海洋星虫多糖质量标准初探

目的:建立海洋星虫多糖的质量标准。方法:对海洋星虫多糖的水分、炽灼残渣和重金属进行检查,采用硫酸-蒽酮比色法对海洋星虫多糖进行含量测定。结果:海洋星虫多糖中水分应不超过5.0%,炽灼残渣不得过1.0%,重金属含量不得过百万分之二十,海洋星虫多糖以葡萄糖(C6H12O6)计,不得少于80%。结论:本方法准确方便,能较全面地控制海洋星虫多糖的质量。     

不同产地裸体方格星虫脂肪酸类成分资源化学评价研究

目的 对裸体方格星虫样品中脂肪酸类成分进行比较研究。方法 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对12个裸体方格星虫样品中的26种脂肪酸进行了含量测定,并进一步对各样品中的各成分的含量进行了主成分分析。结果 对裸体方格星虫样品的测定结果显示各样品26种脂肪酸类成分总含量范围为198.20?578.05 ?g/g,总含量最高的样品是海南三亚的裸体方格星虫体腔液样品（S12）;各产地样品中脂肪酸类成分总含量均呈现体腔液部位高于外壁 内脏部位。测定样品的26种脂肪酸中,不饱和脂肪酸总含量高于饱和脂肪酸总含量;多不饱和脂肪酸中,亚油酸和?-亚麻酸含量最高,分别占总含量的1.54%?5.65%和1.61%?4.94%;单不饱和脂肪酸中顺芥子酸含量最高,分别占各样品总含量的14.66%?46.41%;基于26种脂肪酸的含量测定结果对12个裸体方格星虫样品的PCA分析结果显示不同产地裸体方格星虫的外壁 内脏样品相互接近,体腔液样品差别较大。结论 裸体方格星虫中脂肪酸不仅种类多样、含量丰富,而且具有多种重要活性作用的不饱和脂肪酸比例合理。本研究中对脂肪酸类成分的研究结果将对进一步开发利用裸体方格星虫提供一定的理论基础。     

方格星虫多糖对运动小鼠抗疲劳作用实验研究

目的探讨方格星虫多糖对小鼠的抗疲劳作用。方法将小鼠随机分组,采用小鼠负重游泳实验,以方格星虫多糖0.2,0.4,0.6g.kg-1灌胃给药,测定各组游泳时间,并对游泳后小鼠的血清尿素氮、乳酸脱氢酶、肝糖原、肌糖原、超氧化物歧化酶、丙二醛等指标进行检测。结果与对照组相比,星虫多糖各剂量组明显延长了小鼠的游泳时间。相应剂量给药小鼠血清尿素氮有明显减低,乳酸脱氢酶显著升高,肝糖原、肌糖原也呈上升趋势,低剂量用药能显著提高SOD活性和降低MDA含量。结论星虫多糖对小鼠有明显抗疲劳效果。     

方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响

目的研究方格星虫多糖(Sipunculus nudus polysaccharides,SNP)对小鼠免疫功能的调节作用。方法采用ConA诱导淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定试验测试方格星虫多糖对小鼠细胞免疫功能的影响;采用血清溶血素水平检测和抗体形成细胞数检测方法测试SNP对小鼠体液免疫的影响;采用碳廓清试验测试SNP对小鼠非特异性免疫的影响。结果 SNP能明显提高小鼠的细胞免疫和体液免疫功能,促进小鼠碳廓清速率和小鼠肝脏与脾脏对异物的吞噬功能。结论 SNP可提高小鼠的免疫功能。     

广西北海方格星虫脂肪酸的提取及组成分析

目的：比较分析方格星虫不同部位和极性层中的脂肪酸组成和含量。方法：采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用法测定方格星虫(广西北海西村)不同部位和极性层的脂肪酸组成和含量。结果 方格星虫不同部位和极性层的脂肪酸含量和组成有差异,除了体腔液未鉴定出多不饱和脂肪酸和正丁醇层的单不饱和脂肪酸含量偏低以外,饱和脂肪酸都占总各自脂肪酸总量的一半左右,主要由 C14：0、C16：0 和 C18：0 所组成,单不饱和脂肪酸都占各自脂肪酸总量的 21.5-29.8 ％,其中 C18：1n9 和 C20：1n9 为主要成分,多不饱和脂肪酸占总脂肪酸的相对含量为 21.2-34.6 ％,其中 C20:4n6 的贡献最大,并且还含有一定量的 C20：5n3 (二十碳五烯酸 EPA)。结论 方格星虫体壁和石油醚层的脂肪酸提取率和鉴定出的脂肪酸比例最高,方格星虫脂肪酸不仅种类多样,还有具多种重要活性作用的不饱和脂肪酸。     

