甘糖酯抗氧化作用的分子机制

目的探讨甘糖酯(PGMS)清除自由基抗氧化作用的分子机制。方法给大鼠ig高脂乳剂建立高脂血症模型,分成对照组、甘糖酯治疗组、甘糖酯+DDC组,治疗3周。检测血清、肝脏、脾脏和主动脉中丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性,以及Cu,Zn-SOD mRNA的表达水平。结果甘糖酯治疗组大鼠,丙二醛(MDA)含量降低,SOD,GSH-Px和CAT的活性显著升高,Cu,Zn-SOD mRNA的表达水平增加;而甘糖酯和DDC联合用药治疗组,DDC抑制了甘糖酯诱导的Cu,Zn-SOD mRNA表达水平和SOD活性的升高,造成MDA含量的相应升高。结论甘糖酯通过诱导抗氧化酶SOD,GSH-Px和CAT的活性,增加Cu,Zn-SOD mRNA的表达水平,清除体内过多的氧自由基,达到抗氧化的目的。     

甘糖酯对高脂血症大鼠血脂及脂蛋白脂酶的调节作用

目的探讨甘糖酯调节血脂的分子机制。方法以不同剂量甘糖酯(37.8,75.6 mg·kg^-1·d^-1)给高脂血症大鼠ig给药3周,禁食12 h后,测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的浓度变化,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测组织中脂蛋白脂酶(LPL)mRNA的表达。结果甘糖酯有降低血清TC,TG和LDL-C,升高HDL-C的作用,同时提高LPL mRNA的表达,且呈剂量依赖性关系。甘糖酯对LPL mRNA转录的促进作用与其降低TC,TG和LDL-C的作用呈正比关系。结论甘糖酯通过促进LPL mRNA转录而调节血脂水平,这可能是甘糖酯降血脂、预防动脉粥样硬化等心脑血管疾病的机制之一。     

甘糖酯对大鼠尿激酶的诱导作用

目的　观察甘糖酯对大鼠尿激酶的诱导作用 ,从基因水平上探讨甘糖酯的抗栓机制。方法　采用发色底物法检测甘糖酯对大鼠血浆中尿激酶活性的影响 ,以半定量RT PCR法检测大鼠尿激酶基因表达。结果　大鼠经灌喂甘糖酯后血液中尿激酶活性和mRNA表达水平均高于对照组 ,且尿激酶活性和mRNA表达水平的升高同喂药剂量正相关 ,在 2 5～ 10 0mg·kg-1的剂量范围内随剂量增大而升高。结论　甘糖酯可以在mRNA水平上诱导大鼠尿激酶的表达 ,或加快大鼠尿激酶mRNA的转录速度或增加mRNA的稳定性 ,激活纤溶系统 ,从而表现出一定的抗栓活性     

D-R聚甘酯对局灶性脑缺血大鼠的保护作用

目的研究D-聚甘酯(多糖类化合物)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(RI)的保护作用及其可能机制。方法用改良Longa法,建立大鼠局灶性脑缺血2 h再灌注损伤模型,观察D-聚甘酯对脑缺血再灌注大鼠的脑组织中丙二醛(MDA)含量及对超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响。结果模型组大鼠在RI 24 h、RI 72 h及RI 144h时,MDA含量明显高于假手术组;而SOD和GSH-PX活性降低。D-聚甘酯可降低MDA含量,升高SOD和GSH-PX活性,尤其是在RI 144 h。结论 D-聚甘酯对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抗缺血性脑组织中的自由基有关。     

甘糖酯对大鼠肝脏CuZn-SOD mRNA表达和酶活的诱导作用

目的探讨甘糖酯对大鼠肝脏CuZn-SOD的诱导作用。方法RT-PCR法检测甘糖酯po后的Wistar大鼠肝脏中CuZn-SOD mRNA的表达情况;亚硝酸盐法测定肝组织中CuZn-SOD酶活。结果po甘糖酯后,高剂量组大鼠肝组织的SOD mRNA水平与对照组相比有显著的差异(P<0.01);高剂量组大鼠肝组织CuZn-SOD活力与对照组相比有非常显著的差异(P<0.001),而中剂量组和低剂量组CuZn-SOD活力与对照组相比有显著的差异(P<0.01)。结论甘糖酯能够诱导大鼠肝组织中CuZn-SOD mRNA的表达,并提高其酶活,而且其作用随剂量的增加而提高。     

