早期饲喂纯膳食纤维对大鼠肠屏障的保护作用研究

目的探讨早期饲喂纯膳食纤维对大鼠受损肠屏障的保护作用。方法Wistar大鼠致重型颅脑损伤后，随机分为生理盐水组、能全素组、能全力组、膳食纤维组各8只，分别在伤后6、12、24、48、72h活杀动物；另设正常对照组。取小肠回盲部在光镜下观察其病理形态变化，取门静脉血测血浆微量内毒素的变化。取腹主动脉血测血浆二胺氧化酶、D-乳酸的变化。结果①致伤后各组肠黏膜组织结构受损，内毒素、二胺氧化酶、D．乳酸值明显高于对照组（均P〈0．01），上述变化以伤后12～24h最显著，至72h不能恢复；②早期添加膳食纤维至伤后48h对上述各观察指标有明确改善作用，能全力至48h后有改善作用。结论早期添加单纯膳食纤维作为肠内营养制剂对重型颅脑损伤大鼠肠屏障有保护作用。     

香连丸有效部位对肠黏膜屏障保护作用的实验研究

目的：研究香连丸有效部位对梗阻性黄疸引起的肠黏膜受损的治疗作用。方法：建立梗阻性黄疸引起的肠黏膜受损的家兔模型,观察各组家兔小肠组织病理学变化、血清胆红素和直接胆红素、血二胺氧化酶（DAO）、血清内毒素（ET）的含量。结果：香连丸有效部位能显著减轻家兔小肠黏膜组织病理学损伤,降低血中二胺氧化酶及血清内毒素的水平。结论：香连丸有效部位对家兔肠黏膜屏障有保护作用。     

川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的研究川芎嗪对大鼠小肠缺血再灌注肠黏膜损伤的保护作用,为扩展其临床新用途及肠缺血再灌注损伤的治疗提供实验依据。方法通过建立大鼠小肠缺血再灌注模型,检测缺血再灌注2h及4h后血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）的含量,并观察小肠黏膜病理变化。结果小肠缺血再灌注后,血清中反映氧化损伤程度的MDA明显升高,抗氧化酶SOD则明显减少,NO含量明显增多。结论肠黏膜损伤,应用川芎嗪后再灌注2h和4h两个时间段均能显著改善上述改变。     

正丁酸钠对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用的研究

目的：观察正丁酸钠拮抗高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用。方法：建立大鼠肝脏缺血再灌注模型．将40只雄性Wistar大鼠随机先分成5组（n-8）：假手术组,缺血组,预处理组、治疗1组、治疗2组。分别于缺血再灌注6h前后给药观察血清AST、ALT、TNF—α水平及肝组织HMGB—1含量变化,并行肝组织病理学检查。结果：缺血再灌注组中HMGB—1的含量高,预处理组、治疗1组、治疗2组这三组中相应时间点的HMGB-1含量、AST、ALT水平、TNF—α含量均较缺血再灌注组中低,预处理组较治疗1组、治疗2组效果显著且肝细胞病理损害较轻。结论：正丁酸钠预处理组对肝脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

褪黑素对肠缺血再灌注损伤保护作用的临床研究

目的 研究褪黑素对肠缺血再灌注损伤(IIRI)的保护作用.方法 研究对象随机分为缺血再灌注A组,生理盐水处理B组,地塞米松治疗C组,褪黑素治疗D组,每组20例.手术解除肠缺血前后10min分别静脉注射生理盐水10ml、地塞米松20mg和褪黑素20μg,手术结束后1h内采外周静脉血,用MDA、SOD试剂盒测定血浆MDA浓度和SOD活性.用NO试剂盒和酶学分光光度法测定血浆NO2-/NO3-水平和血浆D-乳酸水平.观察处理后各组肠管颜色完全恢复时间和术后肛门排气时间.结果 褪黑素治疗组与生理盐水处理组和地塞米松治疗组比较,血浆SOD活性明显上升(P＜0.01),MDA浓度降低(P＜0.05),血浆中NO2-/NO3-浓度上升(P＜0.05),D-乳酸明显降低(P＜0.01),各组肠管颜色完全恢复时间和术后肛门排气时间均有缩短(P＜0.05).结论 褪黑素对肠缺血再灌注损伤有较好保护作用,其机制可能是通过清除氧自由基,防止脂质过氧化和保护肠黏膜机械屏障.     

