现时金银花与山银花比较鉴别分析

目的对市售金银花与山银花真伪与种类鉴别的方法进行研究同时考察商品质量。方法采用体视显微、薄层色谱、液-质联用、标识成分(绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙)含量测定等方法对获得的27批样品进行了比较检定。结果花表面腺毛非腺毛的有无及形态、花萼特征、是否检出灰毡毛忍冬皂苷乙可作为鉴别金银花与山银花的依据;27批样品中,16批为金银花,其中1批掺有加重粉;11批为山银花,其中7批灰毡毛忍冬、2批红腺忍冬、1批华南忍冬、1批黄褐毛忍冬。结论体视显微特征和薄层色谱法可鉴别金银花与山银花,结合高效液相测定结果实现了对27批样品的质量考察与比较鉴别研究。     

薄层色谱法鉴别双黄连口服液中金银花成分的改进

目的对双黄连口服液中金银花的薄层色谱鉴别方法进行改进,并对其中是否使用山银花进行鉴别。方法采用薄层色谱法,先将供试品用乙酸乙酯和水饱和正丁醇分别提取后,制备成两份供试品溶液,再以金银花中成分木犀草苷、绿原酸以及山银花中的特征成分灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙作为对照品,分别点于高效预制硅胶G60薄层板上,利用两个展开系统,展开。一份喷以1％三氯化铝乙醇溶液,于紫外光灯（365nm）下检视并成像;另一份喷以10％硫酸乙醇溶液,于105℃加热至条斑显色清晰,目光下检视并成像,进行分析。结果通过对两份薄层色谱图像分析比较,4份供试品均可检出绿原酸、木犀草苷,未检出山银花中的特征成分灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙,阴性对照样品均显示无干扰。结论该法可快速有效地对双黄连i：2服液中金银花成分进行鉴别和质量控制。     

HPLC-UV-ELSD测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量

目的:建立同时测定传统中药山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量的HPLC分析方法。方法:采用Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相0.4%醋酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~12 min,80%A;12~13min,80%A→67%A;13~30 min,67%A→65%A;30~35 min,65%A→80%A),流速0.5 mL.min-1;UV检测:检测绿原酸,λ=326nm;ELSD检测:检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙,雾化室温度88℃,漂移管温度108℃,N2气流量1.0 L.min-1。结果:线性范围内3个化合物呈良好的线性关系(R2>0.9959),加样回收率在99%~101%之间(n=6),该方法精密度、稳定性和重复性良好,RSD<2%。结论:该方法能够方便、准确地测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。     

灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中3种成分含量的变化研究

目的 比较灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。方法 色谱柱：CAPCELL PAK C₁₈ MG（250 mm×4.60 mm,5 μm）;流动相：乙腈（A）-0.4%醋酸溶液（B）,梯度洗脱;流速：1.0 mL·min^-1;紫外检测波长：330 nm;蒸发光散射检测器条件：漂移管温度110℃,气体流速3.0 L·min^-1,撞击器关;柱温：30℃。收集不同发育期（幼蕾期、三青期、大白期、银花期、金花期、凋花期）花蕾样品,采用HPLC-UV-ELSD串联技术,以外标两点法计算绿原酸的含量,以外标两点法对数方程计算灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。结果 灰毡毛忍冬中绿原酸和川续断皂苷乙含量以三青期最高,分别为6.934%,1.800%;灰毡毛忍冬皂苷乙以幼蕾期最高,为9.351%,较三青期高0.227%。结论 通过对灰毡毛忍冬花蕾不同发育期的含量比较可见,最佳采收期为三青期,此时绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量高。     

复方鱼腥草片中山银花检查方法的建立

摘 要 目的： 对复方鱼腥草片中金银花的质量进行研究。方法: 建立以灰毡毛忍冬皂苷甲、灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙为对照的HPLC ELSD和LC MS/MS法检查山银花的方法。结果: HPLC-ELSD法适用于复方鱼腥草片中山银花的检查,并采用LC-MS/MS法对结果进行验证,能鉴别出样品中所用正伪品金银花药材。结论: 上述2种方法均可用于控制复方鱼腥草片中金银花的质量。     

