痰热清抗呼吸道合胞病毒作用体外实验研究

目的研究中草药注射液痰热清对呼吸道合胞病毒(RSV、Long株)的抑制作用。方法以病毒唑为阳性对照药,采用细胞培养技术,观察不同药物浓度及不同给药方式下RSV攻击后各组Hep-2细胞的病变效应(CPE),在此基础上采用MTT比色法,测定各组细胞的病毒抑制率。以CPE法计算药物的半数中毒浓度TC50,分别以CPE法及MTT法计算药物的半数有效浓度EC50及治疗指数TI,比较不同药物浓度及不同给药方式下热毒宁对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用效果。结果痰热清注射液半数中毒浓度TC50为3.972g/L,预防给药方式、细胞外直接灭活及治疗给药方式均有抗RSV作用,其抗RSV的半数有效浓度(EC50)分别为0.428/1.160/1.189g/L,治疗指数TI分别是9.28、3.42和3.34,痰热清对RSV的抑制作用存在着明显的量效反应关系。结论痰热清对RSV有直接灭活作用,对RSV侵入Hep-2细胞有阻断作用,对RSV在Hep-2细胞内增殖有抑制作用,相同浓度下,以预防作用更显著。     

热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对流感病毒FM_1的抑制作用。方法:以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及四氮唑蓝(MTT)比色法,观察在热毒宁干预下,受FM_1感染的犬肾传代细胞(MDCK细胞)的病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及3种不同给药方式(预防给药、直接灭活及治疗给药)下热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度(TC_(50))为10.11g·L~(-1)。预防给药、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测得其抗流感病毒FM_1的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.625、0.725、0.629 g·L~(-1),治疗指数(TI)分别为16.17、13.94、16.07;MTT比色法测得其抗流感病毒FM_1的EC_(50)分别为1.135、0.770、0.661 g·L~(-1),TI分别为8.91、13.12和15.29。3种方式给药,MTT法测定时,热毒宁对流感病毒FM_1的抑制作用无差异;CPE法测定时,热毒宁浓度在0.812 51 g·L~(-1)及以上对流感病毒FM_1的抑制作用无差异。结论:热毒宁对流感病毒FM_1有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。     

热毒宁注射液对腺病毒-3的体外抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对腺病毒-3(ADV_3)的抑制作用。方法:以阿昔洛韦为阳性对照药,采用细胞培养技术及MTT比色法,观察在热毒宁干预下,转染腺病毒E1A基因人胚肾上皮细胞(293细胞)的细胞病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及不同给药方式下热毒宁对ADV_3的抑制作用效果。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度TC_(50)为15.58 g·L~(-1)。预防、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测定的半数有效浓度EC_(50)分别为1.452、1.321、1.193 g·L~(-1),治疗指数TI分别为10.73、11.79、13.06;MTT法测定的EC_(50)分别为2.356、1.494、1.144g·L~(-1),TI分别为6.61、10.43和13.62。结论:热毒宁对ADV_3有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。热毒宁对ADV_3的抑制作用,以预防给药更明显。     

痰热清注射液对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺损伤的保护作用

目的研究痰热清注射液对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 Balb/c小鼠随机分为对照组、感染组、利巴韦林(100 mg/kg)组和痰热清注射液(2、4、8 mL/kg)组,每组10只。呼吸道合胞病毒滴鼻感染后,尾iv给予相应剂量的药物,给药容积为1 mL/100 g,1次/d,连续给药8 d。计算肺指数,测定肺组织悬液lg TCID50,观察肺组织病理学改变,测定MDA、GSH含量和IFN-γ活性,检测T淋巴细胞转化功能和IL-2活性的变化。结果经痰热清注射液治疗后,与感染组比较,痰热清注射液2、4、8 mL/kg组小鼠肺指数、lg TCID50明显降低(P0.05),呼吸道合胞病毒损伤小鼠肺组织病理状态得到改善。与感染组比较,痰热清注射液2、4、8 mL/kg组小鼠MDA水平、GSH水平明显降低,IFN-γ活性明显升高,SI明显升高(P0.05)。结论痰热清注射液对呼吸道合胞病毒感染小鼠的肺损伤具有保护作用,其机制可能与提高机体免疫应答能力有关。     

