丹参多酚酸盐对肝纤维化大鼠NF-κB和IκBα表达的影响

目的观察丹参多酚酸盐的抗肝纤维化作用及其机制。方法将36只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和给药组。50%CCl_4花生油溶液(1 mL·kg~(-1))灌胃诱导建立肝纤维化模型。给药组同时每日一次腹腔注射丹参多酚酸盐20 mg·kg~(-1)。6 wk后观察大鼠肝脏大体形态、肝重-体重比;运用HE和Masson三色染色检测肝纤维化的变化;全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST);放射免疫法测定血清Ⅳ型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)含量;Western blot检测肝脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达。结果与模型组相比,给药组肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构改善,血清中ALT、AST、CIV、LN表达降低(P<0.05)。与模型组相比,给药组胞质中NF-κB和lκBα蛋白的表达上调,胞核中NF-κB蛋白表达下调(P<0.01)。结论丹参多酚酸盐可通过调节大鼠肝脏NF-κB和lκBα的表达来抑制肝纤维化的进展     

丹酚酸A通过调节NF-κB/IκBα信号通路抑制肝纤维化

目的探索丹酚酸A抗四氯化碳(CCl_4)诱导的大鼠肝纤维化的防治及作用机制。方法将48只SD大鼠随机分为空白对照组、CCl_4模型组、丹酚酸A低剂量给药组和丹酚酸A高剂量给药组。除空白对照组外,其他3组每周2次给予50%CCl_4/花生油溶液(1 m L·kg-1)灌胃诱导建立肝纤维化模型,丹酚酸A低剂量和高剂量给药组大鼠同时每日1次给予腹腔注射丹酚酸A(分别为5 mg·kg-1与15 mg·kg-1)。6周后处死大鼠,HE和Masson染色法进行肝组织病理学观察;全自动生化分析仪检测血清肝功能指标(谷丙转氨酶及谷草转氨酶);放射免疫法测定血清肝纤维化指标(透明质酸、Ⅳ型胶原、层黏蛋白和Ⅲ型前胶原肽);Western blot检测肝脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达;Q-PCR检测炎症因子以及肝星状细胞激活因子基因水平的表达。结果与CCl_4模型组相比,丹酚酸A给药组能够显著改善大鼠肝功能,降低大鼠肝纤维化程度(P<0.05)。与此同时,丹酚酸A给药组能够提高肝细胞浆中NF-κB、IκBα蛋白的表达,并降低细胞核NF-κB蛋白的表达,且能够抑制炎症因子与肝星状细胞激活因子基因水平的表达。结论丹酚酸A可通过调节NF-κB/IκBα信号通路发挥抗肝纤维化作用。     

舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用和NF-κB/IκBα信号通路影响的研究

目的探讨舒血宁注射液对大鼠肝纤维化的防治作用及NF-κB/IκBα信号通路影响的研究。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(简称对照组)、肝纤维化模型组(简称模型组)、舒血宁注射液给药组(简称给药组),每组12只。每周2次50%CCl4花生油溶液(1 m L·kg-1)灌胃6周建立大鼠肝纤维化模型。同时,给药组每日一次腹腔注射舒血宁注射液15 mg·kg-1。观察大鼠的生活状况、肝脏大体形态;HE染色检测大鼠肝脏病理学的变化;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST);放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、IV型胶原(CIV)、层黏蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢP);Western blot检测肝脏组织细胞核中NF-κB和细胞质中NF-κB、IκBα蛋白的表达。结果舒血宁注射液治疗后大鼠肝功能指标有明显下降,血清肝纤维化指标有显著降低,并且大鼠肝脏病理组织学结构有明显改善(P<0.05)。与模型组相比,舒血宁注射液能够上调肝组织细胞质中NF-κB和IκBα蛋白的表达,下调细胞核中NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。结论舒血宁注射液可通过抑制NF-κB/IκBα信号通路发挥抗肝纤维化的作用。     

