羊栖菜褐藻糖胶CSFP-1抗肿瘤活性及机制研究

目的 分离纯化制备羊栖菜褐藻糖胶（CSFP-1）,并对其抗肿瘤活性及可能作用机制进行初步研究。方法 通过冷水浸提法制备羊栖菜褐藻糖胶（CSFP）,经超滤系统分离获得CSFP-1,并采用苯酚-硫酸比色法、PMP衍生化、高效液相色谱法、红外光谱分析等多种方法对其理化性质进行分析;采用MTT法评价CSFP-1（0、10、100、300 μg/mL）对宫颈癌细胞（HeLa）、肺癌细胞（A549）和肝癌细胞（Hep3B）生存能力的影响;应用流式细胞术评价CSFP-1对HeLa细胞细胞周期的影响;应用Western blotting技术评价CSFP-1对HeLa细胞凋亡和自噬相关蛋白表达的影响。结果 CSFP-1的糖含量为84.18%,糖醛酸含量为14.28%,硫酸根含量为10.02%,平均相对分子质量为5.6×10⁴,主要由半乳糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和木糖组成。CSFP-1具有选择性细胞毒性,对HeLa细胞生长发挥显著抑制作用（P<0.05、0.001）,对A549和Hep3B细胞存活率没有明显影响。与对照组比较,HeLa细胞经CSFP-1处理24 h后,G1期细胞比例明显增加（P<0.001）;经CSFP-1处理48 h后,S期细胞比例显著增加（P<0.05、0.01、0.001）,G2期细胞比例显著减少（P<0.01、0.001）,均呈现剂量相关性。与对照组比较,CSFP-1 100、300 μg/mL剂量组处理24 h,300 μg/mL剂量组处理48 h Bcl-2蛋白表达显著减少（P<0.05）;100、300 μg/mL剂量组处理24、48 h Beclin-1蛋白表达显著增加（P<0.05、0.01）,且存在时间和剂量相关性。结论 CSFP-1具有选择性抑制HeLa细胞增殖作用,作用机制可能与阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡相关。     

褐藻糖胶的免疫调节作用

观察了从海带中提取的褐藻糖胶对小鼠免疫功能的影响，褐藻糖胶在体外可诱导白细胞介素１（ＩＬ－１）和丙型干扰素（ＩＦＮ－γ）产生；体内给药可增强Ｔ细胞，Ｂ细胞，巨噬细胞（Ｍ）和自然杀伤细胞（ＮＫ细胞）功能，促进对绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）的初次抗体应答。     

褐藻糖胶抗血栓研究进展

褐藻糖胶是一种酸性硫酸化多糖，有多种生物活性和药理作用，其抗血栓活性尤为明显。褐藻糖胶能够抑制凝血酶的产生及活性，提高组织型纤溶酶原活化剂对纤溶酶原的激活作用，从而具有抗血栓形成和溶栓功能。     

褐藻糖胶药理活性研究进展

褐藻糖胶是一类来自于海洋褐藻和无脊椎动物的杂多糖,主要成分为硫酸化的岩藻糖及少量的半乳糖、甘露糖、木糖及糖醛酸等。现有研究表明,褐藻糖胶具有诸多药理活性,如抗氧化、抗肿瘤、抗凝血、免疫调节、抗菌抗病毒、降糖降血脂、神经保护等。本文对褐藻糖胶目前研究的主要药理活性进行了总结,以期为其进一步研究和开发提供参考。     

从海带中提取褐藻糖胶工艺的研究

目的以海带为原料研究褐藻糖胶的提取工艺。方法通过单因素和正交试验,摸索海带粒度、提取温度、提取溶剂、提取时间、料液比和醇沉体积分数对提取纯化褐藻糖胶的影响。结果提取纯化褐藻糖胶的最佳条件为:在20目的海带粉中加入15倍pH2的15g·L-1CaCl2溶液,在60℃下提取1.5h,提取液浓缩后加乙醇至体积分数为65%,使褐藻糖胶沉淀、离心、洗涤并干燥。结论采用该工艺从海带中提取纯化褐藻糖胶,成本低且效果较好。     