联用单磷酸阿糖腺苷和柴胡注射液抑制呼吸道合胞病毒的研究

目的：研究联用单磷酸阿糖腺苷（Ara-AMP)和柴胡注射液对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用。方法：用细胞培养法，采用Vero细胞先感染病毒2h后给药法观察细胞病变（CPE），结果：当100μg/ml的Ara-AMP和1000μg/ml的柴胡注射液联用时，对RSV的抑制呈最大协同作用，当3．125μg/ml的Ara-AMP与31．25μg/ml的柴胡注射液联用时则呈最小协同作用。两药联用的治疗指数（TI）为16，部分抑制浓度（FIC）指数为0．5，小于0．75，结论：联用Ara-AMP和柴胡注射液对RSV的抑制呈显著协同作用。     

牛黄清感胶囊对呼吸道合胞病毒体外预防作用的实验研究

检测牛黄清感胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)的预防的作用,为抗病毒药物的筛选、研发提供实验依据。在VERO细胞培养内,采用病毒细胞形态变化CPE法、MTT染色法,检测不同浓度的牛黄清感胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)的预防作用。实验分一次用药组和三次用药组,计算药物的半数有效浓度IC50,最小有效浓度MIC及治疗指数TI。体外抑制和预防呼吸道合胞病毒的药效实验结果显示"牛黄清感胶囊"具有抑制和预防呼吸道合胞病毒的作用。     

复方野马追胶囊抗呼吸道合胞病毒研究

目的观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)感染及炎性因子IL-8释放的抑制作用。方法采用细胞病变(CPE)观察和活细胞染色方法,观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染细胞的保护。同时,通过ELISA法测定培养上清IL-8的变化。结果复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染有抑制作用,其中以治疗法效果最为明显。同时该药对呼吸道合胞病毒感染后引起的IL-8释放也有明显抑制作用。结论复方野马追胶囊具有明显的体外抗呼吸道合胞病毒感染、降低感染后气道炎症因子释放的作用。     

硫酸卡那霉素体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的评价硫酸卡那霉素体外抗呼吸道合胞病毒作用机制。方法采用细胞培养技术观察硫酸卡那霉素对细胞的毒性和抗呼吸道合胞病毒作用。结果用空斑减数实验测得半数有效剂量(EC50)为(1.71±0.23)mg/ml,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(12.36±0.85)mg/ml,SI为7.2,SI>4(有意义);在不同时间给药对病毒的抑制实验中,呼吸道合胞病毒感染喉癌上皮细胞(Hep-2)细胞后1、2、4、6、8和10h给药均有抑制作用(P<0.05),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程有明显地抑制作用(P<0.05),但是对吸附过程没有抑制作用。硫酸卡那霉素对RSV病毒没有直接的灭活作用。结论硫酸卡那霉素在体外实验中对呼吸道合胞病毒穿入细胞及在细胞内复制的过程均有抑制作用。     

