酶法制备头孢克洛的工艺优化

通过使用合成用固定化青霉素酰化酶对7-ACCA 转化制备头孢克洛的实验研究；在对酶促反应的关键参数：底物质 量浓度、反应温度、反应pH 进行优化后，得出在底物质量浓度175.81g/L、转化温度13.9℃、转化pH6.43 的条件下，合成用固 定化青霉素酰化酶转化7-ACCA 制备头孢克洛效果最佳，转化率可达98% 左右，收率保证在95% 以上，通过HPLC 图谱将头 孢克洛精品与头孢克洛标准品的数据进行了对比，同时对固定化酶的稳定性也进行了检测。     

头孢羟氨苄高分子聚合物检查方法的建立与验证

目的 建立对头孢羟氨苄中高分子聚合物进行分离分析的质量控制方法,并对其进行验证.方法 采用凝胶色谱法,色谱柱为Sephadex G10,流动相A为0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0),流动相B为水;流速为0.6mL/min(采用流动相A时,20min后流速增为2mL/min);检测波长为254nm,进样量为200μL,以头孢拉定作对照加校正因子法外标法定量(头孢羟氨苄:头孢拉定=1∶1).结果 验证了头孢羟氨苄高分子聚合物检测方法,采用该方法对3批样品中高聚物含量进行检测结果均小于0.05%.结论 该法较好的分离头孢羟氨苄及其高聚物,可用于头孢羟氨苄中高分子聚合物的检验.     

碘-淀粉褪色光度法测定青霉素酶活性

目的 构建褪色光度法测定青霉素酶活性新体系。方法 碘与淀粉显蓝色，青霉素酶催化青霉素水解产物青霉噻唑酸与碘反应，吸光度A变化与青霉素酶活性有关联。结果 在5min内，酶促反应符合一级反应的特征，青霉素酶活性E(U/mL)在0~4U/mL范围内与△A呈良好的线性关系：△A=-0.1612+0.3264E(U/mL)，r=0.9965，表观摩尔吸光系数ε=1.88×105L/(mol·cm)，检测限为0.11U/mL。结论 方法用于自制酶液酶活性测定，结果满意。     

产生酰化酶菌种的选育

青霉素酰化酶(penicillin acylase)是半合成抗菌素工业上的一种重要酶类,它可用于青霉素或重排酸(7-苯乙酰氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸)的裂解,以生产6-氨基青霉烷酸(6-APA)或7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA);也可用于缩合制取氨苄青霉素、羟氨苄青霉素及其他半合成青霉素或头孢菌素。但目前国内广泛使用的产生酰化酶的菌种,酶产量较低,因此我们开展菌种选育工作。以大肠杆菌B-EC-1及B-EC-2二株为出发菌株,经紫外线(UV)诱变二次累积处理,选育到1.236菌株,使酰化酶产量由原来的24.84单位/     

HPLC法测定头孢羟氨苄及其有关物质含量

目的建立头孢羟氨苄有关物质的HPLC分析方法。方法采用ODS柱(Polaris250mm×4.6mm,5μm),以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(用10mol/L氢氧化钾调节pH值为5.5)-乙腈(96∶4)为流动相,流速为0.7ml/min,检测波长为230nm。结果头孢羟氨苄、有关物质α-对羟基苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)的线性范围分别为0.125～1.0mg/ml(r=0.9997)、0.312～20μg/ml(r=0.9999)、0.312～20μg/ml(r=0.9999)。结论本方法可用于头孢羟氨苄及其有关物质含量的测定,方法准确、灵敏、简便。     

HPLC法测定头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊中头孢羟氨苄和甲氧苄啶含量的方法改进

目的对高效液相色谱法测定头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊中头孢羟氨苄和甲氧苄啶含量的方法进行改进。方法采用Hypersil ODS2(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.025mol.L-1磷酸(用20%NaOH溶液调节pH值至3.0)-乙腈(88∶12)的流动相,流速:1.0mL.min-1,检测波长为235nm。结果头孢羟氨苄在5.02~351.52μg.mL-1范围内呈良好线性关系,相关系数r=1.0000,平均回收率=100.17%,RSD=0.55%;甲氧苄啶在1.08~75.81μg.mL-1范围内呈良好线性关系,r=0.99994,平均回收率=99.23%,RSD=0.71%。结论本方法简便,结果准确,可靠,可作为该制剂的含量测定方法。     

气相色谱法测定头孢妥仑匹酯中N,N-二甲基甲酰胺残留量

目的 建立头孢妥仑匹酯原料药中N,N-二甲基甲酰胺残留量的检测方法。 方法 采用气相色谱法，FID检测器，色谱柱为DB-624(30m×0.53mm, 3.0μm)，柱温采用程序升温，初始柱温为110℃，保持5min，再以30℃/min的速率升至200℃，保持5min，进样口温度为230℃，检测器温度250℃，以氮气为载气，流速为3.0mL/min，进样体积1.0μL，分流比2:1。 结果 DMF能够有效分离，在4.44~66.60μg/mL范围内线性关系良好，r=0.9993；检测限为0.777μg/mL，定量限为2.664μg/mL；平均回收率为100.72%(RSD=1.76%, n=9)。结论 方法简便灵敏、结果准确、重复性好，可用于头孢妥仑匹酯中DMF残留量的检测。     

