ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌生长及生物膜形成的影响#br#

目的 研究ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine, ε-PL)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus)生长及生物膜形成的影响。方法 以金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923及社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)USA300为试验菌株,常量肉汤稀释法(试管)测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),酶标仪检测吸光度法观察各株金黄色葡萄球菌的生长曲线,96孔板结晶紫染色法检测各株菌生物膜的形成并用扫描电子显微镜(SEM)观察生物膜的形成情况。结果 ε-PL对ATCC25923和USA300的MIC均为31.25mg/mL。ε-PL浓度升高时对两株菌生长的抑制作用随之增强。1/2MIC ε-PL能显著降低ATCC25923和USA300生物膜的形成能力。 结论 ε-PL作为一种安全、高效的天然防腐剂,能有效抑制金黄色葡萄球菌细菌的生长及生物膜的形成,为新型药物的研发提供了理论依据。     

ε-聚赖氨酸对鲍曼不动杆菌生长及生物膜形成的影响

目的 探究ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine, ε-PL)对鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii, Ab)生长和生物膜形成的影响;ε-PL对鲍曼不动杆菌抗菌机制的初步研究。方法 以鲍曼不动杆菌ATCC19606和鲍曼不动杆菌临床分离株为实验菌株,参考CLSI-M100文件中微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC),吸光度法测定鲍曼不动杆菌ATCC19606的生长曲线。通过结晶紫染色检测ε-PL对Ab生物膜形成的影响。比较测定药物处理前和药物处理后菌体丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量。结果 ε-PL对ATCC19606和临床菌株的MIC均为4.096mg/mL,MBC均为8.192mg/mL。随着ε-PL浓度的增加,鲍曼不动杆菌的生长和生物膜的抑制作用越来越明显。 从抑菌-时间曲线结果来看,ε-PL在6h时明显抑制了鲍曼不动杆菌ATCC19606的浮游菌。鲍曼不动杆菌使用ε-PL作用后MDA和ROS含量升高。结论 ε-PL可有效抑制鲍曼不动杆菌的生长和生物膜的形成。使用ε-PL作用后可以使鲍曼不动杆菌菌体内产生大量ROS和MDA,提示ε-PL可能通过氧化作用发挥抑菌效果。     

ε-聚赖氨酸对白念珠菌抑菌活性及机制研究

目的 研究ε-多聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine, ε-PL)对白念珠菌(Candida albicans)的抑菌活性及抑菌机制。方法 以白念珠菌的标准菌株ATCC64548(氟康唑敏感株)、ATCC64550(氟康唑耐药株)以及临床收集的50株菌为实验菌株,按照CLISI- M27文件中的微量稀释法测定ε-多聚赖氨酸的MIC、MFC和SMIC50值;绘制48h内的浮游菌株时间-生长曲线和生物膜抑制-时间曲线;连续观测并记录4h内的芽管形成率和芽管长度;测定药物处理前后白念珠菌的丙二醛和活性氧(ROS)含量。结果 ε-PL对白念珠的最低抑菌浓度(MIC)为512μg/mL,最低杀菌浓度(MFC)为1024μg/mL,SMIC50为512μg/mL,ε-PL对白念珠菌浮游菌及生物膜的抑菌作用随着浓度的升高作用愈明显。抑菌-时间曲线结果表明ε-PL对白念珠菌的浮游菌和生物膜在12h左右即产生明显抑制作用。芽管实验的结果表明高浓度的ε-PL对白念珠菌的芽管形成率及芽管长度具有明显抑制作用。ε-PL作用于白念珠菌后MDA和ROS含量呈现上升趋势,并且与药物浓度大小成正相关。结论 ε-PL对白念珠菌浮游菌株及生物膜均有良好的抑制作用,高浓度ε-PL对白念珠菌主要毒力菌丝有明显抑制作用,ε-PL作用导致白念珠菌内产生大量的活性氧(ROS)以及产生一定程度的脂质氧化,提示ε-PL可能通过氧化作用发挥抑菌效果。     

植物药复方MYD-20抗金黄色葡萄球菌的作用及机制研究

目的 研究植物药复方MYD-20及其软膏剂对金黄色葡萄球菌的抑制作用及初步作用机制。方法 采用肉汤稀释法测定复方MYD-20对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Methicillin-resistant S.aureus(MRSA)临床菌株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC);通过测定药物处理后菌液的碱性磷酸酶(AKP)活性、胞外大分子浓度变化以及扫描电子显微镜的观察结果确定复方MYD-20的抑菌作用机制;建立小鼠烫伤感染模型,探究MYD-20软膏剂的药效作用。结果 MYD-20对金黄色葡萄球菌和MRSA表现出强抑菌活性,对金黄色葡萄球菌、MRSA的MIC和MBC均分别为1.0%、2.0%。经MYD-20处理后,菌液中AKP的活性、胞外大分子的含量均显著上升,结合扫描电子显微镜的观察结果,发现细菌的表面结构受到破坏。MYD-20软膏剂对皮肤深Ⅱ度烫伤感染的模型小鼠显示出显著的创口愈合作用;并降低了创口处炎症因子的表达。结论 复方MYD-20对金黄色葡萄球菌和MRSA具有较强的抗菌作用,其作用机制与破坏细菌细胞膜、细胞壁的通透性...     

