ELISA一步法和两步法检测HBsAg的比较

目的 比较ELISA一步法和两步法检测HBsAg的差异.方法 经HBsAg中和试验确证的115份阳性样本和30份阴性样本,采用ELISA一步法试剂和两步法试剂进行检测.通过检测结果的统计分析评价两种试剂的检测能力.结果 115份阳性样本,一步法阳性检出率68.7%,两步法阳性检出率76.5%;30份阴性样本,一步法阴性检出率93.3%,两步法阴性检出率96.7%;对等评估指标比较结果,两步法均优于一步法,其中敏感性差异有统计学意义（P〈0.01）,特异性差异无统计学意义（P〉0.05）;阳性样本检测值S/CO,两步法高于一步法（P〈0.001）;阴性样本检测值（S/CO）,两试剂检测差异无统计学意义（P〉0.10）.结论 ELISA两步法检测HBsAg的能力高于ELISA一步法,且能确保血液安全.     

两种方法检测HBeAb、HbcAb弱阳性标本的比较

目的比较ECL（电化学免疫发光法）与ELISA（酶联免疫吸附试验）检测乙肝HbeAb和HbcAb结果的符合率,避免假阳性或假阴性的发生。方法先用ELISA法筛选出HBeAb、HbcAb标本的OD值与COV值相近标本922例,分组后再用ECL法进行检验并计算出它们之间的符合率。结果 ELISA法检测HBeAb、Hb-cAb弱阳性组符合率分别为97.7%、97.5%,检测阳性组符合率均为100%。检测阴性组符合率为97.0%、98.0%,差异均无统计学意义（P〉0.05）,而检测OD值〉COV值0.1的弱阴性组符合率分别为85.3%、84.2%,两方法间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ELISA法检测乙肝抗体,应注意标本OD值与COV值相近的标本,尤其弱阴性标本,必要时用ECL法进行复查。     

影响乙型肝炎表面抗原在ELISA检测中的2种因素分析

目的:探讨乙型肝炎表面抗原在ELISA法检测中受溶血标本、洗涤过程影响而使检测结果产生异常的分析.方法:在应用ELISA酶免疫一步法对乙型肝炎表面抗原进行检测的过程中采用以上影响因素进行检测,再与其正常结果加以对照分析.结果:乙型肝炎表面抗原受上述因素影响后易产生假阳性或假阴性的结果.结论:如何避免以上因素对乙型肝炎表面抗原检测结果的影响,这就要求对实验条件、操作规程、试剂与仪器、实验人员的操作水平等进行严格的质量控制,对于已溶血的标本不能使用.     

乙型肝炎表面抗原一步法检测试剂的钩状效应分析

目的 探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)浓度过高时而产生的钩状效应.方法 对筛检出的35份HBeAg阳性而HBsAg阴性[样品吸光度/临界值(S/CO)＜1.0]标本按原倍至最高1∶2048倍比稀释后,用一步法和两步法进行测定,并对结果进行分析.结果 35份样本中,21份二步法检测至稀释度为1∶512时均阳性,一步法在不同稀释度检测结果不同(高浓度时阴性,稀释至1∶2048时均有9例阳性).结论 二步法检测可避免高浓度HBsAg在一步法检测中由于钩状效应所造成的错误结果.     

ELISA一步法和二步法检测HBsAg及NAT检测HBV-DNA结果分析

目的 依托NAT 检测结果,对ELISA 一步法和二步法检测HBsAg 结果进行比较分析.方法 采用2 种不同厂家试剂一步法对33483 人份无偿献血者血液标本进行检测,二步法对35064 人份无偿献血者血液标本进行检测,剔除双试剂阳性后再进行NAT 检测.结果 ELISA 二步法检测总阳性率明显高于一步法;HBV-JH 及HBV-XC 2 种厂家试剂二步法阳性率均明显高于一步法;2 种试剂厂家一步法检测结果不相符现象无明显差异,二步法检测结果不相符现象有明显差异;二步法双试剂阳性率明显高于一步法;HBV-JH 由一步法改二步法后单试剂阳性越来越高,HBV-XC 由一步法改二步法后单试剂阳性越来越低;经二步法剔除双试剂阳性标本后进行NAT 检测阳性率明显低于一步法剔除双试剂阳性标本后的NAT 阳性率.结论 ELISA 试剂由一步法改二步法后ELISA 阳性率明显增加,NAT 阳性率有了明显下降提示HBsAg 漏检得到一定控制;试剂方法改变过程中不同厂家试剂质量出现了较大差异,各试剂厂家在强调ELISA 血液筛查试剂检测灵敏度的同时,应积极改善其检测特异性,减少假阳性避免血液不必要浪费.     

