癌基因P53、Nm23在胃癌中的表达与预后的意义

目的：探讨P53、Nm23蛋白在胃癌组织中的表达与预后关系。方法：应用免疫组化方法检测262例胃癌中P53蛋白和232例Nm23蛋白的表达。结果：P53蛋白阳性表达与否和PTNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况、病理组织学类型及术后1年生存率无明显关联（P＞0.05),而与术后3年、5年生存率呈负相关（P＜0.05)。Nm23低表达者第Ⅱ站以上淋巴结转移者多,阳性表达者无淋巴结转移者多（P＜0.01);Nm23过表达者术后3年、5年生存率高（P＜0.05)。结论：癌基因P53、Nm23蛋白可作为胃癌术后预后判断的重要参考指标。     

苦参碱调控mTOR/p70S6K信号通路对大鼠心肌肥厚的保护作用

目的:研究苦参碱对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对mTOR/p70S6K信号通路的调控。方法:大鼠皮下注射异丙肾上腺素建立慢性病理性心肌肥厚模型,将大鼠随机分为正常对照组、异丙肾上腺素(ISO)模型组、苦参碱(50,100,200 mg·kg^-1·d^-1)+ISO组和单用苦参碱(200 mg·kg^-1·d^-1)组。HE染色观察心肌病理变化;Western blot检测左心室组织中mTOR/p70S6K信号通路相关蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,ISO模型组大鼠的心肌细胞肥大、排列紊乱,可见不同程度的纤维化、间质水肿和炎细胞浸润;苦参碱(50,100,200 mg·kg^-1·d^-1)可减轻大鼠心肌细胞肥大、纤维化、间质水肿和炎细胞浸润等ISO致心肌组织病理学结构的异常改变。与正常对照组相比,ISO模型组心肌组织内p-mTOR、p-p70S6K和p70S6K的表达显著增加;苦参碱(50,100,200 mg·kg^-1)可逆转ISO致大鼠心肌组织中p70S6K表达的上调,同时下调mTOR Ser2448和p70S6K Thr389位点的磷酸化水平,且呈剂量依赖性;mTOR表达在各组之间均无差异;单用苦参碱组与正常对照组比较无显著性差异。结论:苦参碱具有抑制ISO致大鼠心肌肥厚的作用,其机制与抑制mTOR/p70S6K信号通路有关。     

lnc RNA H19和SIRT6在胃癌中的表达及与预后的关系

目的探讨lnc RNA H19和SIRT6在胃癌中的表达及与预后的关系。方法选择收治的胃癌患者132例,实时荧光逆转录法及酶联免疫吸附法测定lnc RNA H19和SIRT6在胃癌组织及胃组织中的表达水平。采用Kaplan-Meier法估计不同lnc RNA H19和SIRT6表达水平的胃癌患者生存率,并采用Log-rank检验进行比较。结果胃癌组lnc RNA H19 mRNA表达水平高于癌旁组、SIRT6 mRNA表达水平低于癌旁组(P<0.05);lnc RNA H19、SIRT6呈黄色或深棕黄色颗粒,定于细胞核;胃癌组lnc RNA H19阳性102例、SIRT6阳性98例,胃癌组lnc RNA H19阳性率高于癌旁组,SIRT6阳性率低于癌旁组(P<0.05);lnc RNA H19、SIRT6蛋白表达与年龄无相关性(P>0.05);与淋巴血管间隙浸润、病理学分级、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度、复发、肿瘤最大径有明显相关性,且有淋巴血管间隙浸润、病理学分期越高、TNM分期越高、有淋巴结转移、浸润深度越深、有复发、肿瘤最大径≥5 cm,lnc RNA H1...     

