单纯疱疹病毒感染患者抗原和抗体检测结果分析

目的 探讨单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)感染患者抗原、抗体的相互关系.方法 对89例皮肤性病门诊的疑似女性病人的疱液或分泌物和血清用酶联免疫法(ELISA)进行抗原抗体检测.结果 抗原阳性的患者,其抗体不一定阳性,抗原阴性的患者,其抗体检测也不一定阴性,对于性病门诊患者,最好同时检测抗原、抗体,以便临床确诊.结论 ELISA法检测疱疹病毒抗原抗体具有简便、快速、特异的特点.     

快速一步法测定HGB抗原的方法学研究及临床应用

目的　建立一种简便、准确、快速检测微量血红蛋白 (HGB)的检验方法。方法　用淋巴细胞杂交瘤技术制备的特异性抗人HGB单克隆抗体 ,在ELISA双抗体夹心的基础上建立快速一步法 ,用于检测粪便中微量HGB抗原。结果　检测灵敏度可达 0 .0 5 8μg/ml,批内及批间变异系数分别为 4.2 %和 5 .1% ;并与常规ELISA法进行了相关分析 ,相关系数r =0 .96。经临床应用 ,效果良好。结论　该方法可作为早期快速诊断胃肠道出血性疾病的重要方法。     

检测唾液中疫苗和疾病诱导的HAV特异性IgG的新酶免疫法

这种新的捕获酶免疫法采用的是三重抗体识别系统,先用驴抗人IgG F(ab)2片段包被96孔板。每份受检样本设4个孔。培育后,2孔加入用含0.5％牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲盐水-吐温20稀释成432 ELISA单位/ml的甲型肝炎病毒(HAV)抗原,另2孔加入缓冲液作为非特异性结合的阴性对照,继续培育过夜。为测定捕获的HAV特异性IgG复合物,每孔加入HAV特异性单克隆     

急性人类免疫缺陷症病毒感染:1例病毒血症患者ELISA假阴性而蛋白印迹试验阳性

ELISA是检测人类免疫缺陷症病毒(HIV)抗体的标准筛选试验.ELISA阳性的血清样品通常用蛋白印迹试验作进一步评价.从急性HIV感染患者血液中分离到HIV或血清中检出HIV抗原的时间比血清抗体阳转早或同时出现.有人在抗体产生的最初阶段,对蛋白印迹法、ELISA和其他方法检测HIV抗体进行了比较研究.结果表明,蛋白印迹法对ELISA敏感,但从蛋白印迹法阳性而ELISA阴性者中分离到HIV尚未见报道.作者报道1例急性HIV病毒血症患者,     

牛乳中抗幽门螺杆菌特异性抗体的间接ELISA法的建立

目的 建立抗幽门螺杆菌(Hp)特异性抗体的ELISA检测方法,用于牛乳中抗Hp特异性抗体的检测.方法 超声Hp全菌抗原接种奶牛,按多克隆抗体制备技术制备牛抗Hp抗血清.用纯化牛IgG免疫家兔.制备兔抗牛IgG多克隆抗体.硫酸铵盐析,DEAE-32柱层析分别纯化牛与兔IgG.兔抗牛IgG以辣根过氧化物酶标记.用Hp全菌抗原包被反应板,建立间接ELISA法用于牛乳抗Hp抗体的检测.结果 建立的抗Hp间接ELISA法的最佳包被抗原量为1.47μg/孔,HRP-兔抗牛IgG 1∶600稀释,标准曲线方程为A=0.0124 0.3988 lnC,相关系数r=0.999 8,线性范围为1.8～145μg/ml,回收宰在86.4%～92.8%,变异系数为9.4%～12.3%.结论 初步建立牛乳中抗Hp抗体的间接ELISA测定法,可用于Hp免疫牛乳中抗Hp特异性IgG的检测.     