小儿宝泰康颗粒对呼吸道病毒感染的抗病毒作用研究

目的 观察小儿宝泰康颗粒对呼吸道合胞病毒和腺病毒感染细胞的抑制作用,以便为呼吸道病毒感染的治疗提供新的药物。方法 通过细胞培养技术观察不同浓度的小儿宝泰康颗粒对HEp-2细胞的细胞毒作用,采用MTT法并结合CPE法检测病毒感染细胞存活率和病毒抑制率,以利巴韦林作为阳性药物对照,评价该药物对呼吸道合胞病毒和腺病毒感染细胞的抗病毒活性。结果 小儿宝泰康颗粒对HEp-2细胞的半数细胞毒性浓度（TC₅₀）为4.4 mg·mL^-1,对呼吸道合胞病毒的半数有效浓度（EC₅₀）为2.03 mg·mL^-1,而腺病毒的EC₅₀为0.65 mg·mL^-1,抗病毒指数分别为2.17和6.75。在对两种病毒的直接灭活作用中,EC₅₀分别为4.13和8.99 mg·mL^-1。阳性对照药物病毒唑在128 g·mL^-1时,对呼吸道合胞病毒和腺病毒的抑制率分别为92.7%和80.16%。结论 小儿宝泰康颗粒是一种对呼吸道合胞病毒和腺病毒感染有抗病毒作用的药物,有临床应用前景和进一步研究的价值。     

大青叶水溶性提取物对登革病毒抑制作用及机制探讨

目的研究大青叶水溶性提取物的对登革病毒的体外抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法采用细胞病变效应法(CPE)、MTT法和实时荧光RT-PCR法3种方法结合,进行药物对病毒的抑制作用及机制探讨研究。结果大青叶水溶性提取物细胞毒性小,在预防给药方式和直接灭活方式试验对登革病毒抑制作用不显著,在治疗给药方式试验中对病毒的增殖有一定的抑制效果,在有效药物浓度范围内,随着浓度的升高抑制作用增强,在1.250mg.mL-1浓度时,抑制率达56.67%;用荧光RT-PCR法进行验证,结果与MTT法一致。结论大青叶水溶性提取物在体外对登革病毒具有抑制作用,主要可能与抑制病毒在细胞内的复制增殖过程有关。     

中药香囊挥发油对呼吸道合胞病毒抑制作用研究

目的：研究中药香囊复方的抗呼吸道合胞病毒能力。方法：本实验用MTT法测定体外细胞培养环境该中药香囊挥发油对呼吸道合胞病毒毒细胞作用的抑制能力。结果：中药香囊挥发油提取液对呼吸道合胞病毒毒力的半数抑制浓度为5.97g/L,12.5g/L的香囊挥发油提取液的病毒抑制率为91.4%。结论：中药香囊挥发油具有较好的抗呼吸道合胞病毒能力。     

痰热清治疗小儿反复呼吸道感染

目的观察痰热清治疗小儿反复呼吸道感染（RRI）的临床疗效。方法将110例反复呼吸道感染患儿随机分为治疗组和对照组,对照组进行常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用痰热清静脉点滴10d,随后6个月随访其呼吸道感染次数。结果治疗组总有效率96．7％,对照组总有效率73％,两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论痰热清对小儿反复呼吸道感染有较好治疗作用,同时也具有免疫调节作用。     

琼枝麒麟菜多糖抗单纯疱疹病毒2型活性研究

目的：探讨琼枝麒麟菜多糖（EGP）抗单纯疱疹病毒2型（HSV-2）的活性及其作用机制。方法：采用观察细胞病变效应（CPE）法和MTT法评价EGP对Vero细胞的毒性。空斑减数实验检测EGP对HSV-2的综合抗病毒活性、直接灭活作用、吸附及穿刺过程的抑制作用、和感染后的治疗作用。Real-time PCR检测EGP对HSV-2基因表达及其DNA复制的影响。结果： EGP浓度低于125 μg/mL对Vero细胞无毒性。EGP具有较强的综合抗病毒活性,在实验所用最低浓度（1.95 μg/mL）下,EGP可达到80 %的HSV-2病毒抑制率。EGP对HSV-2具有很强的直接灭活和抑制吸附作用,治疗作用相对较弱。同时,EGP可以下调HSV-2早期基因UL52和晚期基因UL27的表达,但是对病毒的DNA复制过程无影响。结论：麒麟菜多糖具有显著的抗HSV-2感染活性,主要通过干扰病毒对细胞的粘附、侵入而发挥作用。     