泻心汤有效组分不同配伍对内毒素肺损伤大鼠NF-κB及IκB表达的影响

目的研究泻心汤有效组分及其配伍对内毒素肺损伤大鼠NF-κB及IκB表达的影响。方法大鼠灌胃给予黄芩总黄酮提取物(TFL)、大黄总游离蒽醌提取物(TFA)、大黄总结合蒽醌提取物(TCA)、TFL与TFA配伍高、低剂量(A高A低)、TFL与TCA配伍(B)及醋酸地塞米松(Dex)4d,末次给药后1h股静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠内毒素肺损伤模型,1、2、4h各组分别处死6只动物,收集肺组织,免疫印记(Western blot)检测核因子κB(NF-κB)、κB抑制因子(IκB)的蛋白表达。结果大黄总游离蒽醌、A高及Dex在1、2、4h均能够明显抑制NF-κB p65的核转位(P<0.01),所有给药组在2、4h均能够明显抑制胞质中的IκBα的降解(P<0.01)。结论泻心汤有效组分及其配伍对内毒素肺损伤大鼠保护作用与抑制NF-κB的核转位及IκB的降解有关。     

宝华玉兰种子挥发性化学成分的GC-MS分析

目的分离鉴定宝华玉兰（Magnolia zenii Cheng.）种子的挥发性成分。方法采用气—质联用（GC-MS）技术,应用峰面积归一化法测定各组分的相对含量。结果气相色谱共分离出25个色谱峰,鉴定出其中19种化合物,占该挥发性成分总量的99.60%。结论宝华玉兰种子的挥发性成分以tomentosin（95.48%）为主。     

NF-κB、IκB在阿霉素肾病大鼠中的表达及大黄蛰虫丸的干预作用

目的:探讨NF-κB、IκB在阿霉素肾病大鼠中的表达及大黄蛰虫丸的干预作用。方法:SD大鼠一次性尾静脉注射阿霉素5 mg/kg,随机分为模型组(n=30)和大黄蛰虫丸组(n=15),另以8只正常大鼠作为对照组(正常组),进行对比观察。于实验第7天、14天,各处死4只模型组大鼠,留取肾脏标本待测。实验第28天,大鼠全部处死,观察大鼠超微结构的改变,应用免疫荧光方法及免疫组织化学方法定位及定量分析检测NF-κB、IκB-α的表达变化。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肾小球足细胞结构受到损害,足细胞足突融合,肾小球内NF-κB表达增加[(2.491±0.551)×106],IκB-α表达下调[(0.947±0.631)×106],大黄蛰虫丸可明显抑制阿霉素肾病大鼠肾小球内NF-κB的表达[(1.165±0.374)×106],减轻足细胞足突融合。结论:大黄蛰虫丸可能通过影响NF-κB、IκB的表达而对足细胞起保护作用。     

罗格列酮对糖尿病大鼠大血管中磷酸化IKK和IκBα表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠大血管组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IKK)及其下游作用物NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病组(B)和罗格列酮治疗组(C),C组给予5mg·kg-1·d-1罗格列酮生理盐水混悬液灌胃,A组和B组给予等体积生理盐水灌胃,用免疫组织化学检测8周和12周后颈动脉中磷酸化IKK和磷酸化IκBα表达的改变,光镜、电镜观察各组颈动脉形态的改变。使用图像分析系统分析颈动脉内中膜厚度(IMT),分离血清测血糖、血脂以及C肽。结果与正常对照组相比,糖尿病组及罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达增加,IMT增加(P<0.05);而罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达低于糖尿病组,IMT下降(P<0.05)。结论罗格列酮可通过抑制IKK活化,进而抑制IκBα降解,降低NF-κB活化水平,从而减轻大血管病变。     

