手性柱液质联用法同时测定人体尿液中 泮托拉唑对映体浓度*

目的:建立同时测定人体尿液中左旋泮托拉唑和右旋泮托拉唑浓度的手性柱-液质联用法(Chiral-LC-MS)。方法:以乙腈作为蛋白质沉淀剂,对尿液中的泮托拉唑对映异构体进行Chiral-LC-MS分析。色谱柱:Chiral PAK IE(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-10 mmol·L^-1乙酸铵(含0.1%乙酸)(72∶28,v/v),泮托拉唑对映异构体在9.0 min内可达到基线分离。使用电喷雾离子化(ESI)正离子模式,泮托拉唑和内标((R)-Pantoprazole-d6)的多反应监测(MRM)扫描离子对分别为m/z 384.1→200.1和390.1→206.0。结果:该方法无明显的基质效应,左旋泮托拉唑和右旋泮托拉唑在标准曲线范围内线性关系良好,均为2.50~5000 ng·mL^-1,批内、批间准确度和精密度均<15%。在泮托拉唑对映体的储存、处理和分析过程中未发现两者间的手性转化,测定过程中各化合物稳定性符合要求。结论:建立了简单、高选择性的Chiral-LC-MS方法,可用于同时测定人体尿液中的泮托拉唑对映体的浓度。     

高效液相色谱法测定健康人体血浆中泮托拉唑浓度

目的建立测定健康人体血浆中泮托拉唑浓度的高效液相色谱法。方法用DiamosilC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈-磷酸盐缓冲液(35∶65)为流动相,非那西丁为内标,流量为1.5mL·min-1,在288nm波长下定量测定泮托拉唑血浆浓度。结果泮托拉唑浓度在0.02～4.0μg·mL-1内线性良好,γ=0.9985,平均回收率为100.63%,日内、日间精密度RSD为2.02%～9.33%。结论本法操作简单、快速,重现性好,准确可靠,适用于临床血药浓度监测及药代动力学研究。     

α1—酸糖蛋白手性柱拆分泮托拉唑对映体

目的:建立泮托拉唑对映体拆分和对映体光学纯度测定方法。方法:用α1-酸糖蛋白手性固定相,考察了缓冲液的种类和pH、有机改性剂的种类和比例、流速及柱温对泮托拉唑对映体拆分的影响。采用Chiral-AGP柱(150 mm×4.6 mm,5μm,配有手性AGP预柱),以10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH 5.5)-乙腈(93:7)为流动相,在流速为0.9 mL·min-1,检测波长为290 nm,柱温为20℃的条件下拆分泮托拉唑对映体。结果:用α1-酸糖蛋白手性固定相能完全分离泮托拉唑对映体,分离度达1.77,并测定了泮托拉唑对映体过量百分率。结论:流动相pH和有机改性剂含量是影响对映体分离的重要因素,可以以调节流速和柱温来提高柱效、改善分离。     

泮托拉唑有关物质及对映体的分离

目的建立泮托拉唑有关物质及对映体分离的方法。方法采用Inertsil C18色谱柱，磷酸盐缓冲液-乙腈(67：33)为流动相，检测波长为288nm，分离泮托拉唑的有关物质。采用Kromasil CHI-TBB色谱柱，异丙醇-正己烷-三乙胺-醋酸(10：90：0．15：0．05)为流动相，检测波长为288nm，以联二萘酚作为拆分剂，运用包结拆分法获得光学纯的泮托拉唑。结果采用所选色谱系统，泮托拉唑有关物质能得到良好的分离；能获得光学纯的泮托拉唑。结论所选方法分离度大。柱效稳定。     

