海洋硫酸多糖DPS对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

本文采用碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和白介素－１（ＩＬ－１）氘诱导的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖模型,以ＭＴＴ法观察了海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。大鼠血管平滑肌细胞在ＤＰＳ浓度为０．００１μｇ／ｍｌ～１００μｇ／ｍｌ的２液中孵育２４ｈ后,分别加入ｂＦＧＦ（５０ｍｇ／ｍｌ）或ＩＬ－１（５０Ｕ／ＭＬ）再孵育２４ｈ,用ＭＴＴ法测定海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。结果表明,     

海洋硫酸多糖DPS对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制的探讨

目的　研究海洋硫酸多糖 (DPS)对大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及其作用机制。方法　建立碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和白介素 1(IL 1)所诱导的VSMC增殖模型 ,以MTT法观察DPS对VSMC增殖的影响 ,分别用Griess重氮化反应法和放免法测定VSMC上清液中一氧化氮 (NO)、血管紧张素II(AngII)和内皮素 1(ET 1)的含量。结果　DPS在 0 0 1- 10 μg·mL-1浓度下 ,对bFGF或IL 1所致的VSMC增殖均有明显抑制作用。DPS呈剂量依赖性增加NO合成及降低AngII和ET 1的生成或释放。 结论　DPS对VSMC增殖有抑制作用 ,其机制可能与增加一氧化氮合成及降低血管紧张素II和内皮素 1的生成或释放有关。     

海洋硫酸多糖DPS对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制的探讨

目的　研究海洋硫酸多糖(DPS)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其作用机制。方法　建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白介素-1(IL-1)所诱导的VSMC增殖模型,以MTT法观察DPS对VSMC增殖的影响,分别用Griess重氮化反应法和放免法测定VSMC上清液中一氧化氮(NO)、血管紧张素II(AngII)和内皮素-1(ET-1)的含量。结果　DPS在0.01-10μg·mL^-1浓度下,对bFGF或IL-1所致的VSMC增殖均有明显抑制作用。DPS呈剂量依赖性增加NO合成及降低AngII和ET-1的生成或释放。结论　DPS对VSMC增殖有抑制作用,其机制可能与增加一氧化氮合成及降低血管紧张素II和内皮素-1的生成或释放有关。     

海洋硫酸多糖916对实验性高脂血症大鼠血浆中含硫氨基酸的影响

观察了硫酸多糖９１６对实验性高脂血症大鼠血浆中游离含硫氨基酸水平的影响。结果表明,高脂血症大鼠血浆中含硫氨基酸均比对照组明显升高;９１６给药组能够明显降低血浆中含硫氨基酸的水平。     

海洋硫酸多糖药物"989"对大鼠脑缺血再灌注的影响

采用栓线法和四动脉结扎法造成大鼠脑缺血再灌注模型,观察了海洋硫酸多糖类药物“９８９”对缺血脑组织的保护作用。结果发现,“９８９”在２～１０ｍｇ．ｋｇ＾－１范围内静脉注射,能明显缩小脑栓塞大鼠２４ｈ的脑梗塞范围,改善行为障碍,对局灶性脑缺血和全脑缺血均有明显治疗作用。进一步研究发现,其作用机制可能与抑制脑组织ＴＮＦ－α表达有关。     

超氧阴离子对牛主动脉平滑肌细胞收缩性的影响

目的观察超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法原代培养牛动脉平滑肌,使用数字荧光显微镜技术测定细胞内钙,采用胶原凝胶收缩方法分析收缩性。结果超氧阴离子对高钾溶液及A-23187诱导的钙内流无明显影响(P>0.05),但可使凝胶收缩面积减小。超氧阴离子可使高钾诱导的胶原凝胶收缩面积从18.32%±2.11%减小至5.13%±0.45%(P<0.01),使A-23187诱导的胶原凝胶收缩面积从17.16%±1.10%减小至4.31%±0.04%(P<0.01)。结论超氧阴离子可明显抑制牛主动脉平滑肌细胞收缩性,但对电压依赖性钙通道引起的钙内流及A-23187诱导的细胞内钙变化无影响。     