灰毡毛忍冬花蕾提取物及其两种主要皂苷的溶血性研究

目的评价灰毡毛忍冬花蕾提取物、灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙的体内外溶血作用。方法采用肉眼观察法和紫外分光光度法,观察灰毡毛忍冬花蕾提取物、灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙浓度梯度为5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100 mg·L-1的溶液在体外对2%兔红细胞悬浮液的溶血反应;采用血液生化指标测定方法,分别检测灰毡毛忍冬花蕾提取物2.275 g·kg-1(生药)和1.137 g·kg-1(生药)组、灰毡毛忍冬皂苷乙0.110 g·kg-1和0.055 g·kg-1组、川续断皂苷乙0.020 g·kg-1和0.010 g·kg-1组以及生理盐水组,在小鼠尾静脉给药前及连续给药7 d后,血液中红细胞数、网织红细胞数、血红蛋白含量。结果在体外溶血试验中,各给药组溶血率均<5%,与对照组相比均未见明显的溶血现象(P>0.05);在体内溶血试验中,各组小鼠用药前后,血液红细胞数、网织红细胞数、血红蛋白含量均处于正常范围内,且其数值在给药前后无差异(P>0.05)。结论在本试验条件下,灰毡毛忍冬花蕾提取物、灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙,在体外和体内试验均未导致溶血。     

一测多评法同时测定山银花药材中5种皂苷类成分的含量

目的:建立同时测定山银花药材中5种皂苷类成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,以灰毡毛忍冬皂苷乙为内标,计算其对灰毡毛忍冬皂苷甲、川续断皂苷乙、灰毡毛忍冬次皂苷甲和灰毡毛忍冬次皂苷乙的相对校正因子(RCF),通过RCF计算上述4种皂苷类成分的含量;以外标法测定的上述皂苷类成分含量作实测值,比较计算值与实测值的差异。结果:灰毡毛忍冬皂苷甲、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙、灰毡毛忍冬次皂苷甲和灰毡毛忍冬次皂苷乙检测进样量线性范围分别为0.316~6.32μg(r=0.997 3)、0.453~9.06μg(r=0.998 2)、0.231~4.62μg(r=0.999 6)、0.342~6.84μg(r=0.998 4)、0.147~2.94μg(r=0.996 1);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率试验的RSD分别为97.74%~104.51%(RSD=2.37%,n=6)、96.70%~103.20%(RSD=2.37%,n=6)、96.12%~103.61%(RSD=2.45%,n=6)、98.80%~104.70%(RSD=2.32%,n=6)、99.21%~102.92%(RSD=1.39%,n=6)。计算值与实测值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于山银花药材中5种皂苷类成分含量的同时测定。     

金银花与山银花的鉴别方法研究

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)定性鉴别方法,以区分金银花与山银花及其制剂。方法以灰毡毛忍冬皂苷乙为指标成分,十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.4%醋酸为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,用蒸发光散射检测器。结果金银花及其制剂未检出灰毡毛忍冬皂苷乙,山银花及其制剂均检出。结论建立的HPLC-ELSD定性鉴别方法,可用于金银花及其提取物和制剂中非法添加山银花的检查,为规范金银花药材市场提供技术支持。     

HPLC-MS/MS同时测定银花芒果片中11种成分的含量

目的 建立HPLC-MS/MS同时测定银花芒果片中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙、芒果苷、槲皮素、咖啡酸、木犀草苷、阿魏酸、桔梗皂苷D、橙皮苷和甘草苷含量的方法.方法 采用Agilent Porshell SB-C18柱(4.6 mm×50 mm,2.7 μm),以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱...     

