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相似文献
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1.
目的 探究红景天苷(salidroside, SAL)对结肠癌细胞SW480增殖、凋亡和裸鼠移植瘤生长的影响。方法 采用0、25、50、100μmol·L-1剂量红景天苷处理SW480细胞,将细胞随机分为4组:SAL 0μmol·L-1组、SAL 25μmol·L-1组、SAL 50μmol·L-1组和SAL 100μmol·L-1组。克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测Ki67、PCNA、Caspase-3、Caspase-9、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。建立结肠癌裸鼠移植瘤模型,裸鼠随机分为2组:Control组和Salidroside 50 mg·kg-1组,检测裸鼠肿瘤重量,TUNEL染色检测裸鼠肿瘤细胞凋亡率,免疫组化染色检测Ki67、Caspase-3阳性细胞数。结果 体外实验中,与SAL 0μmol·L-1组相比较,SAL...  相似文献   

2.
目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L-1、(40+2)μmol·L-1、(60+1)μmol·L-1、(60+2)μmol·L-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L-1、(40+2)μmol·L-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L-1、(40+2)μmol·L-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC50值为(59.34±0.31)μmol·L-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ2=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC50值为(5.52±0.18)μmol·L-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ2=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L-1、(40+2)μmol·L-1、(60+1)μmol·L-1、(60+2)μmol·L-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L-1、(40+2)μmol·L-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ2=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L-1)的阿帕替尼作用24 h后,G0/G1期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G0/G1期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L-1、(40+2)μmol·L-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。  相似文献   

3.
目的:探索前处理方法和外源性物质对药物中β-硫化汞(β-Hg S)转化为甲基汞带来的影浓度、物理浸萃前处理手段和外源性物质对β-Hg S转化为甲基汞的影响,采用高效液相色谱与冷蒸气-原子荧光光谱法(HPLC-CV-AFS)在线耦合测定甲基汞。色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-0.06 mol·L-1乙酸铵溶液(含0.1%L-半胱氨酸)(5∶95)为流动相,流速1 mL·L-1,进样体积100μL,检测波长254 nm。结果:15 mgβ-Hg S经超纯水前处理后,测得甲基汞浓度低于检测下限;经5 mol·L-1盐酸或25%氢氧化钾-甲醇溶液分别前处理后,发现有β-Hg S转化为甲基汞,甲基汞质量浓度为(0.63±0.01)μg·L-1和(2.32±0.07)μg·L-1,占可溶性汞的比值分别为0.067%和1.162%;β-Hg S经加热法前处理后,转化甲基汞质量浓度为(0.71±0.03)μg·L-1,显著高于振荡法[(0.52±0.02)μg·L-1]和超声法[(0.61±0.01)μg·L-1],3种物理浸萃方法的甲基汞占可溶出汞比值无显著性差异,分别为0.059%、0.061%和0.062%;盐酸浓度为0.5~5.0 mol·L-1时,测得甲基汞质量浓度为(0.52±0.02)~(0.63±0.04)μg·L-1(占可溶性汞的比值为0.454%~0.069%),8 mol·L-1盐酸浓度下甲基汞的浓度显著升高为(1.50±0.08)μg·L-1(占可溶性汞的比值为0.018%);与β-Hg S对照组[甲基汞浓度(0.64±0.02)μg·L-1,占可溶性汞的比值为0.069%]相比,加入纤维素和植物混合组分后甲基汞浓度为(0.76±0.03)μg·L-1和(1.44±0.07)μg·L-1,占可溶性汞的比值分别为0.070%和0.114%。结论:本研究表明,当样品中存在较高含量β-Hg S(≥15 mg)时,在5 mol·L-1盐酸或25%氢氧化钾-甲醇溶液做前处理溶剂的条件下,β-Hg S经前处理后会转化为甲基汞,转化的甲基汞浓度与酸浓度呈正相关,加热能够促进甲基化的发生,某些外源性物质如纤维素等可促进高含量β-Hg S样品转化为甲基汞。  相似文献   