泮托拉唑有关物质及对映体的分离

目的　 建立泮托拉唑有关物质及对映体分离的方法。 方法 　采用InertsilC1 8色谱柱 ,磷酸盐缓冲液 乙腈 (6 7∶33)为流动相 ,检测波长为 2 88nm ,分离泮托拉唑的有关物质。采用KromasilCHI TBB色谱柱 ,异丙醇 正己烷 三乙胺 醋酸 (10∶90∶0 15∶0 0 5 )为流动相 ,检测波长为 2 88nm ,以联二萘酚作为拆分剂 ,运用包结拆分法获得光学纯的泮托拉唑。 结果 　采用所选色谱系统 ,泮托拉唑有关物质能得到良好的分离 ;能获得光学纯的泮托拉唑。 结论 　所选方法分离度大 ,柱效稳定     

液质联用测定人血浆中泮托拉唑的血药浓度

目的建立液质联用测定人血浆泮托拉唑药物浓度的方法。方法采用WatersAtlantisTMC18柱(2.1mm×100mm,3.0μm),流动相:0.1%甲酸溶液-乙腈(40∶60),流速0.2mL·mL-1,柱温30℃,进样量5μL,电喷雾电离源(ESI),MRM法检测,泮托拉唑母离子[M+H]m/z384.2,子离子m/z200.5,内标盐酸帕罗西汀母离子[M+H]m/z330.1,子离子m/z192.1。结果线性范围为10~5000ng·mL-1,最低检测浓度为1.0ng·mL-1,三种浓度的平均回收率均在90%以上,日内RSD为1.8%~4.0%(n=5),日间RSD为1.2%~1.7%(n=5)。结论该法操作简便,灵敏度高,分析快速,适用于临床上人血浆中泮托拉唑浓度测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中泮托拉唑的浓度

目的：建立测定人血浆中沣托拉唑浓度的高效液相色谱方法.方法：血浆样品经叔丁基甲醚提取后,以乙腈-醋酸盐缓冲液（0.01 mol·L^-1,pH 4.4）（15∶85）为流动相,经Supelcosil色谱柱分离,289 nm波长检测.结果：泮托拉唑在20～4 000μg·L^-1范围内线性关系良好（r=0.999 9）,最低检测质量浓度为15μg·L^-1;高、中、低3个浓度质控样品的日内精密度RSD在4.22%～8.92%之间,日间精密度RSD在3.70%～5.49%之间,方法学回收率为96.36%～109.42%.结论：本方法取样量小,灵敏度高,操作简便易行,为药动学和生物等效性研究提供方法学基础.     

反相高效液相色谱法测定人血浆中泮托拉唑

目的：建立测定人血浆中泮托拉唑浓度的方法。方法：采用高效液相色谱。结果：标准曲线的线性范围２０～４０００ｎｇ／ｍｌ，最低定量浓度为２０ｎｇ／ｍｌ，日内与日间ＲＳＤ均小于１７％。结论：该分析方法符合测定生物样品要求。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中泮托拉唑

目的： 建立测定人血浆中泮托拉唑浓度的方法。方法： 采用高效液相色谱。结果： 标准曲线的线性范围２０ ～４ ０００ ｎｇ／ ｍｌ , 最低定量浓度为２０ ｎｇ／ ｍｌ, 日内与日间 Ｒ Ｓ Ｄ 均小于１７ ％ 。结论： 该分析方法符合测定生物样品要求。     

Chiral-LC-MS/MS法同时测定人血浆中兰索拉唑对映体的浓度

目的:建立Chiral-LC-MS/MS法同时测定人血浆中S-兰索拉唑和R-兰索拉唑的浓度.方法:以乙腈作为蛋白质沉淀剂,对血浆中的兰索拉唑对映异构体进行Chiral-LC-MS/MS分析.色谱柱:Chiralpak IC柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为10 mmol·L-1醋酸铵(含0.05%醋酸)-乙腈(50:50,v/v),兰索拉唑对映异构体在9.0 min内可达到基线分离.采用AB QTRAP 5500质谱仪,使用电喷雾离子化(ESI)正离子模式,兰索拉唑和内标(埃索美拉唑)的多反应监测(MRM)扫描离子对分别为m/z 370.1→252.1和346.1→198.1.结果:该方法无明显的基质效应,S-兰索拉唑和R-兰索拉唑在标准曲线范围内线性关系良好,标准曲线的线性范围均为20.00~10000 ng·mL-1,准确度在±15%,批内和批间精密度均小于10%.在兰索拉唑对映体的储存、 处理和分析过程中没有发现两者间的手性转化,测定过程中各化合物稳定性符合要求.结论:建立了简单、高选择性的Chiral-LC-MS/MS方法,可用于同时测定人血浆中的兰索拉唑对映体的浓度.     

