不同产地桑叶氨基酸、核苷、生物碱成分的含量测定及多元统计分析

目的 建立超高效液相串联三重四极杆质谱（UPLC-TQD）同时测定桑叶样品中氨基酸、核苷及生物碱[1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，DNJ）]含量的方法，并采用多元统计分析方法分析比较不同产地桑叶中成分含量差异，为桑叶资源的品质评价提供科学依据。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH Amide（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱，以0.2%甲酸乙腈（A）-0.2%甲酸水（B）梯度洗脱，流速0.4 mL·min^-1，柱温35℃；使用多反应监控正离子模式测定；采用多元统计分析如主成分分析对不同产地桑叶进行综合性评价。结果 22种成分的浓度与峰面积呈良好的线性关系（r² ≥ 0.990 3）；方法精密度、重复性及稳定性的RSD值均≤ 7.5%；平均加样回收率为86.7%~106.4%，RSD为2.2%~8.9%。不同产地桑叶中氨基酸、核苷及DNJ存在一定差异，结合多元统计分析，共找出8个差异性成分，可将样品分成2组。结论 所建立方法准确可靠，结合DNJ及8个差异性成分含量进行比较，湖北及江西产地的桑叶品质较优。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定防风在大鼠体内的入血成分及代谢产物

目的 研究防风Saposhnikovia divaricata（Turcz.）Schischk.水煎液在大鼠体内的入血成分及代谢产物。方法 应用超高效液相色谱串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术鉴定防风入血成分及代谢产物。采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（150mm×2.1mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,进样量3 μl。结果 建立了大鼠给药后血浆样品的分析测定方法,并且与空白血浆、防风水煎液和对照品的保留时间及质谱碎片离子信息对比,共鉴定了大鼠血浆中21个来源于防风的化合物,包括10个入血原型成分和11个代谢产物。结论 防风主要成分在大鼠体内的代谢途径主要包括羟化、去甲基化、葡萄糖醛酸化等。所建立的方法简单可靠,为揭示防风的药效物质基础提供研究依据。     

复方金钱草颗粒化学成分的UHPLC-Q-TOF/MS分析

目的 通过超高效液相-四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)联用技术定性分析中成药复方金钱草颗粒中的主要化学成分。方法 色谱分离采用XBridge BEH C₁₈柱(2.1 mm×100 mm, 2.5 μm),流动相由0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈组成,梯度洗脱,流速为0.4 ml/min;质谱定性采用四极杆飞行时间质谱,正离子模式扫描。结果 在优化的液质联用条件下,鉴定出复方金钱草颗粒中47个成分,并通过软件计算区分了其中的同分异构体, 且对其药材来源进行了归属。结论 本研究通过UHPLC-Q-TOF/MS联用技术,为鉴定中成药复方金钱草颗粒中的化学成分建立了一种快速、高效的分析方法。     

UPLC-QTOF-MS结合主成分分析法考察胡芦巴盐制前后的化学成分差异

目的 利用超高效液相-四极杆-飞行时间串联质谱( UPLC-QTOF-MS ) 结合多元统计分析筛选并鉴定胡芦巴和盐胡芦巴的差异性成分。方法 采用 C₁₈反相色谱柱0.5% 乙酸-乙腈梯度洗脱,在正离子模式下采集质谱数据,应用Simca-P等软件进行主成分分析 (PCA) 和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）,筛选胡芦巴与盐胡芦巴的差异性成分。通过质谱提供的精确分子量、碎片离子并结合文献数据鉴定PLS-DA分析中VIP值＞1.5的差异性成分的结构。结果 利用准分子离子、二级质谱图、特征碎片离子及其他碎片离子等信息,并参考相关文献报道鉴定了胡芦巴与盐胡芦巴中的24个差异性成分,其中包括7个黄酮碳苷类化合物,15个甾体皂苷类化合物以及1个生物碱类化合物即胡芦巴碱和1个脂肪族化合物即亚麻酸乙酯。通过比较各化合物在胡芦巴和盐胡芦巴样品的质谱中的响应值,盐制后黄酮碳苷类成分响应升高,甾体皂苷中的呋甾烷醇型甾体皂苷响应降低,而螺甾烷醇型/异螺甾烷醇型甾体皂苷响应升高。结论 盐制促进了胡芦巴中黄酮碳苷类成分的溶出,并使胡芦巴中皂苷类成分发生了结构转化。     

