复方藤梨根制剂调节PG细胞间隙连接蛋白Cx43基因表达水平的研究

目的探讨复方藤梨根制剂对高转移性人肺癌细胞(PG)的生长及细胞间隙连接蛋白Cx43表达水平的影响。方法采用MTT法体外观察不同浓度复方藤梨根制剂对PG细胞的杀伤作用;应用流式细胞仪检测用药后PG细胞Cx43的表达水平。结果4个浓度的复方藤梨根制剂对PG细胞均有杀伤作用,呈剂量依赖关系。与对照组相比,Cx43表达水平逐渐上升。结论复方藤梨根制剂对PG细胞具有生长抑制作用,其机制可能与上调间隙连接蛋白Cx43表达水平有关。     

复方藤梨根制剂对裸鼠荷人肺巨细胞癌细胞E-钙黏附素影响的研究

目的研究复方藤梨根制剂对荷人肺巨细胞癌(PG)裸鼠移植瘤的抗癌效应,并初步探讨其对瘤体细胞E-钙黏附素(E-cad)表达水平的影响。方法建立PG裸鼠移植瘤模型;复方藤梨根制剂灌胃21d,称瘤重;采用免疫组化ABC法检测E-cad的表达。结果复方藤梨根制剂三个剂量组与对照组对比,均能明显抑制肿瘤生长,并提高E-cad表达。结论复方藤梨根制剂对PG裸鼠移植瘤具有的抑瘤效果,明显上调PG细胞E-cad的表达。     

复方藤梨根制剂对裸鼠荷人肺巨细胞癌细胞E-钙黏附素影响的研究

目的研究复方藤梨根制剂对荷人肺巨细胞癌（PG）裸鼠移植瘤的抗癌效应，并初步探讨其对瘤体细胞E-钙黏附素（E—cad）表达水平的影响。方法建立PG裸鼠移植瘤模型；复方藤梨根制剂灌胃21d，称瘤重；采用免疫组化ABC法检测E-cad的表达。结果复方藤梨根制剂三个剂量组与对照组对比，均能明显抑制肿瘤生长，并提高E-cad表达。结论复方藤梨根制剂对PG裸鼠移植瘤具有的抑瘤效果，明显上调PG细胞E-cad的表达。     

两种藤梨根制剂促凋亡作用的实验研究

目的研究两种藤梨根制剂促进人食管癌Eca-109细胞凋亡的机制及差异。方法采用MTT比色法检测藤梨根正丁醇药液及乙酸乙酯药液在不同浓度(1μg/mL、10μg/mL、100μg/mL等)及不同时间(24h、48h、72h等)对Eca-109细胞生长的抑制作用;采用TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应;采用免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及caspase的表达。结果藤梨根正丁醇药液对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达87.2%。两种藤梨根制剂对瘤细胞有明显的凋亡效应,而在对照组未见有明显凋亡现象。瘤细胞作用24h、48h、72h后分别与对照组比较,用药组Bax蛋白表达明显增强(P<0.01);同时伴有Bcl-2表达减弱,72h后最明显,差异有显著意义(P<0.01)。藤梨根正丁醇药液促进caspase-3、caspase-9表达明显增强,而对caspase-8表达影响较小。藤梨根乙酸乙酯药液作用于肿瘤细胞时也可观察到类似的效应,且正丁醇药液对肿瘤细胞生长的抑制率高于乙酸乙酯药液。结论藤梨根可通过下调Bcl-2表达,激活caspase-9、caspase-3诱导Eca-109细胞凋亡。     