方格星虫延缓衰老作用研究

目的：研究方格星虫提取物的延缓衰老作用。方法：SD大鼠口服给药30d后，采用硫代巴比妥酸显色法(TBA法)测定受试大鼠血清丙二醛(MDA)含量，采用羟胺法测定血清SOD活性。采用果蝇生存试验测定方格星虫提取物对0regon K野生型黑腹果蝇生存时间的影响。结果：方格星虫提取物经口给予SD大鼠不同剂量的方格星虫提取物30d后，大鼠血清MDA含量显著降低，血清SOD活性显著增强。方格星虫提取物显著延长雌雄果蝇的平均寿命，显著延长雄果蝇的最高寿命。结论：方格星虫提取物具有明显的延缓衰老作用。     

正交试验法优化海洋星虫多糖碱提法提取工艺

目的 优选海洋星虫多糖的提取工艺。方法 以料液比、Na OH浓度、提取温度、提取时间为考察因素,以多糖含量与多糖得率的乘积为评价指标,采用正交试验法优选海洋星虫多糖的提取工艺。结果 海洋星虫多糖的最佳工艺条件为料液比1∶4,Na OH浓度为1%,温度60℃,时间4 h。结论 该提取工艺简便、快捷,可用于海洋星虫多糖的提取。     

方格星虫矿物元素组成及其生物富集特征

目的 研究方格星虫体壁肌肉和体腔液中的矿物元素组成及其与沉积物生境之间的相关性,旨在为方格星虫体内矿物元素开发利用和沉积物内元素的生物富集特征分析提供依据。 方法 在无扰动养殖区（N）、高强度采挖区（H）、中等强度采挖区（R）收集方格星虫和沉积物样品,应用电感耦合等离子体质谱法测定样品中的矿物元素。采用Pearson相关性分析和生物富集系数探讨方格星虫体壁元素与环境沉积物的关系。结果1）方格星虫肌肉中微量元素含量表现为钾>钠>镁>钙>铁>锌>铜>锶>砷>硒等,体腔液中的微量元素含量表现为钠>钾>镁>钙>铁>锶>锰>硒>砷>钒>钼>铅>镉>钴。Pearson相关分析发现,方格星虫肌肉钒元素含量和体腔液中的镉、钙元素均与沉积物具有显著正相关关系。2）方格星虫体壁肌肉中生物富集系数较高的矿物元素包括钾、镉、铜、硒、钼、锡和砷等,体腔液中生物富集系数较高的矿物元素包括钾、镉、钙、钠、锶等。不同处理组方格星虫体壁、体腔液中的矿物元素富集系数均表现出相近的变化趋势。3）高强度采挖组（H组）方格星虫体壁肌肉中的钾元素生物富集系数显著高于无扰动养殖组（N组）和中等强度采挖组（R组）,而H组的镉、铜、钼生物富集系数显著低于N和R组（P<0.05）。高强度采挖组（H组）方格星虫体腔液中的钾、锶元素生物富集系数显著高于无扰动养殖组（N组）和中等强度采挖组（R组）,而H组的镉、铜元素生物富集系数显著低于N组和R组（P<0.05）,不同采挖方式可能影响了相关元素的分布或结合状态。结论 方格星虫体壁和体腔液矿物元素组成丰富,具有重要的开发利用价值。方格星虫对于不同元素的生物富集能力不同,部分元素含量受环境沉积物的影响。     

裸体方格星虫甲醇提取物的化学成分研究

目的 对裸体方格星虫(Sipunculus nudus Linnaeus)甲醇提取物的化学成分进行分离鉴定.方法采用溶剂萃取,硅胶柱色谱及半制备HPLC等分离手段对其甲醇提取物的化合物进行分离,通过理化性质及波谱学手段对所得化合物进行化学结构鉴定.结果与结论分离并鉴定了4个化舍物:胆甾醇(1)、硬脂酸(2)、环(丙氨酸-脯氨酸)(3)、脱氧胸苷(4).这4个化合物均为首次从裸体方格星虫中分离得到.     

方格星虫提取物的抗辐射作用

目的 研究方格星虫提取物的抗辐射作用.方法 将50只ICR雄性小鼠随机分为对照组、模型组及低、中、高3个方格星虫提取物组,灌胃给药,每天1次,给药第15d,以50Co γ射线进行全身照射一次,照射剂量为5Gy,照后继续给药14d.测定小鼠外周血白细胞、血小板和血细胞计数,脾指数、胸腺指数、骨髓有核细胞计数、血清SOD活性和MDA含量,以及睾丸指数、精子数、精子畸形率等.结果 与模型组比较,方格星虫3个荆量组白细胞数、红细胞数、骨髓有核细胞数升高显著;胸腺脾和睾丸指数显著升高;精子数上升,精子畸形率下降,SOD活力增高,而MAD含量下降.结论 方格星虫提取物具有显著的抗辐射作用.     

方格星虫多肽的结构分析及体外抗氧化活性

目的 以方格星虫为原料,酶解制备水溶性多肽并考察其抗氧化活性,探究其结构-活性关系。方法 利用5种蛋白酶酶解新鲜方格星虫,并结合超滤方法得到高分子量(>50kDa)、中分子量(5～50 kDa)和低分子量(＜5kDa)的酶解肽段;利用氨基酸自动分析仪测定方格星虫酶解肽的氨基酸组成。综合考察多肽对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH.)自由基、羟基自由(.OH)、超氧阴离子自由基( O-2.)的清除能力以及还原力效果,评价方格星虫多肽抗氧化活性;利用高效液相色谱-串联质谱方法鉴定小分子肽的氨基酸组成和序列结构。结果 胰蛋白酶水解方格星虫4h得到的酶解液蛋白含量最高,并在酶解液中检测确定了17种氨基酸,其中精氨酸含量最高13.65%。高中低三组肽段中,低分子量肽段的抗氧化活性优于其他：对DPPH 自由基和羟自由基清除能力大小顺序为低分子量>高分子量>中分子量、对超氧阴离子清除能力大小顺序为低分子量>高分子量≈ 中分子量、还原能力强弱顺序为高分子量>低分子量 > 中分子量。经高效液相色谱-串联质谱联鉴定了GFAGDDAPR、GLGGLSPEK 、LDLAGR和VTKEIPR 4个肽段。结论 低分子量的方格星虫酶解多肽具有较好的抗氧化活性,有潜力用作生物医药或化妆品工业的原料。     

方格星虫多糖对记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响

目的观察方格星虫多糖(SNPS)对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的影响。方法 SNPS 3个剂量组100,200和400mg.kg-1每天小鼠灌胃给药1次,连续7天。采用东莨菪碱建立记忆获得障碍模型,再用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力。测试结束后,分别检测血清中SOD活性和MDA含量。结果与模型组比较,SNPS能显著缩短逃避潜伏期和找到平台的时间,显著增加穿越原平台次数;SNPS能显著提高血清SOD活力,降低血清MDA含量。结论 SNPS能改善记忆获得障碍模型鼠的学习记忆能力,提高机体清除自由基、抗氧化能力。     

Immunomodulatory activities on macrophage of a polysaccharide from Sipunculus nudus L.

A water-soluble polysaccharide, named as SNP, was extracted and fractioned from the body wall of Sipunculus nudus L. by DEAE-Sepharose anion exchange and Sepharose CL-6B column chromatography. The structural characteristics of SNP investigated by high performance size exclusion chromatography (HP-SEC), Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) indicated that SNP was a homogeneous polysaccharide with a molecular mass of 350 kD and the monosaccharide composition was determined to be rhamnose (28%), fucose (16%) and galactose (56%). SNP was able to upregulate the expression of cytokines (IL-6 and TNF-α), but did not affect IL-10 secretion by murine macrophages and human peripheral blood mononuclear cells. RT-PCR analysis demonstrated that the SNP also induced the expression of iNOS and COX-2, responsible for the induction of NO and PGE2 respectively, and SNP suppressed the arginase activity. These results suggest that the polysaccharide isolated from S. nudus activates macrophages and has potent immunostimulating activity.     

天花粉多糖的组成及组分Ⅱ相对分子质量分析

目的：对天花粉多糖的组分及组分Ⅱ相对分子质量进行分析。方法：采用水提醇沉提取天花粉多糖,经纯化后进行气相-质谱联用分析得出多糖的组成。相对分子质量分析则采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）。结果：天花粉多糖组分Ⅰ是含有葡萄糖,未知单糖一和未知单糖二的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ是含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和未知单糖三的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ经高效凝胶渗透色谱法得重均相对分子质量（M_w）=42 025;10%大分子部分重均相对分子质量=197 011;10%小分子部分重均相对分子质量=6 676;分布系数（D）=2.56;数均相对分子质量（M_n）=16 427。结论：天花粉多糖组分Ⅰ和天花粉多糖组分Ⅱ的单糖组成不相同,天花粉多糖组分Ⅱ是一个相对分子质量段在42 025左右的大分子。     

HPLC测定赤参丹中丹酚酸B含量

目的为保证药物安全有效,完善赤参丹质量标准,对赤参丹中丹酚酸B进行了含量测定方法的研究。方法HPLC色谱条件：Kromasoil C18（250mm×4．6mm,5μm）;甲醇．乙腈-甲酸-水（28：10：1：61）为流动相,检测波长为286nm,流速1．0mL·min^-1。结果丹酚酸B在浓度0．1083～1．2998μg内线性关系良好（r=0．9998）。样品的平均回收率为98．7％,RSD为1．7％。结论本方法简便可靠,结果稳定,重复性好,可准确测定赤参丹中丹酚酸B的含量。