海洋微生物代谢产物FGFC1的纤溶促进作用

目的:研究海洋微生物产生的吡喃并异吲哚酮化合物FGFC1体外和实验动物体内促纤溶作用.方法:采用异硫氰酸荧光素(F1TC)纤维蛋白降解法和急性肺血栓大鼠模型法研究FGFC1体外和体内的纤溶促进作用.结果:在体外FITC-纤维蛋白降解实验中,FGFC1在0.5～ 25 μmol/L浓度范围内,其纤溶促进作用随着浓度升高逐渐增强;当FGFC1浓度≥25 μmol/L时,其纤溶促进作用维持在最高水平,EC50为5 μmol/L.在大鼠急性肺血栓实验中,FGFC1的剂量为5或10 mg/kg能溶解肺血栓,达到与5 nmol/L剂量单链尿激酶型纤溶酶原激活剂相当的溶栓效果.结论:溶栓药物先导化合物FGFC1具有优良的纤溶促进作用和溶栓效果.     

海洋纤溶活性化合物FGFC1和FGFC2影响血小板聚集特性的研究

目的：研究新型海洋双吲哚纤溶活性化合物FGFC1对血小板聚集的影响,发现纤溶活性化合物FGFC1与血小板相关因子变化的关系,同时比较双吲哚化合物FGFC1和单吲哚化合物FGFC2作用于血小板的异同。方法：从新鲜兔血收集血小板,调整反应体系血小板密度,以乙酰水杨酸为阳性对照,采用微量比浊法分析FGFC1和FGFC2对血小板聚集率的影响,用酶联免疫法测定FGFC1和FGFC2对血小板生理因子含量的变化。结果：FGFC1对ADP和AA诱导的血小板聚集具有抑制作用,最大抑制率分别达到42.58%±1.7%和47.82%±2.18%;FGFC2对ADP、AA和胶原诱导的血小板聚集均具有抑制作用,最大抑制率分别为50.12%±1.02%、45.28%±1.09%和50.28%±2.12%。FGFC1与FGFC2均能提升血小板内环磷酸腺苷含量,且FGFC2能明显降低血小板内血栓素A2含量。结论：海洋双吲哚纤溶活性化合物显著抑制血小板聚集,FGFC1通过影响血小板环磷酸腺苷的含量实现抑制血小板聚集,FGFC2可能通过不止一种途径抑制血小板聚集。吲哚化合物抑制血小板聚集与分子结构密切相关。     

海洋微生物来源吲哚酮纤溶化合物影响纤溶因子构象特性的研究

摘 要:目的 研究FGFC1对各纤溶因子构象的影响及FGFC1促进纤溶反应的机制。方法 采用圆二色谱法研究FGFC1对各纤溶因子结构的影响,采用发色底物法研究FGFC1对各纤溶因子活性的影响,采用SDS-PAGE电泳法研究FGFC1在纤溶酶原和单链尿激酶型纤溶酶原激活剂构成的相互活化反应体系中的作用。结果 远紫外区的CD结果表明FGFC1在23 μmol?L?1~115 μmol?L?1的浓度范围内均使各纤溶因子的二级结构发生变化,这变化都导致酶分子柔性增加、更易发生反应;近紫外区的CD结果表明,FGFC1使纤溶酶原在285 nm处的摩尔旋光度增大。CD研究结果表明FGFC1对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和尿激酶型纤溶酶原激活剂结构的影响较为微弱,对纤溶酶及纤溶酶原结构的影响复杂而深刻。运用发色底物法检测加入不同浓度FGFC1后各纤溶因子的酶活力,排除了FGFC1对纤溶因子的结构影响而导致的纤溶因子失活的可能性。在体外构筑的纤溶反应体系中,SDS-PAGE的结果显示FGFC1的加入促进FITC-纤维蛋白原的降解,表明FGFC1加速纤溶酶原和单链尿激酶型纤溶酶原的相互活化作用。结论 FGFC1作用于纤溶酶原并辅以改变单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的二级结构发挥纤溶促进作用。     

