槐耳菌丝体多糖的分离和分析

由固体培养法得到的槐耳菌丝体,经沸水提取,氯仿-正丁醇除蛋白、乙醇沉淀,分离制备的多糖具有明显提高机体免疫功能的作用,组成分析表明槐耳多糖为蛋白结合多糖,组成单糖为L-岩藻糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖。     

分枝杆菌多糖的制备及对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:制备分枝杆菌多糖并考察其对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法:用苏通培养基培养分枝杆菌,菌体脱脂后,用5种方法提取,比较多糖得率,并用正交试验优化超声提取工艺,再用稀碱提取残渣,粗多糖经Sevag法除蛋白、DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱纯化后得到分枝杆菌多糖;用MTT法检测分枝杆菌多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果:超声后热水提取多糖得率最高,超声提取的优化工艺是提取时间40 min,固液比为1∶150,超声功率600 W;单因素试验优化的Sevag法除蛋白条件为体积比1∶5,萃取时间为20 min,萃取6次;提取得到的4种多糖组分在6.25~50 mg.L-1范围内均能显著促进脾淋巴细胞的增殖。结论:用本实验工艺成功制备了分枝杆菌多糖,制备物具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。     

富锗金针菇多糖的分离纯化及结构的初步鉴定

目的 为研究富锗金针菇多糖抑制乙肝病毒的有效性,对其多糖进行分离纯化,并确定其结构。方法 SEVAG法去蛋白,得到半精品多糖。经DEAE-sephadex A-25柱层析得到精品多糖。用硫酸-蒽酮法,染料结合比色法测定其糖、蛋白含量。结果 多糖为一种中性多糖,几乎不含蛋白。结论 该多糖的分子量为5.4×10~4。其单糖组成仅为D-葡萄糖,属均一多糖类。     

人工培养蛹虫草多糖的研究

以人工培养蛹虫草为原料 ,分离纯化得到蛹虫草多糖 (CMPS) ,经紫外扫描测定其为糖蛋白 .用凝胶过滤色谱法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法验证了纯度 .测定了多糖的分子质量、糖含量和糖醛酸含量、单糖组成及摩尔比、蛋白含量及氨基酸组成、苷键构型等     

桦褐孔菌多糖的纯化及其单糖组成分析

目的对桦褐孔菌多糖进行纯化,并对其中的单糖组成进行研究。方法桦褐孔菌粗多糖经过脱蛋白、脱色得到纯化多糖。柱前衍生化后利用气相色谱分析得到多糖的单糖组成。结果酶法+TCA法蛋白脱除率较高,为82.32%;多糖保留较多,为76.13%。聚酰胺层析柱法多糖脱色效果最好,脱色率高达93.39%,并且多糖保留率也高达81.68%。多糖脱蛋白后的纯度从之前的21.5%提升到80.4%,脱色后的纯度从80.4%提升到85.2%。桦褐孔菌的多糖主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,各单糖质量百分数分别占3.84%、3.69%、3.32%、18.52%、27.30%、28.17%。结论桦褐孔菌多糖最佳脱蛋白方法为酶法+TCA法,最适宜的脱色方法是聚酰胺层析柱法。气相色谱分析方法简便、灵敏,不但多糖纯度高,而且可以准确测出桦褐孔菌多糖中单糖组成。     

牛膝多糖的提取纯化工艺研究

目的:研究牛膝多糖的提取、纯化工艺。方法:采用水煎煮法提取牛膝药材,得粗多糖,经脱蛋白、脱盐和醇沉3步纯化,制备牛膝多糖。以总多糖含量为指标,优选最佳提取纯化工艺。结果:水煎煮的最佳工艺为10倍量水,提取3次,每次2h;脱蛋白工艺中,三氯乙酸(TCA)法优于Sevage法和鞣酸法;脱盐工艺中,分子筛法优于透析法;醇沉使用80%的乙醇。结论:以水煎煮法提取,经脱蛋白、脱盐和醇沉工艺得到的牛膝多糖中总多糖含量及其纯度均较高,可为其药理及制剂研究提供原料。     

