梗阻性黄疸对大鼠肾脏水通道蛋白-3 mRNA表达的影响及意义

目的检测梗阻性黄疸对大鼠肾脏AQP-3基因表达的影响。方法成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为A、B、C、D 4组,A组为梗阻性黄疸7d实验组,B组为A组对照组,C组为梗阻性黄疸14d组,D组为C组对照组。梗阻性黄疸实验动物建立后第7天及第14天分别终止A、B及C、D组动物实验,检测胆红质、血肌酐、尿素氮等生化指标,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组大鼠肾脏AQP-3mRNA的表达,数据处理采用SPSS 11.0统计软件进行统计分析。结果各组大鼠血清肌酐检测结果差异无统计学意义;血尿素氮检测C、D组间差异有统计学意义(P<0.05),而其余各组间差异无统计学意义;AQP-3mRNA表达结果显示A、B组间,C、D组间差异有统计学意义(P<0.01),A、C组间,B、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论梗阻性黄疸14d内血清肌酐可无明显变化;梗阻性黄疸14d时可出现尿素氮的轻度增高;梗阻性黄疸时AQP-3mRNA表达上调,但并不随着胆道梗阻时间的延长而改变。     

胰岛素样生长因子1对大鼠雪旺细胞Neuritin表达的影响

目的 探讨高糖状态下胰岛素样生长因子1(IGF-1)对体外培养的大鼠雪旺细胞neuritin mRNA及蛋白表达的影响.方法 体外培养的大鼠雪旺细胞分为五组:A组为非干预对照组;B、C、D和E组分别以浓度为0.1、1、10和100 ng/ml的IGF-1并高糖同步处理36 h.用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹实验分别检测大鼠雪旺细胞neuritin mRNA和蛋白的表达量.结果 B、C组雪旺细胞neuritin mRNA和蛋白表达量与A组相仿(P＞0.05),D、E组雪旺细胞neuritin mRNA和蛋白表达量均显著高于A组(P＜0.05).D组与E组雪旺细胞neuritin mRNA和蛋白表达量比较无统计学差异(P＞0.05).结论 IGF-1能上调体外高糖培养的大鼠雪旺细胞neuritin mRNA及蛋白的表达量.     

右美托咪定对LPS诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞NF-κB及AQP-5表达的影响

目的研究右美托咪定(DEX)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮(AT-Ⅱ)细胞核转录因子-κB(NF-κB)及水通道蛋白5(AQP-5)的影响。方法原代培养大鼠AT-Ⅱ细胞,建立LPS诱导急性肺损伤细胞(ALI)模型,实验分为对照组、LPS组(1μg·mL^-1)、LPS+DEX(0.1 ng·mL^-1、1 ng·mL^-1、10 ng·mL^-1)组。对照组置于正常条件下培养,LPS+DEX组在加入LPS前1 h分别加入相应浓度的右美托咪定,培养24 h后,MTT检测AT-Ⅱ细胞存活率,采用试剂盒测定各细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,Real-time qPCR、Western blotting分别检测各组NF-κB及AQP-5的mRNA和蛋白表达水平。结果LPS可导致AT-Ⅱ细胞损伤,降低细胞存活率,增加LDH释放;右美托咪定可在0.1~10 ng·mL^-1内以浓度依赖性提高损伤细胞的存活率,减少LDH的释放,抑制LPS诱导的AT-Ⅱ细胞中NF-κB的活化,上调AQP-5的表达。结论右美托咪定对LPS所致AT-Ⅱ细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能是下调NF-κB表达以及上调AQP-5表达。     

