大蒜新素对巨细胞病毒感染小鼠细胞因子TGF-β1的影响

目的 探讨大蒜新素对全身播散型小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染模型鼠转化生长因子β1（TGF-β1）基因转录和蛋白表达的影响. 方法建立MCMV全身播散型感染BALB/c小鼠模型, 将60只模型鼠随机分为安慰药组和大蒜新素（25 mg•kg^-1•d^-1）治疗组, 并设60只同期模拟感染小鼠为对照, 随机分为模拟对照组和大蒜新素对照组, 每组30只. 于药物治疗后1, 3, 7, 14和28 d获取血清和脾细胞（体外培养刺激物为灭活MCMV抗原）. 用双抗体夹心ELISA法检测血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平;用逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）法检测脾细胞TGF-β1mRNA表达强度. 结果安慰药组在治疗后3 d血清TGF-β1水平即显著上升达高峰, 随后逐渐下降, 但至28 d仍明显高于模拟对照组;其脾细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化一致, 均在治疗后3 d明显增高, 7 d达高峰, 28 d回落到稍高于模拟对照组水平. 与安慰药组比较, 大蒜新素治疗组3 d后血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平均有降低, 以治疗后3～7 d差异最为显著;而脾细胞TGF-β1mRNA表达与大蒜新素对照组相近. 结论MCMV在急性感染期可诱导免疫抑制因子TGF-β1基因转录和蛋白表达明显增高, 而大蒜新素治疗可完全阻遏病毒诱导的脾细胞TGF-β1基因转录, 并明显降低模型鼠血清和脾细胞TGF-β1表达水平.     

二苯乙烯苷对APP转基因小鼠学习记忆能力和脑内β-淀粉样肽表达的影响

目的:观察从中药何首乌提取的二苯乙烯苷(TSG)对APP转基因小鼠学习记忆能力、β-淀粉样肽(Aβ)和分泌酶的影响。方法:将APP转基因小鼠随机分为模型组,TSG 0．05和0．2 g·kg-1组,同月龄同背景C57BL／6J小鼠为对照组,各组小鼠从4月龄始连续灌胃给药6个月。用morris水迷宫观察小鼠学习记忆能力,用免疫组化法观察小鼠海马APP,Aβ,β位点剪切酶(BACE,即β-分泌酶)和代表γ-分泌酶的早老蛋白-1(PS-1)的表达。结果:10月龄转基因小鼠模型组与正常对照组相比,模型组学习记忆能力明显降低,海马APP,Aβ和PS-1的表达明显增强。TSG能显著改善模型小鼠学习记忆能力,降低脑内APP、Aβ的生成,抑制海马PS-1的表达。在正常对照组、模型组和TSG组之间,β-分泌酶表达没有明显差异。结论:TSG能减少脑内Aβ形成,改善学习记忆能力,作用机理可能与减少APP生成和抑制γ-分泌酶的表达有关。     

