妊娠期高血压疾病患者胎盘共刺激分子 B7-1和B7-2的研究

目的：探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘巨噬细胞共刺激分子B7-1、B7-2的表达水平,探讨B7-1、B7-2和B7-1/B7-2在发病中的作用。方法采集28例子痫前期患者（包括12例轻度和16例重度）,12例妊娠期高血压患者,12例正常妊娠妇女的胎盘巨噬细胞,用流式细胞技术分别测B7-1、B7-2的表达率。结果子痫前期患者B7-1/B7-2（0．75＆#177;0．13）均高于其余各组（ P ＜0．05）,子痫前期组胎盘B7-1（19．50＆#177;4．05％）高于其它各组（ P ＜0．05）,结论妊娠期高血压疾病患者胎盘局部B7-1的过度表达及B7-2和B7-1/B7-2失衡可能是其发生的重要原因。     

蜕膜共刺激分子B7-1和B7-2与原因不明习惯性流产的关系

原因不明习惯性流产是妇产科常见疾病,其病因至今尚未阐明.蜕膜是母胎直接接触的界面,是母体产生免疫应答的重要部位.研究表明,蜕膜辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)比值失衡与原因不明习惯性流产有密切关系[1],共刺激分子B7-1和B7-2在调控Th分化发挥了重要作用[2].本文运用流式细胞技术,测定蜕膜巨噬细胞表面B7-1和B7-2的表达水平,了解B7-1和B7-2在原因不明习惯性流产发生中的作用和意义.     

原因不明习惯性流产患者绒毛共刺激分子B7-1和B7-2的表达水平变化

近年来,国内外对原因不明习惯性流产病因的研究取得了很大进展,其病因十分复杂,涉及遗传、内分泌、免疫学机制、解剖和感染等诸多因素,已有研究证明80%的原因不明习惯性流产与免疫学机制有关[1,2],其中淋巴细胞亚群及其相关细胞因子与原因不明习惯性流产关系更是目前研究的新热点.研究发现辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)比值失衡与原因不明习惯性流产有密切关系[3].但导致其失衡的原因和机制尚不清楚,B7-1,B7-2是B7家族中重要的共刺激分子,有研究表明,B7家族介导的免疫应答反应参与T淋巴细胞的活化[4].有关B7-1,B7-2在原因不明习惯性流产患者绒毛中表达的研究尚未见报道.本文运用流式细胞技术,首次检测原因不明习惯性流产患者绒毛B7-1、B7-2表达水平变化.     

急性白血病B7-1基因的表达及临床意义

目的:研究B7-1基因在急性白血病(AL)患者中的表达及临床意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测64例AL患者B7-1mRNA的表达水平,14例健康人为正常对照,K562、NB4细胞株为阳性对照。结果:AL患者B7-1基因的表达率与对照组没有差异,但半定量后的表达水平明显较正常低,且初发和缓解患者表达量差异无显著性。结论:B7-1基因表达的紊乱可能在AL的发病中起着重要作用,并且可能与AL复发和预后相关。     

原因不明复发性流产患者外周血Th1/Th2与共刺激分子B7-1、B7-2的关系

目的探讨原因不明复发性流产患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2、辅助性T淋巴细胞1(Th1)及辅助性T淋巴细胞2(Th2)的表达水平,分析B7-1、B7-2与Th1/Th2比率的关系。方法流式法检测20例原因不明复发性流产女性(流产组)、19例正常妊娠女性(正常妊娠组)和15例正常未孕女性(正常未孕组)的Th1/Th2和B7-1、B7-2的表达水平。结果流产组Th1/Th2(15.8±4.2)、B7-1的表达水平(11.4±1.6)%,显著高于其余2组(P<0.01);流产组B7-2的表达水平(17.5±2.0)%,显著低于其余2组(P<0.01);流产组Th1/Th2与B7-1的表达水平之间存在显著正相关(r=0.9136,P<0.01);流产组Th1/Th2与B7-2的表达水平之间存在显著负相关(r=-9571,P<0.01)。结论原因不明复发性流产患者B7-1、B7-2、Th1及Th2的表达水平显著异常,B7-1、B7-2与Th1/Th2比率显著相关,可能是原因不明复发性流产发生的重要原因。     