己酮可可碱对腹膜功能的影响及其机制研究

目的探讨己酮可可碱对腹膜功能的影响和可能机制。 方法将雄性SD大鼠45只随机分成3组各15只，A组每日腹腔内注射0.9%氯化钠溶液20 mL，B组和C组每天腹腔注射4.25%腹膜透析液20 mL，并在第8，10，12天加入LPS75 μg，C组在腹腔注射液中同时加入6 mg&#8226;kg 1己酮可可碱。5周后行2 h腹膜平衡实验测定腹膜功能，留取血液及腹膜透析液，ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)浓度；同时处死大鼠，留取肠系膜组织，RT PCR检测肠系膜组织VEGF mRNA表达水平。 结果B、C组超滤量及2 h透出液葡萄糖浓度/0 h透析液葡萄糖浓度(D2/D0 )比值均较A组明显减少( 均P＜ 0. 05)，B组较C组更明显；B、C组透析液尿素/血浆尿素浓度比值(D/Purea )较A组明显增加(P＜0. 05) ，B组较C组增加更明显；C组腹透液及血清中VEGF浓度，以及肠系膜VEGF mRNA表达较B组明显下降。血清及腹透液VEGF含量分别与D2/D0，D/Purea有较明显的相关性。结论己酮可可碱能有效改善腹膜功能，其机制可能与调节VEGF表达有关。     

丙泊酚对BV-2小胶质细胞活化的影响

目的探讨丙泊酚对脂多糖(LPS)诱导的BV-2小胶质细胞活化的影响及其可能机制。方法体外培养小鼠BV-2小胶质细胞,随机分为LPS 1μg/ml组(A组)、丙泊酚30μM组(B组)、LPS 1μg/ml+丙泊酚30μM组(C组)和空白对照组(D组)。采用RT-PCR检测各组细胞中IL-1β和TNF-αmRNA表达量,Western blot检测总糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的蛋白表达水平。结果 A、C组IL-1β、TNF-α及p-GSK-3表达量均较D组明显增加(P<0.05或P<0.01)。与A组相比,C组IL-1β和TNF-αmRNA表达量降低,而p-GSK-3β蛋白表达量增加(P<0.05)。结论丙泊酚30μM能在体外减轻LPS诱导的BV-2小胶质细胞释放IL-1β和TNF-α的水平,此作用可能与抑制GSK-3β活性有关。     

Effect of propofol on lipopolysaccharides-induced activation of BV-2 microglia cells

目的 探讨丙泊酚对脂多糖(LPS)诱导的BV-2小胶质细胞活化的影响及其可能机制.方法 体外培养小鼠BV-2小胶质细胞,随机分为LPS 1μg/ml组(A组)、丙泊酚30μM组(B组)、LPS1 μg/ml+丙泊酚30μM组(C组)和空白对照组(D组).采用RT-PCR检测各组细胞中IL-1β和TNF-α mRNA表达量,Western blot检测总糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β (p-GSK-3β)的蛋白表达水平.结果 A、C组IL-1β、TNF-α及p-GSK-3表达量均较D组明显增加(P＜0.05或P＜0.01).与A组相比,C组IL-1β和TNF-α mRNA表达量降低,而p-GSK-3β蛋白表达量增加(P＜0.05).结论 丙泊酚30 μM能在体外减轻LPS诱导的BV-2小胶质细胞释放IL-1β 和TNF-α的水平,此作用可能与抑制GSK-3β活性有关.     

复方竹叶石膏颗粒对家兔急性放射性食管损伤Bcl-2与Bax mRNA及蛋白表达的影响

目的 探讨复方竹叶石膏颗粒对家兔急性放射性食管炎组织中Bax和Bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响.方法 将40只雄性家兔随机分为空白对照组(A组)、单纯照射组(B组)、复方竹叶石膏颗粒组(C组)、康复新液组(D组),每组10只.B、C、D组均用6 mV-X射线对家兔食管单次照射32 Gy.C、D组于照射前1周照射至放疗结束后7d.4组均于照射后第7天留取家兔全长食管,检测Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平.结果 B组家兔食管组织中Bax mRNA与蛋白表达水平较A组升高,Bcl-2 mRNA与蛋白表达及Bcl-2/Bax值较A组降低(P＜0.05).C、D组Bcl-2 mRNA与蛋白表达水平及Bcl-2/Bax值高于B组,Bax mRNA与蛋白表达水平低于B组(P＜0.05).C组Bcl-2 mRNA与蛋白表达水平均高于D组(P＜0.05).结论 复方竹叶石膏颗粒能够防治急性放射性食管炎,其机制可能与上调Bcl-2基因与下调Bax基因的表达有关.     