2型糖尿病大鼠主动脉内皮细胞氧化损伤及缬沙坦的保护作用

目的探讨2型糖尿病大鼠氧化应激与主动脉内皮细胞损伤的关系,观察缬沙坦对两者的影响。方法SD大鼠,用长期高能量饮食加小剂量注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制模型。注射STZ12wk末,将大鼠分为3组:正常组、糖尿病组、缬沙坦治疗组(24mg·kg-1·d-1,灌胃给药8wk)。在注射STZ12和20wk末,检测大鼠的内皮依赖性血管舒张反应及主动脉内皮形态,血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,以及主动脉一氧化氮合酶(NOS)基因表达情况。结果①12wk末,糖尿病大鼠主动脉对低浓度乙酰胆碱(ACh)舒张反应减弱,局部内皮隆起,血清SOD、GSH-Px活性增强,MDA和NO含量增加,主动脉iNOS mRNA表达明显上调,eNOS mRNA表达无明显改变。②20wk末,糖尿病大鼠主动脉对各浓度ACh的反应性均减弱,主动脉内皮变性、坏死,血清SOD、GSH-Px活性减弱,MDA含量进一步增加,NO含量下降,主动脉iNOS mRNA表达仍升高,eNOS mRNA表达降低,缬沙坦治疗后能减轻主动脉病变,改善血清SOD、GSH-Px、MDA、NO及主动脉NOS mRNA表达的异常。结论糖尿病大鼠的氧化应激和NO系统的紊乱参与了主动脉病变过程,增强机体抗氧化能力及调节NO生成可能是缬沙坦发挥主动脉保护作用的机制之一。     

二苯乙烯苷对动脉粥样硬化大鼠主动脉胞间粘附分子1、血管细胞粘附分子1及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法采用高脂饲料喂饲+维生素D37MU·kg-1ip1次制备大鼠AS模型。造模12周后治疗性ig给予TSG30,60和120mg·kg-1·d-1。给药6周后,采用黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸比色法测定血清丙二醛(MDA)含量,Western蛋白印迹法检测主动脉胞间粘附分子1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,逆转录聚合酶链反应法检测主动脉ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达,免疫组织化学法检测主动脉VEGF蛋白的表达。结果与正常组相比,AS模型组大鼠血清SOD活性明显降低,MDA水平明显提高,主动脉ICAM-1,VCAM-1及VEGF mRNA和蛋白表达显著增高。与模型组相比,TSG给药6周能明显提高大鼠血清SOD活性,降低MDA水平,对主动脉ICAM-1,VCAM-1及VEGF mRNA和蛋白表达均有明显抑制作用。结论TSG对大鼠实验性AS具有治疗作用,其机制可能与其抗氧化和调节细胞因子分泌有关。     

甘糖酯对实验糖尿病大鼠粘附分子-CD54、CD106、CD62p的影响

目的观察糖尿病大鼠肾脏、主动脉等粘附分子的变化及甘糖酯干预的影响,为早期防治糖尿病并发症提供科学依据.方法实验分正常对照、糖尿病对照、高、低剂量甘糖酯共4组,通过免疫组织化学方法观察大鼠肾脏和主动脉CD54和/或CD106的表达,应用流式细胞仪测定血中单个核细胞表面CD54、血小板表面CI)62p的表达水平;应用甘糖酯治疗8周后,观察上述指标的变化.结果(1)血单个核细胞表面CD54测定表明高剂量甘糖酯组有明显降低,(CD54高=36.04±11.01%,VS CD54DM=65.09±14.92%,P＜0.05),而低剂量甘糖酯组降低不明显;甘糖酯时血小板表面CD62P表达影响不大;(2)肾脏和主动脉CD54、CD106免疫组化显示甘糖酯能降低其表达并减轻组织病理变化,且与剂量有关.(3)甘糖酯有降低血糖的作用,并与剂量有关(高剂量组BG治疗前=20.93土4.22mmol@L-1,BG治疗后=15.76±2.39mmol@L-1,P＜0.05;低剂量组BG治疗前=17.35±1.13mm0l@L-1,BG治疗后=13.52±6.24mmol@L-1,P＞0.05).结论糖尿病粘附分子的增加可能是糖尿病肾病和大血管病变的重要发病因素,甘糖酯可降低CD54、CD106对糖尿病并发症有延缓和改善作用.     

