板栗中蛋白质的分离鉴定及活性研究

目的探讨板栗中蛋白质的分离纯化及其促肾细胞生长作用和抗肿瘤作用及机制。方法从板栗中提取出的水溶性蛋白质,经鉴定是欧栗球蛋白(CAS)。利用MTT法检测该蛋白对正常肾细胞和肝癌细胞HepS,小鼠肉瘤S180腹水型肿瘤细胞增殖的影响;检验其对小鼠T细胞和B细胞增殖作用的影响;用DNA电泳方法检测该蛋白诱导HepS细胞凋亡的作用。结果 CAS在体外对正常肾细胞的增殖有促进作用,对试验的肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,对T细胞和B细胞的增殖有促进作用,对HepS细胞具有诱导凋亡的作用。结论 CAS具有促肾细胞生长和抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用机制可能通过提高机体免疫力和诱导细胞凋亡来实现。     

山楂熊果酸的制备及对小鼠免疫功能和肝癌细胞凋亡的影响

目的探讨山楂熊果酸(UA)对环磷酰胺(CTX)造成的免疫低下小鼠的保护作用及UA对HepS肝癌细胞的影响。方法腹腔注射CTX形成免疫抑制模型,观察UA对模型小鼠的免疫活性的影响;从小鼠腹腔抽取对数生长期肝癌细胞,用流式细胞术和DNA凝胶电泳法检测不同剂量UA对肿瘤细胞凋亡的影响。结果3个剂量的UA均能显著升高外周血的白细胞数,增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能促进脾淋巴细胞增殖,增加脾指数;凝胶电泳检测DNA梯带,不同剂量的UA均能显著增加肿瘤细胞的凋亡率。结论UA对CTX造成的免疫抑制小鼠有显著的正调节作用,对HepS肝癌细胞凋亡有显著促进作用。     

热化疗对K562细胞体外增敏作用的实验研究

目的观察热疗联合阿霉素对人慢性白血病细胞株K562细胞内的药物浓度变化及凋亡的影响。方法MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40、41、42℃,体外作用于K562细胞。作用前及作用48h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡及细胞内药物浓度的变化。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48h IC50的药物浓度作为实验的工作浓度。热化疗组对K562细胞有明显的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强;热化疗组细胞内的药物浓度明显增加(P<0.01)。结论热疗联合阿霉素能增加K562细胞内的药物浓度,提高肿瘤细胞的凋亡率。     

PG490及PG736的抗肿瘤活性研究

目的通过研究PG490及血清孵化PG736对肿瘤细胞的毒性作用,评价PG736的抗肿瘤活性。方法采用14种人肿瘤细胞为实验瘤株,通过MTT法检测PG490、PG736对14种肿瘤细胞的毒性作用。结果与对照组相比较,PG490对所试14种人类肿瘤细胞的增殖均有显著抑制作用(P<0.05),对于不同来源的细胞作用强度略有不同;PG736经人血清孵化后对LOVO及GMC-803细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05)。结论PG490及PG736对14种人肿瘤细胞具有不同程度抗肿瘤作用。     

丙戊酸钠对肿瘤细胞影响的体外研究

目的以K562细胞为研究对象,观察丙戊酸钠体外(VPA)对肿瘤细胞的影响,以进一步指导VPA用于白血病的治疗。方法(1)应用MTT实验研究VPA对肿瘤细胞增殖抑制实验。(2)应用ELISA方法检测VPA诱导K562细胞株细胞凋亡的作用。结果(1)VPA对K562细胞增殖表现出很明显的抑制作用,且在0.1～100mg/ml范围内增殖抑制作用有明显的量效关系。(2)作用时间越长VPA促肿瘤细胞凋亡的现象越明显,各时间段结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论VPA对K562细胞具有增殖抑制作用,且作用具有显著的浓度依赖性。进一步的实验证实,高浓度VPA对K562细胞增殖抑制的的机制是通过诱导细胞凋亡实现的,且促凋亡作用有显著的时间依赖性。     

热疗加阿霉素对慢性白血病K562细胞株的抑制作用

目的观察热疗联合阿霉素对慢性髓系白血病细胞株K562的体外增殖抑制作用及凋亡的影响。方法采用MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40℃及42℃,体外作用于K562。作用前及48h,采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48h后IC50为5μg/ml,以此为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562细胞有抑制作用(P<0.01),并随温度增高而增强;单纯化疗对K562细胞也有抑制作用;各热化疗组对K562均有明显的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡,热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间有显著性差异(P<0.01)。结论热疗联合阿霉素能增强对K562细胞的体外抑制作用,可以提高肿瘤细胞的凋亡率。     

