重组戊型肝炎疫苗在恒河猴中保护性免疫力的持久性

戊型肝炎病毒(HEV)核壳蛋白基因0RF2在昆虫细胞中表达的分子量为56kDa的蛋白在恒河猴中具有高度免疫原性，可有效抵抗第2次接种后1个月的静脉HEV攻击。本文旨在观察该重组疫苗的保护作用能否持续更长时间。     

戊型肝炎病毒及其病毒样颗粒疫苗的研究进展

戊型肝炎(hepatitis E,HE)是全球最主要的病毒性肝炎之一,由戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)感染导致.因为HEV不能在体外细胞培养体系中有效生长,因此HE灭活或减毒活疫苗的研制不可行.目前HE疫苗研究主要集中在有免疫原性的重组病毒衣壳蛋白上.HEV的开放读码框架2编码的蛋白为病毒衣壳蛋白,可在体外自行组装成病毒样颗粒(virus-like particle,VLP).形成的VLP在动物和人体中均可诱导产生高滴度的保护性抗体,是理想的预防性疫苗组分.此文就HEV的流行病学、HEV VLP的形成机制和结构特征以及VLP疫苗的研究现状作一综述.     

大蒜素/有机凹凸棒黏土/海藻酸钠/壳聚糖复合微球的制备及其性能

目的制备大蒜素/有机凹凸棒黏土/海藻酸钠/壳聚糖复合微球(ASCM),并研究其载药性能。方法采用复凝聚法制备了ASCM,以复合微球的载药量和包封率为指标,以大蒜素(DATS)为模型药物,考察了有机凹土(OA)/海藻酸钠(SA)质量比、药物含量、复合温度对微球载药性能的影响,并比较了OA加入前后微球的溶胀性能和缓释性能。结果加入OA后,当复合微球中OA:SA为1:3,OA:DATS为1:1时,其载药量和包封率由原来的12.3%和42.3%分别提高到16.8%和66.5%,而在pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液中累积释放率降低。结论复合微球可以作为药物的缓释载体。     

猪戊型肝炎病毒重组蛋白ORF2-V1单克隆抗体的制备及抗原表位差异分析

目的：开发猪戊型肝炎病毒单克隆抗体并探究其抗原识别位点对病毒的分型,疫苗开发研究和疾病的鉴别诊断具有重要意义。结果：本研究用纯化的SHEV大庆株（DQ）重组蛋白ORF2-V1免疫BALB／c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合,经3次克隆和间接ELISA筛选,获得了αC11、αC12、γH1、γF8、BC4和CH86株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定单抗效价分别为：细胞培养上清1：1．60×10^3～1：3．20×10^3,腹水为1：1．28×10^6～1：2．56×10^6：经ELISA法测定,6株单克隆抗体均与重组蛋白ORF2-V1反应,而不与ORF2其它部分片段的蛋白反应;分别用制备的6株单克隆抗体和SHEV多克隆抗血清对感染SHEV的A549细胞培养物进行了间接免疫荧光（IFA）病原的检测,同时用猪的阳、阴性血清、SP2／0细胞培养上清做对照,结果表明均呈阳性反应,说明这6株单抗可以与天然病毒发生反应;与用多克隆抗体的阳性对照相比,McAb鉴定的SHEV感染细胞培养物间接免疫荧光染色结果特异性强,排除了高背景的非特异荧光影响,对结果的判定更为准确。而以多克隆抗体作为检测抗体,IFA有一定的非特异性荧光反应。单抗的亚类鉴定结果表明,所有McAbs均为IgG1型,且所有单抗的轻链均为K链。     

可溶性甲壳素/海藻酸钠交联微球的制备及其表征和控释性能考察

目的制备可溶性甲壳素/海藻酸钠交联微球,表征微球的微观结构和形态。方法利用滴入法制备可溶性甲壳素/海藻酸钠交联微球,用红外光谱和扫描电镜表征微球的微观结构和形态,以牛血清蛋白为药物模型,研究微球的药物缓释性能。结果可溶性甲壳素与海藻酸钠进行了良好的混溶,并且在钙离子（Ca2+）溶剂环境下形成交联微球。该微球对药物的包封率及缓释性能与海藻酸钠微球相比都有较大改善,包封率从42%提高到74%,药物缓释时间从4 h上升到24 h。结论可溶性甲壳素/海藻酸钠微球的释药具有pH响应性,在pH为1.2的条件下释药慢,而在pH为7.0～7.4时释药快,可用于小肠或结肠定位缓释系统。     

白芍总苷胶囊联合注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白治疗幼年特发性关节炎 23例及对 T淋巴细胞免疫、Th1/Th2漂移及红细胞沉降率的影响