马尾松花粉硫酸酯化多糖对大鼠主动脉平滑肌细胞[Ca2＋]i调控及增殖的影响

目的研究马尾松花粉多糖PPM60．A及其硫酸酯化物SPPM60-A对大鼠动脉平滑肌细胞[Ca2＋]i调控及增殖的影响。方法常规水提醇沉法制备马尾松花粉多糖,SephacrylS-400HR色谱分离得PPM60-A,氯磺酸一吡啶法得硫酸酯化物SPPM60-A,酯化度为1．28。酶解法分离制备大鼠动脉平滑肌细胞,测定酯化前后多糖对其胞内[Ca2＋]i和细胞增殖的影响。结果PPM60．A和SPPM60-A均可以降低[Ca2＋]i,抑制高K＋和去甲肾上腺素（NE）诱导的钙离子升高,降低高K＋引起的钙离子水平上升,对NE诱导的血管主动脉平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用。PPM60．A作用效果好于SPPM60-A。结论PPM60．A及SPPM60．A均能抑制细胞外Ca2＋内流,抑制血管平滑肌细胞增殖。     

海洋硫酸多糖DPS抑制血管平滑肌细胞释放血管紧张素Ⅱ和内皮素-1作用机理的探讨

采用碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖模型 ,对海洋硫酸多糖 DPS抑制 VSMC释放血管紧张素 (Ang )和内皮素 - 1(ET- 1)的机理进行了初步探讨。取生长稳定的 5～ 8代 VSMC,以密度为每孔 5× 10 4 接种在 2 4孔培养板内 ,在含 10 % M199的培养液中 37℃孵育。待细胞贴壁生长稳定后 ,将细胞分为正常对照组 ,b FGF组、DPS组、DPS与 L - NAME联合用药 (DPS L - NAME)组。DPS组和 DPS L- NAME组分别在加入含有 DPS(1mg· L-1)的 M199培养液或含有 DPS(1mg· L-1)和一氧化氮合酶抑制剂 (L - NAME,0 .1mg· L-1)的培养液中预孵 2 4 h后 ,正常对照组除外 ,各组均加入含终浓度为 50 mg· L-1的 b FGF继续培养 2 4 h。用均相竞争放射免疫分析法测定 VSMC上清液 Ang 和 ET- 1的含量。结果表明 ,0 .1mg·m L-1的 L- NAME能完全阻断 DPS抑制 VSMC释放 Ang 的作用 ,但对 ET- 1的释放未见明显影响。提示一氧化氮可能介导 DPS抑制 VSMC释放 Ang 的作用 ,对抑制 ET- 1的释放则无介导作用。     

硫酸茯苓多糖对抑郁症大鼠海马AMPA受体表达的影响

目的探讨硫酸茯苓多糖(SP)是否通过调节α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体的表达而生产抗抑郁作用。方法实验设假手术组、抑郁症模型组、SP(25,50和100 mg·kg~(-1))剂量组及SP(100 mg·kg~(-1))+GYKI 52466(3 mg·kg~(-1))剂量组,每组12只。大鼠卵巢摘除加慢性不可预知性温和应激(CUMS)法诱导抑郁症动物模型。连续灌胃和腹腔注射给药21 d。糖水消耗、强迫游泳及敞箱试验观察大鼠行为变化。尼氏染色观察大鼠海马神经元病理变化。免疫组化法观察海马脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。Western蛋白印迹法检测海马AMPA受体GluR1、磷酸化GluR1及c AMP反应元件结合蛋白(CREB)、p-CREB和BDNF蛋白表达。结果与模型组相比,SP各给药组大鼠强迫游泳不动时间明显降低而自发活动明显增加,同时糖水摄入量及糖水偏爱百分比明显升高(P<0.05,P<0.01),海马神经元损伤显著减轻,GluR1和GluR1磷酸化水平及p-CREB和BDNF表达均明显升高。但与SP(100 mg·kg~(-1))剂量组相比,SP+GYKI 52466组大鼠强迫游泳不动时间又明显增加而自发活动又明显减少,糖水摄入量及糖水偏爱百分比又明显降低,海马GluR1和p-GluR1及p-CREB和BDNF表达又明显降低(P<0.01)。结论 SP具有抗抑郁作用,其机制可能通过增强海马GluR1受体功能,进而上调海马p-CREB和BDNF蛋白表达有关。     