原发性胆囊癌组织中mTOR/p70S6K信号通路的表达及其临床病理学意义

目的探讨mTOR/p70S6K信号通路在原发性胆囊癌组织中的表达和临床意义。方法随机选取原发性胆囊癌患者86例,慢性胆囊炎患者15例,采用SABC免疫组化方法,检测胆囊癌组织和慢性胆囊炎症组织中mTOR及p70S6K蛋白的表达情况。并分析其与原发性胆囊癌组织临床病理学特征之间的关系。结果mTOR及p70S6K蛋白在原发性胆囊癌组织中的阳性表达率分别为77.91%（67/86）及80.23%（69/86）,显著高于两者在慢性胆囊炎组织中的阳性表达率。两者在原发性胆囊癌组织中的表达呈正相关（r=0.791,P〈0.01）。mTOR及p70S6K蛋白的阳性表达率与胆囊癌组织的分化程度、Nevin分期和淋巴结转移密切相关（均P〈0.05）,而与肿瘤直径、患者性别无明显关系。结论mTOR/p70S6K信号通路的特异性激活可能在原发性胆囊癌的发生、浸润、转移中起重要作用。     

p63和CK5/6在鳞癌组织中的表达及其鉴别诊断价值

目的　探讨p6 3蛋白和细胞角蛋白(cytokeratin ,CK) 5 / 6在鳞癌组织中的表达及其鉴别诊断价值。方法　采用免疫组织化学EliVision法检测10 2例鳞癌和98例非鳞癌组织p6 3和CK5 / 6蛋白表达。结果　p6 3在鳞癌和非鳞癌组织中的阳性率分别为98% (10 0 / 10 2 )和7 1% (7/ 98) ,前者高于后者(χ2 =16 5 . 99,P <0 . 0 1) ,CK5 / 6在鳞癌和非鳞癌组织中的阳性率分别为5 9. 8% (6 1/ 10 2 )和9 2 % (9/ 98) ,前者高于后者(χ2 =5 0 . 2 9,P <0 . 0 1) ;p6 3和CK5 / 6蛋白在鳞癌和非鳞癌组织联合表达率分别为39 .2 % (40 / 10 2 )和3 .1%(3/ 98) ,前者高于后者(χ2 =38 71,P <0 . 0 1)。结论　p6 3和CK5 / 6蛋白的联合表达有助于提高低分化鳞癌的诊断准确性。     

mTOR/p70S6K通路在缺氧/复氧诱导的分化后PC12神经细胞凋亡中的作用

目的探讨缺氧/复氧(H/R)诱导的分化后肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)通路的关系。方法实验分为正常对照(Con)组、H/R组、H/R+N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、H/R+雷帕霉素(Rapa)组、NAC组及Rapa组。应用MTT法检测细胞活性,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率,用活性氧试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)生成,Western blot检测Bax、Bcl-2、p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)的表达。结果H/R诱导分化后PC12神经细胞凋亡,Bax表达增加,Bcl-2表达降低,NAC或Rapa显著抑制H/R所致的细胞凋亡,逆转Bax及Bcl-2表达的变化;H/R增加分化后PC12神经细胞内ROS水平,NAC显著抑制H/R所致细胞内ROS水平的增加,而Rapa对细胞内ROS水平无明显影响;H/R增加分化后PC12神经细胞p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)的表达,NAC或Rapa显著抑制H/R所致细胞p-mTOR(Ser2448)及p-p70S6K(Thr389)表达的增加。结论 H/R可能通过升高细胞内ROS水平,进而激活mTOR/p70S6K信号通路,诱导分化后PC12神经细胞凋亡。     

mTOR/P70S6K 信号通路在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨 mTOR/ P70S6K 信号通路在宫颈癌组织中的表达水平及其相关临床诊断、治疗意义。方法收集2012年1月—2014年1月手术切除或进行活检的正常宫颈组织65例,宫颈癌组织、癌旁组织各85例,提取组织中的 mRNA,应用 RT-PCR 的方法来检测3种组织中 mTOR 和 P70S6K mRNA 的表达水平,并进行分析。结果宫颈癌组织中 mTOR、P70S6K mRNA 的表达明显高于癌旁组织及正常组织(P <0．05),mTOR、P70S6K mRNA 水平在宫颈癌组织、癌旁组织及正常组织中均呈正相关(P <0．05)。结论 mTOR 信号通路在宫颈癌组织中处于活化状态,其在宫颈癌的发生发展以及向其他部位转移中具有重要作用,是一个诊断和治疗的分子靶点。     