蛇床子素对APP/PS1小鼠学习记忆的影响

目的观察蛇床子素(OST)对APP/PS1小鼠学习记忆功能的影响。方法采用雄性APP/PS1双转基因小鼠及野生型(WT)小鼠,随机分为3组:WT对照组、APP/PS1对照组和APP/PS1+OST。给药组小鼠自9月龄开始每天给予OST10 mg·kg~(-1),对照组小鼠则给予等体积的双蒸水,连续给药12周。每月观察小鼠筑巢行为的改变;实验结束前采用Morris水迷宫观察小鼠行为学的改变。之后,麻醉并处死小鼠,收集脑组织,采用Nissl染色观察海马神经元的形态及数量;Western蛋白印迹法检测海马组织Aβ1-40/Aβ1-42含量,APP、α分泌酶(ADAM10)及β分泌酶(BACE1)的蛋白表达水平。结果 APP/PS1小鼠筑巢行为评分随着时间推移而逐渐变差,不能筑成完整的巢穴;给予OST治疗后,小鼠的筑巢行为评分接近WT小鼠,基本筑成完整巢穴。由此说明,12月龄的APP/PS1小鼠日常生活能力和社会行为有所损伤,而OST对此可部分恢复。水迷宫结果显示,与WT小鼠相比,APP/PS1小鼠出现明显的空间学习记忆能力的下降,表现为平均逃避潜伏期明显延长且目标象限停留时间百分比和穿越平台次数明显减少;给予OST后改善了APP/PS1小鼠的空间学习记忆能力。组织形态及分子生物学结果显示,APP/PS1小鼠海马DG区及CA3区神经元的细胞形态受损并伴有完整神经元数量的减少,并且海马组织Aβ1-40/Aβ1-42含量增加,APP及BACE1蛋白呈现高表达,ADAM10的蛋白表达下降;给予OST后,减少了APP/PS1小鼠海马组织Aβ的含量,降低了APP及BACE1蛋白水平,增加了ADAM10的蛋白表达。结论 OST可改善APP/PS1小鼠日常生活能力、社会行为及空间学习记忆等能力,并减少海马组织Aβ的含量,可能与调节海马APP的酶切途径有关。     

NMDA对老年性痴呆大鼠βAPP及BACE1表达的影响

目的 探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体抑制剂(盐酸美金刚)对老年性痴呆(AD)大鼠β-淀粉样前体蛋白(APP)及β分泌酶(BACE1)表达的影响。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,治疗组(盐酸美金刚组);除假手术组外,其余两组大鼠海马注射10 μg β淀粉样蛋白(Aβ)1-40构建AD大鼠模型,治疗组大鼠腹腔注射10 mg/(kg.d)盐酸美金刚,其余两组给予等量生理盐水,连续给药14 d,处死大鼠取血及海马组织。ELSIA法检测血清及海马组织中Aβ含量,western blot及RT-PCR法检测海马组织中APP和BACE1蛋白及mRNA表达量。结果 与假手术组比较,模型组中Aβ含量显著提高,APP及BACE1蛋白及mRNA含量显著提高;与模型组比较,治疗组中Aβ含量显著降低,APP及BACE1蛋白及mRNA含量显著下降。结论 盐酸美金刚能通过阻断APP裂解,从而抑制AD大鼠海马组织中Aβ沉积。     

巨细胞病毒感染引发高血压

哈佛医学院的研究者发现巨细胞病毒（CMV）感染可引发小鼠高血压,并能诱导人血管内皮细胞（EC）产生肾素和血管紧张素Ⅱ。     

大蒜新素降低鼠巨细胞病毒播散性感染小鼠病毒DNA载量研究

目的用大蒜新素治疗鼠巨细胞病毒（murine cytomegalovirus, MCMV）播散性感染小鼠至慢性期,检测小鼠唾液腺、肝、脾和肾组织内MCMV DNA载量动态变化,在整体水平上观察大蒜新素抗MCMV的长期疗效。方法BALB/c幼鼠60只,腹腔接种MCMV Smith株建立MCMV播散性感染模型,随机分为大蒜新素治疗组和模拟治疗组各30只,接种病毒后24 h,两组分别腹腔注射大蒜新素25 mg•kg-1•d-1和0.9%氯化钠注射液0.2 mL,qd,共120 d。于治疗后1,3,7,14,28,45,60,75,90和120 d,每组随机选择小鼠3只,取唾液腺、肝、脾和肾组织,采用real time PCR法检测组织内MCMV DNA载量。结果模拟治疗组小鼠唾液腺内MCMV DNA载量最高,在治疗后14 d（感染后15 d）达高峰;肝、脾和肾内病毒DNA载量治疗后7 d达峰值;治疗28 d（感染29 d）后,各组织内病毒DNA载量明显减少,尤其是肝、脾和肾组织病毒DNA呈持续低水平（进入慢性期）。与模拟治疗组比较,大蒜新素治疗组治疗后7,14和28 d唾液腺、脾和肾内MCMV DNA 载量显著降低;治疗后7和14 d肝内病毒DNA载量明显降低。进入慢性期后,两组小鼠各脏器病毒DNA载量差异无显著性。结论大蒜新素长期治疗不能完全清除CMV,但在急性感染期（病毒增殖高峰期）能显著降低脏器内病毒DNA载量。     