谷氨酰胺预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其对eNOS-NO通路的影响

目的探讨谷氨酰胺(Gln)预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤(IR)后的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶(e NOS)/一氧化氮(NO)信号通路的影响。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、IR组、Gln组,每组10只,Gln组给予谷氨酰胺1 g/(kg·d),连续灌胃7 d。Sham组和IR组以同等剂量生理盐水灌胃7 d。Sham组仅分离肠系膜上动脉(SMA)而根部不夹闭。IR组和Gln组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部,30 min后放松血管夹形成再灌注损伤模型。各组大鼠均于制模后24 h采集腹主动脉血和回肠标本。应用HE染色法观察肠黏膜组织形态学改变,ELISA试剂盒双抗体夹心法测定D-乳酸、内毒素含量,硝酸还原酶法检测血清NO的含量,比色法检测血清e NOS、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的含量,荧光定量PCR(RT-PCR)检测大鼠肠组织e NOS、i NOS m RNA表达水平。结果再灌注后,与Sham组相比,IR组肠黏膜绒毛上皮脱落,固有层崩解,部分绒毛顶端出血,腺体明显受损;Gln组表现为肠黏膜绒毛上皮下间隙扩大,但不明显,绒毛轻度水肿,腺体大致正常,固有层轻度水肿。IR组血清D-乳酸、内毒素、i NOS水平及肠组织i NOS m RNA表达水平均高于Sham组和Gln组(P<0.05)。IR组血清NO、e NOS含量及组织中e NOS的m RNA表达量均低于Sham组和Gln组(P<0.05)。结论谷氨酰胺预处理可以减轻肠缺血再灌注后的组织形态学改变及损伤,其机制可能与抑制i NOS表达,增加e NOS表达,从而增加NO活性有关。     

姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支,使心肌缺血60m in,再灌注30 m in,制成急性心肌缺血再灌注损伤模型,缺血前5 m in,舌下静脉推注姜黄素,观察在急性缺血和再灌注状态下血流动力学的变化。再灌注结束时测量心肌梗死面积。结果姜黄素(20,40 mg.kg-1)能剂量依赖地改善大鼠心肌缺血再灌注后的血流动力学变化,LVSP、±dp/dtm ax均较缺血再灌注对照组升高,LVEDP有所降低;同时可减少心肌梗死面积。结论姜黄素对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

凉膈散对肠缺血再灌注损伤大鼠肠道的保护作用

目的:观察凉膈散对大鼠缺血再灌注(I/R)损伤肠黏膜的保护作用.方法:健康Wistar大鼠168只,随机分为正常组、假手术组、模型组、凉膈散治疗组和凉隔散防治组,其中正常组8只,其他4组各40只.正常组不予任何处理,假手术组只分离不夹闭肠系膜上动脉,其余3组通过夹闭肠系膜上动脉建立大鼠小肠I/R模型,根据缺血45min后再灌注3、12、24、48和72h5个时相点义分为5组,每组8只大鼠.测定各组5个时点动物小肠黏膜病理损伤Chiu氏评分、门静脉血浆D-乳酸值、小肠组织匀浆丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力、肠黏膜细胞凋亡指数及Bax表达水平.结果:模型组动物肠黏膜结构破坏明显,Chiu氏评分、血浆D-乳酸值明显升高.小肠匀浆MDA含量升高、SOD活力降低,肠黏膜细胞凋亡指数及Bax表达水平升高.凉膈散干预后,可减轻小肠黏膜病理损伤程度、与模型组比较,除3h外,门静脉血浆D-乳酸值下降,小肠组织匀浆MDA含量降低和SOD活力升高、肠黏膜细胞凋亡指数及Bax表达水平均下降.结论:I/R损伤可破坏肠黏膜屏障功能,凉膈散可通过减少机体氧自由基的生成而保护肠黏膜.     

