毛蚶多糖的分离纯化和免疫活性测定

目的从毛蚶体内分离纯化得到毛蚶多糖精品（polysaccharide from Arca subcrenata Lischke．简称ASLP），分析其纯度和单糖组成，同时考察免疫活性。方法经除蛋白、DEAE-52和Sephadex-GS0柱层析得多糖精品。糖醇乙酸酯法测定单糖组成。体外脾淋巴细胞增殖测定ASLP的免疫活性。结果从毛蚶体内提取到一种均一的多糖组分，其单糖组成只有葡萄糖，ASLP能够显著地促进脾淋巴细胞的增殖。结论从毛蚶中分离纯化得到一种均一的多糖组分，具有显著的体外免疫活性。     

山茱萸多糖的分离纯化及活性研究

目的:山茱萸多糖的分离纯化及活性研究。方法:山茱萸经热水提取,去蛋白、超滤、醇沉、真空干燥得多糖粗品,经DEAE-32、SephacrylS-300HR柱层析得到精品多糖CSZP,并对CSZP进行免疫活性研究。结果:精品多糖CSZP均一,分子量为8．1×104,可明显增强细胞因子IL-2生物活性。结论:山茱萸多糖分离纯化工艺的建立及其免疫活性研究结果为以后进一步研究和开发山茱萸多糖提供了便利条件。     

鹰嘴豆多糖的分离纯化及其抗氧化作用研究

目的对鹰嘴豆果实多糖进行分离纯化得到均一多糖,对分离得到的均一多糖的抗氧化活性进行研究。方法利用热水对鹰嘴豆多糖进行提取,乙醇沉淀得到粗多糖;粗多糖经DEAE-Cellulose 52和Sephacryl S-300柱层析纯化,得到均一多糖CA-1b;高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)验证CA-1b纯度和相对分子质量;酸水解、GC-MS对CA-1b进行糖组分分析;DPPH·清除评价均一多糖的体外抗氧化活性。结果鹰嘴豆果实中分离得到的多糖CA-1b为均一多糖,相对分子质量为1.33×106 Da,由阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal)组成,其摩尔比为2.2∶3.1∶6.2∶1.0。DPPH·清除实验表明,CA-1b具有良好的抗氧化活性,且呈现一定的量效关系,半数清除质量浓度IC50为18.2μg·mL-1。结论研究结果可为鹰嘴豆的深加工和进一步研究开发奠定理论基础。     

猴头菌多糖的分离纯化及活性探讨

目的 :猴头菌多糖的分离纯化及活性探讨。方法 :人工栽培的猴头菌子实体经热水提取、去蛋白、超滤、醇化、真空干燥得多糖粗品 ,经 DEAE- 5 2、Sephacryl S- 4 0 0柱层析得到精品多糖 HEP,并对 HEP进行免疫活性研究。结果 :精品多糖HEP均一、分子量为 5 .5× 10 4 ,可明显增强细胞因子 IL- 2的生物活性。结论 :猴头菌多糖分离纯化工艺的建立及其免疫活性研究结果为以后进一步研究和开发猴头菌多糖提供了便利条件。     

松木层孔菌胞外多糖的组成分析及免疫学活性研究

目的研究松木层孔菌胞外多糖的单糖组成和免疫学活性。方法使用冻融分级、酶＋seveg法脱蛋白和SepharoseCL-6B层析纯化松木层孔菌胞外粗多糖（CPPE）,得到级分PPE,用HPLC分析其均一性和分子量,用气相色谱法测其单糖组成。结果经HPLC验证,PPE为均一组分,分子量为3.9×104Da。气相色谱分析表明,PPE为甘露聚糖。淋巴细胞增殖实验显示,PPE能促进小鼠淋巴细胞的增殖,同时也可协同有丝分裂原ConA和LPS促进小鼠脾T、B淋巴细胞的增殖。结论 PPE具有提高机体免疫力的功能。     