海洋双吲哚化合物溶解大鼠脑微血栓的纤溶作用

目的 检测海洋双吲哚生物碱FGFC1对大鼠脑微血栓的纤溶作用。方法 静脉注射异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠脑微血栓形成,低场核磁共振血栓成像和组织切片评价脑微血栓动物模型构建;颈静脉注射给药FGFC1,荧光比色法检测大鼠血浆荧光强度,ELISA方法检测纤维蛋白降解产物和纤溶酶原活性。结果 低场核磁共振血栓成像和HE染色组织切片显示异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠脑部密度增强和脑血管管壁增厚;冷冻组织切片显示脑血管存在荧光亮斑;血浆荧光强度显示2 h时异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠脑微血栓形成;当FGFC1给药剂量为5 mg/kg时,给药后2 h大鼠血浆FDP、D-D及PLG活性分别为595.24 ng/mL、5.70 ng/mL和86.98 IU/L,与空白对照组差异显著。结论 异硫氰酸荧光素-纤维蛋白诱导大鼠形成脑微血栓模型,FGFC1能够增强脑微血栓动物模型的纤溶活性,实现脑微血栓溶解;海洋纤溶化合物FGFC1具有发展为溶解脑微血栓药物的潜力。     

海洋微生物来源纤溶活性化合物的筛选及其分离

目的 从海洋微生物的次生代谢产物中分离具有纤溶促进作用的化合物.方法 采用选择性培养基从海水样品中分离细菌、真菌和放线菌,利用发色底物法筛选产纤溶活性化合物的菌株和确定菌株发酵培养基,通过HPLC分离活性化合物.结果 从离岸100 m处采集的31个海水样品中获得分离菌株936个,从霉菌FG216的次生代谢产物中,发现了具有纤溶促进作用的活性化合物,采用改良的察氏培养基作为发酵培养基,代谢产物的纤溶促进效果最好,并从FG216的发酵液中分离和精制了活性化合物.结论 从海洋微生物的代谢产物中得到了具有纤溶促进作用的活性化合物.     

比格犬体内FGFC1药物代谢动力学特征及组织分布的研究

目的用高效液相色谱法(HPLC)对海洋新型纤溶化合物FGFC1(fungi fibrinolytic compound 1)的药物代谢动力学和组织分布进行成药性的初步评价。方法分析柱HPC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温为40℃;流动相为乙腈-水(0.1%三氟乙酸)45∶55(V/V)和85∶15(V/V),流速1 m L·min-1;检测波长265 nm。前肢静脉给予比格犬3种剂量(7.5、5.0、2.5 mg·kg-1)的FGFC1,于不同的时间点取血,用HPLC测定血浆和组织中FGFC1的浓度并计算其药物代谢动力学参数和组织分布情况。结果 FGFC1的消除半衰期(T1/2β)分别为(49.035±2.171)、(48.422±2.113)及(48.811±2.372)min;达峰浓度Cmax分别为(56.48±6.23)、(48.63±5.53)、(13.64±2.76)mg·L-1;机体总消除率(CL)分别为(0.006 2±0.000 4)、(0.007 1±0.000 8)、(0.009 2±0.000 6)L·min-1·kg-1;平均保留时间(MRT)分别为(28.17±1.16)、(26.23±0.35)、(28.66±0.84)min。组织分布研究结果表明FGFC1在静脉给药后迅速分布到全身各处,最高药物浓度水平在肝脏中检出。结论FGFC1在比格犬体内呈现良好的药代动力学特性和组织分布特点,表现出较高的成药性特征,值得进一步研究。     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及抗栓活性研究

目的摸索蚯蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶的抗血栓活性。方法采用分步盐析、透析、凝胶色谱和亲和色谱法分离纯化蚯蚓纤溶酶 ;此酶的体内抗栓活性检测采用动静脉旁路血栓形成抑制实验法。结果分离纯化得到的蚯蚓纤溶酶比活高 ,为 16 0 5IU/mg ;蚯蚓纤溶酶的体内血栓形成抑制效果比尿激酶作用显著。 结论该法分离纯化工艺简单 ,特异性好 ,纯化的纤溶酶比活高 ;体内抗栓活性比尿激酶作用显著     

组织纤溶酶原激活物的分离纯化

用亲和层析法从猪心组织分离纯化纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t-PA),以纤维蛋白-sepharose-4B 和 lys-sepharose-4B 两种亲和胶,从5 kg 新鲜猪心组织中分离出 t-PA1.46mg,比活性为235000 IU/mg,得率为34%,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定为一条带,分子量为68000。     

