宫颈癌中p53基因多态性的检测及其临床意义

目的探讨p53基因多态性在宫颈癌中的表达及其临床意义。方法采用等位基因特异性PCR（allele specific polymorphism chain reaction,ASP）的方法检测p53基因型在46例宫颈癌患者及84例对照者中的表达。采用SPSS14.0软件分析p53基因多态性与宫颈癌临床特征的关系。结果 p53基因多态性分析显示,Pro/pro基因型在宫颈癌和对照组中的表达差异有统计学意义。HPV状态分层分析,HPV阴性者中Pro/pro基因型在宫颈癌和对照组中的表达差异有统计学意义,HPV阳性者则无显著统计学差异。p53基因多态性与患者的年龄、宫颈癌的临床分期、组织类型、细胞分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移均无显著相关。不同临床分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移的宫颈癌中Pro/pro基因型表达差异与HPV状态无显著相关。结论 p53基因72密码子Pro/pro基因型可能是HPV阴性妇女患宫颈癌的高危因素。p53基因多态性与宫颈癌临床病理性特征无相关性。     

皮肤癌细胞株p53基因及其表达蛋白质的分析

目的：检测皮肤癌细胞株p53基因特性，为今后的p53基因治疗及生物治疗研究提供实验材料。方法：采用聚合酶链反应．单链构象多态性分析，DNA序列分析结合Western blot方法，对4个皮肤癌细胞株的p53基因突变及p53基因的亚型进行研究。结果：3个细胞株中检出了基因突变，即在KUMA3细胞株密码子176的砼基T被A置换，密码子281的砼基G被A置换；在KUMA4细胞株密码子241的砼基CC被TT置换；在KUMA6细胞株密码子266的砼基G被T置换。第72位密码子的多态性分析结果KUMA3和KUMA4细胞株是Arg/Pro杂合型，KUMA5细胞株是Arg/Arg纯合型，KUMA6细胞株是Pro／Pro纯含型。结论：KUMA3，KUMA4和KUMA6细胞株p53基因有突变，而KUMA5细胞株p53基因无突变；KUMA3和KUMA4细胞株是p53-72Arg／Pro基因型，KUMA5细胞株是p53-72Arg／Arg基因型，KUMA6细胞株是p53-72Pro／Pro基因型。     

p53基因第72密码子多态对胃癌辅助化疗预后的影响

目的 研究p53基因第72密码子多态(Arg72Pro)对接受5-氟尿嘧啶(5-FU)为基础辅助化疗胃癌患者预后的影响.方法 根治术后胃癌患者110例,采用5-FU为基础的方案进行辅助化疗.采用聚合酶链反应连接酶检测反应(PCR-LDR)检测p53 Arg72Pro基因多态.结果 Arg/Arg、Arg/Pro和Pro/Pro基因型频率分别为22.7%、52.7%和24.5%.分别有55.5%和42.7%的患者出现复发和死亡.携带Pro/Pro基因型患者无复发生存率和总生存率均显著低于其它基因型患者(P＜0.05).Cox多因素分析结果显示,p53 Pro/Pro基因型是影响患者无复发生存和总生存的独立危险因素(P＜0.05).结论 p53 Arg72Pro基因多态是接受5-FU为基础方案辅助化疗胃癌患者的独立预后因子.     

Meta分析p53基因第72位密码子多态性和结直肠癌的发病风险的关系

目的：Meta分析p53基因第72位密码子多态性和结直肠癌发病易感性的关系。方法：从Medline,Embase和CNKI数据库中检索研究p53基因第72位密码子多态性与和结直肠癌易感性关系的公开发表论文,使用Stata软件合成分析p53各基因型与结直肠癌易感性的关系。使用比值比（Odds Ratio,OR）和95%可信区间（95%Confidence Interval,95%CI）作为效应指标。同时评价所纳入研究的异质性及发表偏移。结果：共有12篇关于p53基因第72位密码子多态性和结直肠癌易感性的公开发表论文被纳入本研究。12篇纳入文献中总共包括病例2459例,对照3632例。合成分析发现p53基因第72位密码子的Arg等位基因、ArgPro基因型和Pro等位基因分布的比值比（OR）和95%可信区间（95%CI）分别为[1.03;0.89～1.18],[0.98;0.89～1.08]和[1.10;0.94～1.31]。以研究人群进行亚组分层分析发现亚洲人中p53基因的Arg等位基因、ArgPro基因型和Pro等位基因分布的OR和95%CI分别为[0.90;0.68～1.19],[1.04;0.90～1.21]和[1.20;0.82～1.77];在高加索人中p53基因的Arg等位基因、ArgPro基因型和Pro等位基因分布的OR和95%CI分别为[1.07;0.95～1.20],[0.94;0.83～1.07]和[0.91;0.70～1.17]。通过Begger和Egger方法检测均未发现存在发表偏移。结论：本研究提示p53基因第72位密码子多态性与结直肠癌的发病率无直接关系,p53基因多态性可能不是结直肠癌易感性的独立影响因素。     