截短侧耳素衍生物ZYY-12h对MRSA菌株的抑菌作用及作用机制研究

摘要：目的 探究截短侧耳素衍生物ZYY-12h对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果及作用机制。方法 采用抑菌圈法和微量肉汤稀释法测定MRSA菌株对ZYY-12h的敏感性，在此基础上绘制时间-杀菌曲线；再测量经ZYY-12h处理后的MRSA细菌悬液A260、通过SDS-PAGE电泳观察细菌可溶性蛋白的含量变化和扫描电子显微镜(SEM)观察细菌的形态结构变化来探究其抑菌机制。结果 ZYY-12h对MRSA菌株有较强的抑菌活性，其最小抑菌浓度(MIC)为0.125 mg/mL，最小杀菌浓度(MBC)为0.5 mg/mL；经ZYY-12h处理后细菌细胞膜的通透性明显变大，菌体可溶性蛋白含量明显减少，且细菌的外部超微形态结构发生改变。结论 截短侧耳素衍生物ZYY-12h对MRSA菌株有明显的抑制作用，且在高浓度下有杀菌作用，其作用机制与改变细菌的膜通透性和抑制细菌蛋白质合成有关。     

Q-marker思路下的黄连花薹抗菌作用及机制研究

摘要：目的 基于Q-marker思路探究黄连花薹的抗菌活性和机制,在此基础上探讨中药质量标志物与药物整体的作用机制的 异同的确定原则。方法 采用二倍稀释法测定黄连花薹提取物和盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌的最 小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过菌体的胞外可溶性蛋白质含量、胞外核酸相对含量和电导率的测定研究其抗菌 机制。结果 黄连花薹和盐酸小檗碱对3种细菌抗菌作用有差异,其中黄连花薹提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好,MIC为 12.5 mg/mL,MBC为25 mg/mL;盐酸小檗碱对枯草芽胞杆菌的抗菌效果最好,MIC为0.25 mg/mL,MBC为2.0 mg/mL。在盐酸小 檗碱和黄连花薹提取物的作用下胞外可溶性蛋白质含量、胞外核酸相对含量及电导率增加。结论 黄连花薹及盐酸小檗碱对3 种致病菌具有较好的抗菌活性,其作用机制相同,均通过对细菌细胞膜造成损伤增加其通透性,使菌体物质大量外渗,从而达 到其抗菌活性。     

载铜蒙脱石及其杀灭大肠杆菌机制的研究

为制备载铜蒙脱石(Cu-MMT)并研究其杀菌活性及机制，采用离子交换法制得Cu-MMT，对其结构与表面特性进行表征。以大肠杆菌为试验菌株，检测Cu-MMT对细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)， Cu-MMT杀菌过程中菌液胞内酶活性的变化，并观察细菌形态。结果显示，载铜后蒙脱石的离子交换容量增大，但比表面积和表面负电荷密度下降；Cu-MMT对大肠杆菌的MIC和MBC分别为0.16和0.64 mg·mL^-1；Cu-MMT可使细菌细胞膜受损，胞内酶诸如冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶和丙氨酸氨基转移酶等外泄。Cu-MMT对细菌具有较强的杀灭活性，其杀菌机制：Cu-MMT与细菌发生吸附作用，使细菌细胞膜形态和通透性改变，胞内物外泄而死亡。     