4.
目的 研究藁本内酯对帕金森病细胞模型的保护作用及其作用机制。方法 取对数生长期的SK-N-SH细胞使用200μmol·L-1的MPP+处理48 h,构建帕金森病细胞模型;以正常培养基培养的细胞作为对照组。藁本内酯组加入终浓度为30.0μmol·L-1藁本内酯进行培养;P79350组加入30.0μmol·L-1的藁本内酯后,实验结束前1 h加入50μmol·L-1的P79350处理细胞;对照组和MPP+组加入不含药物的培养基培养。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;以流式细胞术检测细胞周期情况和细胞凋亡率;以蛋白质印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶(p38 MAPK/JNK)信号通路和增殖、凋亡相关蛋白的表达水平。结果 对照组、MPP+组和10.0、20.0、30.0、50.0、100.0和200.0μmol·L-1藁本内酯组的细胞存活率分别为(100.00±1.91)%、(35...  相似文献   

5.
目的 对人尿液中2,4-二氨基-N10-甲基蝶酸(DAMPA)浓度的超高效液相色谱质谱联用(UHPLC-MS/MS)定量分析方法的测量不确定度进行评定。方法 通过对人尿液中DAMPA浓度测定方法分析,考察不确定度来源,应用已建立的该方法学数据计算不确定度。结果 人尿液中DAMPA低浓度0.06μmol·L-1及高浓度3μmol·L-1质控样品的扩展不确定度分别为6.9×10-3 μmol·L-1和0.21μmol·L-1(P=95%,k=2)。结论 UHPLC-MS/MS法测定人尿液中DAMPA浓度的不确定度主要由低浓度质控样品校正曲线拟合,基质效应和回收率引入。  相似文献   

6.
目的 研究伊布替尼联合BH3拟似物ABT737的协同抗实体肿瘤作用及机制。方法 以2种类型实体肿瘤细胞,人非小细胞肺癌细胞株A549、H1299和人脑胶质瘤细胞U251、U87为对象,采用SRB法检测不同浓度伊布替尼(20,15,10,7.5,5μmol·L-1)和BH3拟似物ABT737(20,15,10,7.5,5μmol·L-1)单独或共同作用24 h后的细胞增殖情况,计算细胞存活率和合用指数;采用克隆形成试验检验10μmol·L-1伊布替尼与10μmol·L-1 ABT737联合作用120 h后的细胞克隆形成情况;成球试验检测两药联合作用7 d对细胞成球能力的影响;采用PI染色结合流式细胞术检测10μmol·L-1伊布替尼与10μmol·L-1 ABT737联用对U87和U251细胞凋亡的影响;RT-PCR检测两药联合作用24 h后对U87和U251细胞中干细胞标记物Sox2、Nanog和Oct4 mRNA水平影响;Western blotting...  相似文献   

7.
目的 研究橘红素预处理对过氧化氢(H2O2)诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法(1)酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。(2)橘红素5~40μmol·L-1孵育成骨细胞48 h后,加H2O2300μmol·L-11 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,AKP试剂盒测定AKP活性。(3)培养的成骨细胞分为细胞对照组、模型组(H2O2300μmol·L-1,孵育1 h)、模型+橘红素组(橘红素10μmol·L-1预处理48 h后加H2O2300μmol·L-1,1 h)。茜素红染色检测钙化结节数量,流式细胞术检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测SOD活性,Western印迹法检测成骨细胞转录因子(OSX)和骨保护素(OPG)蛋白表达水平。结果 (1) AKP染色成骨细胞细胞胞质呈蓝色,茜素红染色可见钙化结节...  相似文献   

8.
目的 探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响。方法 将小鼠足细胞MPC5分为5组:正常对照组(5.5 mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30 mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30 mmol·L-1葡萄糖+50μmol·L-1 GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30 mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷+50μmol·L-1 GDC-0349)。培养48 h后,噻唑蓝法检测MPC5细胞活力;吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况;流式细胞术检测MPC5细胞凋亡;蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin-1...  相似文献   