金钗石斛多糖对脂多糖诱导的大鼠海马APP和GSK-3β基因的影响

目的：观察金钗石斛多糖（NDP）对脂多糖诱导的大鼠海马APP和GSK-3β基因的影响。方法预防性给药7 d后,侧脑室注射LPS溶液诱导大鼠的神经炎症模型,real time RT-PCR仪定量检测大鼠海马组织中淀粉样前体蛋白APP及糖原合成激酶GSK-3β的mRNA表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠海马组织中的APP、GSK-3βmRNA表达明显增加;NDP给药组[80,160 mg/（kg·d）]大鼠海马组织中的APP、GSK-3βmRNA表达量均较模型组明显降低。结论NDP[80,160 mg/（kg·d）]可以降低LPS诱导的大鼠海马组织APP、GSK-3βmRNA表达。     

巨细胞病毒感染阳性率与小儿呼吸道感染及治疗的相关性分析

目的：探讨巨细胞病毒（ CMV ）感染阳性率与小儿呼吸道感染及治疗的相关性。方法分别检测108例呼吸道感染患儿和96例非感染性患儿口腔分泌物和尿液中的CMV,分析CMV阳性率与小儿呼吸道感染的相关性;再对呼吸道感染患儿使用罗红霉素颗粒进行治疗,比较治疗前、后其口腔分泌物和尿液中的巨细胞病毒CMV阳性率。结果观察组治疗前CMV的阳性率显著高于对照组（ P＜0．05）;观察组治疗后CMV的阳性率显著低于其治疗前（P＜0．05）。结论 CMV感染阳性率与小儿呼吸道感染及治疗有密切的相关性,其可作为临床诊断及治疗小儿呼吸道感染的指标之一。     

葛根素对阿尔茨海默病细胞模型Aβ蛋白的抑制作用

目的在过表达β淀粉样前体蛋白的SH-SY5Y细胞上(SH-SY5Y/APP695)观察葛根素对β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)生成的作用,探讨其防治阿尔茨海默病的机制。方法葛根素2.5,5和10μmol·L-1处理SH-SY5Y/APP细胞24 h,MTT法检测细胞活力,ELISA试剂盒测定细胞外Aβ1-40和Aβ1-42水平;Western blot蛋白质印迹法检测APP及β-分泌酶的蛋白表达变化;荧光法测β-分泌酶的活性;RT-PCR法检测β-分泌酶转录的变化。结果葛根素可剂量依赖性的减少SH-SY5Y/APP695细胞外Aβ1-40、Aβ1-42的水平;酶活性分析显示2.5,5和10μmol·L-1的葛根素分别抑制了15%,30%和40%β-分泌酶的活性。Western blot印迹结果显示,葛根素能剂量依赖性抑制β-分泌酶蛋白表达,2.5,5和10μmol·L-1的葛根素使β-分泌酶的蛋白表达分别减少至82%,71%和45%,与空白对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论葛根素通过下调β-分泌酶蛋白的表达、抑制β-分泌酶的活性减少Aβ的形成,这可能是葛根素防治阿尔茨海默病作用的重要机制之一。     

阿尔采末病APP分泌酶及其靶向干预研究进展

α、β和γ3种分泌酶是淀粉样前体蛋白(APP)加工及代谢的关键酶,选择性地激活α分泌酶或抑制β和γ分泌酶,将有助于减少β-淀粉样蛋白(Aβ)的产生,并可能成为治疗AD的有效靶点。该文主要对APP 3种分泌酶活性表达的影响因素及其靶向干预研究的进展做一综述。