白藜芦醇对高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43表达水平的影响

目的 观察白藜芦醇治疗高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43的表达,阐述白藜芦醇降血脂作用的分子机制.方法 将50只Wistar大鼠随机均分为正常组、高脂模型组、白藜芦醇高、中、低(150、100、50 mg·kg-1·d-1)剂量组,尾静脉取血,测血清中的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(NEFA)等指标;Trizol法提取心肌总RNA,利用RT-PCR技术和免疫组织化学方法结合激光共聚焦技术测定间隙连接蛋白43在正常、高脂、给药3种情况下的差异.结果 高脂血症时,血清中的TC、TG、LDL、NEFA含量升高(P<0.05),HDL含量降低(P<0.05).经白藜芦醇治疗后,TC、TG、LDL及NEFA含量降低(P<0.05),HDL含量上调至接近正常水平.高脂组与正常组比较,间隙连接蛋白43的mRNA表达显著减弱(P<0.05),给药组与高脂组比较,间隙连接蛋白43的mRNA表达显著增强(P<0.05);高脂组与正常组免疫组化比较,间隙连接蛋白43的表达显著减弱(P<0.05),给药组与高脂组比较,其表达显著增强(P<0.05).结论 白藜芦醇具有降血脂作用,药效与间隙连接蛋白43的表达改变有一定联系.     

人脑胶质瘤中Cx43mRNA及其蛋白的表达意义

目的 探讨Cx43基因表达与胶质瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术检测Cx43基因的表达。结果Cx43mRNA及其蛋白表达随着胶质瘤组织学分级的提高呈下降趋势,Cx43蛋白表达结果与Cx43mRNA的表达结果之间呈显著正相关（P〈0．05）。人脑胶质瘤中Cx43mRNA及蛋白表达与肿瘤分级呈负相关。结论Cx43基因表达与胶质瘤恶性进展密切相关。     

下调间隙连接蛋白43表达对血管内皮细胞生物功能的影响

间隙连接蛋白43(Cx43)在伤口愈合过程中发挥重要作用。血管生成也是创伤修复的一个重要特征,但目前很少有关Cx43对血管内皮细胞功能影响的研究。本文采用小干扰RNA(si RNA)特异性减少Cx43在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的表达,研究Cx43的表达下调对HUVEC细胞间信号传递、活力、增殖、迁移以及血管生成活性的影响。结果表明,经si RNA处理后,HUVEC内Cx43的表达降低约80%(P<0.05),HUVEC细胞间信号传递功能减少约65%(P<0.05),细胞活力、增殖和迁移活性显著降低(P<0.05)、血管生成速度减缓。推测在创伤早期维持Cx43的低水平表达,抑制渗透性和炎性等异常血管的生成速度,是保证伤口愈合过程中各关键步骤协调进行的前提条件之一。     

藤梨根乙醇提取物联合CIK细胞对胃癌细胞SGC-7901杀伤作用的研究

目的观察抗肿瘤中药藤梨根的乙醇提取物与CIK细胞在体外联合对胃癌细胞SGC-7901的杀伤作用。方法运用倒置显微镜观察体外培养的胃癌细胞SGC-7901在分别加入不同浓度的藤梨根醇提物以及不同效靶比的CIK细胞24、48 h后的形态变化;采用MTT法检测藤梨根醇提物、CIK细胞以及两者联合作用后的胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制率。结果当1 mg/ml的藤梨根醇提物与效靶比为20：1的CIK细胞相联合24 h,杀伤效率高于单用藤梨根醇提物及CIK细胞（P〈0.05）。结论藤梨根醇提物与CIK细胞在一定条件下联合,具有协同杀伤胃癌细胞的作用。     

激动M_3受体对间隙连接蛋白43表达的影响

目的探索激动心肌M3受体后间隙连接蛋白43的变化情况,进一步发现M3受体作为抗心律失常药物作用新靶点的作用机制。方法通过免疫组化、划痕标记荧光传输技术结合激光共聚焦显微镜和RT-PCR的方法,研究激动M3受体对间隙连接蛋白43表达的影响。结果证实激动M3受体可以改善细胞和细胞之间的通讯,改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构,且其磷酸化水平在间隙连接蛋白的重构过程中发挥了重要作用,并且还发现激动M3受体可以恢复病理条件下下降的间隙连接蛋白43的mRNA水平。结论激动M3受体可以改善病理条件下间隙连接蛋白43的重构,并且其磷酸化形式在闰盘重构中发挥重要的作用。     

间隙连接蛋白45在成人心肌的表达

目前对成人心肌连接蛋白（Cx）40、Cx43表达的研究已有报道,但对Cx45在成人心肌的分布情况研究较少。因此,本实验拟观察成人心肌Cx45的表达,明确其表达分布情况,为深入了解Cx45的功能提供形态学基础。