检测乙型肝炎表面抗原一步法试剂的钩状效应分析

目的:探讨一步法试剂的钩状效应(HOOK)在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)检测的漏检情况和二步法的临床应用价值.方法:对乙肝病毒e抗原(HBeAg)和乙肝病毒核心抗体(HbcAb)两项阳性,而HB8Ag阴性的血清标本进行不同比例稀释,分别用一步法和二步法进行检测和比较.结果:在10份HBeAg和HBcAb两项阳性的血清样品中,二步法检测8份HBsAg阳性,而一步法在不同稀释度时,则检出不同的结果.结论:用一步法检测会因HOOK出现假阴性导致漏检,建议检测乙肝表面抗原用二步法替代一步法.     

带血球的标本对ELISA一步法检测HBsAg的影响

目的 探讨不同程度溶血标本对ELISA两步法检测HBsAg结果 的影响.方法 分别用已知HBsAg和HBsAg阳性的血标本,人为造成不同程度的溶血,同时用ELISA 两步法进行HBsAg检测,用酶标仪检测标本OD值,通过对检验结果 的观察,分析溶血标本对ELISA两步法检测的干扰程度.结果 以标本的OD:cut off≥1为阳性进行结果 判读.结果 当样本游离血红蛋白≥8 g/L时,对ELISA两步法检测有明显的影响,可造成结果 假阳性.结论 用ELISA两步法进行HBsAg检测时,如果样本游离血红蛋白≥8 g/L时要重新抽样进行复检.     

加样时差对竞争抑制法检测抗-HBc的影响因素探讨

目的：探讨加样时差对ELISA一步法试剂检测抗-HBc结果的影响。方法：选择抗-HBc阴性的标本分为A、B、D3组,选择抗-HBc阳性的标本设为C组。A组标本加入后放置室温不同时间再加入酶标试剂;B组标本加入后放置37℃水浴不同时间再加入酶标试剂;C组先加酶标试剂37℃水浴放置不同时间再加入标本;D组先将标本与酶标试剂混匀后加入放置室温不同时间。结果：A、B组加样方式对抗-HBc检测结果影响明显,且加标本与加酶标试剂的间隔时间越长,反应温度越高,标本的假阳性越多;C组加样方式对抗-HBc检测结果影响明显,且加酶标试剂与加标本的间隔时间越长,标本的假阴性越多;D组加样方式对抗-HBc检测结果无影响。结论：A、B、C3组实验的加样时差导致的不公平竞争可对ELISA一步法检测试剂的结果产生影响,出现抗-HBc假阳性、假阴性增多;D组加样方式可最大限度地减少抗-HBc假阳性和假阴性,保证检验质量。     

ELISA法检测献血者HBsAg应用分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)在献血者HBsAg检测中的应用、影响因素及解决方法。方法利用ELISA法,对无偿献血者血液标本进行HBsAg初检、复检两次检测;实验结果0.7≤s/co<1的标本,使用原试剂进行双孔复试。结果 13796份血液标本,HBsAg阳性共24份;0.7≤s/co<1的标本57份,经双孔复试,阳性标本2份。结论应重视OD值接近临界值标本的复核工作;加强对血液标本、仪器设备及检测试剂的质量管理,规范实验操作,提高重复性;建议生产二步法试剂,避免产生高值钩状效应,提高血液安全水平。     

引起HBsAg钩状效应的原因探讨

目的 探讨酶联免疫吸附试验一步法检测血清乙肝五项时出现HBsAg阴性HBeAg阳性的原因以及与乙肝病毒载量的关系.方法 用稀释法检测出现HBsAg阴性HBeAg阳性标本中HBsAg,并对这些标本用HBV-DNA-PCR法检测乙肝病毒载量,分析钩状效应与病毒载量的关系.结果 一步法检出的HBsAg阴性而HBeAg阳性的标本共12份,经稀释后重新测定HBsAg其中11份为阳性,其乙肝病毒载量在7.81×105～4.26×108 copies/ml.结论 高浓度HBsAg是造成一步法钩状效应的原因,其病人体内存在高载量的乙肝病毒.     