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的白术道地性研究

目的 对不同产地白术药材的化学成分进行系统分析,为白术的道地性研究提供依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS),结合质谱分子网络技术,快速鉴定白术的主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对安徽、河北、浙江的25批白术进行多元统计分析,用VIP值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果 不同产地的白术化学差异较为明显,共鉴定出10个差异化合物,其中浙江白术的姜黄烯、AtractylmacrolD、白术内酯Ⅲ、3β-羟基苍术酮、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、β-Vatirenene和苍术酮等成分显著高于安徽或河北样品,可作为潜在的道地性标志物。结论 本研究为全面评价白术药材的质量和道地性提供了依据,并发现不同产地白术的化学成分差异较大,可能与环境、品种和种植方式等有较大关系。     

基于UHPLC-Q-TOF/MS技术鉴定肺脾气虚汤的化学成分及其入血成分

目的 对肺脾气虚汤中的主要化学成分及SD大鼠口服后的入血成分进行鉴定,为分析其药效物质基础提供参考。方法 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱（UHPLC-Q-TOF/MS）技术对肺脾气虚汤提取液及SD大鼠口服肺脾气虚汤后的血清样本进行数据采集,并通过对照品、自建质谱数据库、MS FINDER数据库及查阅文献对其化学成分及入血成分进行快速鉴定。结果 共从肺脾气虚汤中鉴定出56种化学成分,主要为黄酮类、三萜类、酚类成分,化合物大多来源于炙黄芪、陈皮、茯苓和党参;含药血清中检测到 11 种原形成分,包含芒柄花素、黄芪甲苷 IV和新橙皮苷等化合物。结论 该研究较为全面的阐明了肺脾气虚汤化学成分组成及药材来源,并初步分析了其入血成分,为进一步对该方的药效物质基础及质量控制研究提供了科学依据。     

超高效液相色谱在化妆品禁用药物及限用物质和功效成分分析中的应用

目的：推进超高效液相色谱法在化妆品化学分析中的应用。方法：从超高效液相色谱法在化妆品禁用药物（抗生素、激素等）及限用物质（防腐剂、防晒剂、着色剂、染发剂等）和功效成分（育发类、护肤类等）分析中的应用情况三方面进行归纳总结。结果：化妆品单一检验指标朝着多元指标发展,超高效液相色谱比常规液相色谱节省时间,降低能耗,优势明显。结论：超高效液相色谱法在化妆品化学检测方面具有节能、环保、高效的特点,为化妆品市场监管提供了有力的技术支撑。     

牡丹皮化学成分的HPLC-QTOFMS分析

目的 通过高效液相-单重四级杆-飞行时间质谱(HPLC-QTOFMS)联用技术,对中药牡丹皮的主要化学成分进行有效的鉴定。方法 色谱分离采用CAPCELL PAK C₁₈(3.0 mm×100 mm, 3 μm),流动相组成分别为0.1%甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,流速为0.5 ml/min;质谱定性采用飞行时间质谱,正负离子模式扫描。结果 在优化的液质联用条件下,通过单重四级杆-飞行时间质谱鉴定牡丹皮中48个成分。结论 通过HPLC-QTOFMS联用技术,为鉴定牡丹皮中的化学成分建立起了一种快速、高效的分析方法。     

UHPLC-Q-TOF-MS测定男性外用壮阳类喷剂中非法添加盐酸丁卡因

目的 建立超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法测定男性外用壮阳喷剂中非法添加盐酸丁卡因的检测方法。方法 样品采用C₁₈色谱柱分离,以0.05%甲酸水溶液和乙腈梯度洗脱,采用飞行时间质谱（TOF）和选择离子监测（Target MS/MS）模式检测。结果 经对照品确认,样品中检测出盐酸丁卡因。结论 本方法可以用于快速鉴定男性外用壮阳类喷剂中非法添加盐酸丁卡因的检测。     