翡翠贻贝多糖的制备及体外对Hela肿瘤细胞生长的抑制作用

目的制备翡翠贻贝多糖（PVPS）,并对其体外抗肿瘤活性进行研究。方法采用热水提取,Sevage-酶联用法除蛋白分离得到翡翠贻贝粗多糖,再经DEAE-Sepharose和Sepharose CL-6B柱层析纯化得到PVPS。MTT法研究其体外抗Hela肿瘤细胞的活性。结果PVPS的得率为0.86%,PVPS在25mg/L、50mg/L、100mg/L浓度时对体外培养的Hela肿瘤细胞有不同程度抑制作用（P〈0.05或P〈0.01）。结论从翡翠贻贝中制备得到的PVPS具有体外抑制肿瘤细胞生长的作用。     

杏鲍菇子实体多糖的提取和纯化工艺研究

杏鲍菇是一种珍贵食用菌,杏鲍菇多糖具有多种生物活性,本文对杏鲍菇子实体中多糖的最佳提取条件进行了筛选,同时,应用sevage法除蛋白,乙醇沉淀,离心,真空干燥,得到多糖粗品。再用DEAE-纤维素层析法进行多糖的分离和纯化,最后采用紫外光谱扫描、琼脂糖凝胶电泳和高效液相色谱进行分析检测,最后获得单一多糖组分。     

喹诺酮类药物对大鼠软骨细胞体外培养的影响

目的评价4种喹诺酮类药物(环丙沙星、左氧氟沙星、氟罗沙星、帕珠沙星)对幼龄大鼠软骨细胞的相对毒性,以及大鼠周龄、细胞培养时间对大鼠软骨细胞体外增殖和蛋白多糖分泌的影响.方法采用大鼠软骨细胞体外培养技术,将4,8,12周龄大鼠的软骨细胞在各含不同药物的培养基中培养一定时间后,以MTT法和DNB法进行测定.结果4种喹诺酮类药物对4周龄大鼠软骨细胞体外增殖和蛋白多糖分泌均有抑制作用,其顺序为环丙沙星＞左氧氟沙星＞氟罗沙星＞帕珠沙星.环丙沙星对大鼠软骨细胞体外增殖的抑制作用随大鼠周龄的增大而减弱,随培养时间的延长而增强.结论喹诺酮类药物对大鼠软骨细胞体外培养增殖和蛋白多糖分泌具有抑制作用,且该作用与大鼠周龄、细胞培养时间相关.     

败酱草多糖的脱蛋白研究

目的研究败酱草多糖的脱蛋白工艺。方法采用Sevag法、三氯乙酸法、酶法对败酱草多糖进行脱蛋白研究。结果酶法脱蛋白效果明显好于Sevag法,三氯乙酸法的多糖损失较多。在木瓜蛋白酶用量4%（W/V）、pH值6.0、温度55℃、酶解时间2.5 h的条件下,败酱草多糖的蛋白脱除率为51.65%,多糖损失率为7.93%。结论用酶法脱蛋白效果较好。     

老山云芝多糖P对巨噬细胞代谢乙酰低密度脂蛋白的影响

老山云芝多糖P可使小鼠腹腔巨噬细胞乙酰LDL(acLDL)受体数目增加。提高巨噬细胞对acLDL的结合、内移和降解。其对巨噬细胞降解acLDL的影响呈浓度效应关系,该效应在云芝多糖100μg/ml时最大,可使巨噬细胞对(~(125)Ⅰ)ac LDL的降解增加77%。实验结果提示,老山云芝多糖P可能通过刺激清道夫受体途径在整体发挥降脂、抗动脉粥样硬化的作用。     

Evaluation of cytotoxic and mutagenic effects of Coriolus versicolor and Funalia trogii extracts on mammalian cells