TTF-1、Napsin A、CK7、P63和CK5/6在肺癌活检组织学分型中的诊断价值

目的观察TTF-1、Napsin A、CK7、P63和CK5/6在肺活检标本中不同肺肿瘤内的差异表达结果,探讨它们在各类型肺癌鉴别诊断中的价值,寻找最经济有效的抗体组合。方法 209例肺穿刺活检和支气管镜检标本中,原发肺癌202例,转移性腺癌7例。原发癌中,非小细胞癌162例,其中腺癌(AC)102例,鳞状细胞癌(SCC)55例,大细胞癌(LCC)5例;小细胞癌(SCLC)40例。通过免疫组织化学染色,观察TTF-1、Napsin A、CK7、P63和CK5/6在肿瘤中的表达情况。结果判定:阳性瘤细胞数≥10%为阳性,阳性瘤细胞数<10%为阴性。结果 TTF-1在小细胞癌中表达率最高为97.5%(39/40),在鳞状细胞癌中表达率最低为3.6%(2/55)。TTF-1和Napsin A在肺腺癌具有较高特异性,分别为96%、100%,而CK7具有较高敏感性(100%);P63在鳞状细胞癌具有较高特异性(96%),而CK5/6具有较高敏感性(95%)。结论肺活检取材较少的小标本,在鉴别低分化腺癌与低分化鳞状细胞癌、小细胞癌与低分化鳞状细胞癌较困难时,辅助免疫组织化学染色,联合应用TTF-1、Napsin A、P63和CK5/6,是一组最经济有效的抗体组合,同时也有助于对肺原发性腺癌与转移性腺癌的鉴别。     

mTOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨m TOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达水平及其相关临床诊断、治疗意义。方法收集2012年1月—2014年1月手术切除或进行活检的正常宫颈组织65例,宫颈癌组织、癌旁组织各85例,提取组织中的mRNA,应用RT-PCR的方法来检测3种组织中m TOR和P70S6K mRNA的表达水平,并进行分析。结果宫颈癌组织中m TOR、P70S6K mRNA的表达明显高于癌旁组织及正常组织(P<0.05),m TOR、P70S6K mRNA水平在宫颈癌组织、癌旁组织及正常组织中均呈正相关(P<0.05)。结论 m TOR信号通路在宫颈癌组织中处于活化状态,其在宫颈癌的发生发展以及向其他部位转移中具有重要作用,是一个诊断和治疗的分子靶点。     

P504 s、p63、CK34βE12、PSA在前列腺癌中的表达及其临床意义

前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤.为了探讨P504 s、P63、CK34βEl2、PSA表达在前列腺癌诊断和鉴别诊断中的价值,提高前列腺癌早期诊断的准确性.本文综述了近年来国内外相关文献,认为联合检测P504 s、P63、CK34βEl2、PSA可以提高前列腺癌早期诊断的准确性,并对鉴别良、恶性病变有实际临床意义.     

白介素-1β、白介素-6在胃癌组织中的表达及与幽门螺旋杆菌感染的关系探讨

目的:研究白介素-1β、白介素-6两种细胞因子在胃癌组织中的表达及与幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的关系,为寻找有效的胃癌预防措施提供理论依据。方法:用免疫组织化学法检测50例胃癌和50例健康志愿者胃组织中IL-1βI、L-6蛋白表达;用快速尿素酶法检测上述患者胃组织的Hp感染情况。结果:胃癌患者血清的IL-1βI、L-6表达均明显高于健康对照组,结果有显著性差异(P<0.05);而Hp感染情况检测亦发现二组有显著性差异(P<0.05);同时Hp感染者IL-1β、IL-6表达与未感染者比较亦有显著性差异(P<0.05)。结论:IL-1βI、L-6可能参与胃癌的早期形成,Hp感染可能是其过度表达的机制之一。     

MUC5B、MUC6在骨肉瘤中的表达及意义

目的 研究黏蛋白5B(MUC5B)、黏蛋白6(MUC6)在骨肉瘤中的表达及临床意义.方法 选取2014年4月至2017年4月经手术切除的骨肉瘤标本67例,取骨纤维异常增殖73例和正常骨组织标本87例作为对照组,采用免疫组化法测定受试者骨肉瘤组织中MUC5B和MUC6表达水平,分析二者表达水平与骨肉瘤临床病理特征的关系,...     