蒙花苷对TNF-α诱导的血管内皮细胞炎症损伤及TLR4/IκBα/NF-κB信号通路的影响

目的 以肿瘤坏死因子(TNF-a)刺激人脐静脉内皮细胞(EA.hy926),体外模拟血管内皮细胞炎症损伤模型,探讨蒙花苷(Buddleoside,BUD)对血管内皮细胞的保护作用和机制。方法 MTT法检测TNF-a和蒙花苷对EA.hy926细胞活性的影响;采用TNF-a(50 ng.mL_-1)刺激EA.hy926细胞,加入不同浓度(5、15和25 mmol.L_-1)蒙花苷处理,DAPI染色法测定EA.hy926细胞与单核细胞(THP-1)的黏附能力;Western Blot法检测细胞中Toll样受体(TLR4)、核因子-kB抑制蛋白(IκB-α)、核因子-kB(NF-kB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)等蛋白表达;RT-PCR法检测ICAM-1、VCAM-1等基因mRNA的表达;ELISA法检测细胞上清液中白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的含量。结果 蒙花苷可显著抑制TNF-a刺激EA.hy926细胞与THP-1细胞间黏附作用,降低EA.hy926细胞分泌的炎症因子IL-1、IL-6和IL-8水平。Western blot和RT-PCR结果表明蒙花苷能减少EA.hy926细胞中TLR4、NF-kB、ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达量及ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达量,同时能升高细胞中IκB-α的蛋白表达量。结论 蒙花苷能缓解血管内皮细胞炎症损伤,其作用机制可能主要是通过抑制TLR4/IΚBα/NF-κB信号通路发挥效用。     

穿心莲内酯抑制IKK/IκBα/NF-κB信号通路改善抑郁症大鼠的抑郁样行为

目的 探讨穿心莲内酯(Andro)通过抑制核转录因子-κB抑制蛋白激酶(IKK)/核因子κB抑制蛋白(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路改善抑郁症(MDD)大鼠的抑郁样行为。方法 随机取12只SD大鼠作为空白对照组(NC组),其余大鼠采用慢性不可预知轻度应激(CUMS)结合孤养模式造模,将造模成功大鼠随机平分为模型组(Mod组)、Andro组(25 mg·kg^-1·d^-1)、Res组(30 mg·kg^-1·d^-1 IKK/IκBα/NF-κB信号通路激活剂Res)、Andro+Res组(25 mg·kg^-1·d^-1Andro+30mg·kg^-1·d^-1 Res),每组12只大鼠,Mod组和NC组灌胃等量0.9%氯化钠溶液。旷场实验、糖水偏好实验、强迫游泳实验、平衡木实验评估大鼠行为;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫荧光染色检测小胶质细胞、星形胶质细胞活性;Western ...     

新型冠状病毒非结构蛋白NSP13通过调控IκBα蛋白降解抑制NF-κB信号通路

目的 研究新型冠状病毒非结构蛋白13(NSP13)调控NF-κB信号通路的作用机制。方法 利用GV367-NSP13-FLAG慢病毒感染的方法制备高表达NSP13的A549细胞（A549-NSP13）和A549对照组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测NF-κB下游细胞因子白细胞介素6(IL-6)和趋化因子5(CCL-5)表达水平;Western印迹法检测NF-κB信号通路P65、磷酸化P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达。放线菌酮10 mg·L-1处理细胞0,15,30,45,90和120 min,Western印迹法检测IκBα蛋白半衰期。结果 与A549对照组相比,A549-NSP13细胞检测到FLAG标签蛋白条带,且NSP13 mRNA表达显著上调（P<0.01）,表明A549-NSP13细胞系构建成功。与A549对照组相比,A549-NSP13细胞IL-6 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）及CCL-5 mRNA和蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）均显著降低;磷酸化P65蛋白表达下降（P<0.01）,而...     

大鼠颅脑损伤急性期脑组织NF-κB、TNF-α的表达及丙泊酚的干预效应

目的:探讨大鼠颅脑损伤急性期脑组织损伤区NF-κB、TN-α表达及丙泊酚于预的影响.方法:参照改良Feeney自由落体脑损伤装置制备大鼠中度脑损伤模型,将54只大鼠随机分为假手术组、手术对照组、丙泊酚干预组,每组分别于伤后6 h、12 h、24h处死实验动物,检测各时点各组脑组织NF-κB、TNF-α的表达.结果:大鼠脑组织NF-κB、TNF-α伤后6 h、12 h、24h均明显升高,各时间点与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).脑组织内NF-κB和TNF-α之间呈直线相关(r=0.716,P<0.01).丙泊酚干预组脑损伤后,大鼠脑组织NF-κB和TNF-αNF各时点上升幅度均明显低于手术对照组,与手术对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:丙泊酚可在一定程度上抑制NF-κB的活化和TNF-α的高度表达,阻止炎症级联反应的进一步扩大,对颅脑损伤急性期脑组织有一定的保护作用.     

