MicroRNA在山楂酸诱导A549细胞凋亡中的作用研究

目的探讨MicroRNA在山楂酸诱导肺癌细胞A549凋亡过程中发挥的生物学作用。方法将人的肺癌细胞系A549经过山楂酸干预,并提取处理后A549细胞的总RNA,通过AFFX miRNA表达谱芯片,检测山楂酸作用前后A549细胞中miRNA表达差异情况。通过生物信息学,分析预测miRNA作用的靶蛋白。结果山楂酸作用前后肺癌细胞A549中59个miRNA表达差异显著,其中23个miRNA的表达上调,36个miRNA的表达下调。生物信息学分析预测,由miRNA调控的细胞增殖相关靶蛋白400余个,细胞凋亡相关靶蛋白300余个,其中XIAP是miR-630下游调控的靶蛋白。结论山楂酸可能通过调控miRNA的表达发挥对A549细胞的抑制作用。     

基于生物信息学分析关键miRNAs在肺鳞癌发生发展中的功能及意义

目的 应用生物信息学方法探究关键miRNAs在肺鳞癌发生发展中的功能及临床意义。方法 利用GEO2R在线工具分析GSE17681数据集中肺癌样本和对照样本的差异表达miRNA。利用miRTarBase数据库预测排在前3位的上调和下调miRNA的靶基因。利用DAVID数据库对靶基因进行GO和KEGG富集分析。通过STRING数据库构建靶基因间的蛋白互作网络及miRNA-基因互作网络，然后利用Cytoscape软件的cytoHubba插件分析关键miRNA及其调控的Hub靶基因。利用UALCAN数据库分析关键miRNA及其调控的Hub靶基因在肺鳞癌中的表达。最后利用Kaplan-Meier Plotter工具分析关键miRNA对肺鳞癌生存状况的影响。结果 共筛选出116个差异表达的miRNA,包括93个上调miRNA,23个下调miRNA。预测了前3位上调和下调miRNA的1282个靶基因，参与了肺鳞癌的相关通路，如癌症途径、MAPK信号通路等。通过miRNA-基因互作网络筛选到上调和下调的关键miRNA为hsa-miR-19a和hsa-miR-126,其调控的Hub靶基因分别为TNF、P...     

miRNA与药物反应个体差异

目前关于药物反应个体差异研究集中在药物代谢和药物靶点基因的单核苷酸多态性位点(SNPs)和其他基因突变(例如拷贝数的变化)的表型效应,而仅分析DNA序列不能完全解释药物反应个体差异.miRNA的发现,为其提供了新的研究方向.miRNA是一类内源性的非编码小RNA,其与靶基因mRNA3'非翻译区(3'UTR)互补结合,引起mRNA切割或翻译抑制,从而在转录后水平下调基因表达.miRNA可负调控大量人类基因的表达,其中包括许多药物疗效相关基因.越来越多的研究结果表明,miRNA是导致药物反应个体差异的又一重要因素.本文从miRNA调控药物代谢、药物转运和药物靶点,miRNA及其结合位点多态性等方面对miRNA在药物反应个体差异中所起作用进行综述.     

miRNA 在卵巢癌中作用的研究进展

卵巢癌是目前死亡率最高且预后最差的妇科恶性肿瘤,缺乏有效的早期诊断方法以及化疗耐药是其主要原因。微小RNA（miRNA）是一种内源性的非编码短序列小RNA,主要通过在转录后水平降解靶mRNA或者抑制靶基因的表达而参与调控细胞的生长、增殖和凋亡等。一些miRNA 可以通过调节体内多种癌基因和抑癌基因的表达,参与卵巢癌的发生、浸润及转移等进程;且多种特征性miRNA 在个体内的差异性表达也与卵巢癌的耐药及预后密切相关。研究与卵巢癌相关的miRNA 的作用靶基因及其信号调控通路可为进一步提高卵巢癌的临床诊断与治疗提供新思路。本文主要就miRNA 在卵巢癌中作用的研究进展进行综述。     

