )抗兔肺缺血再灌注损伤作用及其机制。方法　在建立兔单肺原位缺血再灌注损伤模型上 ,观察山莨菪碱对肺组织湿 /干比值 (W /D)、丙二醛 (MDA)、肺匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性和肺毛细血管通透性 (LPI)作用和肺组织光镜、电镜形态学变化肺组织损伤 (LTD)程度。结果　缺血 90min、再灌注 12 0min后 ,肺组织的W /D、LPI、MDA、MPO活性、LTD程度减少 ,6 5 4— 2可使肺组织病理损伤明显减轻。结论　山莨菪碱具有抗肺缺血再灌注损伤作用 ,其作用机制可能与抑制中性粒细胞在肺内聚集 ,减轻氧自由基造成的肺损伤有关。     

胆红素在大鼠肺脏缺血再灌注损伤中的抗凋亡作用

目的探讨胆红素对实验性大鼠肺缺血再灌注损伤的抗凋亡作用。方法60只健康Wistar大鼠随机分为3组:手术对照(C)组,缺血再灌注(IR)组,胆红素干预(B)组。每组分别于夹闭缺血的45min,再灌注后30、60、120min4个时点处死大鼠,取血浆和右肺中叶,观察肺组织病理形态变化,测定肺组织干重/湿重(D/W),TUNEL法测定肺组织中细胞凋亡指数(AI)。结果①肺组织D/W:经缺血和再灌注后,IR组和B组的肺组织D/W都呈进行性下降(P<0.01);B组下降幅度明显小于IR组(P<0.05);②肺组织细胞AI的变化:与IR组相比,B组相同时点的肺组织细胞凋亡数显著减少(P<0.05);③肺组织病理变化:缺血再灌注后IR组肺组织损伤进行性加重,B组肺组织充血、水肿、炎性细胞浸润较IR组减轻。结论胆红素对于实验性大鼠肺脏缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与抗细胞凋亡有关。     

天麻糖复合物对大鼠缺血/再灌注模型视网膜的影响

目的观察天麻糖复合物(polysaccharides from Gastro-d ia elata B lum e,GEP)对大鼠视网膜缺血/再灌注(retinal is-chem ia reperfusion,R IR)后视网膜超氧化物歧化酶(superox-ide d ismutase,SOD)、丙二醛(m alond ialdehyde,MDA)、一氧化氮(n itric oxide,NO)含量及视网膜形态的影响。方法采用前房灌注液体形成16 kPa高眼压而建立R IR模型。SD大鼠随机分为:GEP小剂量组、中剂量组、大剂量组、维生素E组、阴性对照组,缺血60 m in后恢复血流,分别于再灌注60 m in,24 h和72 h检测视网膜组织中MDA(比色法),SOD(比色法)、NO(硝酸还原酶法)含量及视网膜光学显微镜的组织学观察。结果GEP干预后,再灌注60 m in,24 h和72h后中、大剂量干预组视网膜中MDA含量均明显低于阴性对照组(P<0.05);SOD含量均明显高于阴性对照组(P<0.05);NO含量在再灌注24~72 h时间段内明显低于阴性对照组(P<0.05),GEP干预组视网膜组织形态学损害较阴性对照组明显减轻。结论GEP对缺血/再灌注的视网膜具有保护作用。     

阿托伐他汀钙防治大鼠肺缺血再灌注损伤的实验研究

目的 探讨阿托伐他汀钙对肺缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法 采用在体大鼠单肺原位缺血再灌注模型。30只Wistar大鼠随机分为假手术组（SD）、缺血再灌注组（IR）、阿托法他汀钙处理组（AT）。各组进行肺湿干重比（W／D）、肺通透性指数测定，并进行肺组织光镜评价。采用免疫组织化学方法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）。结果 AT组较IR组肺通透性指数明显降低（P〈0．01），W／D明显降低（P〈0．01）。AT组肺eNOS表达较IR组明显升高（P〈0．01），AT组肺iNOS表达较IR组明显降低（P〈0．01）。结论 阿托伐他汀钙有保护肺缺血再灌注损伤的作用。其可能的机制为维持肺内皮NO活性，减少自由基的产生及抗炎作用。     

缺血后处理减轻大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的实验研究

摘要： 目的 观察缺血后处理 （I-postC） 对大鼠肢体缺血再灌注 （LIR） 后肺损伤的影响, 探讨缺血后处理的器官保护作用及可能机制。方法 Wistar 大鼠 24 只随机分为 3 组 （n=8）, 对照组 （Control 组）、 缺血再灌注组 （IR 组） 和缺血后处理组 （I-postC 组）。结扎大鼠双后肢根部以阻断血流 4 h, 后再恢复血流灌注 4 h, 制作大鼠 LIR 动物模型。 Control 组橡皮带松弛环绕双后肢不阻断血流, I-postC 组在血流再灌注前, 行重复 3 次的缺血 5 min-再灌注 5 min,再恢复 4 h 的血流再灌注。留取血液及肺组织标本, 测定各组动物动脉血气指标氧分压[p （O2 ） ]和二氧化碳分压 [p （CO2 ） ], 检测血浆及肺组织的丙二醛 （MDA） 含量及黄嘌呤氧化酶 （XOD） 和超氧化物歧化酶 （SOD） 水平, 光镜及电镜下观察肺组织的病理形态学改变。结果 LIR 后 p （O2 ） 和 p （CO2 ） 明显降低, 血浆和肺组织中 SOD 活性明显降低,而 XOD、 MDA 明显增加 （P < 0.05）; 镜下可见肺间质内血管扩张充血, 中性粒细胞浸润, 血管周围间隙增大, 肺泡间隔增宽, 肺泡腔内有渗出液等损伤表现。与 IR 组比较, I-postC 组 p （O2 ） 和 p （CO2 ） 明显增加, 血浆及肺组织 SOD 活性升高; 而 XOD、 MDA 水平降低 （P < 0.05）; 镜下观察肺组织只可见轻度病理改变。结论 I-postC 可通过抑制脂质过氧化反应减轻大鼠 LIR 后肺损伤的程度。     

硫化氢对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响及机制初探

目的观察内源性CSE/H2S通路的改变以及给予H2S供体对缺血/再灌注心脏的影响,探讨该通路与心脏缺血/再灌注损伤的关系及作用机制。方法采用Langendorff离体灌流装置、通过停灌30min/复灌30min方式造成Wistar大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型;采用外源性NaHS(40μmol.L-1)分别在停灌30min前(SIR)与停灌30min后处理(IRS)对缺血/再灌注心脏的影响。记录心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+dp/dtmax)、舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-dp/dtmax)及左室内压差(LVP=左室收缩压-左室舒张压)。采用比色法检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌MDA及SOD;采用比色法检测心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性;采用RT-PCR方法测定心肌组织CSEmRNA表达。结果与缺血/再灌注组(I/R)30min相比,SIR组及IRS组±dp/dtmax、LVP均增高,LDH降低;I/R组MDA水平高于对照组(CON)、SIR组及IRS组(P<0.05,P<0.01);IR组SOD活性低于SIR组及IRS组(P<0.05),但与CON组差别无显著性;I/R组大鼠心肌CSE活性低于CON组(P<0.05);而大鼠心肌CSEmRNA的表达与CON组差异无显著性。结论在缺血前后给予外源性NaHS均可改善因再灌注损伤引起的心肌收缩及舒张功能障碍;其作用机制可能是通过提高心肌SOD活性,增加氧自由基清除而拮抗缺血/再灌注引起的心功能及细胞膜损伤;心肌缺血/再灌注时内源性CSE活性抑制可能与心功能障碍及细胞损伤有关。