硫酸钡-比浊法测定褐藻糖胶中硫酸根的含量

目的 运用硫酸钡比浊法测定日高昆布中褐藻糖胶硫酸根的含量。方法 采用硫酸钡比浊法,通过分光光度计检测到最大吸收波长为360 nm;在此波长下测定褐藻糖胶中硫酸根的含量。结果 硫酸根在60~120 μg范围内线性关系良好(r²=0.990 9),测得褐藻糖胶中硫酸根的含量为(20.52±0.57)％;方法学符合测定要求。结论 该方法简单、准确、快速、灵敏度较高,适用于海藻多糖硫酸根含量的测定。     

褐藻糖胶促进小鼠巨噬细胞免疫活性及机制初探

目的 探讨褐藻糖胶(Fucoidan)对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响及初步探讨作用机制。方法 采用体外细胞培养方法,比色分析检测不同浓度Fucoidan(0、100、200、300、400、500 μg/mL)作用下RAW264.7吞噬中性红的能力,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度Fucoidan(0、50、250、500 μg/mL)作用下RAW264.7增殖,Western Blotting检测Fucoidan诱导的RAW264.7的MAPK/ERK1/2的磷酸化。结果 Fucoidan剂量依赖性地促进RAW264.7吞噬功能和增殖功能。200 μg/mL Fucoidan作用10min即使ERK1/2发生磷酸化,30min时ERK1/2磷酸化达到最大值。结论 Fucoidan可提高小鼠巨噬细胞的吞噬活性和增殖能力,其机制可能与Fucoidan直接激活RAW264.7的MAPK/ERK1/2信号转导通路有关。     

不同提取方法对褐藻糖胶理化性质的影响

目的 比较不同提取方法对褐藻糖胶理化性质的影响。方法 分别采用稀盐酸法和氯化钙从6种褐藻粗多糖中获得 12 种褐藻糖胶(Fucoidan),并进一步对其理化性质进行分析和比较。采用高效液相色谱法(HPLC)测定其单糖组成,离子色谱法(IC)测定其硫酸基含量,Folin-酚法测定其粗蛋白含量,高效凝胶渗透色谱与多角度激光散射仪联用法(HPGPC-MALLS)测定其绝对分子量。结果 稀盐酸法提取褐藻糖胶的得率显著高于氯化钙法,但所得褐藻糖胶的硫酸基含量和绝对分子量都明显降低。结论 稀盐酸法提取褐藻糖胶造成糖链断裂及硫酸基脱落,破坏褐藻糖胶的结构,因此采用氯化钙法更适合褐藻糖胶的提取。     

褐藻糖胶的抗肿瘤作用及构效关系研究进展

作为1种天然来源的海洋硫酸多糖,褐藻糖胶因其复杂的化学结构和独特的生物学功能,引起众多科学工作者的高度关注,近年来已成为海洋天然药物研究的热点。本文就褐藻糖胶的抗肿瘤作用及其相关机制进行综述。     

褐藻糖胶调节肠道菌群改善2型糖尿病

目的 探讨褐藻糖胶（fucoidan,FPS）对2型糖尿病（Type 2 diabetes millitus,T2DM）大鼠的疗效及肠道菌群的调节作用。方法 采用高脂饮食（high fat diet,HFD）联合链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导T2DM大鼠模型,灌胃给予FPS。给药2个月后取血清,测定空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、空腹胰岛素（fasting serum insulin,FINS）及血脂四项;取大鼠新鲜粪便样本进行16S r DNA测序,分析大鼠肠道菌群。结果 与空白组比较,模型组大鼠的FBG、FINS、血脂及肠道菌群都发生紊乱（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,FPS给药可以明显改善大鼠FBG、FINS和血脂四项等指标。16S r DNA分析表明,FPS可以提高菌群Alpha多样性,如丰富度和多样性;Beta多样性分析表明,FPS与空白组更为接近,表明FPS可以显著改善T2DM大鼠粪便菌群的整体结构。物种组成方面,在门水平上,FPS显著增加厚壁菌门（Firmicutes）丰度,并降低拟杆菌门（Bacteroidetes）、放线菌门（Actinobacteria）和变形菌门（Proteobacteria）丰度;在属水平上,FPS显著富集乳杆菌属（Lactobacillus）和毛螺菌属（Lachnospiraceae-NK4A136-group）,并降低拟杆菌属（Bacteroides）丰度。LEfSe分析表明乳杆菌属是FPS关键的差异菌种,Spearman相关性分析进一步表明乳杆菌属与FBG及TG呈显著负相关,并与HDL-C极显著正相关。结论 FPS可显著改善T2DM的糖脂代谢,其作用机制可能与调节肠道菌群,特别是与乳杆菌属密切相关。