B7-1基因修饰的胃癌细胞诱导抗胃癌主动免疫研究

目的　探讨B7 1基因转染胃癌细胞是否具有抗肿瘤主动免疫增强作用。方法　采用重组腺病毒载体将B7 1基因导入人胃癌细胞SGC 790 1,G4 18阳性克隆筛选 ,流式细胞分析显示B7 1的表达 ;将携带B7 1基因的胃癌细胞 (命名为SGC 790 1/B7 1)接种于C5 7BL/ 6小鼠背部皮下 ,观测其致瘤性能 ;SGC 790 1/B7 1致敏的小鼠对野生型瘤细胞是否具有免疫保护作用 ;用SGC 790 1和SGC 790 1/B7 1细胞分别经腹腔免疫小鼠 ,得到腹腔浸润淋巴细胞及致敏脾细胞 ,MTT法检测其体外杀伤实验。结果　B7 1基因在胃癌细胞中获得高表达 ;SGC 790 1/B7 1诱导的CTL(cytotoxicTlymphocyte)对SGC 790 1的杀伤活性显著高于野生型SGC 790 1诱导的CTL对相同靶细胞的杀伤活性 (P <0 0 5 ) ;SGC 790 1/B7 1诱导的CTL对SGC 790 1/B7 1的杀伤率显著高于对野生型SGC 790 1的杀伤率 (P <0 0 5 )。结论　B7 1促进抗胃癌CTL的增殖、活化 ,能诱导抗胃癌主动免疫功能。     

B7-H4的研究进展

B7-CD28家族的共刺激信号分子在免疫应答与调节中发挥重要作用,其作为共刺激或共抑制信号决定最终免疫应答。B7-H4作为B7家族(家族成员20%~40%蛋白质相同)中的负向调节分子,它的发现扩展了人们对细胞介导的免疫应答和耐受调控机制的理解。     

鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备鼠抗人B7-H4单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步鉴定。方法用稳定表达B7-H4分子的L929/B7-H4转基因细胞免疫6-8周龄的Balb/c小鼠。取脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,采用流式细胞术筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗B7-H4单克隆抗体的细胞株,并用Western blot和Dot blot鉴定其生物学特性。细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定T细胞增殖情况。结果成功获得1株稳定分泌抗人B7-H4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5C8。Western blot和Dot blot结果表明,5C8能与人B7-H4蛋白特异性结合。CCK-8实验显示,5C8可以阻断B7-H4分子对T细胞增殖的抑制作用。结论成功获得鼠抗人B7-H4单克隆抗体,为研究B7-H4分子在肿瘤中的作用提供了手段。     

IFN-γ、IL-12对B7-1转染肝癌细胞诱导T淋巴细胞活化的影响

目的探讨B7—1基因转染肝癌细胞与IFN-γ、IL-12联合在体外诱导T细胞活化的能力。方法酶联免疫吸附反应(ELISA)检测联合诱导瘤苗刺激淋巴细胞IFN-γ、IL-12蛋白合成及细胞表面CD4、CD8、CD25的表达。MTT法检测瘤苗对淋巴细胞增殖作用的影响。结果HepG2／B7—1细胞诱导淋巴细胞表达IL-2、IFN-γ,其蛋白质含分别为875pg／ml和1246pg／ml;而联合IL-12、IFN-γ后能进一步诱导IL-2、IFN-γ的蛋白质合成,较各自无细胞因子组明显提高(P＜0．05)。细胞表面CD4、CD8、CD25的表达显著增加。两者联合促进了淋巴细胞的增殖,在E／T=10：1时,较HepG2组明显增大。结论IL-12、IFN-γ增强经B7—1基因转染的肝癌细胞(HepG2／B7—1)诱导淋巴细胞产生IL-2、IFN-γ的能力;IL-12、IFN-γ可能通过调节B7—1分子的生物学活性影响其对T细胞的活化。     

阿糖胞苷刺激Jurkat细胞B7和细胞因子mRNA表达

目的探讨B7共刺激分子在T细胞活化和分化中的作用。方法阿糖胞苷(Ara-C)刺激Jurkat细胞,流式细胞术检测刺激前、后B7-1、B7-2的表达,RT-PCR检测刺激前、后B7-1、B7-2基因的表达,检测T细胞表面因子IL-3和IFN-γ的表达以及这两种细胞因子在Ara-C刺激Jurkat细胞后12,24,48,72,96,120,144 h时间动态变化。结果经Ara-C刺激Jurkat细胞后,均能使B7-1、B7-2表达上调,并且可诱导T细胞分泌细胞因子IL-3和IFN-γ,而未经Ara-C刺激的Jurkat细胞,无B7-1、B7-2的表达,均未诱导细胞因子的分泌。IL-3在T细胞活化12 h即可检测到,在48 h表达量最高,IFN-γ在T细胞活化24 h即可检测到,在72 h表达量最高。结论Ara-C可有效地刺激Jurkat细胞B7的表达,有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞。B7在T细胞活化中起着重要作用。     