脑苷肌肽对缺氧缺血性脑病新生大鼠SIRT1/mTOR/p70S6K通路及神经元凋亡的影响

目的 探讨脑苷肌肽对缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)通路及神经元凋亡的影响.方法 采用结扎左侧颈总动脉及缺氧玻璃仓的方法建立新生大鼠HIE模型,造模大鼠随机分为5组:模型组、脑苷肌肽低剂量组(0.8 m...     

P16基因和HER2/neu基因在胃癌组织中的表达及其意义

目的研究P16基因和HER2/neu在胃癌中的表达及其临床意义。方法选取未经术前放、化疗的胃癌标本112例及癌旁组织20例,通过免疫组织化学SP法检测两组P16基因和HER2/neu基因的表达情况,分析两者的表达与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织P16基因阳性表达率低于癌旁正常黏膜组织,而HER2/neu基因阳性表达率高于癌旁正常黏膜组织;P16的表达与胃癌分化程度和胃癌组织中HER2/neu的表达呈负相关。HER2/neu的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关。结论 P16基因的缺失可能在胃癌的发生发展过程中发挥重要作用;HER2/neu的过表达提示预后较差。     

胃癌组织中雷帕霉素靶蛋白/70 ku核糖体蛋白S6激酶信号通路的表达及临床意义

目的 分析雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、70 ku核糖体蛋白S6激酶（P70S6K）的表达水平与胃癌常见临床病理因素的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应技术,蛋白质印迹技术（Western-blot）检测32例胃癌患者癌组织、癌旁胃组织以及22例非胃癌患者胃组织中磷酸化雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及磷酸化70 ku核酸体蛋白S6激酶（P70S6）K mRNA和蛋白水平的表达情况.结果 p-mTOR mRNA在胃癌组织中的表达水平（0.61±0.11）明显高于癌旁胃组织（0.43±0.10）及非胃癌胃组织（0.39 ±0.07）,p-P70S6KmRNA在胃癌组织中的表达水平（0.63 ±0.13）亦明显高于癌旁胃组织（0.45 ±0.14）及非胃癌胃组织（0.44±0.15）,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;mTOR mRNA和P70S6K mRNA在胃癌组织中的表达呈正相关（r=0.521,P=0.033）;Western-blot检测结果也证实p-mTOR及p-P70S6K在胃癌组织中的表达高于癌旁胃组织及非胃癌胃组织;mTOR及P70S6K mRNA在胃癌组织中的表达水平与病理分期、淋巴结转移等明显相关,而与肿瘤直径、性别等无明显关系.结论 mTOR/P70S6K信号通路在胃癌组织中过度表达可能是胃癌发生的重要机制之一.     

欧前胡素调节MAPK/mTOR/p70S6K信号通路对急性髓系白血病细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨欧前胡素(IMP)对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学行为的影响以及对MAPK/mTOR/p70S6K信号通路的调节机制。方法 将人AML细胞HL-60进行培养传代,并分为对照组(未处理组),ERK抑制剂组(PD98059组),IMP低、中、高剂量组,IMP高剂量+ERK激活剂组(IMP高+Cearoin组),每组均设置6个重复。MTT法检测IMP对HL-60细胞的毒性;MTT法、软琼脂克隆形成实验检测HL-60细胞的增殖活性;流式细胞仪术检测HL-60细胞凋亡;Transwell小室检测HL-60细胞迁移和侵袭能力;ELISA检测HL-60细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平;Western blot检测通路相关蛋白及Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达。结果 与未处理组比较,PD98059组和IMP低、中、高剂量组HL-60细胞的存活率、克隆形成数量、迁移和侵袭数量、促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及ERK1/2、mTOR、p70S6K磷酸化水平、Bcl-2表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、自噬相关蛋白Becl...     

