盾叶薯蓣四倍体及辐射株系薯蓣皂苷元含量分析

目的提高盾叶薯蓣药材的品质。方法通过组织培养,分别用秋水仙素和Co60射线处理盾叶薯蓣愈伤组织和丛生芽,获得盾叶薯蓣四倍体和辐射株系,并分别对其试管苗和部分株系一年生田间苗根茎中的薯蓣皂苷元含量进行分析。结果经诱导获得的大部分四倍体和辐射株系试管苗根茎中薯蓣皂苷元含量都超过了二倍体株系;四倍体株系试管苗与一年生苗根茎中薯蓣皂苷元含量有较强的相关性,而辐照株系试管苗与一年生苗根茎中薯蓣皂苷元含量相关性不明显。但整体看,根茎中薯蓣皂苷元含量高的试管苗在田间生长1年后,薯蓣皂苷元含量一般也较高。结论在组织培养的基础上,利用多倍体和辐射诱变育种来改善盾叶薯蓣的品质是可行的。     

盾叶薯蓣四倍体及辐射株系薯蓣皂苷元含量分析

目的 提高盾叶薯蓣药材的品质。方法 通过组织培养,分别用秋水仙素和Co60射线处理盾叶薯蓣愈伤组织和丛生芽,获得盾叶薯蓣四倍体和辐射株系,并分别对其试管苗和部分株系一年生田间苗根茎中的薯蓣皂苷元含量进行分析。结果 经诱导获得的大部分四倍体和辐射株系试管苗根茎中薯蓣皂苷元含量都超过了二倍体株系;四倍体株系试管苗与一年生苗根茎中薯蓣皂苷元含量有较强的相关性,而辐照株系试管苗与一年生苗根茎中薯蓣皂苷元含量相关性不明显。但整体看,根茎中薯蓣皂苷元含量高的试管苗在田间生长1年后,薯蓣皂苷元含量一般也较高。结论 在组织培养的基础上,利用多倍体和辐射诱变育种来改善盾叶薯蓣的品质是可行的。     

盾叶薯蓣多倍体和辐射诱变株系部分生理活性的比较

分别用秋水仙素和60Coγ射线处理盾叶薯蓣愈伤组织和丛生芽,从而获得同源四倍体与辐射株系。移栽至田间生长一年后挖取新鲜根茎,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析过氧化物酶(POD)同工酶与可溶性蛋白,并对各株系叶的叶绿素含量及抗坏血酸酶过氧化物酶(APX)活力进行测定,结果表明:四倍体株系POD同工酶与可溶性蛋白谱带颜色明显深于二倍体株系与辐射株系;辐射株系与对照株系相比,条带有所变化,这可能影响到有关生物学性状的变化。四倍体株系与辐射株系的叶绿素含量及APX活力相对于对照株系均有不同程度的提高。试验结果对盾叶薯蓣优良品种的培育具有一定的意义。     

植物生长调节剂对盾叶薯蓣产量及薯蓣皂苷元含量的影响

目的大田条件下,研究几种植物生长调节剂对盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元含量及根茎产量的影响。方法采用单因素施肥方法,结果采用SPSS17．0统计软件包进行分析。结果发现施用萘乙酸、多效唑、烯效唑和2,4-D均可大大提高盾叶薯蓣根茎产量,但对于薯蓣皂苷元含量的影响较小。对薯蓣皂苷元含量的影响,2,4-D〉膨大素〉NAA〉稀效唑〉多效唑：对盾叶薯蓣根茎产量的影响,2,4-D〉NAA〉多效唑〉稀效唑〉膨大素。结论喷施一定浓度的2,4-D,对优质、高产盾叶薯蓣的栽培,具有重要的实践意义。     

植物生长调节剂对盾叶薯蓣产量及薯蓣皂苷元含量的影响

目的 大田条件下,研究几种植物生长调节剂对盾叶薯蓣根茎中薯蓣皂苷元含量及根茎产量的影响。方法 采用单因素施肥方法,结果采用SPSS 17.0统计软件包进行分析。结果 发现施用萘乙酸、多效唑、烯效唑和2,4-D均可大大提高盾叶薯蓣根茎产量,但对于薯蓣皂苷元含量的影响较小。对薯蓣皂苷元含量的影响,2,4-D>膨大素>NAA>稀效唑>多效唑;对盾叶薯蓣根茎产量的影响,2,4-D>NAA>多效唑>稀效唑>膨大素。结论 喷施一定浓度的2,4-D,对优质、高产盾叶薯蓣的栽培,具有重要的实践意义。     