羟基丁酸对放射性脑损伤的保护作用

目的 对γ—羟基丁酸钠联合放疗减少放射性脑损伤及其作用机理进行探讨研究。方法采用γ—羟基丁酸钠配合常规放疗对实验动物的脑损伤进行病理学观察，以Mistra肾上腺素自氧化法、Uchiyama试验分别测定SOD活力和LPO含量。结果 γ—羟丁酸钠明显减少6Me V β射线辐照后脑组织损伤，而且可提高SOD活力及减少LPO含量。结论 γ—羟丁酸钠减少放射性脑组织损伤、缓解放疗反应，在提高脑胶质瘤放射治疗效果中发挥着重要作用。     

茶多酚对大鼠肠缺血再灌注肠损伤的保护作用

目的:研究茶多酚(TP)对大鼠肠缺血再灌注(I/R)所致肠损伤的保护作用及其可能的作用机制,为其临床新用途提供实验依据。方法:大鼠随机分为肠I/R损伤对照组、假手术组及TP给药组(100,50,25和12.5 mg.kg-1),通过夹闭肠系膜上动脉1 h、再灌注2 h,建立肠I/R损伤模型。于缺血前20 m in舌下静脉注射药物,假手术组仅分离、不夹闭肠系膜上动脉。再灌2 h后,各组取血及中段小肠组织,测定血清及小肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量,光镜下观察小肠组织形态学改变。结果:与假手术组相比,肠I/R损伤对照组血清及小肠组织中的SOD活力降低,MDA和NO含量升高,镜检发现小肠有明显组织形态学损伤。与肠I/R损伤对照组相比,TP组呈剂量依赖性增强SOD活力,减少MDA及NO含量,减轻小肠组织形态学损伤。结论:TP对肠I/R所致肠急性损伤有显著的及剂量依赖性的保护作用,可能与其自由基清除作用有关。     

槲皮素等对烫伤后小鼠肠粘膜损伤的保护作用

目的　研究槲皮素、芸香苷、黄色素母酮 3种黄酮类化合物对烫伤所致小鼠肠粘膜损伤的保护作用。方法　观察小肠肠粘膜损伤指数的变化 ,检测肠粘膜中蛋白质、DNA含量变化 ,DTNB法测定肠粘膜中GSH的含量 ,并应用DNA解旋的荧光检测法测定DNA损伤程度。结果　槲皮素等三种黄酮类化合物连续 3d灌胃可不同程度的改善烫伤所致肠粘膜损伤状况 ,使肠粘膜损伤指数降低 ,蛋白质、DNA、GSH含量增加 ,DNA损伤程度减轻。其中尤以槲皮素作用较为明显。结论　槲皮素、芸香苷、黄色素母酮 3种黄酮类化合物可明显改善烫伤所致小鼠肠粘膜损伤 ,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

刺五加注射液对肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的：通过建立大鼠肠系膜上动脉缺血再灌注（IR）模型,观察刺五加注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用。方法：健康Wistar大鼠40只随机分为A假手术组,B缺血再灌注组,C缺血再灌注＋生理盐水组,D缺血再灌注＋刺五加注射液组。后两组分别静脉注射生理盐水和刺五加注射液。实验结束后分别观察小肠粘膜损伤程度并行病理评分,检测各组超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）、NO^2-／NO^3-和D-乳酸浓度。结果：D组与B组和C组比较,小肠组织匀浆SOD活性上升（P〈0．05）,MDA浓度降低（P〈0．01）,血浆中NO^2-／NO^3-浓度上升（P〈0．05）,D-乳酸明显降低（P〈0．01）,小肠粘膜损伤程度明显减轻（P〈0．01）。小肠粘膜损伤病理评分与D-乳酸水平呈正相关,与NO^2-／NO^3-水平和SOD活性呈负相关。结论：刺五加注射液对大鼠肠IR损伤有一定的保护作用,作用机制与其清除氧自由基,防止脂质过氧化和保护小肠粘膜上皮细胞有关。     