This study examined the in vitro cytotoxic activities of standardized aqueous bioactive extracts prepared from Coriolus versicolor and Funalia trogiiATCC 200800 on HeLa and fibroblast cell lines using a MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2-]-2-5-difeniltetrazolium bromide) cytotoxicity assay. F. trogii and C. versicolor extracts were cytotoxic to both cell lines. At 10 microL treatment level, F. trogii and C. versicolor extracts inhibited proliferation of HeLa cancer cells by 71.5% and 45%, respectively, compared with controls. Toxicity was lower toward normal fibroblasts. In the latter case, treatment at 10 microL level with F. trogii and C. versicolor extracts reduced cell proliferation by 51.3% and 38.7%, respectively. In separate experiments, the mitotic index (MI) obtained with 3 microL treatment level of unheated extracts of the two fungi was comparable to the MI value obtained by treatment with 4 microg/mL MMC (anticancer agent mitomycin-C). A significant induction of sister chromatid exchange (SCE) was observed in normal cultured lymphocytes treated with MMC (4 microg/mL). MMC treatment reduced replication index compared with treatment with unheated F. trogii extract and negative controls (p < 0.001). In contrast to MMC, F. trogii extracts did not affect the proliferation of human lymphocytes compared with controls (p > 0.05). Laccase and peroxidase enzyme activities in F. trogii extract were implicated in their inhibitory effect on cancer cells. F. trogii extract was concluded to have antitumor activity.     

海洋来源真菌杂色曲霉的化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的研究一株海洋来源真菌Aspergullus versicolor NM-021杂色曲霉的化学成分及其抗肿瘤活性。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备HPLC等色谱技术对其化学成分进行分离、纯化;通过NMR、MS方法,结合与文献报道的数据比对,对化合物的结构进行鉴定。运用细胞毒活性筛选模型对其抗肿瘤活性进行初步评价。结果从该菌株中分离得到了2个蒽醌类化合物2H-6-O-Methylaverufin（1）和6-O-Methylaverufin（2）。生物活性测试结果表明,化合物1对人结肠癌和食管癌具有一定的抑制活性。结论从该菌株中分离得到1个新的具有细胞增殖抑制活性的蒽醌类化合物（1）。     

柳烯酸溶液治疗花斑癣疗效观察

目的观察柳烯酸溶液对花斑癣的治疗效果。方法每日用柳烯酸溶液外喷皮损处2次进行治疗,观察治疗1、2周后的疗效。结果临床有效率及真菌清除率有明显提高,治疗1周后有效率为54%,真菌清除率46%;治疗2周后有效率为94%,真菌清除率为96%。结论柳烯酸溶液治疗花斑癣疗效肯定,安全性高。     

云芝的薄层色谱鉴别

目的 建立云芝的薄层色谱鉴别方法.方法 以环己烷-三氯甲烷-甲酸乙酯-水(8∶7∶5∶1)为展开剂,用硅胶G预制薄层板,以10%的硫酸乙醇液为显色剂,进行薄层色谱分析.结果 云芝与云芝对照药材在薄层板上主斑点位置及颜色一致,且斑点集中、分离度好.结论 所建立的方法快速、简便、灵敏、重现性好、专属性强,可以作为云芝的质量控制方法之一.     

表观遗传试剂诱导海洋真菌Aspergillus versicolor DJ013产生次级代谢产物的研究

目的 对一株来源于浙江东极岛海域沉积物的海洋真菌Aspergillus versicolor进行表观遗传试剂2-hexyl-4-pentynoic acid诱导并研究其次级代谢产物。方法 采用溶剂萃取、柱层析色谱及制备色谱等方法对化合物进行分离纯化,通过LC-MS和NMR等方法进行结构鉴定,采用滤纸片扩散法测定抗菌活性。结果 在表观遗传试剂2-hexyl-4-pentynoic acid诱导下,从Aspergillus versicolor分离得到三个化合物,经结构鉴定为curvularin(1)、cyclo-(L-Trp-L-Phe)(2)和diorcinol (3)。     