一种鲍鱼脏器多糖的鉴定及活性研究

目的 对鲍鱼脏器中获得的一种多糖AHP-12进行纯度和组成的鉴定,并对其抗肿瘤活性进行分析.方法 高效液相色谱和琼脂糖凝胶电泳鉴定纯度;凝胶色谱法测定相对分子质量;明胶比浊法测定硫酸根含量;比色法测定氨基己糖含量;气相色谱测定单糖组成;MTT法检测其体外抗肿瘤活性.结果 鲍鱼脏器多糖AHP-12为一种均一的多糖组分;其相对分子质量约为3×105;硫酸根舍量为13.07%;氨基己糖含量为4.98%;单糖组成为鼠李糖、岩藻糖和半乳糖组成,其摩尔比为: Rha:Fuc : Gal=1:2.2 : 1.7;AHP-12对HeLa细胞增殖有一定的抑制作用.结论 从鲍鱼脏器中提取经分离纯化得到的多糖AHP-12是一种均一的多糖,且为硫酸酯多糖和氨基多糖,具有较弱的体外抗肿瘤活性.     

紫贻贝多糖的提取、分离和基本理化性质分析

目的从紫贻贝(Mytilus edulis Linnaeus)中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质进行分析,为贻贝多糖的结构和活性研究提供依据。方法依次采用冷水,木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解的方法提取贻贝粗多糖,并对粗多糖的总糖、蛋白、糖醛酸、糖胺聚糖和硫酸根含量进行分析。分别采用Sephacryl S-300凝胶柱层析和QSepharose 4 Fast Flow阴离子交换柱层析对粗多糖进行分离和纯化,并对纯化后的组分进行单糖组成、纯度及相对分子质量分析。结果从紫贻贝中经提取和分离共得到了8种水溶性多糖组分,其中水提组分LTS1-A单糖组成较简单,只含Glc。其余各组分单糖组成相对复杂,主要含有Man、GlcN、Gal和Fuc。采用高效凝胶渗透色谱法对各多糖组分进行分析都呈现较为均一的色谱峰,表明具有较好的纯度,各组分相对分子质量范围约为3.0~40 kD。结论采用水提和酶提方法得到了具有不同理化性质的多糖,经两步层析分离能够得到纯度较高的多糖组分,为下一步紫贻贝多糖结构和活性的深入研究提供了依据。     

分枝杆菌多糖的制备及对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:制备分枝杆菌多糖并考察其对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法:用苏通培养基培养分枝杆菌,菌体脱脂后,用5种方法提取,比较多糖得率,并用正交试验优化超声提取工艺,再用稀碱提取残渣,粗多糖经Sevag法除蛋白、DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱纯化后得到分枝杆菌多糖;用MTT法检测分枝杆菌多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果:超声后热水提取多糖得率最高,超声提取的优化工艺是提取时间40 min,固液比为1∶150,超声功率600 W;单因素试验优化的Sevag法除蛋白条件为体积比1∶5,萃取时间为20 min,萃取6次;提取得到的4种多糖组分在6.25~50 mg.L-1范围内均能显著促进脾淋巴细胞的增殖。结论:用本实验工艺成功制备了分枝杆菌多糖,制备物具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。     

海胆黄多糖SEP的制备及其抗肿瘤作用研究

建立荷瘤小鼠模型，以不同剂量的SEP经腹腔注射给药后检测荷瘤小鼠的肿瘤生长情况、脾指数、胸腺指数、脾淋巴细胞增殖和抗氧化酶活性研究海胆黄多糖SEP的抗肿瘤活性。结果：SEP高、中、低3个剂量组均可显著抑制S180实体瘤的生长，其抑瘤率分别为46．9％、41．7％和40．7％；SEP能显著提高荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数，明显促进脾淋巴细胞的增殖，显著降低小鼠血清中丙二醛含量和提高超氧化物歧化酶活性。结论：SEP具有明显的抗肿瘤活性，其作用可能是通过免疫调节和抗氧化作用实现的。     

灵芝多糖分离鉴定及抗肿瘤活性的研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、理化性质及初步抗肿瘤活性。方法采用热水提取 ,乙醇分级沉淀 ,DEAE 32离子交换柱色谱等方法从灵芝子实体中分离得到灵芝多糖。用SephadexG 10 0凝胶柱色谱法测定其纯度和平均分子量。用薄层色谱及气相色谱法测定其单糖组成。溴化四唑蓝法测定其初步体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体中分离得到 4种均一多糖 (GLPL1 ～GLPL4 ) ,其中GLPL1 和GLPL3为主要成分 ,其分子量为 4 10 0和 5 70 0。GLPL1 由葡萄糖组成 ;GLPL3由葡萄糖和半乳糖组成。GLPL1 和GLPL3对人鼻咽癌细胞增殖有显著的抑制作用 ,GLPL3还对人胃癌细胞、人结肠癌细胞增殖有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPL1 、GLPL3是很有潜力的抗肿瘤或辅助抗肿瘤药物     