临床相关剂量参附注射液预处理和后处理对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的影响

目的 探讨临床相关等效剂量参附注射液(shenfu injection,SFI)预处理和后处理对大鼠肠缺血再灌注致急性肺损伤的影响.方法 建立肠缺血再灌注致急性肺损伤模型.健康大鼠随机分成7组,每组8只:对照组(C组):肠系膜上动脉仅分离而不阻断;损伤组(I/R组):肠系膜上动脉阻断1h后再灌注2h,股静脉给予等量生理盐水进行对照;参附注射液预处理组(SFPR组):肠系膜上动脉阻断前1h将10 mL·kg-1的参附注射液从股静脉恒速泵入;参附注射液后处理组(SFPO组):肠系膜上动脉阻断1h后将10 mL·kg-1的参附注射液从股静脉恒速泵入;血晶素组(Hemin组):肠系膜上动脉阻断前24 h腹腔注射Hemin 75 μmol· kg-1.锌原卟啉IX+ SFPR组(ZnPPIX+ SFPR组):肠系膜上动脉阻断前24 h腹腔注射锌原卟啉X(20mg·kg-1),后续操作同SFPR组;锌原卟啉IX+ SFPO组(ZnPPIX+ SFPO组):肠系膜上动脉阻断前24 h腹腔注射锌原卟啉X(20 mg·kg-1),后续操作同SFPO组.术前无需给药的各组腹腔注射等剂量的生理盐水,于再灌注2h后颈动脉放血处死动物.观察肺组织中血红素加氧酶1(HO-1)的表达,丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)含量和肺通透性指数、动脉血气和湿重比值的影响.结果 与I/R组比较,SFPR组、SFPO组和Heim组肺组织HO-1细胞阳性表达增高;ZnPPIX+ SFPR组和ZnPPIX +SFPO组上述阳性细胞表达降低(P＜0.05).SFPR组、SFPO组和Heim组肺通透性指数、肺组织MDA含量和湿/干重比均显著降低,SOD值明显升高(P＜0.05或P＜0.01);与C组比较,I/R组肺通透性指数与肺组织MDA含量和湿/干重比明显增高,而SOD含量显著降低(P＜0.05);各组动物动脉血PaO2、PaCO2较C组显著下降(P＜0.05),SFPR组、SFPO组和Heim组PaO2、PaCO2明显高于I/R组.结论 临床相关剂量的参附注射液预处理和后处理均能明显减轻肠缺血再灌注导致的急性肺损伤,其机制与上调HO-1蛋白表达、一定程度上抑制脂质过氧化、拮抗氧自由基的损伤有关.     

A protective effect of melatonin on intestinal permeability is induced by diclofenac via regulation of mitochondrial function in mice

Aim:

This study investigated the effect of intragastrically administered melatonin on intestinal mucosal permeability induced by diclofenac in mice.

Methods:

Intestinal mucosal permeability was induced in mice by intragastric administration of diclofenac (2.5 mg/kg). Melatonin was given intragastrically (10 mg/kg) once per day for 3 d after diclofenac administration. The small intestine was examined macroscopically and microscopically for pathologic injury to the intestinal mucosa. Intestinal mucosal permeability was evaluated by Evans blue and FITC-dextran methods. Mitochondrial functional parameters, including mitochondrial membrane potential, mitochondrial ATPase and succinate dehydrogenase (SDH) activity, were assessed. The malondialdehyde (MDA) and myeloperoxidase (MPO) levels were determined from small intestinal mucosal homogenates.

Results:

As compared with control mice, the permeability, pathologic score, MDA and MPO levels and ulceration of the intestinal mucosa were increased significantly by diclofenac treatment, and a broadened junctional complex and enlarged intercellular space were observed by transmission electron microscopy (TEM). Melatonin treatment significantly reduced the intestinal mucosal permeability, pathologic score, MDA, and MPO levels and ulceration of the intestinal mucosa. By TEM, the small intestine villus morphology and intercellular spaces were nearly normal in melatonin-treated mice. At the level of the mitochondria, melatonin treatment significantly restored the activities of ATPase and SDH.

Conclusion:

The intestinal damage and increased intestinal permeability induced by diclofenac in mice was limited by melatonin; moreover, melatonin preserved several aspects of mitochondrial function.     