B7-H3在类风湿关节炎患者血清中的水平及与病情相关性分析

目的检测类风湿关节炎患者血清中可溶性B7-H3（sB7-H3）、INF-r,IL-2的水平并探讨其临床意义。方法应用ELISA夹心法检测53例风湿关节炎患者与35例正常人血清sB7-H3,INF-r,IL-2探水平。魏氏法测血沉（ESR）;DAS28方法评价疾病活动度,并探讨其临床意义。结果①类风湿关节炎患者血清sB7-H3水平为（34.25±8.56）μg/L,正常人血清sB7-H3水平（21.52±8.28）μg/L,两者比较差异有显著性意义（P〈0.01）;②RA活动组与缓解组、健康对照组分别比较,sB7-H3水平差异统计学有意义;③INF-r的血清水平在活动组、缓解组、健康对照组均有显著差异（P〈0.01）;④IL-2的血清水平在活动组、缓解组、健康对照组均有显著差异（P〈0.01）;⑤相关性分析结果显示RA患者组B7-H3水平与INF-r、IL-2成正相关,与DAS28呈正相关。结论B7-H3水平的增高可能直接参与了RA的发病,并与RA的疾病活动度有一定的关系,INF-r,IL-2在RA患者血清中呈高表达,因此可能和B7-H3协同参与了RA的发病。     

免疫抑制因子B7-H4与肿瘤关系的研究进展

B7同源体4（B7 homolog 4,B7-H4）是B7家族的新成员,在介导肿瘤免疫应答过程中发挥着重要作用,它可以通过抑制T细胞的增殖、细胞因子（如白介素-2）的产生和细胞周期（G0/G1期）的进程来负性调控T细胞的免疫应答。研究发现B7-H4在多种肿瘤细胞中呈现高表达,在正常组织中低表达或不表达,它可以使肿瘤细胞逃脱机体的免疫防御机制,促进上皮细胞的恶性转化和避免上皮细胞发生凋亡。所以在恶性肿瘤中B7-H4的表达具有重要的临床诊断意义,并可能提供一个用于癌症治疗的新靶点。     

B7-H4在胃腺癌中的表达及临床意义

目的研究B7-H4蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义。方法应用S-P免疫组化法检测B7-H4蛋白在20例正常胃黏膜、50例胃腺癌中的表达情况。结果 B7-H4在胃癌中的阳性表达率（82%）高于正常胃黏膜组（10%）,差异有显著意义（P〈0.05）。B7-H4在胃腺癌中的表达与年龄、性别无关（P〉0.05）,而与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论 B7-H4在胃腺癌中表达上调,可能与胃腺癌的转移和预后相关。     

NF-κB通过TRPM7通道蛋白调控心脏纤维化的机制研究

探索NF-κB和TRPM7之间的相互关系,及其在心脏纤维化过程中的具体调控机制。本研究从细胞和动物层面分别构建了纤维化模型(TGF-β处理MEF细胞、ISO处理小鼠),并利用siRNA干扰和黄芪甲苷靶向抑制TRPM7,通过RT-qPCR和Western Blot分别检测纤维化因子(MMP9和α-SMA)以及TRPM7在mRNA和蛋白水平的表达。同时采用ELISA法测定细胞上清、小鼠和心衰患者血清中的NF-κB的浓度。进一步采用生物信息学方法分析TRPM7启动子区域转录调控信息,预测该区域与NF-κB信号通路的相关性。无论在细胞还是动物模型中,与对照组相比,纤维化组TRPM7的表达显著增加(P<0.05),NF-κB的浓度也显著升高(P<0.05),当TRPM7的表达被抑制后,心脏纤维化程度得到明显的缓解。生物信息学分析表明NF-κB的主要组分NF-κB p65可能通过与TRPM7启动子特定区域结合从而调节TRPM7的表达,最终起到调控心脏纤维化的作用。TRPM7通道蛋白在心脏纤维化过程中发挥着关键作用,NF-κB的上调与纤维化因子的激活关系密切,NF-κB可能是TRPM7通...     

