淫羊藿苷对骨质疏松模型小鼠骨组织形态计量学指标的影响

目的观察淫羊藿苷对骨质疏松模型小鼠骨形态计量学指标的影响。方法取雌性小鼠于无菌条件下切除双侧卵巢,复制骨质疏松小鼠模型。将造模小鼠随机分为：模型、己稀雌酚、淫羊藿苷高、中、低剂量组,以假手术小鼠作为对照组。各组动物按各自药物和剂量灌胃给药,每日1次,连续2个月。停药次日,脱颈椎处死动物,取右侧股骨常规脱钙、石蜡包埋、切片、HE染色,以BI-2000医学图像分析系统进行骨组织形态计量学指标检测。结果与对照组比较,模型组骨小梁平均宽度、骨皮质平均厚度、骨小梁面积及成骨细胞数明显减小,破骨细胞数明显增高（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,淫羊藿苷高、中、低剂量组小鼠的骨小梁平均宽度,骨皮质平均厚度、骨小梁面积和成骨细胞数明显增大,破骨细胞数明显减少,差异有显著意义（P〈0.05、P〈0.01）。结论淫羊藿苷可明显改善骨质疏松模型小鼠的骨形态计量学指标。     

淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响

目的研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用。方法采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响。结果浓度为100、50μmol.L-1的淫羊藿苷明显抑制1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞的数目,当其浓度为100、50、10μmol.L-1时,明显抑制破骨细胞的骨吸收功能,具体表现在吸收陷窝数目及表面积均明显减少。结论淫羊藿苷不仅可以明显抑制破骨细胞的分化,同时具有抑制破骨细胞的骨吸收功能的作用,提示淫羊藿苷具有改善骨吸收功能亢进的潜力。     

基于模型群体分析的淫羊藿抗骨质疏松活性成分筛选研究

筛选淫羊藿中对破骨细胞生长具有抑制作用的活性成分。搜集不同产地淫羊藿药材,MTT法考察不同产地淫羊藿抗前破骨细胞RAW264.7生长活性。结果显示不同产地淫羊藿的抗RAW264.7生长活性具有显著差别。采用模型群体分析,一个具有潜在活性的化合物宝霍苷I被筛选出。通过破骨细胞活性验证,发现宝霍苷I活性优于淫羊藿苷。模型群体分析方法适用于指导中药活性成分预测及发现,为中药活性成分筛选提供了新方法。     

朝藿定C与淫羊藿苷对去卵巢小鼠子宫的影响

目的观察朝藿定C与淫羊藿苷对去卵巢小鼠子宫的作用。方法取昆明种雌性小鼠,手术摘除双侧卵巢,术后3天随机分为8组:模型组、己烯雌酚组、朝藿定C高、中、低剂量组及淫羊藿苷高、中、低剂量组,另设假手术组。连续给药60 d后,处死动物,观测动物子宫系数(UC)、子宫内膜厚度(ET)和子宫腺体直径(UGD)。结果与假手术组比较,模型组UC、ET和UGD明显降低。与模型组比较,淫羊藿苷高、中、低组的UC、UGD明显增加;朝藿定C高、中、低组的UC、UGD明显增加,而ET增加不明显。结论淫羊藿苷和朝藿定C均具有拟雌激素样作用,但淫羊藿苷拟雌激素样作用高于朝藿定C。     

淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收功能

目的 研究淫羊藿苷和仙茅苷配伍抑制破骨细胞形成、分化和骨吸收的相互作用关系.方法 用1,25-(0H)2Vitamin D3和地塞米松;或人巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞鉴定;磷酸苯二钠法测定抗酒石酸酸性磷酸酶活性;将破骨细胞和骨片共同培养,以计算机图像分析测定骨吸收陷窝的面积;以Hoechst 33258和罗丹明-鬼笔环肽染色,激光共聚焦显微镜观察破骨细胞肌动蛋白环(F-actin Ring)的形态;用Western-blot分析细胞骨架相关蛋白的表达.结果 淫羊藿苷和仙茅苷在1×10-6mol/L浓度下可协同抑制破骨细胞的形成、降低抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝面积,抑制破骨细胞骨架F-actin环的构建及其调控因子Rho GTPases和灶性黏附激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达.结论 淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞性的骨吸收,为药对淫羊藿仙茅的配伍提供了实验依据.     