HPLC法测定头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊含量的方法改进

目的建立调整流动相比例,以HPLC法同时测定复方头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊中头孢羟氨苄与甲氧苄啶的含量的方法。方法色谱柱SinoChrom ODS-BP C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:1%冰醋酸(含0.005%乙二胺)溶液∶乙腈(88∶12);流速:1.0mL.min-1;检测波长:233nm。结果头孢羟氨苄在40.00~200μg.mL-1浓度范围之间线性良好,r=0.9999,平均回收率为99.8%,RSD%=0.33%(n=5);甲氧苄啶在8~40μg.mL-1浓度范围之间线性良好,r=1.000,平均回收率为100.1%,RSD%=0.28%(n=5);。结论以本文中采用的流动相,头孢羟氨苄主峰与溶剂峰、头孢羟氨苄峰与甲氧苄啶峰分离完全,结果准确稳定,可用于头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊的含量测定。     

超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法测定三种葡萄糖制剂中 5-羟甲基糠醛的含量

目的建立葡萄糖注射液、葡萄糖酸钙口服溶液与盐酸氨基葡萄糖胶囊中 5-羟甲基糠醛的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱测定方法。方法 2021年 1—9月，采用 ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm，1.8 μm)色谱柱，流动相为 0.05%甲酸溶液 -甲醇( 85∶15)，流速为 0.3 mL/min，柱温 30 ℃，进样盘温度 5℃，进样体积 2 μL。质谱条件: ESI源，正离子扫描，脱溶剂温度: 400 ℃；干燥气流速: 15 L/min；毛细管电压: 3.0 kV。结果 5-羟甲基糠在 2.07～155.25 μg/L浓度范围内，线性关系良好( r=0.999 7)定量限为 0.36 μg/L，平均回收率为 99.54%，RSD为 1.63%(n=9)。结论该方法专属性较强，灵敏度高，稳定性     

超高效液相色谱串联质谱法测定滴眼剂中6种抑菌剂含量

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC/MS/MS)同时测定滴眼剂中6种抑菌剂含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×100mm, 1.7μm)，以含0.05%甲酸的2.5mmol/L醋酸铵溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.4mL/min，柱温为40℃，以多反应监测负离子模式检测。结果 羟苯甲酯、羟苯乙酯在0.002~0.5μg/mL范围内，羟苯丙酯在0.02~0.5μg/mL范围内，山梨酸在0.4~100μg/mL范围内，苯甲酸在0.1~25μg/mL范围内，硫柳汞在0.75~10μg/mL范围内，线性关系良好(r≥0.995)；6种抑菌剂的回收率均在80%~115%(RSD≤6%, n=9)。结论 该法专属性良好，准确，灵敏，快速，可用于多种滴眼剂中6种抑菌剂的含量测定，为高通量快速分析滴眼剂中抑菌剂及提高滴眼剂质量标准提供借鉴。     

HPLC法测定复方愈创木酚磺酸钾口服溶液中糖精钠含量

目的建立复方愈创木酚磺酸钾口服溶液中糖精钠含量的测定方法。方法采用ECOSIL HPLC COLUMN—C18色谱柱（200mm×4．6mm,5μm）;甲醇-乙酸铵溶液（0．02mol／L）（6：94）为流动相;检测波长为230nm;流速1．0mL／min;柱温30℃。结果糖精钠在0．02—0．10mg／mL范围内呈良好线性关系（r=0．9999）;平均回收率为99．1％,RSD为1．2％（n=9）。结论该方法操作简便,准确,重复性好,可作为复方愈创木酚磺酸钾口服溶液中糖精钠含量测定方法。     

膦甲酸钠氯化钠注射液有关物质和含量的测定

目的建立测定膦甲酸钠氯化钠注射液有关物质和含量的方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法测定有关物质,固定相为聚合阴离子树脂（Waters IC PAK,5cm×4．6mm）,流动相为邻苯二甲酸氢钾-1mol／L硝酸溶液,检测波长为290nm,流速为1．4mL／min,柱温为25℃;采用紫外分光光度（UV）法测定膦甲酸钠注射液的含量。结果膦甲酸钠质量浓度在0．24～0．36mg／mL时与吸收度具有良好的线性关系（r=0．9998,n=5）,平均回收率为100．06％,RSD=0．95％（n=9）。结论所用方法简便、快速、准确,可用于膦甲酸钠氯化钠注射液有关物质和含量的测定。     