基于UPLC-Q-TOF/MS的渴络欣胶囊化学成分研究

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术对中药复方渴络欣胶囊中的化学成分进行研究。方法 采用ACQUITY UPLC HSS T3 C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min;采用ESI源在正、负离子模式下分别采集数据。根据化合物精确相对分子质量及二级碎片离子信息,结合参考文献数据,鉴定渴络欣胶囊的主要化学成分。结果 从渴络欣胶囊中分离和鉴定出54个化学成分,包括蒽醌类化合物10个、黄酮类化合物10个、萜类化合物7个、酚类化合物16个等。结论 首次采用UPLC-Q-TOF/MS联用技术研究渴络欣胶囊中化学成分,进一步明确了其物质基础。     

Distinction of water-soluble constituents between some Paecilomyces (= Isaria) and Cordyceps fungi by capillary electrophoresis

In order to reveal the differences between Cordyceps, Paecilomyces (= Isaria) and Nomuraea, we collected seven entomogenous fungi grown in natural field and analyzed the profiles of water-soluble constituents derived from some different sources of Cordyceps, Paecilomyces and Nomuraea by determination using capillary electrophoresis. C. sinensis and C. kyushuensis showed similar peak clusters of protein migrated at 5–7, 8–9, and 12–20 min. The peak clusters obtained from N. atypicola was similar to those of C. sinensis and C. kyushuensis. The water-soluble constituent clusters of C. militaris migrated at 5–9 and 10–15 min were partly different from those of other Cordyceps. It was also revealed that the P. tenuipes and P. cicadae showed lesser peak clusters rather than Cordyceps. These results indicated that the profiles of protein of these entomogenous fungi by capillary electrophoretic analysis could serve as fingerprints for classification and medicinal quality control of Cordyceps.     

基于HPLC多指标成分、化学计量学和熵权优劣解距离法的苏木质量评价研究

目的 采用多指标成分、化学计量学联合熵权优劣解距离法综合评价苏木的质量。方法 采用HPLC法测定不同产地苏木中巴西苏木素、苏木精、原苏木素A、(±)原苏木素B、苏木酮A、鹰嘴豆芽素A、异甘草素和苏木查耳酮;对以上结果进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,寻找影响苏木质量的主要潜在标志物;采用熵权优劣解距离法对不同产区苏木的质量优劣进行评价。结果 18批苏木聚为3类,不同产地苏木质量呈现一定的区域差异。苏木精、巴西苏木素、原苏木素A对苏木质量差异影响较大,是影响苏木质量的主要潜在标志物。广西、广东所产苏木质量最优,其次为四川、贵州和云南,福建地区产品质量较差。结论 本实验建立了苏木质量综合评价方法,操作便捷、可行性高、实用性强,为更加科学、系统地控制苏木质量提供技术支撑。     

不同产地五倍子体外抗菌作用研究

目的 考察五倍子不同产地（河北曲阳、浙江嘉兴、湖南桑植、陕西西乡、云南凤县）的体外抗菌作用。方法 五倍子醇提浸膏用倍半稀释法稀释成不同浓度药液,采用管碟法测定各产地五倍子的最小抑菌浓度（MIC）。结果 河北、浙江、湖南、陕西、云南所产五倍子醇提浸膏对金黄色葡萄球菌的MIC依次为6.25、1.562 5、1.562 5、3.125、0.781 25 mg/L;对大肠杆菌的MIC依次为3.125、12.5、6.25、6.25、3.125 mg/L;对白色念珠菌的MIC依次为6.25、1.562 5、3.125、1.562 5、3.125 mg/L;对绿脓杆菌的MIC依次为12.5、6.25、6.25、6.25、3.125 mg/L。结论 河北、浙江、陕西、云南、湖南所产五倍子均有抑菌作用,其中云南产五倍子醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌抑菌作用最强,陕西、浙江产五倍子醇提物对白色念球菌的抑菌作用强。     