乌司他丁对重度创伤失血性休克大鼠肠道屏障的影响

目的探讨应用乌司他丁对重度创伤失血性休克大鼠进行复苏对肠道屏障的影响。方法 70只SD大鼠,随机分为3组:假休克组(SS组)、乳酸林格液复苏组(LRS组)、乳酸林格液+乌司他丁复苏组(LRS+UTI组)。LRS组、LRS+UTI组各取12、24、48h3个时间点,LRS组将血液回输并输入两倍量的乳酸林格氏液进行复苏,LRS+UTI组50000U·kg-1·d-1UTI加入乳酸林格氏液内输注。用ELISA试剂盒检测各组不同时间点血浆中DAO、ET的水平。结果 (1)LRS组与LRS+UTI组12、24、48h3个时间点其DAO值均高于SS组(P<0.05),LRS组在24h达高峰,其后下降,但降幅较小,而LRS+UTI组在复苏后24h即出现明显下降趋势,复苏48h后明显下降。LRS+UTI组与LRS组相比24、48hDAO含量差异有统计学意义(P<0.05)。(2)LRS组与LRS+UTI组12、24、48hET值均高于SS组(P<0.05),LRS组在24h达高峰,其后下降,下降幅度较小,而LRS+UTI组24、48h下降明显。LRS+UTI组与LRS组相比在24、48hET值差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用乌司他丁复苏创伤-失血性休克,可有效降低肠屏障功能的损伤,减轻肠黏膜的通透性,减轻细菌及内毒素移位。     

苯丁酸钠对SHG-44 胶质细胞瘤株的抗肿瘤作用机制研究

目的观察苯丁酸钠对人脑胶质细胞瘤株SHG-44的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用的机制是否涉及调节ASIC2的表达。方法体外培养人脑胶质细胞瘤株SHG-44,平皿克隆形成法测定细胞描定依赖性生长能力,PI染色流式细胞术（Flow cytometry,FCM）分析细胞周期和凋亡率,Hoechst33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞的形态,Western Bloting分析药物对ASIC2蛋白表达的影响。结果平皿集落形成法检测显示苯丁酸钠对人脑胶质细胞瘤株SHG-44的抗肿瘤作用,且呈浓度依赖性。PI染色FCM结果表明苯丁酸钠以时间和浓度依赖方式对人脑胶质细胞瘤株SHG-44的抗肿瘤作用。Hoechst33258染色荧光显微镜观察可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,苯丁酸钠处理后凋亡细胞比例增加,且呈时间和浓度依赖性。Western Bloting检测显示苯丁酸钠诱导细胞凋亡的机制涉及上调ASIC2表达。结论苯丁酸钠在体外对人脑胶质细胞瘤株SHG-44具有抑制增值的作用,初步推断苯丁酸钠诱发人脑胶质细胞凋亡与其上调ASIC2表达有关。     

Protective effects of betulinic acid on intestinal mucosal injury induced by cyclophosphamide in mice

BackgroundBetulinic acid (BA) is a plant-derived pentacyclic triterpenoid with a variety of biological activities. The purpose of this study was to assess the potential protective role of BA against intestinal mucosal injury induced by cyclophosphamide (CYP) treatment.MethodsMice were pretreated with BA daily (0.05, 0.5, and 5.0 mg/kg) for 14 days, then injected intraperitoneally with CYP (50 mg/kg) for 2 days.ResultsBA pretreatment reduced the contents of malondialdehyde (MDA) and glutathione (GSH), decreased the activity of superoxide dismutase (SOD) in small intestine, increased villus hight/crypt depth ratio and restored the morphology of intestinal villi in CYP-induced mice. Moreover, BA pretreatment could significantly down-regulate the levels of pro-inflammatory cytokines interleukin-5 (IL-5), IL-17, IL-12 (P70) and tumor necrosis factor α (TNF-α), reduced production of chemokines macrophage inflammatory protein-1α (MIP-1α), macrophage inflammatory protein-1β (MIP-1β) and regulated upon activation, normal T-cell expressed and secreted (RANTES), and enhanced the levels of anti-inflammatory such as IL-2 and IL-10 in serum, and decreased the mRNA expressions of IL-1β and TNF-α in intestine of CYP-induced mice. Furthermore, RT-PCR demonstrated that BA improved intestinal physical and immunological barrier in CYP-stimulated mice by enhancing the mRNA expressions of zonula occluden 1 (ZO-1) and Claudin-1.ConclusionsBA might be considered as an effective agent in the amelioration of the intestinal mucosal resulting from CYP treatment.