天然黄酮类化合物的药理活性及分离提取

<正>黄酮类化合物是自然界广泛存在的一类化合物,在高等植物体内分布较多。本文对黄酮类化合物的结构与药理活性、提取分离方法等研究进展进行了综述,并对该领域的研究热点进行了展望。1黄酮类化合物结构特点及分布黄酮类化合物是一类自然界中广泛分布的多酚类物质。现泛指具有15个碳原子的多元酚类化合物,其中2个芳环(A环、B环)之间以一个三碳链(C3)相连,其骨架可用C6-     

中草药桃仁纤溶酶的亲和层析分离

目的分离出高效、特异、安全、不良反应较小的纤溶酶,为溶栓药物的研究奠定基础。方法利用硫铵沉淀法提取出桃仁纤溶酶,测定其比活力,并比较不同蛋白酶抑制剂对桃仁纤溶酶活性的抑制作用,采用亲和层析法对桃仁纤溶酶进行分离纯化。结果亲和层析法分离得到了纤溶酶活性单一组分,比活力为89.08 U.mg？1,比纯化前提高了7.37倍,该组分属于丝氨酸蛋白酶家族。结论利用大豆胰蛋白酶抑制剂作为配基,采用亲和层析法分离桃仁纤溶酶可以得到单一活性成分,且比活力相对提高。     

蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤作用

目的　观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法　采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模型对蚯蚓纤溶酶进行体内抗肿瘤药效学观察。结果　蚯蚓纤溶酶在体外对人癌细胞的生长无抑制作用 ;灌胃给予蚯蚓纤溶酶 2 0 0～ 10 0 0mg·kg-1,可明显抑制人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤的生长。结论　蚯蚓纤溶酶具有抗肿瘤作用。     

Development of an Efficient Extraction Method for Harvesting Gymnodimine-A from Large-Scale Cultures of Karenia selliformis

Gymnodimine-A (GYM-A) is a fast-acting microalgal toxin and its production of certified materials requires an efficient harvesting technology from the large-scale cultures of toxigenic microalgae. In this study the recoveries of GYM-A were compared between several liquid-liquid extraction (LLE) treatments including solvents, ratios and stirring times to optimize the LLE technique for harvesting GYM-A from Karenia selliformis cultures, of which the dichloromethane was selected as the extractant and added to microalgal cultures at the ratio 55 mL L⁻¹ (5.5%, v/v). The recovery of GYM-A obtained by the LLE technique was also compared with filtration and centrifugation methods. The stability of GYM-A in culture media were also tested under different pH conditions. Results showed that both the conventional filter filtration and centrifugation methods led to fragmentation of microalgal cells and loss of GYM-A in the harvesting processes. A total of 5.1 µg of GYM-A were obtained from 2 L of K. selliformis cultures with a satisfactory recovery of 88%. Interestingly, GYM-A obviously degraded in the culture media with the initial pH 8.2 and the adjusted pH of 7.0 after 7 days, but there was no obvious degradation in the acidic medium at pH 5.0. Therefore, the LLE method developed here permits the collection of large-volume cultures of K. selliformis and the high-efficiency extraction of GYM-A. This work provides a simple and valuable technique for harvesting toxins from large-scale cultures of GYM-producing microalgae.     

Lack of effect of 5-aminosalicylic acid on platelet aggregation and fibrinolytic activity in vivo and in vitro

Summary We have studied platelet aggregation and fibrinolytic activity in six patients with chronic inflammatory bowel disease treated with 5-aminosalicylic acid (mesalazine).There were no changes in these measurements during normal treatment, i.e. 1.5 g per day with a slow-release formulation, nor after an intravenous dose of 250 mg. Also in vitro tests were negative, in contrast to the inhibition seen with aspirin (acetylsalicylic acid).We conclude that treatment with mesalazine does not constitute a hazard to these patients in regard to prolonged bleeding time caused by an influence on platelet aggregation or fibrinolytic activity.     