胶体金法与酶联免疫法联合检测HBsAg的结果比较

目的探讨基层医院HBsAg的有效检测方法。方法采用胶体金法（GIA）与酶联免疫法（EIA）对18638例血清标本同时进行HBsAg检测,并且对结果进行对比分析。结果 18638例标本中有1例HBsAgEIA阴性而GIA阳性;13例HBsAgEIA阳性或OD值为临界值的样本,GIA结果为阴性;其余的标本EIA和GIA对于HBsAg阴性及阳性的标本检测结果一致。结论两种方法对HBsAg检测的特异性相近。两种方法若联合检测应用于临床,可提高检测结果的准确性。     

两种方法检测HBeAb、HBcAb弱阴性标本分析

目的通过观察酶联免疫吸附试验法(ELISA)与时间分辨法(TRFIA)在检测乙型肝炎e抗体(HBeAb)和乙型肝炎核心抗体(HBcAb)的具体效果,比较二者的符合率,为得到更有效的检测结果提供方法学上的依据。方法以我院2011年1月至2011年12月收治的乙型肝炎感染患者856例,通过抽血采样作为标本,采用ELISA法对HBeAb和HBcAb的OD值及COV值相近的标本进行筛选分组,再通过TRFIA法对筛选出标本进行检测,计算两种方法下检测的符合率。结果采用ELISA法,对HBeAb进行检测,阳性组符合率为100%,弱阳性组符合率为97.6%,阴性组符合率为97.3%,弱阴性组符合率为85.2%;对HBcAb进行检测,阳性组符合率为100%,弱阳性组符合率为97.4%,阴性组符合率为97.2%,弱阴性组符合率为83.5%。两种方法对于HBeAb和HBcAb在阳性组、弱阳性组、阴性组的检测差异均不具有显著性,无统计学意义(P>0.05),对于HBeAb和HBcAb在弱阴性组的检测差异具有显著性,有统计学意义(P<0.05)。讨论ELISA法检测乙型肝炎抗体,应严格注意OD值与COV值相差不大的标本,尤其是弱阴性标本,如无法确定,应采用TRFIA法进行复查,以便保证检测结果的准确性。     

ELISA法检测血清HBV抗-HBc假阳性的原因探讨

目的探讨ELISA法检测乙肝病毒抗-HBc假阳性的原因,提高检测结果的准确度。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）,对410例血清先用一种试剂初检,再用另外两种试剂复检,初检呈阳性反应而两种试剂复检均为阴性者判为假阳性。结果在406份标本中用科华公司的试剂检测到抗-HBc阳性标本348份,用英科兴创公司的试剂检测到抗-HBc阳性标本355份,二者符合率为98.0%。其中52份标本用两种试剂复查后抗-HBc均为阴性,假阳性占12.8%。结论用ELISA竞争法检测抗-HBc,由于非特异吸附和操作等多种原因易出现假阳性结果,尤其对于抗-HBs和抗-HBc同时阳性的标本应该复查抗-HBc。     

用ELISA法检测乙肝两对半的试验中的一点体会

<正>从事临床检验二十余年,在使用ELISA法检测乙肝两对半的试验中,有时发现空白和阴阳性对照以及室内质控结果正常(Cutoff=0.105)而血液标本孔的OD值却有普遍偏高的情况(大多数OD值≥0.060),标本的阳性率很高。每44份标本中有8～13份阳性结果,且大多数阳性标本都出现弱阳性结果(0.105≤OD值≤0.500)。我们就此经过仔细分析并采取相应措施,最终解决了乙肝两对半中这个问题。我们用乙肝两对半中表面抗原为例,进行一系列试验,现简单介绍如下:     

戊二醛消毒剂对酶联免疫法检测结果的影响

目的探讨戊二醛消毒剂对酶联免疫法(ELISA)造成的假阳性及假阴性影响,为临床免疫实验室合理选择消毒剂提供依据。方法夹心ELISA(以乙肝表面抗原试剂进行实验)及竞争ELISA(以乙肝e抗体试剂进行实验),以自带阴性及阳性血清进行实验,至加入显色液后,加入戊二醛2μl,加入终止液,以全自动酶标仪进行比色,对数据进行分析。结果戊二醛使ELISA各孔显黄色,吸光度值升高,夹心法达阳性判断标准,竞争法达阴性判断标准。结论临床免疫实验室在使用戊二醛消毒剂时,应密切观察显色剂颜色的改变,以便及时发现假阳性及假阴性影响,保证检验结果的准确性。     