HPLC—ELSD法测定盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的含量

目的:建立盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC—ELSD),Allti-ma C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(52:48),流速1.0 mL·min~(-1);蒸发光散射检测器参数:漂移管温度40℃,气压3.5 kPa。结果:薯蓣皂苷在0.24～4.80μg(r=0.9995)范围内线性关系良好,平均回收率为97.9%(RSD=1.1%,n=6)。结论:该方法简便、快速、灵敏、准确、重现性好,可作为盾叶薯蓣的质量控制方法。     

薄层扫描法测定盾叶薯蓣中盾叶新苷和薯蓣皂苷的含量

目的:采用薄层扫描法测定盾叶薯蓣中盾叶新苷和薯蓣皂苷的含量。方法:采用瑞士CAMAG TLC SCANNER Ⅲ型线性扫描仪,含0.3％CMCNa的硅胶G薄层板,展开剂:氯仿-甲醇-水(65:35:10)10℃以下放置过夜后的下层溶液,显色:10%硫酸乙醇溶液喷雾,110℃烘烤约10 min。检测波长510nm,狭缝尺寸:6.0 mm×1.0mm。结果:盾叶新苷点样量在0.622～3.11μg,薯蓣皂苷在0.986～4.98μg的范围内与峰面积呈良好线性关系,r分别为0.9991,0.9993;回收率分别为96.4％,97.7％。结论:本法操作简便,精密度好,结果准确可靠。     

盾叶薯蓣薯蓣皂甙元含量与气候因素的相关性研究

以简单相关、多元回归及逐步回归分析等方法研究我国湖南湖北等27个县的盾叶薯蓣皂甙元含量与七个气候生态因子的关系。结果表明:1.年降水量和年平均5 cm土温为影响盾叶薯蓣皂甙元含量的主要因素;2.盾叶薯蓣皂甙元合成与积累的最适气候生态条件为:年降水量:800～900 mm,以850 mm最佳;年平均5 cm处土温:15～17℃,以16℃最佳。     

盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的PLS-NIR法快速测定

利用近红外光谱技术,建立了一种快速测定盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的方法.运用偏最小二乘法(PLS)建立盾叶薯蓣中薯蓣皂苷含量与其近红外光谱之间的校正模型,模型的校正集内部交叉验证决定系数(R2)为0.992 1,交互验证均方差(RMSECV)为0.010 4,外部预测均方差(RMSEP)为0.010 5,预测值的平均相对误差为4.12％.     

盾叶薯蓣中新甾体皂苷的研究

为了研究盾叶薯蓣的水溶性化学成分, 用溶剂提取、色谱分离等方法从盾叶薯蓣的水溶液中分离到一个新甾体皂苷, 经¹H NMR、¹³C NMR、¹³⁵DEPT、HMQC、HMBC和TOCSY谱鉴定, 该化合物的结构为: (25R)-26- O-(β-D-glucopyranosyl)-furost-5-en-3b, 16, 20, 26-tetraol-22-seco-3-O-b-D-glucopyranosyl-(1→3)-b-D-glucopyranosyl- (1→4)-[a-L-rhamnopyranosyl-(1→2)]-b-D-glucopyranoside, 命名为zingiberenin F (1)。该化合物为一新甾体皂苷化合物, 该骨架甾体皂苷在薯蓣科中为首次报道。     

盾叶薯蓣中水溶性甾体皂苷成分

为研究盾叶薯蓣的水溶性化学成分，用溶剂提取，色谱法分离，光谱法鉴定结构。从盾叶薯蓣的水溶液中分离到5个甾体皂苷(I～V)，经分析¹H NMR、 ¹³C NMR、¹³⁵DEPT、 HMQC、 HMBC和TOCSY谱，鉴定了化合物的结构，其中4个为原甾体皂苷，1个为甾体皂苷。化合物V为(25R)-26-O-(β-D-glucopyranosyl)-furost-5-en-3β,22ξ,26-triol-4β-acetoxyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-［α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)］-β-D-glucopyranoside，为1新化合物，命名为zingiberenin G，化合物I、II、III在盾叶薯蓣中为首次报道。     

纤维素酶辅助提取盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的工艺优化研究

以薯蓣皂苷元的提取收率为考察指标,采用中心组合试验设计和响应面分析法对纤维素酶酶解提取盾叶薯蓣中薯蓣皂苷元的工艺条件进行优化,确定其最佳工艺条件:采用盾叶薯蓣与水的料液比为1∶10;酶解pH值为5.75;酶解温度为54℃;酶解作用时间为2.5h;纤维素酶用量为10.8U/g的工艺条件,使得薯蓣皂苷元的提取率达到1.5%以上。结果表明纤维素酶辅助提取法是提高薯蓣皂苷元的有效途径。     