氨基胍和维生素C对糖尿病大鼠血脂水平和主动脉硫酸乙酰肝素蛋白多糖表达的影响

目的观察氨基胍(Am i)与维生素C(V itC)合用是否可通过抑制糖基化和氧化应激对糖尿病大鼠主动脉起到保护作用。方法腹腔注射链脲佐菌素诱导建立1型糖尿病大鼠模型,Am i,V it C和V it C+Am i治疗组分别ig Am i 100 mg.kg-1,V itC 100 mg.kg-1或V itC 100 mg.kg-1+Am i 100 mg.kg-1,每日1次,给药16周。观察大鼠的一般状况;血糖、血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、糖化血红蛋白(HbA1c)和糖化低密度脂蛋白(G-LDL)水平;HE染色及免疫组织化学检测主动脉内膜硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)表达。结果与模型组相比,Am i和V it C可增加糖尿病大鼠的体重,但对血糖水平无影响;V it C降低TG、TC和LDL水平,显著提高HDL水平,Am i及V it C明显降低HbA1c和G-LDL水平,并增强主动脉HSPG表达。Am i+V it C的治疗作用较Am i及V it C更为明显,但所有的观察指标未恢复至正常组水平。结论Am i和V it C无降血糖作用,但可通过抑制糖基化和氧化应激对糖尿病大鼠主动脉起到保护作用。     

钙通道阻滞剂对大鼠肝细胞钙释放激活的钙电流的影响(英文)

目的:研究钙通道拮抗剂对大鼠肝细胞钙释放激活的钙电流(I_(CRAC))的影响,方法:应用全细胞膜片箝技术。结果:I_(CRAC)的电流峰值是(-0.41±0.09)nA(n=15),反转电位约为0 mV,维拉帕米(Ver),地尔硫(艹卓)(Dil)和硝苯地平(Nif)显著降低I_(CRAC),不影响它的反转电位,Ver 5 μmol·L~(-1)的抑制率是40％±12％(n=3),Ver 50 μmol·L~(-1)使,CRAC的幅值从(-0.49±0.12)nA降到(-0.20±0.09)nA(n=5,P<0.01),抑制率为57％±15％,Dil和Nif 50 μmol·L~(-1)分别从(-0.43±0.10)nA(n=5),(-0.32±0.08)nA(n=5)降到(-0.29±0.07)nA(P<0.01),(-0.27±0.08)nA(P<0.01),抑制率分别为31％±11％,19％±7％,I_(CRAC)的幅值大小依赖细胞外钙浓度。I_(CRAC)在含台氏液1.8 mmol·L~(-1)中电流幅值为(-0.21±0.08)nA(n=3,P<0.01),结论:这三种钙通道拮抗剂有效抑制,I_(CRAC)并且通过抑制I~(CRAC)减少肝细胞钙超载。     

氯通道阻断剂对大鼠主动脉环收缩和舒张反应的影响

目的　观察氯通道阻断剂DIDS和呋塞米(furosemide)对苯肾上腺素 (phenylephrine,PHE)引起的收缩反应和ATP引起的内皮依赖性舒张效应的影响。方法　采用内皮完整和去内皮的大鼠离体主动脉环 ,进行等长张力实验。结果　DIDS(1～ 30 0 μmol·L-1)和furosemide(10～ 32 0μmol·L-1)均浓度依赖性抑制PHE引起的收缩反应 ,但对内皮完整的血管环抑制率和去内皮的血管环抑制率不同 ,DIDS的IC50 分别为 (12 0± 8 0 ) μmol·L-1和 (2 8 3± 7 3)μmol·L-1;furosemide的IC50 分别为 (17 9± 6 6 ) μmol·L-1和 (41 0± 15 6 ) μmol·L-1。DIDS(10 0 μmol·L-1)对 10μmol·L-1和 10 0 μmol·L-1的ATP舒张无影响 ,但可增加 1mmol·L-1ATP引起的舒张效应 (P <0 0 5 ) ;furosemide(2 0 0μmol·L-1)对 10 μmol·L-1的ATP舒张无影响 ,但可使 10 0μmol·L-1ATP和 1mmol·L-1ATP引起的舒张效应增强 (P<0 0 5 )。结论　DIDS和furosemide可抑制PHE引起的收缩 ,且对带内皮血管环的抑制率均大于去内皮血管环的抑制率 ,并可增加ATP引起的内皮依赖性舒张。     