高效液相色谱法手性拆分奥美拉唑对映异构体

目的：手性拆分奥美拉唑对映异构体,建立检查埃索美拉唑钠原料药中R-异构体的HPLC方法。方法：采用Chiral pak IC手性柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以正己烷-异丙醇-甲醇-三乙胺（40∶40∶20∶0.1,v/v/v/v）为流动相,检测波长为302 nm,柱温为30 ℃,流速为1.0 mL·min^-1。结果：埃索美拉唑及其R-异构体的分离度（R）大于7。R-异构体的检测限和定量限分别为32 ng·mL^-1和80 ng·mL^-1,线性范围为0.5~30 μg·mL^-1。自制三批埃索美拉唑钠盐中R-异构体的含量均为0.02%,R-异构体的限度符合要求。结论：该方法简便,快速,可用来检查埃索美拉唑钠原料药中R-异构体的限度。     

柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分布洛芬对映异构体

目的：建立一种柱前手性衍生化-反相高效液相色谱紫外法检测布洛芬的异构体。方法：以N′N-羰基二咪唑（CDI）作为活化剂活化布洛芬的羧基基团,再以（R）-（+）-1-（1-萘基）乙胺（R-NEA）作为手性衍生化试剂进行反应。选用Kromasil C18色谱柱,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,以乙腈-0.05%磷酸（68∶32）为流动相,检测波长225 nm。结果：布洛芬的非对映异构体色谱峰的保留时间分别为25.6 min和27.9 min。结论：本方法操作简单,条件温和,衍生化产物稳定,且衍生化试剂价格便宜,更准确地实现了对布洛芬对映异构体的分离检测。     

健康人群口服复方二甲双胍格列吡嗪片尿药排泄研究

目的:建立二甲双胍和格列吡嗪尿药浓度的测定方法,研究健康人群口服二甲双胍格列吡嗪片后二甲双胍和格列吡嗪的尿药排泄特征.方法:二甲双胍尿液样品用流动相稀释,经涡旋高速离心后,采用Lichrospher ODS色谱柱分离,流动相为乙腈-3 mmol·L-1十二烷基硫酸钠(25:75),用紫外检测器检测,波长为232 nm.格列吡嗪尿液样品经盐酸酸化后用乙酸乙酯提取,采用LichrospherODS色谱柱分离,流动相为乙腈-0.1％的乙酸水溶液(55:45),质谱采用电喷雾离子源和选择性离子检测方式.10名健康受试者单次口服二甲双胍格列吡嗪片2片后,测定给药前及给药后0～2、2～4、4～6、6～8、8～10、10～12、12～16、16～24 h各时间段的二甲双胍及格列吡嗪尿药浓度.结果:高、中、低浓度的批间与批内精密度(RSD)相对标准差均小于10％.10名健康受试者单次口服二甲双胍格列吡嗪片后,24 h内尿液中二甲双胍及格列吡嗪的累积排泄量分别为(102.5±27.3)mg和(452.2±191.4)μg,平均累积排泄率分别为(26.27±7.00)％和(9.04±3.83)％.结论:建立的人尿样中格列吡嗪的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定方法和二甲双胍的高效液相色谱(HPLC)测定方法准确、灵敏,适用于尿药排泄检测.     