非蛋白编码小RNA分子在癌症中的作用

microRNA(miRNA)是一类含量丰富的非蛋白编码(non-protein-coding)小RNA,可作为负性基因调节器,能调节多种生物进程。生物信息数据显示,每个miRNA能控制数百种基因靶标,miRNA可能对每一条遗传通路都有影响。miRNA突变或误表达与多种人体癌症有关,同时也表明miRNA可以作为肿瘤抑制基因和致癌基因。已证明miRNA能抑制重要癌症相关基因的表达,因此miRNA可能有助于癌症的诊断和治疗。     

汉黄芩素调控miRNA-135b-3p靶向SIX4抑制A549细胞上皮间质转化的分子机制

目的 探究汉黄芩素对人非小细胞肺癌A549细胞侵袭转移的影响及其对EMT的作用和分子机制。 方法 （1）研究汉黄芩素对A549增殖、侵袭转移的影响。MTT实验检测汉黄芩素对A549细胞的毒性作用，HE染色观察汉黄芩素处理前后形态学变化，划痕实验、Transwell小室实验检测侵袭转移能力，Western Blot和qRT-PCR实验测定EMT相关标志物表达情况。（2）研究A549细胞EMT相关miRNA及调控机制。利用高通量测序技术，检测汉黄芩素处理TGF-β1诱导的A549后差异表达的miRNA，进行qRT-PCR验证；划痕实验、Transwell小室实验分析细胞转染miRNA mimic、inhibitor和NC后A549细胞侵袭转移能力，Western Blot和qRT-PCR实验测定EMT相关标志物的表达情况。运用GO和KEGG数据库分析，找出目标miRNA作用的靶基因；Western Blot实验和qRT-PCR实验验证miRNA mimic、inhibitor和NC转染后靶基因及蛋白的表达情况；双荧光素报告酶基因实验证明该miRNA对靶基因翻译的调控作用。 结果 （1）汉黄芩素可抑制A549细胞的生长增殖，上调TGF-β1诱导的A549细胞E-cadherin及下调Vimentin的表达，降低细胞迁移的能力，逆转细胞的形态变化。（2）高通量测序得到差异表达的miRNA，其中汉黄芩素可逆转miRNA-135b-3p在A549细胞EMT过程中的过表达，抑制A549细胞的侵袭和转移。 pathway分析及miRNA数据库靶基因预测miRNA-135b-3p可调控SIX4的表达。双荧光素报告基因实验显示miRNA-135b-3p可结合于SIX4基因的3’-UTR产生调控，过表达miRNA-135b-3p的A549细胞SIX4表达降低，敲低miRNA-135b-3p后可恢复。 结论 汉黄芩素调控miRNA-135b-3p靶向SIX4抑制A549细胞的侵袭转移和EMT过程。     

微小RNA在糖尿病及其并发症中的分子机制

微小RNA(miRNA)是非编码基因的产物,可通过与mRNA特异结合来调节基因的表达.在糖尿病领域,已发现多种miRNA可通过调节胰岛素分泌、胰腺的分化发育、胰岛细胞脂性凋亡及胰岛素敏感性来影响糖尿病的发生发展,且在相关并发症的发病机制中发挥重要作用,本文综述糖尿病及其并发症发病机制相关的miRNA研究的最新进展.     

微小RNA在白血病中的作用及治疗策略

微小RNA（microRNA,miRNA）是一类由19～25个核苷酸组成的非编码蛋白质的单链小分子RNA,其在白血病中扮演着癌基因和抑癌基因的角色,针对miRNA在白血病中的不同作用,可采取相应的治疗策略。对于在白血病中高表达的具有癌基因功能的miRNA,可采用反义寡核苷酸等技术下调或抑制miRNA;而对于在白血病中显著低表达、发挥着抑癌基因作用的miRNA,可采用基因治疗的方法,导入相应的外源miRNA,使其正常表达。因此,miRNA对于白血病的基因治疗或作为白血病治疗的新靶标具有广阔的应用前景。     