甘草酸人工抗原的合成鉴定及免疫原性分析

目的制备中药甘草的活性成分甘草酸(GA)的人工抗原及抗血清,为制备GA的单克隆抗体、并建立快速检测GA的酶联免疫吸附测定(ELISA)提供技术基础。方法将GA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原后,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定其相对分子质量,用此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,并通过间接ELISA法和竞争ELISA法检测其抗体效价和特异性。结果合成的人工抗原GA-BSA中GA与BSA的结合比约为7∶1;免疫小鼠得到特异针对GA的多抗血清,GA抗体的效价为1∶8000。结论成功地合成了GA的人工抗原,且该抗原有较好的免疫原性,可应用于建立GA的免疫分析方法。     

ELISA法与胶体硒法检测HIV抗体的比较

目的:通过ELISA法(双抗原夹心法)和胶体硒法检测HIV抗体的比较,评价胶体硒法(雅培快速试纸条)的检测效果。方法:ELISA法和胶体硒法检测HIV抗体。结果:对250份样品检测,两种初筛检测法的结果极为相关,检测出阳性率差异无显著性,两种方法结果的符合率98.8%;胶体硒法的敏感性高于ELISA。结论:胶体硒法的敏感性已达到ELISA水平,可作为筛查HIV抗体的重要方法。     

多种检测模式在血液抗-HIV筛查应用中的探讨

目的探讨不同检测方法、不同检测试剂对人类免疫缺陷病毒抗体（抗2HIV）检测结果的影响。方法双抗原夹心ELISA一步法和二步法、快速胶体硒法等检测模式来诊断HIV并进行比较分析。结果双抗原夹心ELISA一步法和二步法与快速胶体硒法比较,快速胶体硒法灵敏度100％,阳性预告值95．24％;ELISA法灵敏度95．34％,阳性预告值100％。结论多种检测模式在血液抗-HIV筛查应用是必要的。     

血站系统梅毒抗体检测方法的对比分析

梅毒螺旋体(Treponema Pallidum,TP)侵入人体后,血清中可产生非特异性反应素抗体和抗TP抗原的特异性抗体.目前血站系统梅毒检测采用快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲苯胺红不加热试验(TRUST)检测非特异性反应素抗体,常产生假阳性或假阴性结果[1],近年来国内开始采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗体,而常用的TP抗原血清学试验如TPPA、TPHA等大多用于确证试验.我站于2001年开始TRUST法与TP-ELISA法对献血者标本进行初、复检,取得良好效果.笔者应用TRUST法与TP-ELISA法对19853例无偿献血者标本进行检测,并将阳性标本与梅毒抗体确证试验梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法进行对比分析.     

子宫内膜异位症患者血清抗转铁蛋白抗体的表达及意义

目的建立一种ELISA方法 ,检测患者血清中抗转铁蛋白抗体 ,评价其对子宫内膜异位症诊断的价值。方法用转铁蛋白抗原包被 ,间接ELISA方法检测患者血清中抗转铁蛋白抗体。采集患者血清 ,分 3组 :盆腔内异症组 38例 ,Ⅰ、Ⅱ期 2 0例 ,Ⅲ期 9例 ,Ⅳ期 9例 ;妇科良性疾病对照组 30例 ;正常对照组 4 0例。结果内异症患者血清中抗转铁蛋白抗体阳性率高达 94 .7% ,正常对照组阳性率为 2 .5 % ,良性疾病对照组阳性率为 0 % ,内异症组与两对照组比较差异有显著意义 (P均 <0 .0 1 )。间接ELISA法诊断内异症临床敏感性为 94 .7% ,特异性为 98.6 % ,诊断符合率为 96 .5 %。内异症各组阳性率比较差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论用转铁蛋白抗原包被的间接ELISA法检测血清中抗转铁蛋白抗体诊断内异症敏感性、特异性强 ,诊断符合率高 ,可试作为内异症辅助诊断及疗效检测的一种非创伤性的指标     

第3代和第4代HIV检测试剂在血液检测中的结果分析

<正>HIV诊断试剂盒种类繁多,目前国内血站普遍采用ELISA法检测,ELISA法特异性,敏感度高,现已展到4代抗原抗体检测试剂盒。目前国内试验室在筛查抗-HIV抗体时,大多选用的是第3代双抗原夹心法试剂盒[1],为了保护输血的安全性,降低经输血感染HIV的风     