痰热清联合布地奈德治疗小儿毛细支气管炎的临床观察

毛细支气管炎是婴幼儿常见的呼吸道感染,主要由呼吸道合胞病毒（RSV）引起,临床主要以喘憋、三凹征和喘鸣为特征,严重者可致心力衰竭、呼吸衰竭等并发症,严重危害婴幼儿健康。我们应用痰热清注射液联合布地奈德治疗小儿毛细支气管炎,取得良好效果。现报告如下。     

罗浮山百草油体外抗腺病毒研究

摘要：目的:研究罗浮山百草油（LHO）体外抗腺病毒感染的作用。方法:采用细胞病变CPE法及噻唑蓝（MTT）法检测LHO对于Hep-2细胞的安全剂量,同法检测腺病毒感染及LHO给药前后对腺病毒体外感染的抑制作用。结果:MTT法测得LHO对Hep-2细胞的半数细胞毒性浓度(CC50)为92.41μg·ml-1;腺病毒感染Hep-2细胞后7 d,细胞产生明显病变,LHO给药后能够明显抑制腺病毒感染引起的细胞病变;MTT法测得LHO对腺病毒半数抑制率(EC50)为55.18μg·ml-1,选择指数（SI）为1.67。结论:LHO可以抑制腺病毒的体外感染引起的细胞活性降低及细胞病变。     

应用痰热清联合更昔洛韦治疗小儿呼吸道合胞病毒性肺炎的临床疗效观察

目的：探讨分析痰热清联合更昔洛韦治疗小儿呼吸道合胞病毒性肺炎的临床疗效。方法随机选取我院2013年4月至2015年3月期间接收治疗的84例小儿呼吸道合胞病毒性肺炎患儿作为研究分析对象,将所选患儿按入院单双号分为对照组（ n＝42例）和研究组（ n＝42例）,对照组采用利巴韦林药物进行治疗,研究组则给予痰热清联合更昔洛韦进行治疗,比较两组患儿临床治疗状况。结果比较两组患儿临床治疗总疗效,研究组95．24％比对照组83．33％明显要高,组间数据有统计学意义（ P ＜0．05）。比较两组患儿治疗中不良反应发生状况,研究组7．14％和对照组9．52％,组间数据无统计学意义（P＞0．05）。结论临床治疗小儿呼吸道合胞病毒性肺炎疾病可采用痰热清联合更昔洛韦进行治疗,此治疗方式可明显提高患儿临床治疗疗效,且安全可靠,临床推广应用价值较大。     

清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染细胞超微结构改变影响的实验研究

目的观察清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒（RSV）感染后细胞超微结构改变的影响。方法制备清肺口服液含药血清,应用细胞培养技术,将培养的人胚肺成纤维细胞（Hep-2）分组,利用电镜观察呼吸道合胞病毒攻击后各组人胚肺成纤维细胞超微结构的变化。结果病毒攻击组细胞核增大,核质比增加,核仁凝聚,核膜凹陷成夹层,包涵体形成,线粒体凝聚,粗面内质网扩张,溶酶体增多,核染色质浓缩,细胞外可见病毒颗粒。含药血清感染时给药组细胞核大小基本正常,有的轻度增大,无核仁凝聚,无包涵体形成,粗面内质网形态正常,线粒体基本正常,偶有凝聚现象,细胞间很少找到病毒颗粒。含药血清感染后给药组细胞核增大,核仁凝聚,粗面内质网扩张,线粒体凝聚,但程度较轻。结论RSV感染人胚肺成纤维细胞后,细胞可出现超微结构的改变,清肺口服液含药血清可以减轻这种改变。感染时给药比感染后给药作用更明显。     