FHIT、HPV16／18在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体（Fragile histidine triad）基因（FHIT）及HPV16／18与宫颈癌发病的关系。方法采用免疫组化法检测50例宫颈鳞癌组织、50例正常宫颈组织中的FHIT基因表达情况和HPV感染情况。结果FHIT在正常宫颈组织中的阳性表达率为72％（36／50）,在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为32％（16／50）,明显低于正常宫颈组织组P〈0．001。HPV16／18在正常宫颈组织的阳性率为12％（6／50）,在宫颈鳞癌组的阳性率为72％（36／50）,两组间比较有统计学差异P〈0．001。相关分析提示FHIT蛋白缺失与HPV16／18感染无相关关系。结论FHIT基因缺失及HPV16／18感染与宫颈癌的发生有关。HPV感染与FHIT蛋白缺失异常是导致宫颈鳞癌的两个独立原因。     

泸州地区妇女HPV感染与宫颈病变程度的关系

目的分析泸州地区妇女不同宫颈病变程度与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。方法采用基因芯片技术对泸州地区783例妇女不同程度宫颈病变样本分为慢性宫颈炎、CINI、CINII、CINⅢ、乳头状瘤及宫颈癌6组,并行HPV基因分型检测。结果783例宫颈病变样本的总感染率为54．79％（429／783）,其中宫颈癌感染率84．07％（95／113）,显著高于其余各组（P〈0．05）;慢性宫颈炎感染率为42．21％（168／398）,显著低于除CINI组以外的各组（P〈0．05）;乳头状瘤组感染率79．31％（23／29）,显著高于慢性宫颈炎及CINI组（P〈0．05）。429例阳性患者样本中,高危感染率80．89％（374／429）,其中乳头状瘤组感染率显著低于其余各组（P〈0．05）,宫颈癌感染率显著高于其余各组（P〈O．05）。HPV阳性患者亚型分布中,仅高危型感染者乳头瘤样病变感染率显著低于其余各组（P〈0．05）,仅低危感染者乳头状瘤感染率显著高于其余各组（P〈0．05）。结论泸州地区宫颈病变妇女高危HPV感染与宫颈癌及宫颈上皮内瘤变有关,并有随宫颈病变程度加重而升高的趋势。低危HPV感染为尖锐湿疣等良性性传播疾病的主要病原因子。     

p53基因蛋白在宫颈上皮内瘤样变的表达及意义的研究

目的探讨p53基因蛋白在宫颈上皮内瘤样变（CIN）的表达及意义。方法随机选取2010年3月。2012年9月在本院治疗的100例患者的手术标本为研究对象,实验组60份宫颈上皮内瘤样变标本采用免疫组化染色检测,依据CIN的级别分成3组,对照组40份标本采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡情况,分成阳性组（宫颈癌）和阴性组（正常宫颈鳞状上皮）;分析5组间的p53阳性表达率。结果正常宫颈鳞状上皮的p53蛋白表达率为0,而宫颈癌p53蛋白表达率为40％,且CIN分级越高,p53阳性表达率也越高,且十＋＋的概率也越高;宫颈癌的细胞分级越高,p53蛋白表达率也越高,即癌细胞的分化率越差,p53蛋白表达率越高,CINI与CINⅡ、Ⅲ比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论p53基因蛋白表达与CIN的发生、发展有密切关系,是宫颈癌发生的早期事件。     