蝮蛇毒小分子多肽的分离、纯化及其抗肿瘤作用研究

目的从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,测定理化性质,研究其对肿瘤细胞的生长抑制作用。方法利用有机溶剂沉淀和Sephadex G-50S、ephadex G-25凝胶过滤色谱等方法分离纯化长白山栖岩蝮蛇蛇毒中的1种小分子多肽Saxis;采用Tricine-SDS-PAGE鉴定;利用Bradford蛋白质测定法测定蛋白质浓度;运用MTT比色法检测该小分子多肽对宫颈癌细胞Hela、肝癌细胞SMMC-7721和胃腺癌细胞SGC-7901的生长抑制作用。结果该小分子多肽Saxis的相对分子质量约为5 200,它能抑制Hela、SMMC-7721和SGC-7901细胞的增殖,并且对这3种肿瘤细胞的抗增殖作用具有药物剂量依赖关系,24 h的IC50分别为66.3,54.5,62.2μg/mL。结论利用有机溶剂沉淀和凝胶过滤色谱法可以从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,其对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用。     

浒苔多糖的分离纯化及其对小鼠淋巴细胞活性的影响

为了探讨浒苔(Enteromorpha)多糖的免疫调节活性,采用Sevage法,Sephacryl-300 分子筛层析以及乙醇分级沉淀法获得四个浒苔多糖组分EP,EP1、EP2和EP3,比较四种多糖对体外培养的小鼠T、B淋巴细胞增殖影响;同时观察作用效果较强的EP2在T、B淋巴细胞中的分布及其对细胞RNA合成的影响。结果表明,EP、EP1、EP2和EP3中单糖、糖醛酸、硫酸根含量存在差异,均能促进对B淋巴细胞以及ConA或LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖,且EP2的作用效果最好;经EP2处理的T、B淋巴细胞或同时用EP2和丝裂原(ConA或LPS)处理的T、B淋巴细胞体积明显增大,RNA合成增加,B淋巴细胞有母细胞化趋势。由此可见,浒苔多糖能调节小鼠淋巴细胞活性,促进丝裂原诱导的淋巴细胞分化和免疫应答,有望成为一种新的动物免疫增强剂。     

天花粉多糖的组成及组分Ⅱ相对分子质量分析

目的：对天花粉多糖的组分及组分Ⅱ相对分子质量进行分析。方法：采用水提醇沉提取天花粉多糖,经纯化后进行气相-质谱联用分析得出多糖的组成。相对分子质量分析则采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）。结果：天花粉多糖组分Ⅰ是含有葡萄糖,未知单糖一和未知单糖二的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ是含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和未知单糖三的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ经高效凝胶渗透色谱法得重均相对分子质量（M_w）=42 025;10%大分子部分重均相对分子质量=197 011;10%小分子部分重均相对分子质量=6 676;分布系数（D）=2.56;数均相对分子质量（M_n）=16 427。结论：天花粉多糖组分Ⅰ和天花粉多糖组分Ⅱ的单糖组成不相同,天花粉多糖组分Ⅱ是一个相对分子质量段在42 025左右的大分子。     

Cell proliferative effect of polyxyloses extracted from the rhizomes of wild turmeric,Curcuma aromatica

Hot water-soluble crude polysaccharides were extracted from the rhizomes of wild turmeric, Curcuma aromatica Salisb. (Zingiberaceae), using dry grinding, boiling water extraction, and then ethanol precipitation. The crude polysaccharide extract was then fractionated by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography, and subsequently further purified by Superdex G-200 gel filtration column chromatography, giving two relatively abundant polysaccharide fractions, called P11 and P21, and a much less common fraction P22 obtained in insufficient amounts for further analysis. The two main polysaccharide fractions were evaluated for monosaccharide composition by acid hydrolysis and high performance liquid chromatography (HPLC), whilst the molecular weight and functional groups were determined by gel permeable chromatography (GPC) and FT-IR, respectively. Fractions P11 and P21 were found to be polyxyloses with molecular weight-averages of 469,171 and 157,665?Da, respectively. P11 (100?μg/mL) could significantly induce human gingival fibroblast cells proliferation by 30%, while P21 (100?μg/mL) could significantly inhibit gingival fibroblast cells proliferation by 92%. The in vitro human primary gingival fibroblast cell proliferation in cell culture at a concentration of 100?μg/mL.     