缺氧预处理诱导大鼠心肌细胞差异表达microRNA的芯片筛选与生物信息学分析

目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对照组(CON)和缺氧预处理组(HPC),CON组细胞正常培养,HPC组细胞经历10 min缺氧和30 min再给氧,提取心肌细胞总RNA,行miRNA芯片筛选,qRT-PCR验证芯片结果。利用软件预测差异表达miRNA调控的靶基因,分析靶基因富集的基因功能(gene ontology,GO)和信号通路(pathway)。结果与CON组相比,HPC可诱导大鼠心肌细胞miRNA表达谱发生明显改变,共有12个miRNA上调,14个miRNA下调(P<0.01,FDR<0.05);选择其中荧光信号值>500的7个miRNA,用于生物信息学分析。qRT-PCR检测miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216水平,变化趋势与芯片结果一致。生物信息学分析显示差异表达miRNA所调控的靶基因功能明显富集于27个GO和6条信号通路。结论 HPC可诱导成年大鼠心肌细胞miRNA表达谱明显改变,这些差异表达miRNA可能通过调控靶基因参与HPC介导的心肌细胞保护作用。     

靶向微小RNA的病毒感染疾病治疗新策略

微小RNA（microRNA,miRNA）是真核生物细胞的一类长度约为19～25个核苷酸的非编码小RNA,在生物体发育和基因表达过程发挥重要的调控作用。miRNA分子通过与靶mRNA的互补配对,在转录后水平上对基因的表达进行负调控。近来研究表明miRNA在病毒感染宿主过程中发挥重要作用。通过设计抗miRNA反义寡核苷酸促进或阻断特定miRNA的表达可以实现抑制病毒复制的目标。本文综述了抗miRNA反义寡核苷酸研究现状和面临的挑战。     

与结直肠癌转移相关的微小RNA研究现状北大核心CSCD

瘤转移是结直肠癌患者死亡的主要原因之一。microRNA(miRNA)对结直肠癌转移的作用包括调节肿瘤细胞上皮-间质转化、调控癌基因、抑癌基因以及肿瘤转移相关基因的表达等,通过与靶基因mRNA互补位点结合,在转录后水平调控靶基因的表达,进而调控肿瘤的发生、发展。近年来,越来越多的研究显示,miRNA在结直肠癌的侵袭转移中起重要的作用,有望成为结直肠癌治疗的新靶点。     

miRNA与肾癌关系的研究进展

miRNA(小RNA)是一类大小为19至25个核苷酸的非编码单链RNA。它们在转录或翻译水平调节基因的表达。最近研究表明miRNA在诸如细胞分化、凋亡、增殖等过程中发挥重要作用。在肾透明细胞癌等多种肿瘤中均发现有miRNA的异常表达。某些特定miRNA的表达异常还和缺氧、上皮-间充质转变等肾癌关键发病机制密切相关。总结现阶段与肾癌相关miRNA的研究进展,并进一步探讨它们作为肾癌诊断标记物和治疗靶标的可行性。     

miRNA145作为抑癌基因在胃癌中的表达及其功能研究

近年来随着miRNA成为新的研究热点,越来越多的研究表明miRNA在肿瘤中发挥促癌基因或抑癌基因的作用。该文通过介绍miRNA145的生物合成和作用机制,进一步探讨其作为抑癌基因在胃癌的发生发展、侵袭转移、早期发现、治疗及预后中的表达及功能研究。     

小分子核糖核酸在前列腺癌中的表达及作为诊疗和预后标志物的研究

目前,前列腺癌(PCa)的诊断都是把血清前列腺特异性抗原(PSA)和数字直肠检查(DRE)两项指标做为诊断依据.然而这种方法 存在较低的阳性率和较高的误诊率等缺陷,近年来,新的诊断标志物已经应用于临床诊断中,如前列腺癌抗原3(PCa-3)和融合基因TMPRSS2-ETS等还处在试验阶段,所以发现可用于诊断和预后新的标志物仍然是必要的.最近的研究表明,小分子核糖核酸(miRNA)的表达有反向调控基因表达的作用,与PCa在内的多个肿瘤的生物学行为相关联,而且miRNA在不同肿瘤中表达存在差异,因而miRNA可以作为肿瘤潜在的诊断、预后及治疗的工具.该文通过回顾各种与PCa相关的miRNA的表达和研究进展,以阐明其在PCa诊断及治疗中的作用.     