银柴颗粒中山银花藤检查方法的研究

目的建立HPLC-ELSD和LC-MS/MS测定方法,对银柴颗粒进行山银花藤检查。方法以山银花藤中的特征性成分灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙为指标,采用HPLC-ELSD法进行限量检查,并采用LC-MS/MS法对结果进行验证。结果在收集的24批样品中,有6批样品检出了灰毡毛忍冬皂苷乙,可能存在以山银花藤替代忍冬藤投料的情况。结论建立的检查方法准确、可靠,专属性强,可用于检查银柴颗粒中山银花藤的使用情况。     

HPLC-MS法测定双黄连口服液中木犀草苷和绿原酸的含量并评价二者对成品质量的影响

目的:建立测定双黄连口服液中主要成分木犀草苷含量的方法,并探讨木犀草苷和绿原酸对成品质量控制的影响。方法:木犀草苷含量测定采用高效液相色谱-质谱联用法。色谱柱为Agilent HC-C18柱,流动相为0.2%磷酸(A)-乙腈(B)(梯度洗脱),流速为1mL·min-1,检测波长为350nm,进样量为10μL,柱温为25℃;绿原酸的含量测定采用2010年版《中国药典》(一部)双黄连口服液项下方法。通过测定9批双黄连口服液样品和4个模拟样品中木犀草苷和绿原酸的含量分析二者对成品质量的影响。结果:木犀草苷检测浓度在3.9～39.0μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为99.5%,RSD=3.6%。9批双黄连口服液中木犀草苷的含量为5.56～30.20μg·mL-1,有较大差异;绿原酸的含量为0.71～0.94μg·mL-1,差异不大。4个模拟样品中木犀草苷的含量为0～33.28μg·mL-1,有较大差异;绿原酸的含量为1.07～1.23μg·mL-1,差异不大。结论:仅测定绿原酸来表征双黄莲口服液中金银花的含量有失准确、专属和有效,建议在双黄连口服液质量标准中增加木犀草苷的含量测定。     

HPLC同时测定山银花中绿原酸和木犀草苷的含量△

目的:建立同时测定山银花中绿原酸和木犀草苷含量的高效液相色谱法。方法:采用Phenomenex LunaC18柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,以乙腈和0.4%醋酸溶液进行梯度洗脱,检测波长350nm。结果:绿原酸在77.15～771.5mg·L-1线性关系良好,平均回收率在101.7%(RSD1.71%);木犀草苷在1.536～15.36mg·L-1线性关系良好,平均回收率在101.6%(RSD2.03%)。结论:该方法简便,准确,快速易行,可同时测定山银花中绿原酸和木犀草苷的含量。     

泸州古蔺山银花指纹图谱及一测多评同时检测研究

目的:建立HPLC指纹图谱及一测多评同时检测泸州古蔺山银花中9个成分的质量分析方法。方法:以绿原酸为参照物,建立泸州古蔺山银花HPLC指纹图谱,并采用斜率校正法计算其与新绿原酸、隐绿原酸、獐牙菜苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙的相对校正因子,分别用外标法和一测多评法计算含量。结果:建立了10批古蔺山银花HPLC指纹图谱,相似度均在0.99以上,标定了11个共有峰,指认了其中9个共有峰,并分别采用外标法和一测多评检测其含量,二者无显著差异。结论:实验将一测多评和指纹图谱相结合评价泸州古蔺山银花的质量,该方法准确、简便、可行,为更全面控制山银花的质量提供参考依据。     

金银花中绿原酸和木犀草苷的含量测定

目的：建立同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量的高效液相色谱方法。方法：以乙腈-四氢呋喃（95∶5）为流动相A,0.4%磷酸为流动相B,采用梯度洗脱,0~8 min为88%,8~10 min为80%,10~25 min为80%~75%;绿原酸和木犀草苷的检测波长分别为327 nm和350 nm;流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,进样量为20μL。结果：应用梯度洗脱得到较好的分离效果,绿原酸浓度在10.18~162.88μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9）;木犀草苷浓度在2.01~20.12μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999 7）。结论：该方法准确,操作简便,可用于金银花中绿原酸和木犀草苷含量的同时测定。     