HBcAb,HBcAg同时阳性的探讨

在我们日常工作中经常出现HBcAb、HBcAg同时阳性的血清标本,为了探讨其发生机制及临床意义,我们对500份血清标本进行了研究;现将结果报道如下．1材料和方法1．1标本来源所有的血清标本均来自我院门诊及住院患者,采用固相放射免疫和酶免疫吸附试验两种方法检测表面抗原、核心抗体,对两者都阳性的500份标本检测表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗原（放免法）。1．2试剂和仪器固相放射免疫试剂购于三V公司,酶免试剂购干上海荣盛生物技术公司,仪器分别使用GC-1200全自γ计数器和ZS板式酶标仪．1.3HBcAg检测原理将人血清加入内壁涂有…     

核酸检测与酶联免疫吸附试验在血液标本内乙肝病毒检测中的价值

目的研究核酸检测(NAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)在血液标准内乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)检测中的价值。方法20140例无偿献血者的血液标本为研究对象,先进行ELISA检测,对ELISA无反应性的标本再进行NAT,跟踪随访并分析检测结果。结果20140份血液标本中,ELISA检测双试剂阳性6份,单试剂阳性8份,双试剂阴性20126份。在双试剂阴性标本中,NAT检测呈阴性20111份,阳性15份,在确认阳性的15份标本中,对符合诊断条件的献血者进行追踪,ELISA阴性转化阳性3份,均在ELISA窗口期经过NAT检测确认,NAT检测中发现2份隐匿性HBV感染。结论NAT在临床检测中具有高灵敏度以及高特异性等优点,和ELISA相结合使用,一定程度上具有互补性,适用于血液检查中,能明显减少误诊情况发生,减少窗口期,对输血安全有重要意义。     

ELISA与免疫层析法检测抗-HIV假阳性1例病例报道及原因分析

目的 酶联免疫吸附法(ELISA)与免疫层析法检测抗-HIV假阳性1例原因分析.方法 采用两个厂家ELISA法试剂和1种免疫层析法抗-HIV试剂检测同一标本抗-HIV均阳性,同一标本及重新抽取的1份标本送往权威部门进行确证试验,结果抗-HIV阴性.结果 假阳性的主要原因是存在其它抗体的干扰.同一种检测方法不同的检测方式因其方法学的不同其结果也有明显的差异.结论 对于用ELISA法筛查出现阳性的标本,需认真核对初、复检标本,以保证检验结果的准确性和可靠性.     

乙型肝炎血清学模式对ELISA一步法检测HBsAg的影响

探讨 ＥＬＩＳＡ一步法检测两种不同乙型肝炎血清学模式标本的 ＨＢｓＡｇ吸光度值差异的原因。 方法：将同一时间内 ＥＬＩＳＡ一步法检测的所有 ＨＢａＡｇ阳性标本分为 ＨＢｅＡｇ阳性与 ＨＢｅＡｇ阴性两种血清学模 式,对其原血清及１∶１０稀释血清的ＨＢｓＡｇ吸光度值进行比较。结果：当用原血清做ＥＬＩＳＡ一步法试验时, ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ均阳性标本的ＨＢｓＡｇ吸光度值显著低于ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性标本,而将标本进行１∶１０稀 释后进行同步对比试验,则发现第一种血清学模式标本 ＨＢｓＡｇ吸光度值显著高于第二种模式标本 ＨＢｓＡｇ吸 光度值。结论：与ＨＢｅＡｇ阴性标本比较,ＨＢｅＡｇ阳性标本的ＨＢｓＡｇ滴度相对较高,而ＥＬＩＳＡ一步法检测高滴 度ＨＢｓＡｇ标本时,不可避免会出现显色淡,吸光度值偏低的结果,故应采用经典二步法操作。     

对合格献血员人群抗HBc阳性率的调查

目前献血员体验对乙肝指标仅要求HBsAg阴性,而对抗HBc不作要求。为了解献血员抗HBc阳性率,我院对1998年1～6月的合格献血员抗HBc进行了全面的检测,现报道如下。1 材料与方法试剂:中美合资上海华泰生物工程实业有限公司的“捷而准”酶免疫一步法试剂盒。仪器:奥地利SLT spectra-I型全自动酶标仪。取当天体检中全部合格献血员标本进行检测,并记录结果。每份标本测即原血清样品测定结果和将血清1:30稀释后的测定结果。2 结果对经筛选合格的献血员血样1250份进行检测,其中抗HBc阳性383份,阳性率为5.6％。调查结果,见表1。3 讨论乙肝核心抗体的滴度在发病期间较高,恢复期则下降,低滴度可在人体内保持10余年以至终身携带。抗HBc低滴度