基于FGFR1靶点分子虚拟对接筛选淫羊藿中抗骨质疏松的药效成分

目的基于FGFR1蛋白靶点筛选淫羊藿中抗骨质疏松的药效成分。方法采用维甲酸灌胃14 d复制大鼠骨质疏松模型,给予淫羊藿提取物进行干预;采用Western blotting法检测各组大鼠股骨FGFR1蛋白的表达,用UPLC-Q-TOF-MS确认提取物中化学成分。基于FGFR1靶点进行分子虚拟对接筛选药效成分。结果淫羊藿能够改善大鼠骨质疏松症状,并提高FGFR1蛋白的表达。淫羊藿提取物中指认出23种化合物,其中淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、箭藿苷C可与FGFR1可以有效对接。结论淫羊藿中淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、箭藿苷C可能通过上调FGFR1发挥抗骨质疏松作用。     

基于体内暴露及网络药理学探讨鞣花酸干预胃肠道出血的作用机制

目的 基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对口服给药鞣花酸后大鼠体内暴露成分进行分析鉴定,结合网络药理学探讨鞣花酸及其体内暴露成分治疗胃肠道出血(gastrointestinal bleeding,GIB)的作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定大鼠口服鞣花酸后的外源性代谢产物,利用PharmMapper、SwissTargetPrediction数据库预测鞣花酸体内暴露成分的潜在作用靶点,通过GeneCards、OMIM、DRUGBANK数据库收集GIB相关疾病靶点,进一步筛选出成分与疾病的交集靶点;通过STRING 11.0数据库构建蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,借助CytoScape 3.8.2软件对PPI网络进行可视化分析,筛选核心作用靶点;采用Metascape分析平台对交集靶点进行GO分析和KEGG富集分析,并通过CytoScape 3.8.2软件构建成分-靶点-通路图。最后,基于AutoDockVina 1.1.2软件进行分子对接计算,验证化学成分与核心靶点的靶向关系。结果 基于UPLC-Q-TOF-MS分析,鉴定了鞣花酸体内暴露成分,包括鞣花酸原型成分及10个尿石素类代谢物,通过网络药理学预测,发现其潜在作用靶点500个,以及GIB相关靶点1 117个。SRC、PIK3R1、HRAS等为PPI网络的核心靶点。KEGG富集结果发现,该类成分主要涉及PI3K-Akt信号通路、抗EGFR酪氨酸激酶抑制剂通路、黏着斑信号通路等相关通路,GO富集分析主要涉及激酶活性调节、蛋白质丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、蛋白质磷酸化等。分子对接结果显示,11个成分与6个核心靶点均有较好的结合活性。结论 鞣花酸体内暴露成分可能通过减少氧化应激,抑制炎症反应等发挥止血作用,为含有鞣花酸类相关中药治疗GIB的物质基础及作用机制研究提供科学依据。     

Analysis of sterols and fatty acids in natural and cultured Cordyceps by one-step derivatization followed with gas chromatography–mass spectrometry

Ten free fatty acids namely lauric acid, myristic acid, pentadecanoic acid, palmitoleic acid, palmitic acid, linoleic acid, oleic acid, stearic acid, docosanoic acid and lignoceric acid and four free sterols including ergosterol, cholesterol, campesterol and β-sitosterol in natural (wild) Cordyceps sinensis, Cordyceps liangshanensis and Cordyceps gunnii, as well as cultured C. sinensis and Cordyceps militaris were first determined using pressurized liquid extraction (PLE), trimethylsilyl (TMS) derivatization and GC–MS analysis. The conditions such as the amount of reagent, temperature and time for TMS derivatization of analytes were optimized. Under the optimum conditions, all calibration curves showed good linearity within the tested ranges. The intra- and inter-day variations for 14 investigated compounds were less than 3.4% and 5.2%, respectively. The results showed that palmitic acid, linoleic acid, oleic acid, stearic acid and ergosterol are main components in natural and cultured Cordyceps which could be discriminated by hierarchical clustering analysis based on the contents of 14 investigated compounds or the 4 fatty acids, where the contents of palmitic acid and oleic acid in natural Cordyceps are significantly higher than those in the cultured ones.     