人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的作用

目的：了解生殖道人乳头瘤病毒高危型（HPV16／18）感染与宫颈病变、宫颈癌的关系,以便早期发现和治疗宫颈上皮内瘤样变（CIN）和原位癌。方法：利用膜式液基薄层细胞学（TCT）技术筛查与病理学诊断相结合,以宫颈炎为对照组,对宫颈炎和高危患者（如ASCUS、CIN、宫颈原位癌）共685例进行HPVl6／18型荧光定量PCR检测。结果：高危患者中HPV16／18感染率为64．2％（124／193）,其中宫颈癌、CINⅢ和CINⅡ的HPV16／18感染率为97．2％（69／71）,CINⅠ感染率为52．0％（26／50）,ASCUS感染率为40．3％（29／72）,宫颈炎对照组感染率为11．2％（55／492）,宫颈炎和高危患者两组结果比较有统计学差异（P〈O．005）,高危患者中〈40岁感染率为69．0％（40／58）,≥40岁感染率为62．2％（84／135）,两组结果比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：高危型HPV16／18感染与宫颈病变,特别是宫颈癌、宫颈癌前病变的发生有明显的相关性,并且病变越重,HPV的感染率越高。提示宫颈癌的防治重点应放在高危型HPV感染者,并且宫颈病变的发生与年龄无相关性。     

P53 Codon 72基因多态性与前列腺癌易感性荟萃分析

目的 探讨P53基因Codon 72位点多态性与前列腺癌易感性的关系.方法 使用数据库检索相关文献,按纳入标准搜索研究P53 Codon 72 Arg/Pro多态性与前列腺癌易感性相关的文献,采用STATA软件进行统计分析.结果 共有1706例前列腺癌患者和2455名对照个体被纳入当前荟萃分析.分析表明P53 Codon 72 Arg/Pro多态性与前列腺癌易感性无显著相关（等位基因比P=0.406,OR=1.07,95％ CI：0.92～1.24;显性模式P=0.166,OR=1.05,95％ CI：0.98～1.13;隐性模式P=0.462,OR=0.87,95％ CI：0.61～1.25）.结论 P53 Codon 72 Arg/Pro基因多态性与前列腺癌无明显相关性.     

支气管哮喘分型与β2-肾上腺素能受体基因多态性的关系

目的 探讨β2-肾上腺素能受体(β2-AR)16、27位点基因多态性与支气管哮喘分型的关系。方法 采用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)方法,分析40例外源性、34例内源性哮喘患者的β2-AR基因多态性。结果 内、外源性哮喘组β2-AR基因16位点基因型频率分别为：Arg／Arg 17．7％、17．5％,Arg／Gly 52．9％、42．5％,Gly／Gly 29．4％、40．0％,两组比较差异无显著性。27位点基因型频率分别为：Gin／Gln 11．7％、52．5％,Gln／Glu 70．6％、37．5％,Glu／Glu 17．7％、10．0％,两组比较差异有显著性。结论 β2-AR基因27位点多态性与支气管哮喘分型相关联,16位点多态性与支气管哮喘分型无关联。     

p53 Codon 72 polymorphism in oral exfoliated cells in a Sudanese population

Earlier studies have investigated the tumor suppressor gene p53 as a co-factor in the development of oral squamous cell carcinoma (OSCC). Our previous studies have indicated that chronic use of Sudanese snuff (toombak) and the presence of human papilloma virus (HPV) may be involved in the high prevalence of OSCC in Sudan. This study investigated the prevalence of p53 codon 72 polymorphism in brush biopsies obtained from a Sudanese population. A total of 174 individuals were included in the study; chronic toombak users (n=152) and non-users (n=22). DNA was extracted from all the samples and genotyped for the codon 72 polymorphism by polymerase chain reaction/restriction fragment length polymorphism. The Arg/Pro genotype was found in 53% of the 174 study participants, compared to 21% found with Arg/Arg and 26% found with Pro/Pro. Stratifying by toombak use, 28 (18%), 45 (29%) and 79 (52%) of the 152 samples from toombak users had Arg/Arg, Pro/Pro and Arg/Pro respectively, compared to 9 (41%), 0 (0%) and 13 (59%) found in the 22 samples from non users. The differences between the samples from toombak users and non users in Arg/Arg and Pro/Pro codon 72 polymorphism and HPV infection were statistically significant (p<0.05). Our study indicated that a high prevalence of the genotype Arg/Pro at the p53 codon 72 may contribute to susceptibility to OSCC, especially in combination with the use of carcinogenic tobacco-specific nitrosamine (TSNA)-rich toombak. Our observations warrant an in-depth study for understanding the role of p53 polymorphism in human oral cancers.     