B7-H4介导肿瘤免疫逃逸机制及临床研究进展

协同刺激分子B7-H4是B7家族中的新成员,能通过抑制T细胞增殖、减少细胞因子产生和减慢细胞周期进程而负性调控T细胞免疫应答。研究表明,B7-H4在多种肿瘤细胞及组织中均呈高表达,与肿瘤免疫逃逸关系密切,在肿瘤的发生、发展和转归中发挥重要作用。研究B7-H4在肿瘤中的表达和意义,有助于阐明肿瘤免疫逃逸机制,也为肿瘤的免疫治疗提供新的靶点和策略。     

共刺激分子B7-CD28在肿瘤免疫研究中的进展

抗肿瘤免疫以细胞免疫为主,共刺激分子发挥了相当重要的作用。B7-CD28是激发机体抗肿瘤免疫应答的共刺激信号,由于肿瘤细胞缺乏B7分子的表达,机体抗肿瘤作用显著降低。转基因治疗后,可以使机体重新获得对肿瘤的主动免疫应答能力。     

IFN-γ对白血病U937细胞株B7-H1表达的影响

目的探讨IFN-γ对白血病U937细胞株B7分子同源配体1(B7 homolog 1,B7-H1)表达的影响。方法采用不同剂量的IFN-γ处理U937细胞株48h后,分别采用免疫组化法、流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR检测IFN-γ对U937细胞表达B7-H1的影响。结果①与对照组(IFN-γ0 ng/ml)比较,在蛋白水平,经不同浓度的IFN-γ(50ng/ml、100ng/ml和150ng/ml)处理后的U937细胞B7-H1表达强度明显升高(P<0.001);而且B7-H1的表达水平与IFN-γ之间存在剂量效应关系。②在mRNA表达水平,IFN-γ能以剂量依赖性方式诱导U937细胞的B7-H1表达:IFN-γ50ng/ml、100ng/ml和150ng/ml组B7-H1的表达水平较对照组分别升高了6.5、26和22.7倍。结论 IFN-γ以剂量依赖性方式上调U937细胞上B7-H1表达。     

人结肠直肠癌组织中B7-H4的表达及其临床意义

目的探讨共刺激分子B7-H4在结肠直肠癌组织中的表达及其意义。方法运用免疫组织化学S-P法检测B7-H4分子在60例结肠直肠癌组织中的表达,并对其表达水平与结肠直肠癌临床病理参数之间的关系进行相关性分析。结果B7-H4在结肠直肠癌组织中高表达,阳性率为83.3%;在结肠直肠癌组织中B7-H4的表达与患者性别、年龄、肿瘤组织的类型、分级和分期无关（P〈0.05）,而与淋巴结是否转移显著相关（P〈0.05）。结论B7-H4在结肠直肠癌组织中的高表达,可成为结肠直肠癌新的诊断标志。B7-H4在肿瘤的发生、进展中起到一定作用,封闭B7-H4有可能成为结肠直肠癌免疫治疗的一个新靶点。     

干扰素γ诱导肝癌HepG2细胞表达B7分子的实验研究

目的研究干扰素γ(IFN-γ)对人肝癌细胞B7分子表达的影响。方法选用人肝癌HepG2细胞进行体外培养,经过不同浓度的IFN-γ干预后,采用MTT法检测细胞增殖作用,RT-PCR检测B7-1和B7-2mRNA的表达。结果不同浓度的IFN-γ对HepG2细胞体外生长有明显抑制作用;干预后HepG2细胞的B7基因表达明显增加。结论IFN-γ能直接抑制HepG2细胞增殖,显著上调HepG2细胞B7基因的表达,具有一定的抗肿瘤效应。     

ADS-7多功能吸附树脂制备高纯度丹酚酸B的应用研究

目的探讨ADS-7多功能吸附树脂对丹参中丹酚酸B的分离纯化方法。方法以丹酚酸B的含量及洗脱率为指标,通过动态吸附试验考察ADS-7树脂的吸附性能。结果 ADS-7树脂对丹参中丹酚酸B具有较高的吸附选择性,吸附量为95.7 mg.g 1(干树脂),甲酸/50%乙醇(10∶90)作为洗脱剂,丹酚酸B的纯度高达87.2%。结论 ADS-7树脂用于丹参中丹酚酸B的分离纯化简单高效。