NF-κB表达水平与大鼠慢性阻塞性肺疾病气道、肺血管重构的相关性

目的探讨NF-κB的表达水平与大鼠慢性阻塞性肺病(COPD)气道、肺血管重构的相关性。方法 24只♂SD大鼠随机分为4组。正常对照组(A):正常饲养4周;慢支组(B):于实验d1、14经气道内注入脂多糖(LPS),200μg/次,4周后检测;COPD组(C):d1、14经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h,共4周;COPD并肺动脉高压组(D):d1、14经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h/d,共6周,实验的最后2周在熏香烟的同时,给予18%低氧8h/d。各组测定气道阻力、肺血流动力学和右心室肥厚指数,观测气道炎症,气道重构以及肺小动脉的病理形态学改变,用免疫组化检测各组肺组织中NF-κB蛋白的表达,RT-PCR、Western blot检测肺组织中mRNA、蛋白的表达。结果①与A组相比,C、D组气道阻力明显增大(P<0.05)。②C、D组RVSP、mPAP和RV/LV+S都明显高于A组(P<0.05)。③与A组比较,C、D组气道重构指标细支气管管壁厚度与气管外径比值(MT%)、管壁面积和气管总面积比值(MA%)均明显增高(P<0.05)。④与A组相比,C、D组肌化型动脉百分比增多(P<0.05);D组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值(WT%)、管壁面积与血管总面积比值(WA%)比值增大(P<0.05)。⑤免疫组化示,C、D组NF-κB蛋白表达强于A组(P<0.05),C、D组间表达差异无显著性。⑥RT-PCR结果说明,与A组相比,C、D组NF-κB mRNA表达明显增强(P<0.05)。C组与D组间NF-κB mRNA表达也有差异(P<0.05)。⑦Western blot电泳结果显示,与A组相比,C、D组NF-κB蛋白表达明显增强(P<0.05),D组较C组NF-κB蛋白表达增强(P<0.05)。结论 COPD早期已出现肺血流动力学变化,随疾病进展出现进行性加重的肺血管、气道重构,同时NF-κB的表达逐渐增强,说明NF-κB与COPD的肺血管、气道重构有关。     

内毒素耐受新生大鼠肺泡巨噬细胞糖皮质激素受体表达及意义研究

目的了解肺泡巨噬细胞在产生内毒素耐受时,糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在转录水平的表达。方法培养新生大鼠肺泡巨噬细胞,将细胞随机分为4组(A组为正常对照组,B、C组为小浓度LPS耐受组,D组为高浓度LPS直接刺激组),分别用不同浓度脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激肺泡巨噬细胞24h后,再改变LPS浓度刺激上述各组细胞24h,分别提取RNA和蛋白质,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GR的mRNA表达。结果GR mRNA与β-actin比值A组高于D组,低于内毒素耐受的B、C组(P<0.01)。D组的表达水平低于内毒素耐受的B、C组(P<0.01)。但内毒素耐受的B、C组间无明显差异。结论内毒素耐受的肺泡巨噬细胞GR表达上调,说明巨噬细胞内毒素耐受时GR起到重要作用。     

Effect and possible mechanism of desferrioxamine on microvascular formation of ischemic myocardium in rats

目的 探讨去铁胺(DFO)对大鼠缺血心肌微血管形成的作用及可能机制.方法 48只SD大鼠随机均分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、结扎组(C组)和DFO 200mg/kg组(D组).术后7d,处死大鼠,免疫组化法检测微血管密度(MVD)及低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,RT-FCR检测HIF-1α mRNA表达.结果 与A、B组相比,C、D组MVD、HIF-1α蛋白和mRNA表达均增加(P＜0.05或P＜0.01),其中D组各指标增加更为显著(P＜0.01).结论 DFO 可以促进大鼠缺血心肌组织微血管形成;其作用机制可能与上调HIF-1α的表达有关.