Tp53单核苷酸多态与晚期NSCLC对铂类药物化疗敏感性关系

目的 探讨Tp53基因单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞型肺癌(NSCLC)患者对铂类药物为主的化疗方案敏感性的关系.方法 用新型三维DNA微阵列检测芯片进行基因分型,测序法验证该芯片结果,比较不同基闪型对化疗敏感性的影响.结果 携带杂合基因型和突变纯合型对化疗敏感性的影响趋势不同;但多种因素校正、分析差异无统计学意义.结论 Tp53 Pro72Arg位点基因状态可能对NSCLC患者化疗敏感性有影响.     

Chilean pilot study on the risk of lung cancer associated with codon 72 polymorphism in the gene of protein p53

The p53 gene has a polymorphism at codon 72 that presents the arginine or proline genotype, although this polymorphism has been associated with genetically determined susceptibility to lung cancers, the literature has not been consistent with this association. In Chile lung cancer represents the second cause of mortality from cancer. p53 codon 72 polymorphism frequency was studied in a Chilean subpopulation of 133 healthy controls and 111 lung cancer patients. The allelic distribution of the three genotypes (ArgArg, ArgPro, ProPro) in healthy normal controls was 41, 44 and 15%, respectively, which differs slightly from that of lung cancer patients, which was 38, 40 and 22%. A relation between the presence of the Pro allele and lung cancer risk in male smokers was observed. Relative risks were O.R.=2.47 (95% CI: 1.34-4.54) for one single nucleotide polymorphic allele (Pro) and O.R.=3.88 (95% CI: 1.16-13.39) for ProPro genotype.     

Intron 3 16 bp duplication polymorphism of p53 is associated with an increased risk for breast cancer by the age of 50 years

We used a large population-based case-control study to determine whether three known p53 polymorphisms, intron 3 16 bp duplication, codon 72(Arg/Pro) and intron 6 MspI restriction fragment length polymorphism, alter the risk for breast cancer in German women. For all three polymorphisms, the odds ratios (ORs) for breast cancer were increased in women carrying the rare allele; however, this was statistically significant only for the 16 bp duplication polymorphism. Compared with the 16 bp duplication wild-type A1/A1 genotype, ORs for A1/A2 genotype and A2/A2 genotype were 1.3 [95% confidence interval (CI) 1.0-1.7] and 1.7 (95% CI 0.8-3.4), suggesting an allele dosage effect (trend test, P = 0.03). Significant evidence was found for a differential effect by family history of breast cancer (P = 0.03 for interaction), with the OR being 5.3 among women with a first degree family history. Our data suggest that inheritance of an intronic polymorphism in the p53 gene increases breast cancer risk appreciably in women by the age of 50 years with a family history of breast cancer in the German population.     

吸烟及HPV16/18 感染对低度宫颈上皮内瘤自然消退的影响

目的宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasias,CIN)是一组与宫颈浸润癌密切相关的癌前期病变的统称,包括宫颈不典型增生和宫颈原位癌,反映了宫颈癌发生中连续发展的过程,本研究探讨吸烟及HPV16/18感染与宫颈上皮内瘤变自然消退之间的关系。方法追踪2009年1月～2010年12月在长沙市三医院及长沙市妇幼保健院确诊为宫颈上皮内瘤变Ⅰ、Ⅱ期患者并在1年后复检者共385例,其中吸烟者98例,不吸烟者287例,高危HPV16/18感染者242例,无高危HPV16/18感染者143例。1年后复检385例患者中166例宫颈上皮内瘤变自然消退。对HPV16/18及吸烟对宫颈上皮瘤变转归的关系进行统计学分析。结果一年后385例CIN中166自然消退,非HPV16/18感染患者较HPV16/18感染患者有更高的宫颈上皮内瘤变自然消退率(60.8%vs32.6%),而其中吸烟的HPV16/18感染者宫颈上皮内瘤变自然消退率最低(27.1%)。结论Ⅰ、Ⅱ期宫颈上皮内瘤变在12月内可自然消退,HPV感染(HPV16/18)是宫颈上皮内瘤变持续的重要因素,吸烟可能促进HPV感染患者宫颈上皮内瘤变的持续存在。     

Association of EGF and p53 gene polymorphisms and colorectal cancer risk in the Slovak population