三味檀香水提液对大鼠离体主动脉环的作用

目的探讨三味檀香水提液(ESWTX)对离体大鼠主动脉环的舒张作用。方法采用离体大鼠主动脉环张力记录法,观察ESWTX对去甲肾上腺素(NE)、KCl引起的血管平滑肌收缩的影响。结果ESWTX能使NE、KCl收缩血管平滑肌的最大反应下降,作用机制与维拉帕米相似;对NE、KCl收缩达峰值的离体大鼠主动脉环有舒张作用;对NE引起的依赖于细胞内钙收缩有明显的抑制作用,而对外钙收缩的抑制作用比较弱。结论ESWTX的作用类似于维拉帕米,具有舒张血管平滑肌的作用,其机制可能与拮抗钙离子有关。     

丹参素对大鼠心室肌动作电位、L-型钙电流和ATP敏感性钾电流的作用

目的研究丹参素对单个大鼠心室肌细胞动作电位、L-型钙电流和ATP敏感性钾电流（IKAVP）的影响,探讨丹参素在离子通道水平的药理机制。方法胶原酶急性酶解法分离单个大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳的方法,记录丹参素对动作电位、L-型钙电流和IKATP的影响。结果丹参素可影响心室肌细胞动作电位时程（APD）,并能使APD25、APD50和APD90显著缩短;丹参素能够抑制三．型钙电流;丹参素可使IKA卯外向电流增大,此效应呈浓度依赖性。结论丹参素的心肌保护作用机制与抑制L-型钙电流和部分激活IKA口外向电流有关。     

D-硫酸多糖抗血管平滑肌细胞增殖作用及其机制

目的：探讨硫酸多糖（DPS）抗增殖作用及其机制,方法;用MTT法评价DPS抗大鼠主动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖作用,用流式细胞仪观察DPS对VSMC胞浆内游离Ca^2 的含量、细胞周期和蛋白质含量的影响。结果：DPS在0.001-100mg/L浓度下,对AngⅡ诱导的VSMC增殖均有明显抑制作用,最佳抑制浓度为1mg/L,流式细胞术分析结果表明,DPS在抗增殖的浓度（1mg/L）下能抑制VSMC从G0/G1到S期的转换,阻止VSMC进入G2/M期;减少VSMC蛋白质的合成、DPS能明显抑制胞浆内游离Ca^2 浓度的升高,此作用可被一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）所阻断,提示一氧化氮可能介导了DPS降低胞浆内游离Ca^2 浓度的作用。结论：硫酸多糖DPS可拮抗AngⅡ诱导的VSMC增殖,其作用机理可能与降低胸浆内游离Ca^2 浓度,抑制VSMC的DNA及蛋白质合成有关。     

芍药苷对大鼠心肌细胞L钙通道的阻断作用

目的　在单个大鼠心肌细胞上 ,研究芍药苷对L型钙通道的阻断作用。方法　采用全细胞膜片钳技术。结果　芍药苷浓度依赖性阻断ICa ,L,其IC50 为 387μmol·L- 1 。应用 40 0 μmol·L- 1 芍药苷后 ,ICa,L最大电流幅度下降 51 % ,但I U曲线的形态和反转电位没有变化 ,激活曲线也没有明显的改变 ;失活曲线向较负电压的方向偏移约 8 3mV ,通道从失活中恢复的时间明显延长 ,由给药前的 (96± 1 7)ms增至 (1 85± 2 8)ms ;芍药苷的阻断作用没有显示出频率依赖性。结论　芍药苷对心肌细胞ICa ,L有阻断作用     

碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心室肌细胞L型钙通道的阻断作用

目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞L-型钙通道(ICa)的影响。方法采用酶急性分离的单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术,观察F2对ICa的影响。结果F20.1,1,10×10-6mol.L-1可剂量依赖地抑制ICa,抑制率分别为40%,72%,84%,IC50为1.19×10-6mol.L-1。F2上移ICa的I-V曲线,但不改变ICa的最大锋电位和翻转电位;F2对ICa稳态激活曲线无明显改变;F2可使得ICa稳态失活曲线左移;延长ICa失活恢复时间。结论F2对心肌细胞ICa具有阻断作用。     

钙通道阻滞剂对心肌重构保护机制的研究

目的研究L和L/T型钙通道在梗死心肌组织中钙蛋白酶介导的心肌损伤中的作用。方法结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型,术前7d分别用安慰剂、L型钙通道阻滞剂阿莫地平(4mg·kg-1d-1)、L/T型钙通道阻滞剂米贝拉地尔(10mg·kg-1·d-1)。术后1、3、7、14d分别检测左心室游离壁(LVFW)、室间隔(IS),右室壁(LV)钙蛋白酶(ucalpain,mcalpain)及钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)表达。术后14d测心肌梗死病灶大小、IS隔厚度、左室大小。结果室间隔ucalpain蛋白表达于心肌梗死14d增加;左室游离壁mcalpain蛋白表达于心肌梗死3d时达高峰。米贝拉地尔更明显地抑制心肌组织mcalpain的上调,缩小心肌梗死病灶。阿莫地平则抑制ucalpain蛋白表达,明显抑制左室扩张和室间隔肥厚。结论心肌梗死病理过程中,梗死病灶内mcalpain上调,肥厚组织中ucalpain上调。L和L/T型钙通道阻滞剂能减轻心肌重构与选择性的抑制心肌组织中的ucalpain和mcalpain有关。     

过氧化氢对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的影响

目的:研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(Ica,L)的影响。方法:用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流,观察5mmol·L-1H2O2引起单个大鼠心室肌细胞Ica,L改变。结果:在5mmol·L-1H2O2作用下,大鼠心室肌细胞Ica,L峰值电流密度从4.89±0.52pA/pF增加至9.80±0.65pA/pF(P<0.05,n=10),电流-电压曲线下移,但激活电位、峰电位和翻转电位无明显改变;H2O2对Ica,L激活时间常数-电压曲线无明显影响,但可使其灭活时间常数-电压曲线明显向上移;H2O2对Ica,L稳态激活曲线无明显改变,但可使其稳态失活曲线明显左移,V0.5从(-26.85±5.3)mV左移至(-37.20±4.5)mV(P<0.05,n=5)。结论:H2O2可以增加大鼠心肌细胞Ica,L,且使其失活明显减慢。     

Interactions between calcium channel compounds and adenosine systems in brain of rat

A number of organic ligands of calcium channels were investigated for possible actions on several aspects of adenosine systems in the cerebral cortex of rat. The principle findings of the present study were that a number of antagonists of calcium channels and the agonist compound Bay K 8644 inhibited binding to adenosine receptors, binding to nucleoside transporters, and the accumulation of [³H]adenosine with a low μM potency. 2-Nitrophenyl dihydropyridine derivatives were more potent than 3-nitrophenyl dihydropyridine or nondihydropyridine ligands of calcium channels at inhibiting binding to adenosine receptors. Dihydropyridine ligands of calcium channels were more potent than non-dihydropyridine ligands of calcium channel in inhibiting the binding of [³H]nitrobenzylthioinosine to cortical membranes or inhibiting the accumulation of [³H]adenosine into synaptoneurosomes. However, unlike the case of adenosine receptors, no distinction between 2-nitrophenyl and 3-nitrophenyl dihydropyridine derivatives was observed. In addition, the non-dihydropyridine ligand of calcium channels, diltiazem was a weak inhibitor of the accumulation of [³H]adenosine. These results demonstrate that organic ligands of calcium channels, particularly dihydropyridine compounds, can interact with several aspects of adenosine systems.