柱前衍生-高效毛细管电泳法测定刺糖多糖中单糖的组成

目的:分析测定刺糖多糖中单糖的组成。方法:将刺糖多糖水解成单糖,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,采用高效毛细管电泳法在245 nm紫外检测分离测定各单糖。结果:刺糖多糖中阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸的摩尔比为2.80∶38.61∶5.28∶3.76∶1.91∶3.82∶2.45,且刺糖多糖中葡萄糖的含量为35.65%。结论:本法测定刺糖多糖的单糖组分操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于刺糖多糖单糖组成测定和质量控制。     

柱前衍生化–高效液相色谱法测定蒙古黄芪多糖中单糖的组成

目的测定蒙古黄芪多糖中的单糖组成。方法蒙古黄芪多糖样品用三氟乙酸溶液水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,采用HPLC法于245nm波长处检测各单糖。结果蒙古黄芪多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖组成,物质的量比分别为0.02∶0.05∶0.17∶1∶0.18。结论此方法简单、快速、重复性好,可用于蒙古黄芪多糖中单糖组成分析。     

蜜环菌多糖的分离纯化及PMP衍生化HPLC分析

目的:对蜜环菌发酵液进行多糖的提取、分离纯化,得到均一多糖,对其进行单糖组分分析.方法:分离纯化采用分步醇沉和葡聚糖凝胶(Sephadex G-200)色谱法;纯度鉴定及分子量测定采用高效液相色谱法;单糖组成采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生HPLC法测定.结果:获得两种均一多糖(AMFP-Ⅰ、AMFP-Ⅱ),峰位分子量分别为 812 939D、596 217D,重均分子量(MW)分别为995 098D、872 640D,分布宽度(Mw/Mn)分别为1.268 93、1.235 20;测定单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖.结论:两种多糖分子量分布及单糖组成均不同,AMFP-Ⅰ主要由半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,AMFP-Ⅱ主要由半乳糖醛酸、半乳糖、木糖组成.     

HPLC分析大蒜多糖中的单糖

目的 建立一种反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分析大蒜多糖中的单糖组成及摩尔比。方法 大蒜多糖样品经2 mol·L^-1硫酸降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮( PMP)衍生化,采用Shimadzu VP-ODS柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)分离,以乙腈-醋酸铵缓冲溶液(取醋酸铵7.708 g加水溶解并稀释至1 000 mL,用醋酸调pH 5.5 (22∶78)为流动相,流速为0.8 mL·min^-1,在245 nm处检测单糖的衍生化产物。结果 大蒜多糖中甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcUA)半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Arab)7种单糖的摩尔比为4.31∶4.23∶4.19∶9.13∶27.4∶4.99∶3.81。结论 本方法灵敏度高,结果准确可靠,可用于大蒜多糖的单糖组成测定及质量控制。     

柱前衍生化HPLC法测定不同基源金线莲多糖的单糖组成

目的:建立测定不同基源金线莲多糖中单糖组成的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Alltima-C18,柱温为30℃,流动相为0.1 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(Na H2PO4-Na2HPO4,p H=6.7)-乙腈(83∶17,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为254nm。结果:花叶开唇兰多糖由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其物质的量之比为2.52∶0.53∶1.00∶5.07∶1.58;台湾银线兰多糖由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量之比为1.10∶0.50∶1.00∶1.92;滇越金线兰多糖由甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其物质的量之比为2.95∶0.28∶0.53∶1.00∶9.30∶2.26。甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的进样量分别在0.32~3.18μg(r=0.999 9)、0.08~0.83μg(r=0.9999)、0.08~0.78μg(r=0.999 9)、0.13~1.32μg(r=0.999 9)、0.38~3.75μg(r=0.999 8)、0.24~2.43μg(r=0.999 7)范围内与各自峰面积呈良好线性关系;精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3%;平均加样回收率分别为99.34%、98.43%、99.79%、98.93%、99.50%、99.71%(n=6)。结论:该方法简单、快速、分离效率高,可用于测定不同基源金线莲多糖中的单糖组成。     

柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成

目的建立PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成。方法采用水提醇沉法提取黄河滩枣多糖,多糖水解后进行PMP衍生化,HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成及摩尔比,并对等度和梯度洗脱两种模式的测定结果进行分析比较。结果黄河滩枣多糖由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等六种单糖组成,它们的摩尔比约为0.54∶0.50∶0.27∶2.03∶5.40∶1.00,等度和梯度洗脱测定结果基本一致。结论本实验改进的等度洗脱方式更加简便易行,快速准确,适用于黄河滩枣多糖的单糖组成分析。     

高效毛细管区带电泳法分析南瓜多糖的单糖组成

目的测定南瓜多糖的单糖组成及摩尔比。方法以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为单糖的柱前衍生化试剂,用毛细管区带电泳(CZE)法测定南瓜多糖的单糖组成。电泳缓冲液为pH10.8的150mmol·L-1硼砂水溶液;熔融石英毛细管柱(58.5cm×75μm)的有效长度为48.5cm;分离电压10kV;柱温25℃;3.45kPa压力进样,进样时间5s;二极管阵列检测器检测。结果各单糖的检测限均低于10μg·mL-1。南瓜多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为1.33∶3.12∶7.33∶1.0∶3.67∶6.06。结论该方法具有简单、快速、高效等优点,可用于南瓜多糖的单糖组成测定及质量控制。     

新疆药桑叶、枝多糖中单糖的组成分析与测定

目的:分析新疆药桑叶、枝多糖中单糖的组成并对其进行测定。方法:采用水提醇沉法提取新疆药桑叶、枝中的多糖,用2mol·L-1H2SO4将多糖水解成单糖,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化;采用反相高效液相色谱法测定各单糖。结果:桑叶、桑枝多糖均是由甘露糖、鼠李糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成。7种单糖在25min内可很好地分离。结论:本方法操作简便、灵敏度高、结果准确,可用于新疆药桑的质量控制。     

高效毛细管电泳法测定唐古特大黄多糖中单糖的组成

目的测定唐古特大黄多糖中单糖的组成及其物质的量之比。方法将大黄多糖样品用2 mol·L^-1的硫酸溶液降解成单糖后，用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化成单糖，应用毛细管区带电泳法测定各单糖。熔融石英毛细管柱(50 μm×70 cm，有效长度60 cm);二极管阵列检测器;运行缓冲液为硼砂水溶液(浓度为150 mmol·L^-1、pH值为10.8);分离电压10 kV;柱温25 ℃;0.5 Pa压力下进样，进样时间5 s。结果唐古特大黄多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸等8种单糖组成，其物质的量之比为1.00∶23.27∶15.93∶2.95∶1.34∶49.07∶2.62∶4.31。结论该方法具有简单、快速、分离效率高等特点，可用于唐古特大黄多糖中单糖组成的测定。     

离子色谱测定多糖的单糖组成的方法学研究及其应用

本文旨在建立一种采用高效阴离子色谱分离和定量分析11种常见单糖的方法。采用Dionex ICS-5000+离子色谱仪,以Carbo PACTMPA 10(2.0 mm×250 mm)阴离子交换柱为分离柱,脉冲安培检测器检测,200 mmol/L Na OH和200 mmol/L的CH3COONa梯度洗脱,建立了可同时检测11种常见单糖的离子色谱-脉冲安培法(HPAEC-PAD),可实现核糖(Rib)、岩藻糖(Fuc)、鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man)、木糖(Xyl)、果糖(Fruc)、半乳糖醛酸(Gal A)、葡萄糖醛酸(Glc A)的定性定量分析。该方法在1~50 mg/L范围内具有良好的线性(R2=0.99100~0.99978),精密度RSD值小于3.52%,回收率在97.33%~101.82%,重复性RSD值小于3.04%。采用该方法对牛蒡精制多糖ALP-1的单糖组成进行了测定,结果表明牛蒡多糖ALP-1由岩藻糖(Fuc)、阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖(Glc)和果糖(Fruc)组成,摩尔比为7.69∶1.00∶34.62∶3.08。对牛蒡多糖单糖组成的成功测定说明该方法成功建立,为常见单糖的定性定量分析及多糖的单糖组成分析提供了快速可靠的方法。     