酶联免疫法测定丙肝病毒核心抗原和抗体的联合应用

目的对所选样本同时进行丙肝病毒核心抗原和抗体的ELISA检测,揭示此两种方法联合应用在丙肝诊断与治疗中的应用价值。方法从临床申请丙肝病毒RNAPCR法检测的临床标本中选取1298份标本（其中阳性结果191例,阴性结果1107例）,同时进行丙肝病毒核心抗原和抗体的ELISA检测。结果丙肝病毒核心抗原和抗体的ELISA检测都阳性,该标本数为60例,同时丙肝病毒RNAPCR法检测亦为阳性,阳性率100%,而传统单一丙肝病毒抗体的ELISA检测法,假阴性率为2.33%（3/129）;丙肝病毒核心抗原和抗体的ELISA检测都阴性,该标本数为1101例,仅有2例丙肝病毒RNAPCR法检测为阳性,假阴性率只占0.18%,而传统单一丙肝病毒抗体的ELISA检测法,假阴性率为1.56%（2/128）;丙肝病毒核心抗原ELISA检测结果阳性而抗体ELISA检测结果阴时,假阴性率为37.5（3/8）,若同时应用此种结果可提示进一步申请丙肝病毒RNAPCR法检测从而大大降低假阴性率。结论对临床样本同时进行丙肝病毒核心抗原和抗体的ELISA检测,能够明显提高丙肝诊断符合率,同时降低假阴性率。     

天津市部分人群“e”抗原、抗体的初步调查

1972年“e”抗原发现,现已确认为乙型肝炎的第三抗原抗体系统,对判定肝炎病人的予后和传染性有一定实用价值。我们于1977年对天津市部分人群“e”抗原抗体系统作了初步调查,结果报告如下: 一、材料和方法 (一) “e”抗原抗体检测方法:标准“e”抗原抗体系由河南医学院肝炎研究组和河南新乡地区防疫站赠给。采用琼脂双扩散及对流电泳两种方法。 1.琼脂双扩散法:据Magnius法略加改进。用缓冲液(参阅对流电泳法)配成0.9％琼脂糖。采用琼脂扩散七孔法,中心孔放参考的e抗体,上下两孔放参考的“e”抗原。于37℃扩散3—4天观察结果。 2.对流电泳法:据河南医学院肝炎组介绍的方法:琼脂缓冲液为0.01MTris和0.1MNaCl加2％聚乙二醇,琼脂糖为0.9％,槽液用Tris缓冲液,     

一种温自身抗体患者血源筛选方法的建立

目的 建立一种自动化、微量、准确和快速的为温自身抗体患者筛选血源的方法.方法 利用微板法中灵敏度最高的梯形板和自动加样器,将含温自身抗体患者的红细胞抗原阴性相对的抗体混合；在528个献血者标本中,筛选相应抗原阴性的献血者,使用手工试管法进行平行实验；记录并对比上述2种方法筛选总过程使用的时间,筛选出的供者标本数.结果 梯形板法、传统试管法均可筛选出相同血型抗原阴性供者,梯形微孔板筛选所需要的总时间为3h,大大低于试管法的26 h,试剂也为试管法的1/20.结论 梯形板和自动加样器的联合应用为温自身抗体患者筛选合适血源,具有快速、准确和节省试剂的优点.     

以精子抗原肽为抗原的抗精子抗体ELISA检测方法的建立

目的建立组合多个精子抗原肽为抗原的检测抗精子抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法用PS3全自动多肽合成仪合成4个特异精子肽,并经反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化和质谱鉴定。用ELISA检测4个合成肽的抗原性,基于对这些合成肽抗原活性的评价,将4个精子抗原肽混合后(组合肽)作为抗精子抗体(AsAb)检测用抗原。结果合成了实验所需要的抗原性肽段,RP-HPLC结果显示纯度达95%以上。以组合肽为抗原建立的检测AsAb的间接ELISA方法,与商品化试剂盒相比符合率为95.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,以组合的精子抗原肽作为包被抗原建立的ELISA方法可提高AsAb检测的灵敏度。     