洋葱挥发油抗肿瘤作用的实验研究

目的:研究洋葱挥发油离体对人肝癌细胞株(QCY-7703)、人胃癌细胞株(MGC-803)、人宫颈癌细胞株(Hela)、人肺腺癌细胞株(SPC-A-1)的增殖抑制作用和在体对小鼠肉瘤S180及小鼠艾氏腹水癌的抑制作用。方法:采用MTT法检测不同剂量的洋葱挥发油对4种肿瘤细胞增殖的影响,复制小鼠肉瘤S180和小鼠艾氏腹水癌模型,检测不同剂量(1000、500、250mg·kg-1)的洋葱挥发油对小鼠肿瘤的抑制作用,比较其抑制率。结果:洋葱挥发油离体和在体实验中对肿瘤细胞均具有较强的增殖抑制作用。结论:洋葱挥发油能抑制多种肿瘤细胞的增殖,对肿瘤细胞有明显的细胞毒性作用。     

片仔癀体外抗肿瘤作用研究

目的研究片仔癀对体外肿瘤细胞增殖的影响,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测片仔癀对体外培养肿瘤细胞(肝癌SMMC-7721细胞、胃癌SGC-7901细胞、宫颈癌HeLa细胞)的抗肿瘤作用;以鸡胚尿囊膜血管生成(CAM)实验,研究片仔癀对新生血管生成的抑制作用。结果片仔癀在0.2～1.0mg/mL对各肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,1.0mg/mL片仔癀对肝癌细胞增殖抑制率达到81.55%;片仔癀在0.1～1000μg/mL对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,给药鸡胚的新生血管数减少,血管变细,其中10μg/mL抑制率最高,一级血管抑制率为61.1%,二级血管抑制率为59.1%。结论在实验给药浓度下,片仔癀对受试肿瘤细胞的增殖具有较强抑制作用,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用。     

鬼臼毒素聚合物胶团对人胶质瘤细胞的抑制作用

目的 合成鬼臼毒素聚合物胶团,评价其对人胶质瘤细胞的增殖抑制作用。方法 制备鬼臼毒素聚合物胶团,考察其理化性质,通过肿瘤细胞摄取实验,噻唑蓝（MTT）法检测其对U87细胞的增殖抑制作用。结果 鬼臼毒素聚合物胶团比游离药物鬼臼毒素对人胶质瘤细胞有更大的增殖抑制作用,显著增加肿瘤细胞内的药物浓度。结论 鬼臼毒素聚合物胶团对人脑胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用。     

美洛昔康对人肝癌HepG_2细胞增殖的抑制作用

目的:研究环氧合酶(COX)-2抑制剂美洛昔康对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用及其作用机制。方法:MTT法观察美洛昔康在不同浓度和作用时间下对细胞增殖的抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;DNA原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果:美洛昔康可抑制人肝癌细胞HepG2增殖;TUNEL及FCM检测结果均显示美洛昔康可诱导HepG2细胞凋亡。结论:美洛昔康可通过抑制细胞增殖和诱导凋亡2种途径抑制人肝癌细胞HepG2的生长。     

参附注射液和高乌甲素对小鼠肝癌细胞H22生长抑制及诱导凋亡作用

目的研究比较高乌甲素注射液和参附注射液对小鼠肝癌细胞株生长抑制及凋亡诱导作用。方法苔盼蓝计数,四甲基偶氮唑盐(MTT)法,流式细胞仪技术分析药物对细胞周期和凋亡指数的影响,琼脂糖电泳技术分析药物对DNA作用。结果氢溴酸高乌甲素注射液对H22作用、细胞数量与形态无明显影响;参附注射液可明显抑制小鼠肝癌H22的生长,细胞表现典型的凋亡形态,在浓度为50 mL/L时,出现明显的凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳检测出现DNA ladder。结论参附注射液体外能抑制小鼠肝癌H22细胞株的增殖和诱导细胞凋亡,高乌甲素注射液体外对H22细胞的生长、凋亡没有影响。     

苏木提取液对胃癌细胞增殖及凋亡作用的研究

目的探讨苏木提取液对人胃癌细胞株SGC-7901的生长抑制及凋亡作用。方法采用细胞计数法绘制生长曲线检测苏木提取液对SGC-7901细胞的生长抑制作用;苏木素-伊红(HE)及荧光染色观察用药后细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形。结果生长曲线提示苏木提取液对SGC-7901细胞有明显的生长抑制作用;形态学观察可见典型的细胞凋亡特征,如细胞核固缩、染色质凝聚及凋亡小体形成,且药物作用呈现一定的浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形。结论苏木提取液对人胃癌细胞株SGC-7901有明显的生长抑制及诱导凋亡的作用。     