NF-κB/IκB在二苯乙烯苷抑制过氧化氢诱导内皮细胞凋亡中的表达变化

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制因子(IκB)基因表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为对照组、H2O2组、TSG组,采用Ho-echst 33258染色观察细胞凋亡形态,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NF-κB与IκB mR-NA表达,Western blot检测NF-κB p65、IκB蛋白表达。结果与对照组比较,H2O2组凋亡细胞数增多,细胞凋亡率增加,细胞增殖降低;NF-κB mRNA和蛋白表达增加,IκB mRNA和蛋白表达降低,差异均有显著性(P<0.01)。经TSG预处理后,细胞的增殖率较H2O2组增加,细胞凋亡率减少;NF-κBmRNA和蛋白表达减少,IκB mRNA和蛋白表达增加(P<0.01)。结论二苯乙烯苷能抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,其作用机制可能与调节NF-κB/IκB表达有关。     

IκBα、IKKα、IKKβ与Tim-3在肿瘤患者中表达及相关性研究

摘要：目的：探讨肿瘤患者的IκBα、IKKα、IKKβ-mRNA与Tim-3 mRNA表达的相关性。方法：采集32例肿瘤患者和34例体检者外周血,提取RNA并反转录成cDNA,运用实时定量PCR方法检测IκBα、IKKα、IKKβ-mRNA及Tim-3 mRNA的表达。结果：肿瘤患者的IκBα、IKKα、IKKβ-mRNA与Tim-3 mRNA具有相关性。其中：IkBα=0.749 Tim-3;Ikkα=0.723 Tim-3;Ikkβ=0.910Tim-3。结论：肿瘤患者NF-κB抑制蛋白IkBα的活性、IκBs激酶（IKK）酶活性都与Tim-3分子具有相关性,其中Ikkβ与Tim-3相关性更密切。研究提示肿瘤病人的免疫功能与IKKβ的活性密切相关。     

人IκBα突变体诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用

目的 探讨人IκBαM诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用.方法 将DA→Lewis大鼠原位肝移植模型分三组:组Ⅰ为对照组,组Ⅱ为PcDNA3.0空载体转染组(移植前两天行人PcDNA3.0转染供肝),组Ⅲ为PcD-NA3.0-IκBαM转染组(移植前两天行人PcDNA3.0-IκBαM转染供肝).于术后1d,3d,7d,14d检测肝功能、血清IL-2.以及外周血CD4<' >和CD25<' >的表达变化.结果 组Ⅲ与组Ⅰ和组Ⅱ相比较:①肝脏功能指标术后3d,7d具有显著性差异(P<0.05);②术后3d、7d外周血单核细胞表面CD4、CD25的表达水平明显升高,具有显著性差异(P<0.05);③术后3d,7d血清IL-2明显降低,具有显著性差异(P<0.05).结论 IκBαM具有诱导免疫耐受的作用.     

X射线照射对RAW264·7细胞TNF-α和NF-κB表达的影响

目的探讨X射线照射诱发小鼠巨噬细胞分泌TNF-α和NF-κB的规律。方法以8Gy X射线单次照射小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,并于照后不同时间收集细胞培养上清液,采用ELISA法检测RAW264.7细胞TNF-α分泌水平;以8Gy X射线单次照射小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,并于照后不同时间收集细胞并进行裂解,采用Western blot实验检测NF-кB（p65）的表达。结果 X射线照射能使小鼠巨噬细胞分泌TNF-α增加,在照射后34h达到一次分泌峰值;细胞核中NF-κB（p65）分布增多,并且随着时间的延长其核移位明显增多,照射后4h达到一次最高值。结论 X射线照射能诱发小鼠巨噬细胞TNF-α和NF-κB表达增强。     