酪氨酸蛋白激酶配体EphrinB2蛋白靶向miRNA表达 载体构建及其沉默效率评价

目的：针对大鼠的Efnb2基因序列（目的蛋白EphrinB2）,构建特异性干扰微小RNA(miRNA)及其表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR,并检测其对Efnb2基因的干扰作用。方法：根据NM001107328基因序列设计并合成4对miRNA oligo;将4对oligo退火成双链。然后用载体构建试剂盒进行重组克隆,将4对双链miRNA oligo分别插入到miRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个miRNA表达质粒,通过脂质体2000将已经构建好的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR干扰质粒转染至大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞中,通过qPCR检测Efnb2基因表达水平的变化。结果：DNA测序分析证明Efnb2基因的miRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明Efnb2基因的表达水平明显降低。结论：成功地构建了针对Efnb2基因的miRNA载体,转染细胞后对Efnb2基因沉默。     

microRNA与肿瘤发生相关性的研究进展

microRNA(miRNA)是一种非编码的单链小分子RNA,广泛存在于真核生物中.它通过在转录后水平负调控基因的表达,参与生命过程中的一系列重要进程.近来研究发现,miRNA可能通过调控某些致癌基因和抑癌基因,参与肿瘤的发生和发展.因此,通过寻找与肿瘤相关的miRNA,可以为肿瘤的诊断和生物治疗提供新的靶标.     

乳腺癌microRNA表达谱的初步研究

目的:探讨miRNA基因表达谱的筛选及其在乳腺癌发生发展中的作用.方法:收集8例患者的新鲜乳腺癌组织及配对癌旁组织,利用miRNA芯片对其进行实验分析, 并采用 real time-PCR验证芯片结果的准确性,生物信息学分析其作用靶点.结果:通过SAM软件,相对癌周组织在乳腺癌组织中查出上调的miRNA基因3个,下调的miRNA基因23个.其中显著上调的为hsa-miR-155和hsa-miR-193b.显著下调的为hsa-miR-145,hsa-miR-381,hsa-miR-132,rno-miR-10b,hsa-miR-199b-5p,hsa-miR-100,hsa-miR-335,hsa-miR-497和hsa-miR-99a.实时定量验证芯片结果准确可靠,生物信息学发现不同miRNA对应的靶基因分别为FOXA1、 HOXA1、SMAD7和PSTON等.结论:筛选得到乳腺癌miRNA的差异表达谱靶点非常广泛,涉及到细胞周期调控,转录调控等,可能在乳腺癌的发病机制中发挥潜在作用.     

MicroRNA作为肿瘤治疗靶点的研究进展

近年研究发现,miRNAs与肿瘤的发生、发展存在着密切的关系。与正常组织相比,肿瘤组织中miRNA的表达谱发生明显的变化,并且miRNA与抑癌基因或原癌基因相互作用,在肿瘤的发生和发展中扮演着重要角色。某些miRNA可具备癌基因的功能,下调抑癌基因的表达,促进了肿瘤的增殖、转移和浸润等;也有一些miRNA具备抑癌基因的功能,下调癌基因的水平,在肿瘤的凋亡、分化和治疗等方面做出了有益的贡献。目前,较多研究已在体内模型中证实靶向致癌miRNA或恢复肿瘤抑制miRNA的治疗方式是非常可行性的。本文将就miRNA作为癌基因或肿瘤抑制基因以及这些miRNA作为肿瘤治疗靶点的最新研究进展作一综述。     

COCH基因与miR-96的相关性研究

目的研究COCH基因与小分子RNAmiR-96的相互作用,探讨miR-96的表达变化是否对COCH基因有影响。方法在细胞水平上,转染miR-96的miRNA模拟物和miRNA抑制物而改变miR-96的表达水平,通过荧光定量PCR检测COCH基因的表达变化情况。结果 miR-96的表达变化与COCH基因的表达变化呈正相关关系。结论结果显示miR-96并没有对COCH基因进行负调控,而是呈现协同作用,甚至miR-96有可能作用于其他相关因子而导致COCH基因表达上调,从而影响COCH基因在耳蜗及前庭功能变化中的作用。     

微小RNA在胃癌中的研究现状

微小RNA(miRNA)与胃癌具有密切关系。根据miRNA对胃癌促进和抑制的不同作用,可将miRNA分为癌基因和抑癌基因。由于miRNA在胃癌和健康人群中表达具有差异,因此可成为新型的肿瘤标志物进行胃癌辅助诊断和预测治疗反应及预后。掌握miRNA与胃癌耐药的关系,有利于研发新的治疗方式。本文将从miRNA与胃癌的发生发展、诊断、预后、耐药、治疗等方面进行综述。