Determination of oligosaccharides and monosaccharides in Hakka rice wine by precolumn derivation high-performance liquid chromatography

This article presents a precolumn derivatization procedure with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) reagent to detect oligosaccharides and monosaccharides in Hakka rice wine. The subsequent separation of the derivatized glucose–PMP also was performed using a mobile phase consisting of the molar ratio of acetonitrile to ammonium acetate buffer (0.1M) of 22:78 at a flow rate of 1.0 mL/min with the column temperature of 35°C, and the pH of ammonium acetate buffer at 5.5. The optimum derivation conditions were as follows: reaction temperature, 70°C; reaction time, 30 minutes; molar ratio of PMP to glucose, 10:1 (v/v); molar ratio of sodium hydroxide to glucose, 3:1 (v/v). The recovery rates were between 93.13% and 102.08% with relative standard deviation of 0.96–2.48%. The established method provides sufficient sensitivity with values of limit of detection of 0.09–0.26 mg/L and limit of quantification of 0.27–0.87 mg/L for determination of oligosaccharides and monosaccharides.     

云芝胞内糖肽的糖类含量测定和指纹图谱研究

目的 建立云芝胞内糖肽的游离糖和水解单糖指纹图谱和含量测定的检测方法。方法 游离糖测定以水为溶剂超声提取后PMP衍生化，水解单糖测定酸水解后PMP衍生化，采用HPLC对来自不同企业的云芝胞内糖肽原料、中间体的游离糖和水解单糖进行定性和定量分析。通过化学计量学分析对指纹图谱进行了分析，探讨不同生产企业生产的云芝胞内糖肽差异性。结果 2种方法均通过方法学验证；不同企业的样品分别聚类，有3种游离糖和2种水解单糖对云芝胞内糖肽的质量差异贡献较大。结论 建立的分析方法可有效用于云芝胞内糖肽中游离糖和水解后的单糖的测定和指纹图谱研究，采用的化学计量学研究方法对云芝胞内糖肽的质量控制提供了指导意义。     

间接高效液相色谱法分析测定金铁锁多糖的单糖组成

为了研究高效液相色谱法分析测定金铁锁多糖中主要所含单糖的组成及其比例,将多糖样品加硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后用HPLC-DAD进行分析测定,并将单糖对照品同法衍生化后测定得到各单糖衍生化物的标准曲线,对样品水解液中主要所含单糖进行测定分析。结果显示14.85 mg金铁锁多糖中含有半乳糖(5.02 mg)、葡萄糖(2.51 mg)、木糖(1.20 mg)、鼠李糖(0.31 mg),其摩尔比为15∶7∶4∶1。实验表明该分析测定方法灵敏、准确、可行。     

Advancing monosaccharides as biomarkers: part I. Development of fluorophore-assisted carbohydrate-electrophoresis in Chironomus riparius

Fluorophore-assisted carbohydrate-electrophoresis (FACE) was developed as a bioassay for environmental stressors in larval Chironomus riparius. This quantitative technique involved acid hydrolysis and 2-aminoacridone labeling of monosaccharides followed by carbohydrate gel electrophoresis. Methods for carbohydrate isolation from whole tissue homogenates as well as migration distances for 23 different monosaccharides and 4 disaccharides were established. Sensitivity of the technique (5 microg/ml saccharide) exceeded those of other detection methods. Results showed seven distinct bands in larvae. Four migrated distances similar to those of ribose, glucose, galactose, and fructose. Three proved to be alternative reaction products (ARP). Experiments determined that two of the ARPs were primarily from glucose and one was from glycogen. FACE allowed different saccharides from multiple larval samples to be analyzed in parallel. Effects of toxicants and diet on bioenergetics could be studied using this technique.     