复合磷酸酯酶对大鼠高脂血症性脂肪肝的作用

目的研究复合磷酸酯酶对高脂血症性脂肪肝的防治作用.方法连续灌胃脂肪乳剂30天,复制大鼠高脂血症性脂肪肝模型,造模同时给药;测定肝脏中TC、TG、MDA含量及SOD活性,观察大鼠肝组织病理变化.结果与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TC、TG、MDA显著升高,SOD活性显著降低,肝细胞中出现明显的脂肪变性,而复合磷酸酯酶可以降低模型大鼠肝脏TG、TC、MDA含量,提高SOD活性,改善肝细胞脂肪变性程度.结论复合磷酸酯酶能够抑制高脂血症性脂肪肝大鼠肝脏TC、TG、MDA的异常增加,增强肝脏SOD活性,减少肝脏内脂肪的沉积,对高脂血症性脂肪肝有较好的防治作用.     

甘糖酯降低实验性糖尿病大鼠肾脏ICAM-1,VCAM-1表达

目的探讨甘糖酯(PGMS)对糖尿病大鼠肾脏细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响和保护作用.方法链尿佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病.甘糖酯(52,26mg·kg-1·d-1)治疗8周,测定血糖、糖化血红蛋白、肾脏/体重,24h尿蛋白排泄率,利用免疫组织化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)技术检测肾脏组织ICAM-1,VCAM-1分布及表达.结果与糖尿病模型组比较,PGMS有减轻肾脏肥大趋势;降低尿蛋白排泄率(P＜0.05);免疫组化显示PGMS能明显减少ICAM-1,VCAM-1在肾脏组织的分布;RT-PCR,Western bbt结果显示PGMS能明显降低ICAM-1,VCAM-1 mRNA和蛋白水平表达,高剂量组效果优于低剂量组但无统计学差异.ICAM-1,VCAM-1表达与肾脏肥大、尿蛋白存在部分正相关.结论PGMS能降低STZ诱发的糖尿病大鼠肾脏ICAM-1,VCAM-1 mR-NA和蛋白水平.     

灵芪安神口服液影响老年大鼠MDA,SOD的实验研究

目的:观察灵芪安神口服液(LQASL)对老年大鼠丙二醛(MDA),超氧化歧化酶(SOD)的影响。方法:LQASL按10g·kg~(-1)·d~(-1),20g·kg~(-1)·d~(-1),40g·kg~(-1).d~(-1),60g.kg~(-1)·d~(-1)给老年大鼠连续灌胃30d,测定其血清、组织中SOD活性和MDA含量。结果:LQASL4个剂量组均能明显降低老年大鼠血清中MDA含量,明显提高其血清、组织中SOD活性,并可使老年大鼠组织中MDA含量减少,以20g·kg~(-1)·d~(-1)剂量效果最佳(P<0.001)。结论:LQASL可能是通过改善自由基代谢发挥其抗衰老作用。     

云芝多糖B对大鼠单核细胞趋化蛋白—1基因表达的影响

目的:探究野生云芝多糖水溶性新组分CVPS-B对大鼠脾细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因表达的影响.方法:以β-actin为内标准物,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CVPS-B分别对正常情况下以及脂多糖(LPS)诱导下大鼠脾细胞MCP-I基因表达的影响,并对RT-PCR产物进行测序,以证实其特异性.结果:(1)正常情况下大鼠脾细胞MCP-1 mRNA的表达(MCP-1/β-actin的比值)生理盐水对照组为1.4±0.3;CVPS-B三个剂量组(10、30和50mg·kg~(-1)·d~(-1),ip,连续4d)分别为:1.6±0.4、1.7±0.5和1.5±0.4,后三组与对照组无显著差异(P>0.05);(2)大鼠腹腔给药LPS(10μg·kg~(-1)可使脾细胞MCP-1 mRNA的表达增加114％.(3)CVPS-B4个剂量组(5、10、30和50mg·kg~(-1)·d~(-1),ip,连续4d)可使LPS(10μg·kg~(-1),ip)诱导的脾细胞MCP-1 mRNA的表达分别减低51％,70％,84％和99％(n=6).结论:CVPS-B可预防性抑制LPS对大鼠脾细胞MCP-1基因表达的诱导作用,且呈剂量依赖性,但对正常情况下大鼠脾细胞MCP-1 mRNA的表达则无明显影响.     