淫羊藿苷抗抑郁及对皮质酮致PC12细胞损伤的保护作用研究

目的：研究淫羊藿苷的抗抑郁及对皮质酮致PC12细胞损伤的保护作用。方法：采用大／小鼠强迫游泳、小鼠悬尾三种实验模型,将动物随机分为对照组、淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组、阿米替林组,观察药物对大／小鼠强迫游泳不动时间、小鼠悬尾不动时间的影响;并在细胞水平建立皮质酮损伤PC12细胞模型,观察淫羊藿苷的细胞保护作用。结果：在大／小鼠强迫游泳和小鼠悬尾实验中,淫羊藿苷可显著缩短大／小鼠的强迫游泳不动时间和小鼠悬尾不动时间,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;在皮质酮损伤PC12细胞的模型上,淫羊藿苷可显著提高PC12细胞的存活率,拮抗皮质酮诱导的细胞损伤作用。结论：淫羊藿苷具有明显的抗抑郁效果,其抗抑郁作用与神经细胞保护作用有关。     

基于FGFR1靶点分子虚拟对接筛选淫羊藿中抗骨质疏松的药效成分

目的基于FGFR1蛋白靶点筛选淫羊藿中抗骨质疏松的药效成分。方法采用维甲酸灌胃14 d复制大鼠骨质疏松模型,给予淫羊藿提取物进行干预;采用Western blotting法检测各组大鼠股骨FGFR1蛋白的表达,用UPLC-Q-TOF-MS确认提取物中化学成分。基于FGFR1靶点进行分子虚拟对接筛选药效成分。结果淫羊藿能够改善大鼠骨质疏松症状,并提高FGFR1蛋白的表达。淫羊藿提取物中指认出23种化合物,其中淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、箭藿苷C可与FGFR1可以有效对接。结论淫羊藿中淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、箭藿苷C可能通过上调FGFR1发挥抗骨质疏松作用。     

淫羊藿苷对维甲酸致大鼠骨质疏松影响的研究

目的观察淫羊藿苷对维甲酸致大鼠骨质疏松的影响。方法大鼠分为对照组、模型组、淫羊藿苷低、中、高剂量组,每组10只。70ms／kg维甲酸灌胃2周制备大鼠骨质疏松模型。淫羊藿苷组灌胃给予50、100、200mg／kg淫羊藿苷,连续4周。测定血和骨中相关指标;测定骨密度;骨物理学指标和生物力学指标。结果与模型组比较,淫羊藿苷组可不同程度的升高血清中Ca2＋、P3＋浓度（P〈0．01）,降低ALP（P〈0．01）;升高骨中Ca2＋、P3＋、Hyp含量（P〈0．05或〈0．01）;升高骨密度、湿重、干重（P〈0．01）;增加骨中最大弯曲力、抗弯强度、断裂挠度、弹性段终点荷。结论淫羊蓉苷对维甲酸致大鼠骨质疏松有一定的防治作用。     

淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨和下丘脑不同核团ERβ mRNA表达的影响

目的观察淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨和下丘脑不同核团ERβmRNA表达的影响,探讨其治疗绝经后骨质疏松的作用机制。方法将10～11月龄SD♀大鼠60只,随机分为假手术组、去卵巢模型组、淫羊藿苷小、中、大剂量组(每组12只)。以双侧卵巢切除法建立大鼠骨质疏松模型。分别用淫羊藿苷小、中、大剂量给药4个月,采用RT-PCR法,观察各组大鼠骨和下丘脑室旁核、视上核、弓状核ERβmRNA表达的变化。结果大鼠卵巢切除后,血清E2水平、椎骨骨密度、子宫湿重、胫骨和下丘脑弓状核ERβmRNA表达明显降低(P<0.01),下丘脑室旁核、视上核ERβmRNA表达均明显升高(P<0.01)。与去卵巢模型组比较,淫羊藿苷50.0和100.0 mg.kg-1组治疗后,血清E2水平、椎骨骨密度、胫骨和下丘脑弓状核ERβmRNA表达明显升高(P<0.01),下丘脑室旁核、视上核ERβmRNA表达均明显降低(P<0.01),子宫湿重无明显改变(P>0.05)。结论淫羊藿苷可以改善切除卵巢所致的骨质疏松大鼠的骨密度,对子宫无不良反应。其机制可能与其选择性调节去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑不同核团ERβmRNA表达水平有关,调节下丘脑功能活动是其途径之一。     