9.
患者,男,55岁,因"突发胸痛2h"于2010-06-20急诊入院。既往有高血压病、高血脂、高尿酸血症及糖尿病病史,无药物过敏史。体检:T36.5℃,P82次/min,R20次/min,BP 120/90mmHg。生化示:果糖胺2.44mmol·L-1,血清总胆红素19.4μmol·L-1,间接胆红素14.10μmol·L-1,乳酸脱氢酶494U·L-1,肌红蛋白91μg·L-1,尿酸614μmol·L-1,葡萄糖8.54mmol·L,甘油三酯2.32mmol·L-1,ALT35U·L-1,AST 23U·L-1。初步诊断为心肌梗死。予肝素钠注射液5 mg+0.9%氯化钠注射液5ml q1h iv抗凝、阿  相似文献   

10.
目的 探究灵芝酸D(GAD)对人结直肠肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 将直肠癌细胞系SW620分为6组:空白对照组(完全培养基)、低(5μmol·L-1 GAD)、中(10μmol·L-1 GAD)、高(20μmol·L-1 GAD)3个剂量实验组、Pifithrin-α组(3μg·mL-1 Pifithrin-α)和联合组(3μg·mL-1 Pifithrin-α+20μmol·L-1 GAD)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖能力,用Caspase-3/Caspase-8/Caspase-9检测试剂盒检测相应蛋白活性,用蛋白质印迹法检测抑癌蛋白p53(p53),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白质的表达水平。结果 空白对照组和低、中、高3个浓度实验组细胞增殖活性分别为(96.33±2.62)%,(95.00±1.63)%,(70.33±5.91)%和(49.00±3.56)%;4组Caspase-...  相似文献   

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13.
This study describes a new approach for organophosphorous (OP) antidotal treatment by encapsulating an OP hydrolyzing enzyme, OPA anhydrolase (OPAA), within sterically stabilized liposomes. The recombinant OPAA enzyme was derived from Alteromonas strain JD6. It has broad substrate specificity to a wide range of OP compounds: DFP and the nerve agents, soman and sarin. Liposomes encapsulating OPAA (SL)* were made by mechanical dispersion method. Hydrolysis of DFP by (SL)* was measured by following an increase of fluoride ion concentration using a fluoride ion selective electrode. OPAA entrapped in the carrier liposomes rapidly hydrolyze DFP, with the rate of DFP hydrolysis directly proportional to the amount of (SL)* added to the solution. Liposomal carriers containing no enzyme did not hydrolyze DFP. The reaction was linear and the rate of hydrolysis was first order in the substrate. This enzyme carrier system serves as a biodegradable protective environment for the recombinant OP-metabolizing enzyme, OPAA, resulting in prolongation of enzymatic concentration in the body. These studies suggest that the protection of OP intoxication can be strikingly enhanced by adding OPAA encapsulated within (SL)* to pralidoxime and atropine.  相似文献   

14.
In order to find out the values of the steroid resources for the future use. the compositions and contents of steroidal sapogenins from 13 domestic plants have been investigated. As a result,Dioscorea nipponica, D. quinqueloba andSmilax china were found to have large amount of diosgenin. And pennogenin inTrillium kamtschaticum andParis verticillata, yuccagenin inAllium fistulosum, hecogenin inAgave americana and neochlorogenin inSolanum nigum were appeared to be major steroidal sapogenins.  相似文献   