高效液相色谱法测定复合维生素B片中4种组分的含量

目的:采用离子对高效液相色谱法测定复合维生素B片中烟酰胺、维生素B6、维生素B2、维生素B1等4种水溶性维生素的含量。方法:以C18为色谱柱,0.005mol.L-1庚烷磺酸钠溶液(含0.5%冰醋酸和0.05%三乙胺)-甲醇(72∶28,v/v)为流动相,流速为1mL.min-1,检测波长为280nm。结果:烟酰胺、维生素B6、维生素B2、维生素B1的线性范围分别为0.315 4~15.77μg,0.052 16~2.608μg,0.052 27~2.613 5μg,0.447 4~22.37μg;方法的回收率均在98.5%~101.4%,RSD均为0.6%~1.8%。结论:本法简便,快速,为复合维生素B片产品的质量控制及多维类药物中水溶性维生素含量的测定提供了可靠依据。     

复方山泽降脂方降脂作用实验研究

目的探讨效验复方山泽降脂方（SZ）对实验性高脂血症大鼠血脂的调节作用。方法用脂肪乳剂灌胃造成大鼠实验性高脂血症动物模型,以复方山泽降脂方3.5、7、14 g.kg-1低、中、高剂量组给予大鼠灌胃28 d后,经腹主动脉取血,测血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）。结果与高脂模型组比较,高剂量SZ能显著降低血清TC、TG、LDL-C水平和动脉硬化指数（AI）（P〈0.01或P〈0.05）,但对HDL-C的影响不大。结论复方山泽降脂方对高脂血症大鼠的脂质代谢有一定的调节作用,提示其对高脂血症的防治具有应用价值。     

冻干重组葡激酶对正常人凝血、纤溶系统影响的研究

目的　探讨冻干重组葡激酶 (r Sak)对正常人出、凝血及纤溶系统的影响 ,为进一步临床应用提供翔实的依据。方法　健康志愿者 2 0例静脉注射不同剂量r Sak(1、2 5、5、10、15mg) ,观察临床出血情况以及动态监测用药前后BT、BPC、APTT、PT、TT、Fg、D D、PL∶A、α2 PI∶A。结果　 2 0例中 4例有轻微出血 ,以皮肤粘膜为主 ,可自行止血 ,无 1例伴内脏出血。其中 3例牙龈渗血 ,2例穿刺部位出血。 4例有D D轻微异常 ,其余以上指标皆无变化。实验显示本药为高度选择性溶栓药 ,对正常人出凝血相无改变。结论　在本试验剂量范围内 ,该药是相对安全的 ,可很好耐受 ,但用于临床的最佳剂量有待进一步临床验证     

药物制剂中月桂醇磷酸酯钾的新型处理方法及对水溶性药物成分表征的影响

目的：建立一种新型、简便的方法处理药物制剂中的月桂醇磷酸酯钾（HR-S1）,并对其中的水溶性药物成分进行含量表征。方法：取润肤霜2.0 g,加入甲醇10 mL,搅拌,过滤,加甲醇5 mL洗涤残渣,合并滤液;加入0.25 mL磷酸,摇匀,用10 mL正己烷萃取,重复3次,去除正己烷层,残余溶液氮吹至干,加甲醇复溶。润肤霜中人参皂苷Rg₁的检测：C₁₈色谱柱为固定相,乙腈-0.1%醋酸梯度洗脱,检测波长为203 nm。结果：本研究所建立的方法能完全去除HR-S1对润肤霜中水溶性药物成分人参皂苷含量表征的干扰,方法回收率高至99.6%,精密度和重复性好。结论：该方法操作简便快速,能完全消除HR-S1的干扰,回收率高,可用于乳霜中月桂醇磷酸酯钾的去除及人参皂苷Rg₁的表征。     

复方黄连胶囊降血糖作用的实验研究

目的:研究复方黄连胶囊(CRCC)降血糖作用及部分机制。方法:建立大鼠四氧嘧啶糖尿病模型,观察CRCC对血糖、血清胰岛素、糖化血红蛋白、糖耐量、心肌组织内脂质过氧化水平的影响。结果:CRCC(1．09, 2．18,4．36 g·kg~(-1),ig给药)能降低糖尿病大鼠的血糖和糖化血红蛋白,升高血清胰岛素水平,增强其糖耐量,并能抑制心肌的脂质过氧化反应。结论:CRCC具有降血糖作用,并可通过改善心肌组织内脂质过氧化作用对心肌产生保护作用。