基于Micro-CT技术分析淫羊藿苷和朝藿定C对糖皮质激素性骨质疏松症小鼠骨组织微结构的影响

目的 应用Micro-CT技术观察淫羊藿苷和朝藿定C对糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）小鼠模型骨组织骨量、骨微结构的影响。方法 8周龄C57/BL6雄性小鼠随机分为4组：对照组、模型组、淫羊藿苷（200 mg/kg）组和朝藿定C（200 mg/kg）组,除对照组外,其他3组小鼠im地塞米松5 mg/kg,0.125 mg/次,每周3次,制备GIOP模型,对照组im等体积的生理盐水,造模同时,每天ig给药1次,连续60 d后取材,采用micro-CT方法对胫骨近端骨微结构进行三维分析;HE染色病理切片观察胫骨近端骨组织病理形态。结果 骨量参数：与对照组比较,模型组骨矿物质含量（BMC）、骨矿物质密度（BMD）、组织矿物含量（TMC）、组织矿物质密度（TMD）均显著下降（P<0.05、0.01）;与模型组比较,淫羊藿苷组、朝藿定C组BMC、BMD、TMC、TMD指标均显著提高（P<0.05）;其中朝藿定C组各指标均较淫羊藿苷组显著升高（P<0.05）。与对照组比较,模型组相对骨体积（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁厚度（Tb.Th）指标均显著下降（P<0.05）,骨小梁分离度（Tb.Sp）、结构模型指数（SMI）均显著提高（P<0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷、朝藿定C组BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著升高,Tb.Sp、SMI显著下降（P<0.05）,其中朝藿定C组各指标均较淫羊藿苷组改善显著（P<0.05）。HE染色病理切片示,模型组骨小梁数目明显减少,稀疏断裂,大部分不能连接成网状,骨髓腔明显增大,骨小梁结构出现较大的空白区域;淫羊藿苷及朝藿定C组小鼠骨小梁明显宽厚,数目也显著增加,骨小梁断裂较少,骨小梁光滑,接近对照组,其中朝藿定C组增加较淫羊藿苷组明显。结论 地塞米松诱导的骨质疏松小鼠模型成功建立,朝藿定C和淫羊藿苷抗骨质疏松活性明显,主要通过增加骨量和改善骨小梁微结构来最终提高骨强度,其中朝藿定C抗骨松作用更强;Micro-CT技术与传统的检测方法相比,在中药干预GIOP骨微结构参数分析上具有便捷、高效,经济,图像多维、全面,准确的优势。     

地附补肾颗粒对肾虚致骨质疏松模型大鼠的影响及机制的实验研究

目的观察地附补肾颗粒对肾虚致骨质疏松模型大鼠的实验影响。方法将72只SD雌性大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、阳性对照组(0.27g.kg-1)、地附补肾颗粒高(11.72 g.kg-1)、中(5.86 g.kg-1)、低(2.93 g.kg-1)组,每组12只,除假手术组,其余各组去势法切除双侧卵巢复制骨质疏松模型。造模后用药组给药8周,之后观察各组结果并作比较分析。结果地附补肾颗粒中剂量能显著提升骨质疏松模型大鼠的子宫指数、BMD、Ca2+、E2水平,通过降低TRAP、ALP活性降低骨高转换率,降低IL-6的表达。结论地附补肾颗粒通过补肾滋阴,可改善肾虚致骨质疏松模型大鼠的症状。     