注射用苄星青霉素含量测定方法的改进

目的：对《中国药典》（2005版）中注射用苄星青霉素中青霉素含量测定的方法进行改进。方法：采用KromasilC18柱（7μm,250mm×60mm）;流动相：0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（用氢氧化钠溶液调节pH值至6.5）-乙腈（75∶25）;流速：1.0mL/min;检测波长：225nm;柱温：35℃。结果：在该色谱条件下,青霉素峰能与其他杂质峰获得完全分离,青霉素质量浓度在0.125～2.000mg/mL范围内,峰面积响应值（A）与青霉素质量浓度（C）间有良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率：99.60%。结论：该方法简单、快速、准确地测定注射用苄星青霉素中青霉素的含量。     

离子色谱法测定甲磺酸伊马替尼中甲磺酸

目的 建立离子色谱法测定甲磺酸伊马替尼中甲磺酸的检测方法.方法 采用IonPac AS11-HC阴离子分析柱(250mm×4.0 mm),柱温30℃,电导检测器,进样量10μL,淋洗液为10 mmol/L氢氧化钾溶液,体积流量1mL/min,采集时间10min.结果 甲磺酸在38.5～192.6 μg/mL线性关系良好(r=0.999 7),准确度的RSD为0.23％.结论 本法准确、可靠,可作为甲磺酸伊马替尼中甲磺酸的测定方法.     

高效液相色谱法测定青霉素V钾片中主药的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定青霉素V钾片中主药含量的方法。方法:色谱柱为DiamonsilC18,流动相为乙腈-0.02mol/L醋酸钠(70∶30),流速为1.0ml/min,检测波长为268nm,灵敏度为0.01AUFS,柱温为(26±1)℃,进样量为20μl。结果:青霉素V钾检测浓度在10.0～120.0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5);平均加样回收率为100.2%(RSD=0.42%)。结论:本方法快速、简便、准确,可用于青霉素V钾片的质量控制。     

多动安颗粒质量标准研究

目的建立多动安颗粒的质量标准。方法对处方中黄连、佛手、熟地黄、麻黄药材进行薄层色谱(TLC)法鉴别。采用高效液相色谱(HPLC)法测定处方中盐酸小檗碱的含量,色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50,V/V,每100 mL中含十二烷基硫酸钠0.4 g,pH=4.0),检测波长为345 nm,柱温为35℃,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL。结果TLC色谱图中斑点清晰,阴性对照无干扰。盐酸小檗碱进样量在0.044~0.264μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999);平均加样回收率为99.67%,RSD为2.70%(n=6)。结论该方法操作简便、专属性强、重复性好,可作为多动安颗粒的质量控制方法。     

青霉素钠和头孢唑林钠与脂肪乳配伍时的含量测定

目的建立检测两种常用的抗生素（注射用青霉素钠、注射用头孢唑林钠）在分别与10％,20％,30％脂肪乳配伍时含量的高效液相色谱法,同时考察配伍后24h内两种抗生素的含量变化。方法色谱柱为AgilentHCc。s柱（250mm×4．6mm,5μm）。检测青霉素钠的流动相为0．1mol／L磷酸二氢钾溶液（pH=2．5）-乙腈（70：30）,流速为1．0mL／min,柱温为25℃,检测波长为225nm。检测头孢唑林钠的流动相为磷酸氢二钠-枸橼酸水溶液（各3．8×10～mol／L）-乙腈（88：12）,流速为1．0mL／min,柱温为25℃,检测波长为254nm。结果青霉素钠的质量浓度在0．075～4．8g／L范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0．9998）。头孢唑林钠的质量浓度在0．0078～8．0g／L范围内,与峰面积呈良好线性关系（r=0．9998）。结论该方法简便、精密,回收率与精密度高,重现性好,可用于青霉素钠及头孢唑林钠在脂肪乳中的含量检测。     

HPLC法测定酒石酸布托啡诺注射液的含量

目的建立酒石酸布托啡诺注射液的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,应用DIONEX-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(25∶75)为流动相;流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:282 nm。结果酒石酸布托啡诺在25.5～510.0μg/mL具有良好的线性关系(r=0.999 7);平均回收率为99.90%,RSD为1.20%(n=9)。结论本方法简便、快速准确,可作为该制剂质量控制方法。     

固相萃取高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度

目的建立固相萃取高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度。方法血清样品经C18固相萃取小柱净化处理,以去甲万古霉素为内标。色谱柱:Hypersil ODS柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈:0.05mol/LKH2PO4(含0.1%三乙胺,磷酸调pH=3.5)(9:91),检测波长:236nm,流速:1.0mL/min,柱温:30℃,进样量:50μL。结果万古霉素在2.5～80.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9992),最低检测浓度1.0μg/mL,方法回收率97.1%～104.2%,绝对回收率>70%,日内、日间RSD低于6.1%。结论本方法快速、灵敏、准确,可用于临床血清万古霉素的浓度监测。