During the transformation process single nucleotide polymorphisms (SNPs) of key genes, such as p53 Arg72Pro or EGF A61G, may mediate various cellular processes. These variants may be associated with colorectal cancer risk (CRC), but conflicting findings have been reported. The purpose of this study was to determine the association of the SNPs in 5′ UTR of EGF A61G and p53 Arg72Pro and CRC in the Slovak population. The present case-control study was carried out in 173 confirmed CRC patients and 303 healthy subjects. Genotyping was performed by PCR-RFLP methods. Significant association was observed between age and CRC risk (p=0.001). Lower CRC risk was seen in younger patients carrying genotype p53 Arg72Pro (0.14; 95% CI 0.02–0.99, p=0.049). Gender-stratified analysis showed a significant inverse association of the polymorphism EGF G61G with CRC risk (0.48; 95% CI 0.2–0.9, p=0.04) only in male patients. Tumour site genotype distribution revealed that female patients with localized colon cancer were significantly associated with p53 Pro72Pro genotype (4.0; 95% CI 1.27–12.7, p=0.04) whereas the cancer of rectosigmoid junction was associated with the EGF G61G genotype (4.5; 95% CI 1.2–16.97, p=0.02). Combination of p53 Arg72Pro or EGF A61G polymorphisms were not associated with CRC risk by using logistic regression.     

HPV16载量与新疆维吾尔族宫颈癌关系的研究

目的 探讨不同宫颈病变组织中HPV16E6、E7基因载量与新疆维吾尔族宫颈癌前病变进展的关系;评价实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HPV在临床的应用价值.方法 收集124例宫颈组织(包括宫颈癌和癌前病)和96例宫颈脱落细胞标本,应用实时荧光定量PCR (FQ-PCR)检测早期基因E6、E7和β-肌动蛋白的拷贝数,分析病毒载量.结果 ①β-肌动蛋白阳性标本中,正常对照组、宫颈炎组、CIN组和宫颈癌组HPV16 E6阳性率分别是3.29％、93.3％、75.7％和83.1％;E7阳性率分别是64.8％、86.6％、81％和100％,E6/E7的检出率随宫颈病变严重程度升高,但宫颈癌、CIN、宫颈炎3组之间E6/E7阳性率无显著性差异(x2=0.66,P＞0.05; x2 =0.08,P＞0.05).②HPV16 E6载量(均数±标准差)在正常对照:0.00068±0.00、CINⅠ:1.12±1.98、CINⅡ:0.69±1.02、CIN Ⅲ:3.22±7.86、宫颈癌:2.83±4.59.不同病变组病毒载量分布差异有统计学意义(P＞0.01),与病变严重程度相关(r=0.83,P＜0.01).③HPV16 E7载量(均数±标准差)在正常对照:1.80±5.86、CINⅠ:2220±3894、CIN Ⅱ:11340±21848、CINⅢ:7908±1.02、宫颈癌:9194±20478.各级病变载量分布差异有统计学意义(P＞0.01),与病变严重程度相关(r=0.754,P ＜0.01).结论 采用FQ-PCR检测宫颈组织HPV16 E6/E7结果显示,病毒载量与新疆维吾尔族妇女宫颈病变程度高度相关,其病毒载量可能是预测宫颈病变的理想指标;FQ-PCR方法检测宫颈病变中HPV DNA载量,具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,对宫颈癌的普查和治疗有指导意义.     

HPV16-E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及临床应用

目的 研究人乳头瘤病毒16型E6蛋白（human papillomavirus-16 E6 protein,HPV16-E6）在宫颈病变组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测HPV16-E6蛋白在宫颈正常组织、慢性炎症、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）、浸润癌上皮中的阳性表达情况.结果 HPV16-E6在正常宫颈、宫颈炎、CIN,宫颈癌各组中,阳性表达率分别为0.5%、38.35%、46.15%、71.11%,4组比较差异有统计学意义（χ2=27.50,P〈0.01）.经χ2分割后比较（α′=0.007143）,宫颈癌组、CIN组、宫颈炎组的阳性率显著高于正常宫颈组（P〈0.05）,宫颈癌组的阳性率显著高于宫颈炎组（P〈0.01）.HPV16-E6与年龄、病理类型、宫旁或脉管浸润相关（P〈0.05）.结论 HPV16-E6与宫颈癌的启动、发生、发展及侵袭转移均密切相关.HPV疫苗对于宫颈癌的防治有广泛的应用前景.