银杏蜜环口服溶液中单糖HPLC特征图谱及其质量评价

目的 利用HPLC建立银杏蜜环口服溶液中糖的特征图谱，并对不同来源的银杏蜜环口服溶液质量进行评价。方法 采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone，PMP）柱前衍生HPLC，结合中药指纹图谱相似度分析软件对4批次市售银杏蜜环口服溶液和6批次自制口服溶液中单糖进行相似度分析，同时通过对组方中成分单糖组成进行测定，对共有峰进行了归属和确认。结果 通过对自制口服溶液与市售口服溶液的HPLC特征图谱进行研究，确定了5个共有峰，经过归属验证，分别为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖，相似度介于0.998~1.000之间；同时对口服溶液及其组方中原药材进行了单糖组成测定，发现水解口服液中单糖来源于蜜环菌粉、银杏叶提取物及矫味剂甜菊糖；进一步对不同厂家的银杏叶提取物和蜜环菌粉进行单糖组成测定，结果显示不同厂家的银杏叶提取物和蜜环菌粉单糖组成有明显差异。最后通过对口服液及其原辅料中多糖进行提取、测定，发现口服液中多糖主要来源于蜜环菌粉。结论 本研究建立的方法能较全面地体现银杏蜜环口服溶液组分中单糖的特征，将市售口服溶液、自制口服溶液及其原药材的水解单糖进行归属及溯源，可用于口服液及其原料药材、辅料的质量评价。     

山西省医患双方对民营医疗服务的评价

目的　通过问卷调查 ,了解山西省医生和患者对民营医疗服务的态度和看法 ,了解民营医疗服务在我国卫生保健体系中的作用和地位。方法　采用描述性分析方法 ,分析医患双方以及不同性质医疗机构医生对民营医疗的评价。结果　多数医生认为应该规范医疗服务市场 ;只有不足 4 0 %的医生和居民同意建立更多的民营医疗机构 ,鼓励公立医疗机构的医生到民营医疗机构兼职 ;83.0 %的居民认为公立医疗机构的技术水平高 ,但就服务质量而言 ,多数居民认为民营医疗机构较高。结论　民营医疗在我国已经具有一定的规模 ,为人们就医 (特别是农村地区 )提供了一种选择 ,在一定程度上提高了居民利用医疗服务的可得性、可及性 ,但对民营医疗还需规范     

Visualization and quantitation of peroxisomes using fluorescent nanocrystals: treatment of rats and monkeys with fibrates and detection in the liver.

Peroxisome proliferation in the liver is a well-documented response that occurs in some species upon treatment with hypolipidemic drugs, such as fibrates. Typically, liver peroxisome proliferation has been estimated by direct counting via electron microscopy, as well as by gene expression, enzyme activity, and immunolabeling. We have developed a novel method for the immunofluorescent labeling of peroxisomes, using an antibody to the 70-kDa peroxisomal membrane protein (PMP70) coupled with fluorescent nanocrystals, Quantum Dots. This method is applicable to standard formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. Using this technique, a dose-dependent increase in PMP70 labeling was evident in formalin-fixed liver sections from fenofibrate-treated rats. In formalin-fixed liver sections from cynomolgus monkeys given ciprofibrate, quantitative image analysis showed a statistically significant increase in PMP70 labeling compared to control; the increase in hepatic PMP70 protein levels was corroborated by immunoblotting using total liver protein. An increase in hepatic peroxisome number in ciprofibrate-treated monkeys was confirmed by electron microscopy. An advantage of the Quantum Dot/PMP70 method is that a single common protocol can be used to label peroxisomes from several different species, and many of the common problems that arise with immunolabeling, such as fading and low signal strength, are eliminated.