不同类型盾叶薯蓣同工酶的分析

目的从分子生化水平上对田间农艺性状表现差异的6种类型盾叶薯蓣进行比较分析。方法采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对6种类型盾叶薯蓣的叶片进行过氧化物酶(POD)同工酶测定。结果POD同工酶在不同类型盾叶薯蓣间有所不同。根据酶带的分离结果,可将此6种类型大致划分为三大类,即有花纹大三角叶型(A)与无花纹大三角叶型(B)为一类;有花纹小三角间心形叶型(E)与无花纹心形叶型(D)、无花纹小三角间心形叶型(F)为一类;有花纹心形叶型(C)为单独一类。结论根据酶带分布差异的分析结果,可以初步对形态表现不同的盾叶薯蓣加以归类。同工酶电泳分析方法可作为薯蓣选种研究的辅助工具。     

穿龙薯蓣总皂苷中薯蓣皂苷元含量的毛细管气相色谱法研究

目的：建立毛细管气相色谱法测定穿龙薯蓣总皂苷中蓣皂苷元的含量。方法：采用HP－1（Methyl siloxane)不锈钢毛细管柱,柱温度270℃,柱头压123．7kPa,汽化室温度330℃,检测器温度310℃,载气（N2）流速2．0mL.min^-1,分流比40：1,对穿龙薯蓣总苷中薯蓣皂元含量进行测定。结果：能将薯蓣皂苷元及其主要杂质进行分离,薯蓣皂苷元在352－1758ng范围内峰面积与其浓度线性关系良好（r＝0．9996）,样品平均回收率为95．65％,精密度RSD为1．0％（n＝5）。结论：该法测定定样品无需衍生化,分离效果好,分析快速准确。     

气相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元含量

目的 建立菝葜中薯蓣皂苷元的含量测定方法。方法 程序升温气相色谱法，CP Sil 5CB熔融石英毛细管柱，FID检测器。结果薯蓣皂苷元在0．20～5.0μg范围内具有良好的线性关系，r=0．9998，测定方法平均回收率为97．20％。结论 本方法有较高的灵敏度和回收率，可用于菝葜中薯蓣皂苷元的含量测定。     

盾叶薯蓣中甾体皂苷的分离与结构鉴定

目的对盾叶薯蓣根茎中甾体皂苷类的化学成分进行研究。方法利用常规柱层析法与制备型HPLC法相结合对盾叶薯蓣中的活性成分进行分离纯化,通过1 H-NMR、13 C-NMR和MS等光谱法鉴定单体化合物的结构。结果从盾叶薯蓣根茎中共分离得到了20个甾体皂苷化合物,其中7个化合物为首次从该植物中发现。结论盾叶薯蓣根茎中主要含有螺甾烷型和呋甾烷型甾体皂苷。     

正交设计法优选盾叶薯蓣总皂苷的提取工艺

目的:确定盾叶薯蓣总皂苷的最佳提取工艺。方法:采用正交实验设计进行优选,对提取物进行盐酸水解、石油醚提取制备供试液。以薯蓣皂苷元作为对照品,采用比色法洲定含量。结果:优选提取工艺为:样品粗粒,乙醇浓度80%,溶剂用量8倍,提取次数2次(2 h,1 h)。结论:此工艺简单,适于工业化生产。     

RP-HPLC测定清肺化痰口服液中薯蓣皂苷元含量

目的建立高效液相色谱法测定清肺化痰口服液中薯蓣皂苷元含量方法。方法样品进大孔吸附树脂吸附后70%乙醇洗脱,反相高效液相色谱法测定,Inertsil ODS-3(4.6 nm×250 nm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-水(90∶10),流速1.0 m l.m in-1,进样量20μl,检测波长203 nm。结果样品中薯蓣皂苷元含量测定线性范围为1.6~8.0μg,(r=0.999 4),平均回收率95.32%,RSD为0.5%。结论含量测定方法简便、可靠、实用,可作为制剂的质量标准依据。     

HPLC法测定中药白英中薯蓣皂苷元的含量

目的用HPLC法测定不同来源白英中薯蓣皂苷元的含量。方法选用Apollo C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈水(体积比为90∶10),检测波长为210 nm,柱温为室温。结果薯蓣皂苷元的质量浓度在0.04~0.20 g.L-1内与峰面积呈良好线性关系,方法的平均回收率为104.5%(n=9);不同来源的白英药材中薯蓣皂苷元的含量有较大差异。结论方法操作简便、准确、灵敏度高,为白英药材质量控制提供了定性和定量依据。