甘草酸苷通过MAPK p38/NF-κB通路对炎症后色素沉着的抑制作用

目的 探讨甘草酸苷对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激后角质形成细胞分泌COX-2/PGE₂和对共培养黑素细胞合成黑素的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 以人表皮角质形成细胞为对象,分为对照组、LPS组、甘草酸苷组（2,5,10 μmol·L^-1）。采用ELISA法检测PGE₂的含量,Western blot检测细胞COX-2、NF-κB p-p65、p-IKKα/β和MAPKp-p38蛋白的表达,比色法检测共培养黑素细胞的黑素含量。结果 与对照组比较,LPS显著增加角质形成细胞COX-2、NF-κB p-p65、p-IKKα/β、MAPK p-p38蛋白表达（P<0.01）和PGE₂的分泌（P<0.01）,增加共培养黑素细胞黑素生成（P<0.01）。与LPS组比较,甘草酸苷呈剂量依赖性抑制COX-2、NF-κB p-p65、p-IKKα/β、MAPK p-p38蛋白表达（P<0.05）和PGE₂的分泌（P<0.05）,减少共培养黑素细胞黑素生成（P<0.05）。结论 甘草酸苷通过抑制角质形成细胞MAPK p38/NF-κB通路,从而降低COX-2/PGE₂的表达,减少共培养黑素细胞合成黑素。     

双环醇对脂多糖诱导巨噬细胞iNOS蛋白的表达和NF-κB活化的抑制作用

目的炎症是肝炎病毒或其它因素所致的肝损伤的一个共同特征,该文目的系研究抗肝炎新药双环醇对与炎症反应相关分子的调节作用。方法以无毒性浓度双环醇预先与巨噬细胞株RAW264.7和小鼠腹腔巨噬细胞温孵1h后,加入一定量脂多糖(LPS)共同培养适当时间以诱导上述细胞的活化,培养上清中NO2-的含量和TNF-α的水平分别用Griess试剂及L929细胞株生物法测定,用Westernblot方法测定iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化。结果双环醇在0.1～0.5mmol.L-1剂量依赖性降低1mg.L-1LPS引起的RAW264.7和小鼠腹腔巨噬细胞NO的释放以及TNF-α的分泌,双环醇0.5mmol.L-1能够明显抑制1mg.L-1LPS引起的iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化。结论双环醇对与炎症相关的调控因子iNOS蛋白的表达和NF-     

核转录因子NF-κB在中耳胆脂瘤中的表达

胆脂瘤型中耳炎是一种临床危害很大的中耳疾病,是耳鼻咽喉科常见的疾病之一,它主要以上皮细胞增生、角化上皮脱屑堆积为特征,虽然其不产生与恶性肿瘤同样的无限增殖,但它可引发骨质破坏,侵蚀中耳及内耳的结构,引起严重的颅内并发症,严重危害生命.目前确切机理尚未完全明了.本试验重在探讨核转录因子NF-κB在中耳胆脂瘤发病机制中的作用.……     

NF—κB／IκB—α信号通路对ATRA诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨NF-κB／IκB-α信号通路对全反式维甲酸（ATRA）诱导HL-60细胞凋亡的影响。方法将HL-60细胞与不同浓度的ATRA共同孵育，MTF法观察ATRA对细胞增殖作用，流式细胞术及电镜分析细胞凋亡．Western—Blot检测NF-KB及JKB吨的变化。结果MTT显示ATRA呈时间-剂量依赖方式抗HL-60细胞增殖．作用72h流式细胞术DNA直方图上出现典型的亚二倍体凋亡峰．透射电镜下见细胞核染色质致密浓缩．凋亡小体形成，Western—Blot产物艟示HL-60细胞NF—κBp65下降，而IκB—α上升。结论ATRA能抗HL-60细胞增殖诱导捌亡．该过程可能与抑制IKB—α的降解阻止NF—κB的活化有关。     

参芪扶正注射液对RAU大鼠TNF-α、NF-κB p65表达影响

目的建立复发性口疮(RAU)大鼠动物模型,探讨参芪扶正注射液对RAU大鼠TNF-α、NF-κBp65表达影响。方法大鼠脊柱两侧注射大鼠口腔黏膜抗原乳化液,建模后将溃疡大鼠随机分为3组:正常组(GroupN)不建模;对照组(GroupC)建模正常饮食水;参芪扶正注射液组(GroupS)大鼠按8ml.Kg-1.d-1剂量灌胃20天。检测给药后大鼠RAU炎性细胞因子TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果实验大鼠于最后一次抗原注射6d后开始出现口腔溃疡。口腔溃疡炎症细胞因子TNF-a表达水平均明显低,炎性细胞胞核内NF-kB P65低表达。结论参芪扶正注射液对RAU大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制炎性细胞NF-kB P65的活化及减少炎性细胞因子的分泌有关。