复方硝酸益康唑凝胶治疗花斑癣的临床疗效观察

目的：观察复方硝酸益康唑凝胶治疗花斑癣的疗效及安全性。方法：将100例患者随机分为治疗组与对照组,治疗组外搽复方硝酸益康唑凝胶,每日早晚各搽1次,薄涂于患处,并轻轻按摩片刻,每周复查1次,连用2周;对照组为外搽曲安奈德益康唑乳膏（商品名派瑞松,西安杨森制药有限公司生产）,治疗方法同治疗组。两组均停用其他外用药及内服药,连续观察2周疗效。结果：治疗组总有效率（82.0%）与对照组（86.0%）无统计学差异（P〉0.05）。结论：本院自制制剂复方硝酸益康唑凝胶是一种疗效高、应用方便、经济安全的治疗花斑癣外用药物,适合临床推广应用。     

海洋真菌Aspergillus versicolor菌丝体中化学成分的研究

自海洋真菌Aspergillus versicolor菌丝体的丙酮和甲醇萃取部分进行化学成分的研究，从中分离得到7个化合物．经光谱数据分析．鉴定其结构为柄曲菌素(Ⅰ)、6-甲氧基柄曲菌素(Ⅱ)、奥佛尼红素(Ⅲ)、酪氨酸(Ⅳ)、3-甲基-吡咯并哌嗪2，5-二酮(Ⅴ)、3-异丙基-吡咯并哌嗪2．5-二酮(Ⅵ)和尿素(Ⅶ)。其中化合物Ⅳ．Ⅴ和Ⅵ为首次从该属菌中分离得到。     

Anti-tumor effect of Coriolus versicolor methanol extract against mouse B16 melanoma cells: in vitro and in vivo study.

Numerous studies have shown immunostimulatory and anti-tumor effects of water and standardized aqueous ethanol extracts derived from the medicinal mushroom, Coriolus versicolor, but the biological activity of methanol extracts has not been examined so far. In the present study we investigated the anti-tumor effect of C. versicolor methanol extract (which contains terpenoids and polyphenols) on B16 mouse melanoma cells both in vitro and in vivo.In vitro treatment of the cells with the methanol extract (25-1600 microg/ml) reduced melanoma cell viability in a dose-dependent manner. Furthermore, in the presence of the methanol extract (200 microg/ml, concentration IC(50)) the proliferation of B16 cells was arrested in the G(0)/G(1) phase of the cell cycle, followed by both apoptotic and secondary necrotic cell death. In vivo methanol extract treatment (i.p. 50 mg/kg, for 14 days) inhibited tumor growth in C57BL/6 mice inoculated with syngeneic B16 tumor cells. Moreover, peritoneal macrophages collected 21 days after tumor implantation from methanol extract-treated animals exerted stronger tumoristatic activity ex vivo than macrophages from control melanoma-bearing mice. Taken together, our results demonstrate that C. versicolor methanol extract exerts pronounced anti-melanoma activity, both directly through antiproliferative and cytotoxic effects on tumor cells and indirectly through promotion of macrophage anti-tumor activity.     

盐酸布替萘芬乳膏与酮康唑乳膏治疗皮肤癣菌感染的疗效比较

目的评价布替萘芬治疗皮肤癣菌的疗效。方法选取有效皮肤癣菌病例189例,男108例,女81例,体癣43例,股癣38例、手足癣74例,花斑癣34例,年龄(38±25)岁,随机分为A、B两组;其中A组95例,男性61例,女性34例,体癣23例,股癣20例、手足癣37例,花斑癣15例,使用盐酸布替萘芬乳膏为治疗组;B组94例,男性47例,女性47例,体癣20例,股癣18例、手足癣37例,花斑癣19例,使用酮康唑乳膏为对照组。疗程4周。结果 A组平均治愈率为100%,真菌菌检转阴率为93.7%;B组平均治愈率80.6%,真菌菌检转阴率为60.2%;停药8周后随访或检查,A组复发率为0,B组复发率为30.7%;说明布替萘芬疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论布替萘芬是治疗皮肤癣菌的有效药物,且优于酮康唑。