高效液相色谱法测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量

目的：建立高效液相色谱（HPLC）法测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量。方法：流动相：0．5％冰乙酸-乙腈,线性梯度洗脱：0—20min（90：10—78：22）,20～35min（78：22～76：24）,35—37min（76：24～65：35）,37—40min（65：35—90：10）;流速：1．0ml／min;检测波长：绿原酸为326nm,木犀草苷为350nm;柱温：30℃;色谱柱：依利特HypersilODS2（4．6mm×250mm,5μm）;进样量：10μl。结果：绿原酸的质量浓度在0．0216～0．1080mg／ml内与峰面积具有良好的线性关系,回归方程为Y=26347606．4815X-76704．9000（R^2=0．9990）。木犀草苷的质量浓度在0．000416—0．002080mg／ml内与峰面积具有良好的线性关系,回归方程为Y=28566947．1154X＋22．1500（R^2=0．9991）。70％甲醇超声提取方法较好,金银花提取物中绿原酸和木犀草苷的含量分别为3．416％和0．124％,这2种成分在24h内稳定性良好。结论：该方法简便、准确、快速易行,且该色谱条件可测定金银花中2种成分的含量。     

野菊花提取物的质量标准研究

目的建立野菊花提取物的质量标准。方法以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（7：3：1：1.2）为展开剂,以2%三氯化铝乙醇溶液为显色剂,采用TLC法对野菊花提取物进行鉴别。采用HPLC法,色谱柱为AgilentEclipse,分别以甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸（5：6：89）、甲醇-0.5%冰醋酸（47：53）为流动相,检测波长均为326nm测定绿原酸、咖啡酸和蒙花苷的含量。结果在TLC色谱中检出野菊花提取物中的绿原酸、木犀草苷、蒙花苷。HPLC法中绿原酸、咖啡酸和蒙花苷的线性关系良好,平均回收率分别为101.12%、101.63%和100.37%,RSD分别为3.08%、1.61%、1.97%。结论所建立的方法简便可行,重现性好,可用于野菊花提取物的质量控制。     

RP-HPLC法测定独一味胶囊中木犀草苷的含量

目的:建立测定独一味胶囊中木犀草苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为UltimateXB-C18,流动相为甲醇(A相)-0.2%醋酸溶液梯度洗脱(0～35min,A相33%;35～37min,A相33%～70%;37～47min,A相70%;47～50min,A相70%～33%),检测波长为349nm,流速为1.0mL·min-1,进样量为10μL,柱温为30℃。结果:木犀草苷进样量在0.0411～2.0560μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9998);平均加样回收率为98.06%、96.71%、95.75%,RSD=1.70%。结论:该法稳定、简便,可用于独一味胶囊的质量控制。     

HPLC法测定抗601合剂中绿原酸的含量

目的建立抗601合剂中金银花有效成分绿原酸含量测定的方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Hy-persil ODS(4.0 mm×125 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(15∶85∶0.5),流速1.0 ml.min-1,检测波长为327 nm,柱温27℃。供试品溶液加50%甲醇-水溶液,超声震荡,取上清液。结果绿原酸进样浓度在0.2～2μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.3%,RSD为0.79%(n=6)。结论所用方法准确、简便可行、重现性好,可作为抗601合剂的质量控制方法。     

口炎清咀嚼片质量标准研究

目的:建立口炎清咀嚼片的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对金银花、玄参和甘草进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量:色谱柱为Hypersil ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(19∶81),检测波长为327nm,流速为0.8mL·min-1。结果:TLC斑点清晰集中;绿原酸检测浓度在11.3~101.7μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9991);平均回收率为99.04%,RSD=1.31%(n=9)。结论:所建标准可用于口炎清咀嚼片的质量控制。     

HPLC法测定双花颗粒中绿原酸的含量

目的:建立测定双花颗粒中绿原酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Shimpack VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸(10:90),检测波长为326nm,流速为1.0m L.min-1,柱温为30℃。结果:绿原酸的进样浓度在5.4～54.0μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997);平均加样回收率为99.05%,RSD=4.22%(n=9)。结论:本方法准确、简便、可靠,可用于双花颗粒的质量控制。