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16.
Clinical and in vitro investigations were carried out to test the efficacy of gut lavage, hemodialysis, and hemoperfusion in the treatment of poisoning with paraquat or diquat. In a patient suffering from diquat intoxication 130 times more diquat was removed by gut lavage 30 h after ingestion than was removed by complete aspiration of the gastric contents.Determination of in vitro clearances for paraquat and diquat by hemodialysis showed that, at serum concentrations of 1–2 ppm, such as are frequently encountered in poisoning in man, toxicologically relevant quantities of herbicide cannot be removed from the body. At a concentration of 20 ppm, on the other hand, hemodialysis proved to be effective, the clearance being 70 ml/min at a blood flow rate of 100 ml/min. The efficacy of hemoperfusion with coated activated charcoal was on the whole better. Especially at concentrations around 1–2 ppm, the clearance values for hemoperfusion were some 5–7 times higher than those for hemodialysis.In a patient suffering from paraquat poisoning, both hemodialysis as well as hemoperfusion were carried out. The in vitro results could be confirmed: At serum concentrations of paraquat less than 1 ppm no clearance could be obtained by hemodialysis while by hemoperfusion with activated charcoal quite high clearance values were measured and the serum level dropped down to zero.
Zusammenfassung Klinische Untersuchungen und Laboratoriumsversuche wurden durchgeführt, um die Wirksamkeit von Darmspülung, Hämodialyse und Hämoperfusion bei Paraquat- und Deiquat-Vergiftungen zu prüfen.Bei einem Patienten wurde 30 Std nach Deiquat-Aufnahme durch Darmspülung 130mal mehr Deiquat entfernt als durch vollständige Aspiration des Mageninhaltes. In vitro-Versuche ergaben, daß bei Blutserumkonzentrationen von 1–2 ppm, die bei Vergiftungen oft gemessen werden, durch Hämodialyse keine toxikologisch relevanten Paraquat- oder Deiquat-Mengen entfernt werden können. Dagegen erwies sich die Hämodialyse bei 20 ppm und einer Blutumlaufgeschwindigkeit von 100 ml/min mit einer Clearance von 70 ml/min als wirksam. Die Hämoperfusion mit beschicheter Aktivkohle war in diesen Versuchen aber eindeutig überlegen, denn insbesondere bei Konzentrationen um 1–2 ppm waren die Clearance-Werte 5–7mal höher als bei der Hämodialyse.Die in vitro-Ergebnisse wurden bei einem Patienten mit einer Paraquat-Vergiftung bestätigt: Bei Konzentrationen unter 1 ppm war die Hämodialyse wirkungslos, während durch Hämoperfusion relativ hohe Clearance-Werte erreicht wurden, so daß der Serumspiegel rasch unter die Nachweisgrenze abfiel.
  相似文献   

17.
Zusammenfassung Mittels Gaschromatographie und Dünschichtchromatographie wiesen die Autoren 11 Substanzen nach, welche durch Injektion oder nach Verabreichung per os in die Kniegelenksynovialflüssigkeit eindrangen. In ihrer Aufstellung konnten sie eine direkte Beziehung zwischen Struktur sowie chemischphysikalischen Eigenschaften der Substanz und ihrer Fähigkeit, aus dem Blut in die Kniegelenksynovialflüssigkeit einzudringen, nicht nachweisen, außer der Tatsache, daß Substanzen mit starker Affinität zu Eiweißstoffen erst in höheren Dosen nachweisbar waren.  相似文献   

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This article assesses pain within the context of the dose response. A substantial number of studies indicate that the dose response for pain-related endpoints is commonly biphasic, being independent of the type of biological model employed, endpoint measured, or agent tested. The quantitative features of the dose response are also remarkably consistent regardless of the receptor pathway that mediates the nociceptive response, indicating a likely downstream message convergence. These findings have important implications for drug discovery, development, and clinical evaluation.  相似文献   

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The current USP National Formulary contains 65 Monographs for drug formulations containing neomycin. All 65 Monographs prescribe a bioassay for neomycin assay. This bioassay, based on cell culture, is labor intensive, has poor precision, and cannot be adapted for purity or identification. High-performance anion-exchange chromatography with integrated pulsed amperometric detection (HPAE-IPAD), a liquid chromatography technique, has been shown to be suitable for neomycin purity analysis and neomycin assay of an over-the-counter first aid cream (Hanko and Rohrer [17]). Here we propose that an HPAE-IPAD assay can replace the bioassay in the 65 neomycin-containing Monographs. We applied the HPAE-IPAD assay to four neomycin-containing drug products representing the four classes of formulations found in the 65 Monographs, liquid, solid, suspension, and cream. Each drug was analyzed with two chromatography systems, and on 3 separate days. For all products, HPAE-IPAD measurements were precise and accurate with respect to the label concentrations. There was also high accuracy for spike recovery of neomycin from the four drug products throughout 70–150% of the labeled concentration. These results suggest that an HPAE-IPAD assay would be an accurate assay for neomycin, and would be faster and more precise than the current bioassay.  相似文献   

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