灵芝多糖抑制NADPH氧化酶表达防治大鼠动脉粥样硬化

目的探讨灵芝多糖对食饵性实验动脉粥样硬化(AS)大鼠的防治作用及其作用机制。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、动脉粥样硬化模型组、灵芝多糖低、中、高剂量预防组。12周末颈动脉取血检测血清丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;处死大鼠,光镜观察各组主动脉粥样斑块形成情况;取主动脉测定活性氧(ROS)含量;免疫印迹观察其Nox4、p22phox蛋白表达情况。结果灵芝多糖各剂量组均可有效抑制动脉粥样硬化病理进程,降低血清MDA、SOD及主动脉ROS含量等氧化应激反应指标,减少主动脉Nox4、p22phox蛋白表达。结论灵芝多糖通过下调Nox4、p22phox等NADPH氧化酶蛋白表达水平抑制主动脉氧化应激反应,明显改善大鼠动脉粥样硬化。     

α-硫辛酸抗心肌肥厚作用

目的研究α 硫辛酸（α LA）抗异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的作用。方法24只大鼠随机分为模型组、对照组、硫辛酸组,每组8只。模型组和硫辛酸组建立心肌肥厚模型,硫辛酸组同时给予α 硫辛酸盐液腹腔注射,100 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1,qd。测定大鼠全心质量指数（HW/BW）、左心室质量指数（LVW /BW,即LVI）,放射免疫分析法和逆转录聚合酶链反应（RT PCR）检测大鼠心肌组织血管紧张肽Ⅱ（AngⅡ）、AT1R含量及AT1mRNA表达水平,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与对照组比较,模型组大鼠HW/BW、LVI明显升高,心肌AngⅡ、AT1R含量及AT1mRNA表达水平增高,心肌和血清MDA含量增高,SOD含量降低（P＜0.01）;与模型组比较,硫辛酸组各心脏指标均明显减低,心肌组织MDA、AngⅡ、AT1R含量及AT1mRNA表达水平降低,SOD含量增高（P＜0.01）。结论氧化应激参与心肌肥厚的发生发展,α LA通过抗氧化作用抑制心肌肥厚的发生发展。     

葡萄内酯对脑缺血致血管性痴呆大鼠的保护作用

目的:考察葡萄内酯对脑缺血致血管性痴呆大鼠的保护作用。方法:SD大鼠随机分成假手术组、模型组、安理申组(1.028 mg.kg-1)和葡萄内酯低、中、高剂量(0.257,0.514,1.028 mg.kg-1)组,ig给药,连续52 d。采用永久性结扎大鼠双侧颈总动脉法建立血管性痴呆模型,以Morris水迷宫试验进行行为学测试,观察大鼠的学习记忆能力,检测大鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶(AChE)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)和谷氨酸含量的变化。结果:中、高剂量葡萄内酯可以明显缩短大鼠的逃避潜伏期,提高其穿越平台次数,增强大鼠的空间学习记忆能力,与模型组比较有极显著性差异(P<0.01)。葡萄内酯各剂量均能降低血管性痴呆大鼠AChE活性以及MDA和谷氨酸含量,与模型组相比,均有显著性差异(P<0.01)。葡萄内酯中、高剂量组的SOD活性明显低于模型组(P<0.01)。结论:葡萄内酯对血管性痴呆有保护作用,其作用机制可能与其降低MDA含量、乙酰胆碱酯酶活性以及谷氨酸对脑神经的毒害作用有关。     

xy9902抗大鼠心肌重构作用的实验研究

目的研究新型选择性雌激素受体调节剂(SERMs)xy9902对大鼠心肌重构的干预作用,并初步探讨其机制。方法腹主动脉缩窄复制压力负荷增高致大鼠心肌重构动物模型,术后2周存活动物分为模型组(AAC)、卡托普利组(Cap)及xy9902组(xy9902),另设假手术组(Sham)。Mal-lory三色染色观察心肌组织胶原纤维含量的变化。黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量。结果与Sham组比较,AAC组心脏指数HMI及LVMI增加,心肌细胞排列紊乱、增粗,细胞间隙明显增宽,可见大量异常胶原纤维堆积,CVF增大,然而Cap组和xy9902组明显好转。AAC组心肌SOD活性下降,MDA含量增加,Cap组和xy9902组与AAC组比较,SOD活性增加,MDA含量下降(P<0.01)。相关分析结果表明CVF与SOD/MDA比值呈负相关(P<0.01)。结论 xy9902对心肌重构有防治作用,其对体内氧化应激平衡的正向调控可能是抗心肌重构的分子机制之一。