结合化学识别模式的霞日森登质量标志物研究

目的：建立基于蒙药材霞日森登质量标志物（Q-Marker）的质量控制方法,结合化学识别模式分析不同产地霞日森登的质量差异。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定杨梅素、二氢杨梅素、没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素及花旗松素7种Q-Marker含量,建立一测多评法（QAMS）,并与外标法（ESM）及标准曲线法所得结果比较结果差异;通过霞日森登HPLC指纹图谱及运用聚类分析、主成分分析等化学识别模式对11批霞日森登药材质量进行评价。结果：建立了QAMS,内参物二氢杨梅素与没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素和花旗松素的相对校正因子分别为1.569、1.435、1.426、1.467、0.794（杨梅素为0.489,因偏离大去除）,且11批霞日森登样品3种方法测定结果无显著差异;获得指纹图谱及共有模式,经过聚类分析和主成分分析得出不同产地的11批霞日森登可聚为4类。结论：通过建立的指纹图谱和QAMS能精准测定霞日森登中Q-Marker的含量,可用于霞日森登的质量评价,为评估霞日森登的质量提供了更为科学与全面的基础依据。     

不同产地玉竹中金属元素的水溶特性和含量特征研究

目的 建立玉竹中金属元素K、Mg、Fe、Mn和Cu的含量测定方法,探讨玉竹中这5种金属元素的含量特征及水溶特性.方法 采用火焰原子吸收分光光度法,对玉竹饮片及其水煎液中金属元素含量进行测定,分析和比较玉竹中金属元素含量差异性,以及在水煎过程中金属元素水溶出特性.结果 17批不同产地的中药玉竹中金属元素含量差别较大,湖南...     

Quality control of Cordyceps sinensis, a valued traditional Chinese medicine

Cordyceps sinensis, a well-known and valued traditional Chinese medicine, is also called DongChongXiaCao (winter worm summer grass) in Chinese. It is commonly used to replenish the kidney and soothe the lung for the treatment of fatigue, night sweating, hyposexualities, hyperglycemia, hyperlipidemia, asthemia after severe illness, respiratory disease, renal dysfunction and renal failure, arrhythmias and other heart disease, and liver disease. As the rarity and upstanding curative effects of natural Cordyceps, several mycelial strains have been isolated from natural Cordyceps and manufactured in large quantities by fermentation technology, and they are commonly sold as health food products in Asia. In addition, some substitutes such as Cordyceps militaris also have been used and adulterants also confused the market. Therefore, quality control of C. sinensis and its products is very important to ensure their safety and efficacy. Herein, markers and analytical methods for quality control of Cordyceps were reviewed and discussed.     

基于主成分分析对于不同产地黄芩茎叶提取物紫外指纹图谱的鉴别研究

目的 建立黄芩茎叶提取物紫外指纹图谱的研究方法。方法 利用紫外谱线组法对不同产地黄芩茎叶提取物的乙酸乙酯、三氯甲烷、乙醇、水提取液建立黄芩茎叶提取物紫外指纹图谱,并利用simca-p+11分析软件,对不同产地黄芩茎叶提取物的紫外吸收数据进行主成分分析,根据它们的紫外指纹图谱峰位置的差异及主成分分析的结果,为黄芩茎叶提取物的质量控制提供实验依据,对于不同产地的黄芩茎叶提取物加以区分鉴别。结果 不同产地黄芩茎叶提取物的成分存在一定的差异性,可以有效控制不同产地黄芩提取物的质量的稳定性。由主成分分析选出的各产地的黄芩茎叶提取物的主成分吸收波长,可以明显的区分不同产地的黄芩茎叶提取物。结论 建立了黄芩茎叶提取物产地与紫外谱线组的相关性研究方法,对于鉴别黄芩原产地也具有一定的指导意义。