淫羊藿苷对肾阳虚细胞糖皮质激素受体表达影响的研究

目的:研究淫羊藿苷对肾阳虚细胞模型糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法:制备肾阳虚细胞模型,应用淫羊藿苷高、中、低剂量及阴性对照干预,采用反相-聚合酶链反应和蛋白免疫法观察干预后GR的mRNA和蛋白的表达情况。结果:与对照组比较,经淫羊藿苷高、中、低剂量干预后的GR的mRNA和蛋白的表达均显著增加(P<0.05)。结论:淫羊藿苷可能通过上调GR的表达而达到治疗肾阳虚的目的。     

石榴籽油对雌激素相关骨质疏松症小鼠软骨代谢的保护作用及对相关蛋白表达影响的探究

目的 观察石榴籽油抑制骨质疏松症小鼠软骨代谢的效果.方法 将36只雌性ddY小鼠随机分为6组:正常组、模型组、石榴籽油低、中和高剂量组以及雌二醇组,分别给予各组小鼠1 g/kg/d饲料灌胃,于1、2、3、4周后检测各组小鼠的体质量变化以及4周后的子宫质量,观察正常组、模型组、不同PSO剂量实验组的骨质疏松病理切片情况,通过RT-PCR比较开始给予饲料以及1、2、3、4周后检测各组破骨细胞相关基因MMP2、CTR、Itgβ3以及成骨细胞相关基因Lrp5、OPN的表达水平.结果 卵巢切除后模型组小鼠子宫质量显著下降;石榴籽油的低剂量对子宫质量的下降有显著抑制作用,其效果与雌二醇相当;石榴籽油的中剂量和大剂量对子宫质量的下降无明显抑制作用.模型组动物股骨近端骨小梁微结构破坏,程度最为严重,骨密质比较薄,骨细胞数量减少,骨小梁稀疏、断裂、排列紊乱,髓腔增大,测定其骨密度为(0.98±0.15) g/cm3显著低于正常组(1.37±0.23) g/cm3及PSO低剂量组(1.21±0.19) g/cm3;同时PSO低剂量组骨质疏松的病理改变改善明显,骨小梁密增多,骨密质增厚.低剂量组(5％)石榴籽油对破骨细胞的三种基因(CTR、ITGb3、MMP2)呈现下调,其中CTR下调最为显著;而对成骨细胞相关基因Lrp5呈现显著上调,P＜0.05.结论 石榴籽油通过相关基因调节抑制破骨细胞活性,减轻骨吸收和破坏,从而抑制骨质疏松症小鼠骨量的丢失;同时通过作用于成骨细胞相关基因,促进成骨细胞分化,促进成骨.     

Effect of Tanshitone on prevention and treatment of retinoic acid-induced osteoporosis in mice

Objective To observe the prevention and therapeutic effects of tanshitone(TAN)on retinoic acid induced osteoporosis in mice.Methods The mice osteoporosis was induced by given retinoic acid intragasttrically for two weeks.The histomorphological features of bone were observed and biochemical indexes in serum(Ca,P,ALP,TRAP,E2,BGP)were determined after mice were given TAN at the dose of 40,80,160 mg·kg-1 respectively.Results Tanshitone can induce high conversion of osteoporosis.The levels of P,ALP,TRAP and BGP in the TAN groups were lower than the model group,while the E2 level was higher than the model group.Conclusions Tanshitone can prevent the loss bone in the experimental mice.The mechanism may be that it improves the level of estrogenic hormone and inhibits the high bone turnover.     