目的分析白芍总苷胶囊联合注射用重组人 Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白( rhTNFR:Fc,益赛普)治疗幼年特发性关节炎( JIA)病儿的临床效果及对 T淋巴细胞免疫、 Th1/Th2漂移及红细胞沉降率( ESR)水平的影响。方法选取 2015年 1月至 2018年 6月郑州儿童医院收治的 JIA病儿 46例,采用随机数字表法分为对照组与观察组每组 23例,对照组单用益赛普治疗,观察组加用白芍总苷胶囊治疗,比较两组疗效,采用幼年关节炎疾病活动性评分表( JADAS27)评定病儿临床症状及体征的改善,并测定病儿治疗前后外周血 T淋巴细胞免疫( CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、免疫球蛋白( IgA、IgG、IgM)、 Th1、Th2细胞比例、 Th1/Th2比值及红细胞沉降率、肿瘤坏死因子 ?α(TNF?α)水平的变化,统计治疗不良反应发生率。结果观察组总有效率 86.96%和对照组总有效率 65.22%比较,差异无统计学意义( P＞0.05);治疗前,两组 JADAS27各维度评分比较差异无统计学意义( P＞0.05),治疗后,观察组各维度评分降低幅度均高于对照组, JADAS27总分( 11.17±0.95)分低于对照组( 15.87±1.03)分(P＜0.05);治疗前,两组 T淋巴细胞免疫及实验室各指标比较差异无统计学意义( P＞0.05)治疗后,观察组 CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+、Th2细胞比例高于对照组, IgA、IgG、IgM、Th1细胞比例、 Th1/Th2比值及红细胞沉降率、T,NF?α均低于对照组( P＜ 0.05);两组治疗期间均无严重不良反应发生( P＞0.05)。结论白芍总苷胶囊联合益赛普治疗 JIA疗效肯定,可改善病儿临床症状及体征,调节机体免疫,改善 Th1/Th2漂移,下调外周红细胞沉降率、 TNF?α水平。     

戊型肝炎病毒感染的血清学研究

目的:了解戊型肝炎病毒在健康人群、肝炎患者及商品猪中的感染情况。方法:利用新的抗体检测试剂,采用酶联免疫方法(ELISA)进行戊肝抗体检测。结果:健康人群抗HEVIgG阳性率93.1%,肝炎患者中抗HEVIgG阳性率68.6%。两组商品猪抗HEVIgG阳性率分别96.8%和50.6%。结论:戊型肝炎病毒感染阳性率高,应采取相应的预防措施。     

人 IL-2与 HBsAg融合基因重组卡介苗的构建与鉴定

目的:构建人 IL-2与 HBsAg融合基因并转化到BCG中构建重组BCG(recombinant BCG,rBCG),为制备治疗和预防乙型肝炎和结核病的二联疫苗奠定基础。 方法:以IL-2 pMalLP质粒和HBsAg pMalLP质粒为模板,设计引物,利用PCR技术扩增 ...     

肝病患者1913例中庚型肝炎病毒感染状况的临床分析

目的　了解庚型肝炎病毒 (HGV)在各种类型病毒性肝炎中的感染状况 ,对 HGV感染的病例进行临床分析。方法　对 1913例不同临床类型的住院病人进行回顾性分析。结果　共检出抗 -HGV阳性 15 7例(8.2 1% ) ,其中单独抗 -HGV阳性者 3 6例 (1.88% ) ,与其他各型肝炎病毒均有重叠 /混合感染 ,共检出 12 1例(6.3 3 % )。在感染病例中以中青年为主 (5 9.2 4% ) ,肝癌患者中 HGV的感染率 (3 3 .3 3 % )明显高于其他组 (P<0 .0 0 5 )。结论　 HGV病毒可与其他各型肝炎病毒重叠 /混合感染 ,也可单独存在 ,可致各种肝炎、肝硬化 ,甚至可能引起肝癌     

小鼠血清乙型肝炎病毒前S1抗体间接ELISA检测方法的建立和验证

目的  建立小鼠血清乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）前S1抗体的间接ELISA检测方法。方法  以合成的HBV前S1（21-47位氨基酸）多肽包被酶标板,利用方阵滴定法确定间接ELISA方法的最适工作条件,对该法的精密度、特异性和灵敏度进行验证,并与商品化试剂盒进行比较。结果  确定最佳抗原包被浓度为1.0 mg/L,血清稀释度为1︰10。该方法的特异性、灵敏度和精密度均符合检测要求。本法与商品化前S1抗体检测试剂盒测定结果的符合率为98.0%。结论  成功建立了HBV前S1抗体间接ELISA方法,可用于小鼠血清中前S1抗体的检测。     