分枝石蕊多糖诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究分枝石蕊多糖（CFP-1）是否能诱导K562细胞凋亡。方法：抑制细胞增殖的测定采用MTT法;用荧光显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化;采用琼脂糖凝胶电泳法观测DNA碎片;用流式细胞仪检测凋亡细胞数。结果：CFP-1（50-800mg/L）明显抑制K562细胞增殖,并且呈浓度依赖性,K562细胞与CFP-1300mg/L共同培养5d后,观察到典型的凋亡形态变化,电泳呈现梯形条带。结论：CFP-1诱导人白血病K562细胞凋亡。     

一叶秋碱诱导K562细胞凋亡

目的研究一叶秋碱（ＳＥＣ）能否诱导Ｋ５６２细胞凋亡。方法细胞增殖抑制采用ＭＴＴ法;形态学研究采用电子和荧光显微镜;流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂。结果ＳＥＣ１０～１６０ｍｇ·Ｌ－１呈剂量依赖性抑制Ｋ５６２细胞增殖（ｒ＝０９６１３,Ｐ＜００５）;ＳＥＣ作用４８ｈ后,电镜下可见细胞膜完整,核染色质边聚和凋亡小体;荧光显微镜下核染色质凝聚成点状结构;流式细胞仪出现凋亡峰;ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳可见“梯状”图谱。结论ＳＥＣ可诱导Ｋ５６２细胞调亡。     

丹参酮ⅡA对小鼠骨髓瘤细胞SP2/0体外增殖与凋亡的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)对小鼠骨髓瘤细胞SP2/0的生长抑制与诱导凋亡作用。方法选用小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0,运用光镜、MTT法、DNA琼脂糖凝胶电泳分析SP2/0细胞增殖及凋亡的改变。结果经丹参酮ⅡA处理后,SP2/0细胞增殖明显被抑制,当4.0μg/mL TanⅡA处理SP2/0细胞72 h,增殖抑制率达(79.4±2.2)%,镜下可见凋亡细胞的形态学改变,细胞DNA片断化(呈现"梯状"断裂现象)。结论TanⅡA能有效地抑制小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0增殖,诱导SP2/0细胞凋亡。     

中华眼镜蛇毒血清抑制HL60细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的　探讨中华眼镜蛇毒血清体外对白血病细胞系(HL6 0 )的抑制作用及其机制。方法　以人粒细胞白血病细胞系 (HL6 0 )为靶细胞 ,观察口服中华眼镜蛇毒血清对肿瘤细胞增殖的影响 ,并采用DNA片断凝胶电泳、流式细胞仪分析药物体外诱导细胞凋亡情况。结果　中华眼镜蛇毒血清在体外显著抑制HL6 0细胞的生长 ,其抑制作用随着剂量的加大而增强 ,高剂量 (7 5g·L-1)的抑制效果相近于阿霉素(5mg·L-1) ,和空白对照组比较差异有显著性。经DNA电泳、流式细胞仪分析显示中华眼镜蛇毒血清与HL6 0细胞共同培养可诱导其发生细胞凋亡。结论　中华眼镜蛇毒血清体外能显著抑制HL6 0细胞的生长 ,此作用可能与诱导白血病细胞发生凋亡有密切关系。     

冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡

目的　研究冬凌草甲素诱导人白血病HL 6 0细胞凋亡的作用。方法　形态学观察 ,DNA凝胶电泳及流式细胞术。结果　冬凌草甲素能显著地诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的浓度效应关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯带 ;流式细胞仪检测到G1亚峰。结论　冬凌草甲素能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,并与其细胞杀伤活性相互平行 ,提示冬凌草甲素的抗癌活性与诱导肿瘤细胞凋亡相关     

四嗪二甲酰胺抑制肝癌细胞株HepG2增殖并诱导细胞凋亡的研究

目的观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肝癌细胞株HepG2增殖并诱导细胞凋亡作用。方法将不同浓度的ZGDHu-1与HepG2细胞在体外培养,用台盼蓝染色、MTT法、5′-溴-2′脱氧尿苷(B rdu)-ELISA法观察ZGDHu-1对HepG2细胞增殖的抑制作用;用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin-V/PI双标记、Ho-echst33258荧光染色和ELISA法测定DNA片段等技术检测细胞凋亡。结果ZGDHu-1能抑制HepG2细胞增殖和活力,呈现作用时间和剂量的量效关系。HepG2细胞与ZG-DHu-1作用后,大部分细胞阻滞于G2-M期;出现典型的细胞形态改变,DNA片断化,亚G1峰检出并增加,Annexin V+/PI-表达升高,细胞内DNA片段含量增加,Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等均证实ZGDHu-1能诱导HepG2细胞凋亡。结论ZGDHu-1能抑制HepG2细胞增殖,并可诱导其细胞凋亡。