亚最低杀菌浓度环丙沙星体外诱导铜绿假单胞菌标准质控菌株耐药研究

目的:研究亚最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,Sub-MBC)环丙沙星体外诱导对铜绿假单胞菌MIC值影响,为防止临床不合理使用抗菌药物导致细菌耐药性,提供新思路。方法:以铜绿假单胞菌质控菌株ATCC27853为研究对象,以环丙沙星为诱导耐药抗菌药物,用微量稀释法首先测定其MBC值,然后用1/2MBC值环丙沙星浓度进行体外诱导培养,每天观察其MBC值变化,及时调整诱导浓度为变化后MBC值的1/2,直到诱导菌株MBC值升高到原始MBC值的64倍时,停止诱导,并记录诱导天数;诱导出的耐药菌株传代3 d,再采用微量稀释法对其MBC进行测定,并通过全自动微生物药敏仪对其进行耐药性鉴定。结果:铜绿假单胞菌标准质控菌株的环丙沙星MBC值为0.5μg·ml^-1;采用0.25μg·ml^-1环丙沙星浓度体外诱导7 dMBC值明显升高,诱导30 d升高至原始菌株MBC的64倍;诱导出的铜绿假单胞菌针对环丙沙星的耐药菌株,经3 d传代后,微量稀释法测定其MBC仍为原始菌株的64倍,全自动药敏分析仪鉴定为环丙沙星耐药菌。结论:亚最低杀菌浓度环丙沙星可体外诱导铜绿假单胞菌标准质控菌株出现耐药,且耐药性随亚最低杀菌浓度诱导时间延长而增加,诱导出的铜绿假单胞菌耐药菌株的耐药性能稳定传代,提示低剂量使用抗菌药物可导致细菌产生耐药性。     

13种中药材提取物体外抗菌活性筛选

目的:研究比较13种常见中药材80%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)、大肠埃希菌(Escherichiacoli,EC)和白色念珠菌(Candida albicans,CA)的抑制作用。方法:通过旋转蒸发仪减压蒸馏将13种常见中药材的80%乙醇冷浸提取物浓缩制备成干浸膏,琼脂打孔法测量其抑菌圈直径,微量液体培养基倍比稀释法测定其最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal/fungicidal concentration,MBC/MFC),测定这13种中药材粗提物对临床常见4种病原菌的体外抗菌活性。结果:鸡冠花、大狼毒、川明参、巴戟天、白茅根、一支箭对13株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的MIC/MBC值,除个别菌是12.5 mg·mL-1,其他MIC值都在0.09~6.25 mg·mL-1之间;鸡冠花、川明参、荜澄茄对一株标准EC有抑菌活性其MIC/MBC值均在6.25~12.5 mg·mL-1之间;大狼毒、鸡冠花、白茅根、没药、川明参、巴戟天、一支箭对10株耐药PA,其MIC/MBC值在0.78~6.25 mg·mL-1之间;川明参、巴戟天、大狼毒、对7株CA的耐药菌株,其MIC/MFC值在3.12~6.25 mg·mL-1之间。结论:鸡冠花、大狼毒、川明参、白茅根具有广谱抗菌活性,且抑菌活性强弱依次是SA>PA>EC>CA。     

葎草水提液的体外抑菌作用研究

目的:研究葎草水提液的体外抑菌效果。方法:采用倍比稀释法和96孔板微量肉汤稀释法对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌进行体外抑菌试验,测定其抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:该药对试验菌株呈现不同程度的敏感,大肠埃希菌的MIC和MBC值浓度同为31.25 mg·ml-1;对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC值浓度同为3.91 mg·ml-1;对铜绿假单胞菌的MIC和MBC值分别为125 mg·ml-1和250 mg·ml-1。结论:以水煎液为研究对象,考察葎草的体外抑菌效果更贴近临床应用形式,为葎草相关制剂的深入研究提供参考。     

佛手抗菌活性及其药效成分橙皮苷对金黄色葡萄球菌的作用机制研究

摘要：目的 探究佛手的抗菌活性和机制,为佛手抗菌药物的开发和中药的抗菌机制研究提供参考依据。方法 采用琼脂二倍稀释法测定板蓝根水煎液、佛手水煎液、佛手挥发油和橙皮苷对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过菌体的生长曲线、胞外可溶性蛋白质含量和胞外核酸相对含量的测定研究橙皮苷对金黄色葡萄球菌的抗菌机制。结果 佛手水煎液、佛手挥发油和橙皮苷对这4种菌的抗菌效果均强于板蓝根水煎液,其中以橙皮苷对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好,MIC为0.05mg/mL,MBC为0.2mg/mL;橙皮苷作用下金黄色葡萄球菌菌体生长显著缓慢,胞外可溶性蛋白质含量和胞外核酸相对含量增加。结论 佛手对4种致病菌具有较好的抗菌活性,可通过改变金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性来影响细菌的生长,从而达到抑菌效果。     

中药久灵膏抗菌作用研究

目的 探讨久灵膏的抗菌作用.方法 制备不同浓度的含药营养琼脂培养基和含药营养肉汤培养基,观察久灵膏的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);用兔烫伤皮肤感染抑菌实验来观察久灵膏的体内抗菌作用.结果 1)久灵膏的MIC和MBC分别为2.0%～3.0%及3.0%～6.0%.2)对实验动物显示有较好的抗菌、抗感染作用.结论 久灵膏体内和体外均有不同程度的抑菌和杀菌作用.     

赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

目的 探究赶黄草水煎液在体外对金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜(MRSA)形成的影响。方法 采用微量肉汤稀释法测定赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),根据MIC和MBC绘制杀菌曲线,采用结晶紫染色法和激光共聚焦观察赶黄草水煎液对SA和MRSA生物膜形成的影响,并通过测定胞外多糖和胞外DNA的含量研究赶黄草水煎液破坏SA和MRSA生物膜的作用方式。结果 赶黄草水煎液对SA的MIC和MBC分别为1.36和2.71 mg/mL,对MRSA的MIC和MBC为2.71和5.73 mg/mL;赶黄草水煎液可使SA和MRSA均生长受到抑制,抑制生物膜的形成、减少胞外多糖和胞外DNA的释放。结论 赶黄草水煎液对SA和MRSA具有良好的抑菌作用,可通过抑制胞外多糖和DNA的分泌破坏生物膜的形成。     

Anti-Salmonella activity of medicinal plants from Cameroon

OBJECTIVES: To evaluate the effects of herbal extracts derived from plants commonly prescribed by traditional practitioners for the treatment of typhoid fever. DESIGN: A cross sectional study. SETTING: Departments of Life Sciences and Chemistry, University of Buea, Cameroon. SUBJECTS: Methanol extracts of plant parts commonly used in Cameroon for the treatment of typhoid fever. MAIN OUTCOME MEASURES: Antimicrobial activity was tested using the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) assays. RESULTS: Methanol extracts of plant parts commonly used in Cameroon for the treatment of typhoid fever were tested for antibacterial activity against Salmonella typhi, S. paratyphi and S. typhimurium. The formulations used were: 1) Formulation A comprising Cymbogogon citratus leaves, Carica papaya leaves, and Zea mays silk. 2) Formulation B comprising C. papaya roots, Mangifera indica leaves, Citrus limon fruit and C. citratus leaves. 3) C. papaya leaves. 4) Emilia coccinea whole plant. 5) Comelina bengalensis leaves. 6) Telfaria occidentalis leaves. 7) Gossypium arboreum whole plant. Antimicrobial activity was tested using the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) assays. Generally, Formulation A elicited inhibitory activity at a lower range of 0.02 to 0.06 mg/ml. Similarly, Formulation B elicited bacterial activity at the lowest range of 0.06 to 0.25 mg/ml. C. bengalensis leaves on the other hand, showed the lowest activity with a concentration range of 0.132 to 2.0 mg/ml and 1 to 4 mg/ml in MIC and MBC assays respectively. S. paratyphi was most sensitive to the formulations (concentration range of 0.02 to 1 mg/ml in both MIC and MBC assays) while S. typhimurium was the least sensitive and concentrations of up to 4 mg/ml were required to be bactericidal. CONCLUSION: It is concluded that plant extracts with low MIC and MBC values (1 mg/ml and lower) may contain compounds with therapeutic activity.     

加替沙星和司帕沙星的光动力抗菌研究

目的 喹诺酮作为抗菌药物在临床上具有一定的光敏毒副作用,那么喹诺酮化合物是否可以作为光敏抗菌药物应用呢？ 基于上述目的我们研究了加替沙星 (GFLX)、司帕沙星 (SPFX) 的光动力抗菌活性。方法 本文报道了 GFLX、SPFX 在 650、450 和 365nm 及白光不同光照波长及激光能量密度与暗反应条件下对耐药菌株金黄色葡萄球菌 (MRSA)、铜绿假单胞菌 (P. aeruginosa)、大 肠埃希菌 (E. coli) 的抗菌活性。结果 GFLX、SPFX 对 MRSA、P. aeruginosa、E. coli 暗毒性最低抑菌浓度 (MIC) ≤ 2.5μg/mL; 最低杀菌浓度 (MBC) ≤ 20μg/mL。GFLX 在 450nm 光照条件下对 MRSA、P. aeruginosa、E. coli 的 MIC 分别为 0.15、0.31 和 0.07μg/ mL;MBC 分别为 0.62、1.25 和 0.15μg/mL。相应的 SPFX 在 650nm 光照条件下抗菌活性分别为 0.31、0.31 和 0.07μg/mL;MBC 分 别为 20、5 和 0.15μg/mL。进一步研究表明 GFLX、SPFX 光动力灭菌活性及细胞毒性具有光波长及能量依赖性。结论 光照可以 一定程度上增加 GFLX 和 SPFX 的抗菌活性,但提升能力有限,在此区间其光敏毒副作用有限,这类药物不会伤及细胞,因而喹 诺酮类药物在临床上不足以作为光敏抗菌药物使用,相对安全。