EGFR、CK5/6在三阴性乳腺癌中的表达及临床病理意义

目的 探讨三阴性乳腺癌(TNBC)中EGFR、CK5/6的表达与TNBC患者临床病理特征之间的关系.方法 回顾性分析135例TNBC的临床病理资料,用免疫组织化学法检测EGFR、CK5/6的表达情况,并统计二者与患者临床病理资料间的关系.结果 135例TNBC中,106例(78.5％)表达EGFR和/或CK5/6,二者的单独表达率分别为68.9％、53.3％.二者的表达与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移情况差异均无统计学意义,而与Ki67有统计学意义.结论 TNBC中EGFR、CK5/6的表达率较高,EGFR、CK5/6的表达与Ki67表达有关,二者可能与TNBC患者的预后不良有关.     

miR-10b 通过mTOR/P70S6K 信号通路对宫颈癌大鼠的作用机制研究

目的探讨miR-10b通过mTOR/P70S6K信号通路对宫颈癌大鼠的作用机制。方法采用人宫颈癌HeLa细胞株构建宫颈癌大鼠模型,分为Gg组(宫颈癌大鼠)、Gm组(注射miR-10b-mimics)、Gi组(注射miR-10b-inhibitions)。采用HE染色观察癌组织变化,Western blotting、RT-PCR检测mTOR/P70S6K的mRNA和蛋白表达水平,Transwell检测HeLa细胞的侵袭能力。结果Gg组肿瘤组织出现丰富的血供,界限分明,切面呈鱼肉状,肿瘤细胞大小较为均等;Gm组肿瘤组织中有大量纤维血管形成,肿瘤细胞大小不等,胞浆着色较深;Gi组肿瘤组织中纤维血管较少,胞浆着色稍浅。Western blotting结果显示,mTOR/P70S6K蛋白表达水平为Gm组Gg组>Gm组(P<0.05),miR-10b mRNA水平为Gi组Gg组>Gm组(P<0.05)。结论miR-10b过表达可激活mTOR蛋白,增加P70S6K活性,抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移,有望成为宫颈癌治疗的新靶点。     

芦荟大黄素对胃癌SGC-7901细胞凋亡、自噬及p53/AMPK/mTOR信号通路的影响

摘 要 目的：探讨芦荟大黄素（AE）对胃癌SGC-7901细胞凋亡、自噬及p53蛋白（p53）/磷酸腺苷蛋白激酶（AMPK）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的影响。 方法: 实验分为对照组（AE 0 μmol·L-1）、AE低（10 μmol·L-1）、中（30 μmol·L-1）、高（50 μmol·L-1）剂量组和自噬阻断剂3 甲基腺嘌呤（3 MA）+ AE组（20 μmol·L-1+50 μmol·L-1）。CCK 8法检测各组细胞增殖抑制率,采用透射电镜及单丹磺酰尸胺（MDC）染色观察各组细胞自噬体及自噬溶酶体的变化,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记测定（TUNEL）法观察各组细胞凋亡率变化,Western blot法检测各组细胞p53、AMPK、mTOR信号通路蛋白及自噬标致蛋白Beclin 1蛋白（Beclin 1）、微管相关轻链蛋白Ⅰ（LC3Ⅰ）及微管相关轻链蛋白Ⅱ（LC3Ⅱ）表达情况。 结果: 与对照组相比,AE各剂量组及3 MA+AE组细胞的增殖抑制率、凋亡指数（AI）显著升高（P<0.05）,且呈剂量依赖性;AE中、高剂量组的增殖抑制率和AI与3 MA+AE组相比差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,AE各剂量组细胞自噬体、自噬空泡增多,溶酶体积分光密度（IOD）/所选区域面积（Area）值及p53、AMPK、Beclin 1表达显著升高,mTOR表达及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值显著降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性;3 MA+AE组细胞自噬体、自噬空包等超微结构减少,IOD/Area值及p53、AMPK及Beclin 1表达显著降低,mTOR表达及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值显著升高（P<0.05）。 结论: AE可通过提高胃癌SGC-7901细胞自噬水平,诱导SGC-7901细胞凋亡,其机制可能与促进p53/AMPK/mTOR信号通路表达有关。