右归饮联合盐酸雷洛昔芬给药治疗小鼠骨质疏松症

目的 观察右归饮和盐酸雷洛昔芬联合给药对骨质疏松模型小鼠的治疗作用,并研究其作用机制。方法 将C57BL/6雌性小鼠切除卵巢制备骨质疏松模型,手术12周后将小鼠随机分为4组：模型组、右归饮（0.1 g/只）组、盐酸雷洛昔芬（10mg/kg）组和联合给药（右归饮0.1 g/只与盐酸雷洛昔芬10 mg/kg联合给药）组,另设假手术组,连续7周每天ig给药1次。给药结束后,将动物处死,Micro-CT测定骨密度和骨组织微形态,并测定骨形态计量指标——骨体积分数（BV/TV）、骨表面积/骨体积（BS/BV）、骨小梁的平均厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）;试剂盒法测定血清中I型胶原氨基端（P1NP）、胶原羧基端（CTx）水平;分离并培养骨髓间充质干细胞,体外培养7 d,CCK-8法测定细胞增殖率,试剂盒法检测分化相关指标碱性磷酸酶（ALP）水平。结果 与模型组比较,右归饮组、盐酸雷洛昔芬组和联合给药组的骨密度、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著升高,BS/BV和Tb.Sp显著降低（P<0.05）;与盐酸雷洛昔芬组比较,联合给药组的BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著升高,BS/BV和Tb.Sp显著降低（P<0.05）。联合给药组P1NP水平、细胞增殖率均显著高于其他各组（P<0.05、0.01）。ALP水平显著高于假手术组、模型组、盐酸雷洛昔芬组,显著低于右归饮组（P<0.01）。结论 在给药时间相同的前提下,右归饮和盐酸雷洛昔芬联合给药比单独给药更有效地抑制小鼠骨丢失,通过促进细胞的增殖和分化提高骨形成能力,达到增加骨密度、治疗骨质疏松的效果。     

红车轴草异黄酮对维甲酸致小鼠骨质疏松的预防作用

目的研究红车轴草异黄酮对维甲酸致小鼠骨质疏松的预防作用,并探讨其主要作用机制。方法维甲酸(90mg.kg-1)致小鼠骨质疏松模型,红车轴草异黄酮(50、100、200mg·kg-1)灌胃给药,实验过程监测体重,2周后以比色法测定血清钙、磷含量和碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性,竞争放射免疫法测定血清中骨钙素(BGP)和雌二醇(E2)含量,取股骨进行骨组织形态学观察。结果维甲酸可引起高转换型骨质疏松,红车轴草异黄酮可升高E2值,降低P、ALP、TRAP、BGP水平。结论红车轴草异黄酮对维甲酸致小鼠骨质疏松有一定的预防作用,其机制可能与其减缓雌激素水平降低,抑制骨高转换有关。     

丹皮酚对湿疹模型小鼠SP、NK1R表达及肥大细胞活化的影响#br#

摘要：目的　探究丹皮酚对湿疹模型小鼠P物质（SP）、神经激肽1受体（NK1R）表达及肥大细胞活化的影响。方法　选取健康清洁级C57BL小鼠100只,用2,4-二硝基氯苯（DNCB）涂于小鼠双耳内侧致敏,建立湿疹模型,造模成功后采用随机数字表法分为湿疹模型组,丹皮酚低（25 mg/kg）、中（50 mg/kg）、高（100 mg/kg）剂量组及阳性药物（地塞米松0.65 mg/kg）组,每组20只。另取20只小鼠于双耳内侧涂抹等量生理盐水作为空白对照（Control）组。各组均于造模成功后开始给药,丹皮酚低、中、高剂量组和阳性药物组均经腹腔注射相应剂量药物,1次/d,共14 d,Control组和湿疹模型组经腹腔注射等量生理盐水。肉眼观察小鼠耳部湿疹皮损程度并进行评分;苏木精-伊红（HE）染色检测各组小鼠耳部组织病理变化;酶联免疫吸附测定法检测SP含量;免疫组化法检测耳部皮损组织NK1R及肥大细胞活性标志物类胰蛋白酶（Tryptase）表达。结果　与Control组相比,湿疹模型组小鼠耳部皮肤可见红肿、角化结痂、渗出等损伤及表皮角化过度、真皮层炎症细胞浸润等病理损伤,皮损程度评分、SP含量、NK1R及Tryptase表达水平均升高（P＜0.05）;与湿疹模型组相比,丹皮酚低、中、高剂量组及阳性药物组小鼠耳部皮肤红肿、角化及炎性浸润等病理损伤程度减缓,皮损程度评分、SP含量、NK1R及Tryptase表达水平均降低（P＜0.05）,且丹皮酚各剂量组呈剂量依赖性;丹皮酚高剂量组上述指标与阳性药物组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　丹皮酚可能通过抑制湿疹模型小鼠耳部皮损组织中SP、NK1R表达,抑制肥大细胞活化,缓解湿疹炎性损伤症状。