HPLC-MS法测定人血浆中克拉霉素含量的方法学研究

目的:建立人血浆中克拉霉素测定的 HPLC-MS 法。方法:血浆经1mol·L~(-1)氢氧化钠溶液碱化后,用乙醚提取。采用 Zorbax SB-C_(18)(150mm×2.1 mm,5μm)分析柱,以乙腈-水-冰醋酸(60:40:0.05)为流动相,流速为0.4 mL·min~(-1);用HPLC-ESI~+-MS 法,选择性离子检测方法。质谱检测参数如下:干燥气流速13 L·min~(-1),干燥气温度350℃,雾化气压207kPa,毛细管电压3000 V,碎片电压150 V。选择检测的离子为 m/z 748.5(克拉霉素),m/z 837.5(罗红霉素)。结果:血浆中克拉霉素检测方法的线性范围为0.01～10μg·mL~(-1),最低检测限可达1.1 ng·mL~(-1)。血浆中克拉霉素的方法回收率为92.7%～99.4%,日内 RSD<5.1%,日间 RSD<3.6%。结论:本法灵敏,准确,可用于克拉霉素的药代动力学研究。     

离子对RP-HPLC法测定甲磺酸帕珠沙星尿药浓度

目的:建立反相离子对高效液相色谱法以测定尿液中帕珠沙星浓度。方法:色谱条件:Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:3 mmol/L十二烷基硫酸钠(含0.5%三乙胺,用H3PO4调pH至4.0)-乙腈(62∶38,V/V);流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:242 nm。结果:尿液标准曲线线性范围为1~300 mg/L(r=0.9998),高、中、低三种浓度的批内和批间精密度均小于10.0%,提取回收率为94.0%~95.3%。12名健康志愿者分别进行单剂量静脉滴注注射用甲磺酸帕珠沙星后,帕珠沙星在24小时内尿液中的累积尿药排泄率为(90.3±2.6)%。结论:本方法准确可靠,操作简便,适用于临床药代动力学及常规尿药浓度监测。     

Determination of hydrochlorothiazide in human plasma by liquid chromatography/tandem mass spectrometry

In this study, a fast and sensitive liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for determination of hydrochlorothiazide in human plasma was developed and validated. The analyte and irbesartan, used as the internal standard, were precipitated and extracted from plasma using methanol. Analysis was performed on a Phenomenex Kromasil C₈ column with water and methanol (27:73, v/v) as the mobile phase. Linearity was assessed from 0.78 to 200 ng/mL in plasma. The analytical method proved to be applicable in a pharmacokinetic study after oral administration of 12 mg hydrochlorothiazide tablets to 20 healthy volunteers.     

普萘洛尔对映异构体的血浆样品测定

建立以2,3,4,6-四乙酰基--βD-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯(GITC)为手性衍生化试剂测定血浆中普萘洛尔对映体浓度的反相高效液相色谱方法。血浆样品经甲醇除蛋白。采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm,Bnentnach),流动相为甲醇-20 mmol/LKH2PO4的水溶液(75∶25);流速1 mL/min;检测波长220 nm。结果:S(-)-普萘洛尔和R(+)-普萘洛尔检测浓度在1.00~277.78μg/mL浓度范围内与色谱峰面积有良好的线性关系。日内、日间精密度均小于5%,回收率分别为98.95%和105.76%,RSD均小于7.13%。结论:本方法灵敏度高,重现性可用于血浆中普萘洛尔对映体的分离测定。     

高效液相色谱法测定血浆中氯胺酮对映体的浓度

目的:建立以高效液相色谱手性固定相法测定血浆中氯胺酮对映体浓度的方法。方法:色谱柱为Chirobiotic V手性柱,流动相为甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.02∶0.02),检测波长为269nm,流速为1mL·min-1,内标为非那西丁。结果:S-氯胺酮、R-氯胺酮分别在19.5～2600(r=0.9992)、26～2600ng·mL-1(r=0.9989)范围内线性关系良好,最低检测浓度分别为13.0、19.5ng·mL-1;相对回收率分别为99.48%～103.40%、98.53%～103.20%,绝对回收率分别为63.2%～73.1%、64.5%～72.3%;日内RSD分别为3.3%～6.4%、3.5%～5.7%,日间RSD分别为7.1%～9.7%、6.3%～9.9%。结论:本方法简便、准确、灵敏、快速、专属,可用于血浆中R-氯胺酮和S-氯胺酮的测定及药动学研究。