Properties of leukokininogen isolated from human neoplastic ascites.

Leukokininogen, the protein precursor of the vasoactive polypeptide leukokinin-H, has been isolated from human ovarian carcinoma ascites. A homogeneous preparation was achieved after a procedure consisting of ammonium sulfate fractionation, gel filtration with Sephadex G-200, DEAE-Sepharose ion exchange chromatography and preparative isoelectric focusing. Leukokininogen has an isoelectric pH of 4.56 and a molecular weight of about 41,000 daltons, determined by polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of sodium dodecylsulfate. Kinin-like activity was generated from leukokininogen by incubation of the protein with the leukokininogenase from murine ascites tumor cells and with trypsin. Human plasma kallikrein does not release kinin activity from leukokininogen. The amino acid composition and immunological properties of leukokininogen demonstrate that leukokininogen is distinct from plasma bradykininogens.     

分子排阻色谱法测定螺旋藻多糖纯度和分子质量

使用分子排阻色谱法，用已知平均分子质量的硫酸化葡聚糖作为标准，分别用5种不同的流动相，在Shodex Sugar KS柱上测定螺旋藻多糖的纯度以及分子质量，使用线性回归得出校正曲线。并且通过对结果进行多种方法学的考查，选取最佳的分析条件。     

Antihemorrhagin in the blood serum of king cobra (Ophiophagus hannah): purification and characterization

King cobra (Ophiophagus hannah) serum was found to possess antihemorrhagic activity against king cobra hemorrhagin. The activity was stronger than that in commercial king cobra antivenom. An antihemorrhagin has been purified by ion exchange chromatography, affinity chromatography and gel filtration with a 22-fold purification and an overall yield of 12% of the total antihemorrhagic activity contained in crude serum. The purified antihemorrhagin was homogeneous in disc-PAGE and SDS–PAGE. Its apparent molecular weight determined by SDS–PAGE was 120 kDa. The antihemorrhagin was also active against other hemorrhagic snake venoms obtained in Thailand and Japan such as Calloselasma rhodostoma, Trimeresurus albolabris, Trimeresurus macrops and Trimeresurus flavoviridis (Japanese Habu). It inhibited the proteolytic activity of king cobra venom. It is an acid- and thermolabile protein and does not form precipitin lines against king cobra venom.     

红芪多糖RHG的分离纯化及化学结构

甘肃产的名贵中药材红芪( Hedysarum polybotrys Hard.-Maz)的根经热水提取,醇析、脱除蛋白质、DEAE-Sephadex A-25离子交换色谱及Sephadex G-75柱色谱分离得一水溶性多糖RHG。用电泳及凝胶过滤法鉴定为均一组分,系由单一葡萄糖残基构成。平均分子量1.4×10⁴。经甲基化、高碘酸钠氧化、Smith降解、NMR和IR分析以及KI-I₂反应证明其化学结构是以α-D-(1→4)葡萄糖为主链,并在 6-位氧上有短而少量分枝的葡聚糖。     

Purification and some properties of hamster liver aldehyde oxidase

Aldehyde oxidase was purified from hamster liver cytosol by ammonium sulfate fractionation, chromatography on DEAE-cellulose and Phenyl-Toyopearl, and HPLC-gel filtration on TSK-gel G3000SW(XL) column. The purified enzyme was homogeneous by the criterion of sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Its molecular weight was determined to be 144800 by SDS-PAGE and 288000 by HPLC gel filtration. The isoelectric point was pH 5.1. The apparent Km and Vmax for benzaldehyde and 2-hydroxypyrimidine were 19.0 and 4.4 microM, and 165 and 211 nmol/min/mg protein, respectively. The benzaldehyde oxidase activity was markedly inhibited by menadione and chlorpromazine. The substrate specificity was different from those of the enzymes from other animals.