慢性乙型肝炎患者表面抗原水平与乙型肝炎病毒DNA载量关系分析

目的多角度分析慢性乙型肝炎（乙肝）患者血清乙肝表面抗原（HBsAg）水平与乙肝病毒（HBV）．DNA载量之间的定量关系,为HBsAg定量结果的临床应用提供实验依据。方法回顾性分析有肝病理活检,同时检测HBsAg定量与HBV—DNA的182例慢性乙肝患者临床资料。从3个角度分组分析各组HBsAg水平与HBV—DNA载量的线性关系：依据182例患者HBV．DNA载量结果（0．000～5．745）的分布规律,分为低载量组（0．000-1．915）、中载量组（〉1．915～3．830）和高载量组（〉3．830～5．745）,即相当于原始结果的0～104、〉104～106、〉106-108U／mL;依据乙肝e抗原（HBeAg）结果分为阴性组和阳性组;依据纤维化病变的程度分为无明显纤维化组（S0-S1期）、明显纤维化组（S2-S3期）和早期肝硬化组（s4期）。结果HBV．DNA低、中、高载量组间HBsAg水平差异比较：总体水平以及HBV．DNA高载量组与低、中载量组间比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;HBV．DNA低、中载量组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。HBV．DNA载量与HBsAg水平的线性关系：总体呈负相关『相关系数（r）=-0．448,P〈O．01];HBV—DNA低、中栽量或HBeAg阴性时,二者均无相关性（P〉0．05）;HBV．DNA高载量、HBeAg阳性及肝纤维化病变各组二者呈高到低度负相关（r=-0．553、-0．635、-0．459,P〈O．01）;随肝纤维化病变程度的进展,二者相关性下降（r=-0．535、-0．459、-0．218,P〈O．05）,HBeAg阳性时的相关性最高（r=-0．635,P〈O．01）。结论慢性乙肝患者HBsAg水平与HBV—DNA载量呈负相关,但不能直接反映HBV复制的状态．实际工作中对HBsAg定量结果应依据病程和HBeAg等相关检查进行分析和合理应用。     

乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义

目的：探讨乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义。方法选取本院2013年2月∽2014年2月收治的108例乙型肝炎患者为研究对象,按HBV DNA含量高低分为A（〈103拷贝/ml）、B（103∽105拷贝/ml）、C（106∽108拷贝/ml）3组,分别检测3组的乙型肝炎血清免疫标志物（HBV M）与乙型肝炎病毒核酸（HBV DNA）含量。结果 A组的HBeAg为（3.971±14.47）S/CO,B组为（446.7±785.8）S/CO,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;A组的抗-HBe、HBeAg、HBsAg与C组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;B组的HBeAg与C组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;3组的抗-HBs、抗-HBc比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。HBV M阳性标本中抗-HBs、抗-HBc与HBsAg含量与HBV DNA无相关性,抗-HBe与HBV DNA呈负相关,HBeAg与HBV DNA呈正相关。结论定量检测HBV DNA可真实反映HBV的复制情况,对于传染性评价、乙型肝炎诊治及疗效观察均具有指导意义;定量检测HBV M虽在HBV复制程度的判断及传染性评价方面无明显价值,但可为乙型肝炎数据管理奠定基础。     

慢性乙型肝炎重叠戊型肝炎感染60例临床分析

目的 观察慢性乙型肝炎患者重叠感染戊型肝炎病毒临床特点及戊型肝炎病毒对慢性乙型肝炎患者的影响.方法 对60例慢性乙型肝炎病毒重叠戊型肝炎病毒感染组患者与60例单纯慢性乙型肝炎病毒感染组的临床资料进行对照分析.结果 2组的临床生化指标,总胆红素、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、凝血酶原活动度、血白蛋白差异有统计学意...     

乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子区变异的临床研究

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异、基本核心启动子(BCP)A 1762T/G1764A变异及二者联合变异在HBeAg阴性和HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者中的变异特点及与病情进展的关系.方法 将120例HBV DNA阳性CHB患者分为A、B两组,A组为HBeAg阴性CHB患者60例,B组为HBeAg阳性CHB患者60例,用荧光定量PCR检测A、B两组HBV DNA水平,用直接测序法检测A、B两组前C区G1896A及BCP区A1762T/G1764A变异的发生率.根据前C区及BCP区测序结果又分为变异组和无变异组,分析前C区及BCP区变异发生与病情进展的关系.结果 120例HBV DNA阳性CHB患者中A组检出变异株47例,B组检出变异株15例,A组和B组CHB患者中G1896A变异检出率分别为40.0％和10.0％ (x2=14.40,P=0.000);A1762T/G 1764A变异检出率分别为38.3％和15.0％(x2=8.35,P=0.003);联合变异的检出率分别为21.7％和0％(x2=14.58,P=0.000).120例CHB患者中G1896A、A1762/G1764A、联合变异的变异组HBV DNA含量明显高于无变异组HBV DNA含量,P＜0.05,差异有统计学意义.HBeAg阴性CHB患者轻、中、重度不同病情中,G1896A变异、A1762T/G1764A变异及联合变异的变异组与无变异组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1 )HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异是导致HBeAg阴性、HBV DNA持续阳性的主要机制之一.(2) HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异可能加重HBeAg阴性CHB患者病情的发展.     

血清IgA、IgG、IgM辅助诊断乙型肝炎的临床价值

目的 探讨血清免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM辅助诊断乙型肝炎的临床价值.方法 选取88例重度乙型肝炎患者作为实验组,88例轻中度乙型肝炎患者作为对照组,88例接受健康检查体检者作为健康组.通过全自动生化分析仪及配套检查试剂实施血清IgG、IgM及IgA等指标的检测,比较三组IgA、IgM、IgG水平;比较治疗后有...