单磷酸阿糖腺苷 病毒唑 柴胡及其联合应用对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的研究单磷酸阿糖腺苷(Ara-AMP)、病毒唑、柴胡及其联合应用对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用。方法将Ara-AMP、病毒唑及柴胡分别稀释成不同的浓度,用细胞培养法观察药物的细胞毒性反应;采用Vero细胞先感染病毒2h后给药法观察细胞病变(CPE)和药物对RSV的抑制作用。结果Ara-AMP、病毒唑及柴胡对Vero细胞的毒性剂量(TD)分别为0.25、0.2、2mg/ml;当Ara-AMP、病毒唑分别与柴胡联用时并未增加对细胞的毒性,而Ara-AMP与病毒唑联用时则对细胞的毒性增加;3种药物各自在Vero细胞上对RSV都有抑制作用,Ara-AMP和病毒唑的有效剂量均为25滋g/ml,柴胡为125滋g/ml。当3种药物配伍联合应用时,均可产生协同作用。结论Ara-AMP、病毒唑及柴胡各自对RSV具有显著的抑制作用,它们的联合应用可产生显著协同作用,既可降低用药量,减少毒副反应,又可有效抑制RSV的感染。     

静脉滴注痰热清佐治重症呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎疗效观察

目的：观察痰热清注射液治疗重症呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎的临床疗效。方法：用直接免疫荧光法检测呼吸道脱落上皮细胞中的呼吸道合胞病毒抗原,选出42例阳性患者并符合重症毛细支气管炎诊断标准的患儿进行研究,将患儿随机分成两组,观察组、对照组各21例,观察组在常规治疗的基础上加用痰热清注射液,对照组加用利巴韦林。结果：痰热清注射液组总有效率为90％,利巴韦林组有效率为62％,两组比较有显著性差异。结论：痰热清注射液佐治重症呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎疗效满意。     

痰热清注射液的清热作用及其主要活性成分在LPS诱导发热大鼠中的药物动力学研究

目的 研究痰热清注射液的清热作用及其主要活性成分在发热大鼠体内的药物动力学变化。方法 SD大鼠随机分成4组,分别为正常对照组、发热模型对照组、正常给药组、发热模型给药组。发热模型对照组和发热模型给药组腹腔注射LPS 100μg·kg^-1造模,正常对照组和正常给药组同时给予同剂量生理盐水。所有大鼠30 min后尾静脉给5 mL·kg^-1痰热清注射液,于给药后8 h内每0.5 h测1次体温,给药后不同时间取血浆,同时从血浆中提取3种成分,LC-UV法测定黄芩苷（BG）的浓度,LC-MS法测定熊去氧胆酸（UDCA）和鹅去氧胆酸（CDCA）的浓度。采用WinNonlin 6.3计算药动学参数。结果 痰热清注射液对LPS诱导发热大鼠有显著降温作用,能使发热大鼠体温降至与正常大鼠体温接近,并且在给药后5～8 h血药浓度较低时仍有较好的降温作用。发热模型大鼠和正常大鼠iv 5 mL·kg^-1痰热清后估算BG的半衰期分别为（41.42±7.65）和（50.32±19.10）min,AUC0～τ分别为（2 411.95±523.80）和（2 187.74±447.14）μg min.mL-1,估算UDCA的半衰期分别为（60.22±14.97）和（71.85±18.82）min,AUC0～τ分别为（1 687.59±319.65）和（1 581.38±101.48）μg min·mL^-1,AUC0～∞分别为（1 754.39±311.16）和（1 659.51±110.23）μg min·mL^-1,估算CDCA的半衰期分别为（96.47±25.04）和（94.35±27.41）min,AUC0～τ分别为（407.35±87.29）和（356.89±39.16）μg min·mL^-1,结果表明发热模型大鼠和正常大鼠iv 5 mL·kg^-1痰热清后BG、UDCA和CDCA的药物动力学行为相似。结论 痰热清注射液对LPS诱导发热大鼠有显著降温作用,发热状态下大鼠静脉注射痰热清注射液不影响其主要活性成分BG、UDCA和CDCA的药物动力学行为。