应用酶联免疫吸附实验检测肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的:制备和纯化O157:H7抗原,免疫家兔和豚鼠,获得高效价的抗O157:H7免疫血清并进行纯化及酶标记.建立对O157:H7感染患者快速诊断方法,做到早期发现及时治疗,有效控制疫情的蔓延. 方法ELISA双抗体夹心法检测O157:H7抗原.步骤:包被特异性抗体,加处理后的粪便等标本,然后加入抗O157:H7酶结合物,最后加入底物显色.结果本课题所研制的抗O157:H7酶结合物只对O157:H7呈阳性反应,而与其他相关细菌无交叉反应.结论应用酶联免疫吸附试验(即双抗体夹心法)对肠出血大肠杆菌O157:H7抗原的检测较常规法实验程序简捷、快速、敏感.临床和现场验证结果表明,其方法具有灵敏度高,特异性强操作简单等特点,为肠出血性大肠杆菌O157:H7的鉴定及快速诊断提供了一种新的检测手段.     

AIF多克隆抗体的制备纯化和鉴定

目的制备抗AIF多克隆抗体。方法用人工合成的AIF抗原肽免疫实验动物制备多克隆抗体并纯化。利用ELISA和Western blot方法检测多克隆抗体的效价和特异性。结果实验获得的血清抗AIF抗体经间接ELISA法检测,效价达到1∶128 000。Western blot检测表明抗体效价高、特异性强。结论实验获得了高效价的特异性的抗AIF抗体,为进一步研究肿瘤的抗凋亡机制提供新的方法。     

ELISA间接法检测肾综合征出血热病人抗体的影响因素探讨

以亲和层析提取的肾综合征出血热(HFRS)病毒结构蛋白为特异性抗原．建立了检测HFRS病人血清中特异性抗体的ELISA间接法。在此基础上．用正交设计法及方阵法对影响ELISA接法特异性的主要因素(封闭因素、包被时间、抗原保存时间、血清浓度及抗原浓度)进行探讨。结果表明,封闭因素及抗原保存时间对ELISA反应的特异性没有显性影响；抗原包被时间在24h结果最佳；最适抗原浓度及血清浓度分别为25μg／ml及1:8000。     

基于IgY的ELISA用于囊尾蚴循环抗原的检测

目的 建立基于IgY的双抗体夹心ELISA用于囊尾蚴病的诊断.方法 制备并纯化抗囊尾蚴循环抗原(CA)卵黄抗体(IgY),建立以抗CA的IgY为捕获抗体,酶标记抗CA的单克隆抗体1A5为检测抗体的双抗体夹心ELISA法,共检测样品450份,并与捕获抗体和检测抗体均为单克隆抗体的ELISA法比较,验证方法的敏感性、特异性与实用性.结果 成功制备并鉴定了特异性IgY抗体,建立了基于Igy的双抗体夹心ELISA检测体系.IgY-ELISA和双单抗-ELISA检测囊尾蚴CA的灵敏度分别为8.3 μg/L和13.9 μg/L.IgY-ELISA检测囊尾蚴病患者血清与脑脊液的CA阳性率分别为100％ (139/139)与89.5％ (17/19),囊尾蚴病猪血清的阳性率100％ (222/222),健康人与健康猪血清的阴性率为100％.结论 建立的基于lgY的双抗体夹心ELISA检测囊尾蚴CA用于囊尾蚴病诊断,具有较高的特异性和敏感性,可用于囊尾蚴病的辅助诊断.     

结核抗体临床应用的观察

随着近年来结核分枝杆菌特异性抗原的发现、纯化及实验技术的不断发展,利用ELISA法或金标法测定患者血清中结核抗体用来诊断活动性肺结核已在临床应用,敏感性和特异性都在不断提高.但因所有的抗原及技术各不相同,各方法的试剂间仍有较大差异[1].对2000年1月～2001年1月间进行的结核抗体测定情况进行分析,报告如下: