血管紧张素Ⅱ及牛磺酸对体外培养乳鼠肥大心肌细胞心律失常发生的作用

在培养72h的乳鼠心肌细胞,血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AgnⅡ)1,10,100和1000nmol·L^-1时,可浓度依赖性地增加细胞搏动频率;而牛磺酸5,10和20mmol·L^-1不影响心肌细胞搏动频率,但能浓度依赖性地拮抗AngⅡ100nmol·L^-1加快心肌细胞搏动频率的作用。AngⅡ100nmol·L^-1连续作用7d引起的培养乳鼠肥大心肌细胞搏动频率加快,动作电位APA升高,APD₅₀和APD90延长,SCL缩短;哇巴因50nmol·L^-1诱发的心肌细胞搏动节律失常发生率高于常规培养组。牛磺酸20mmol·L^-1可抑制AngⅡ引起的上述改变,并降低哇巴因诱发的心律失常发生率。     

蒺藜皂苷激活PKCε抗氧化应激诱导心肌细胞凋亡的机制

观察蒺藜皂苷 (gross saponins of Tribulus terrestris, GSTT) 在过氧化氢 (hydrogen peroxide, H₂O₂) 诱导新生大鼠心肌细胞凋亡过程中对蛋白激酶C Eplison亚型 (protein kinase C Eplison, PKCε) 及凋亡相关蛋白的影响, 探讨蒺藜皂苷抗心肌细胞凋亡的作用机制。新生大鼠心肌细胞原代培养, H₂O₂建立心肌细胞凋亡模型, 流式细胞术检测细胞凋亡率; Western blotting法检测phospho-PKCε及Bcl-2、Bax的蛋白含量; 免疫细胞化学技术检测cleaved caspase-3蛋白含量。与模型组比较, GSTT (100 mg·L^-1) 预处理可明显降低H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡率 (P < 0.01), 并增加phospho-PKCε及Bcl-2的蛋白含量 (P < 0.01), 降低Bax及cleaved caspase-3的蛋白含量 (P < 0.01); PKC抑制剂白屈菜红碱 (chelerythrine, Che) 可部分阻断蒺藜皂苷抗心肌细胞凋亡作用, 与蒺藜皂苷组比较具有统计学意义 (P < 0.05, P < 0.01)。GSTT抗心肌细胞凋亡的作用机制可能与激活PKCε后抑制线粒体依赖的凋亡有关。     

气相色谱法测定脂肪酶的活力

本文发展了一种以气相色谱检测脂肪酶活力的方法。以三丁酸甘油酯为底物,通过气相色谱对产物正丁酸进行定性定量分析。正丁酸在0.11～11.35 mmol·L^-1内线性关系良好, 回归方程为: y = 45 464x - 3 115.2, r = 0.996 8。反应时间仅需5 min,最适pH值和温度分别为7.5和32 ℃。低、中、高3个浓度正丁酸的回收率分别为90.3%,104.6%和89.4%;RSD分别为3.01%,4.50%和6.64%。通过实验测定出K_m =0.25 mmol·mL^-1,奥利司他的半数抑制浓度 (IC₅₀) 为0.048 5 mg·mL^-1。本方法具有反应体积小、操作简单、快速、灵敏等特点。     

根皮素的抗炎和免疫抑制作用 (英文)

探讨根皮素（phloretin）在体外对小鼠T淋巴细胞增殖、活化、周期和巨噬细胞NO释放、吞噬功能的影响。CFDA-SE标记技术结合流式细胞术检测根皮素对T淋巴细胞增殖的影响。荧光抗体染色结合流式细胞术分析根皮素对T淋巴细胞在Con A的刺激下CD69和CD25的表达水平的影响。碘化丙啶（PI）染色检测细胞周期的分布情况。Griess试剂盒和荧光微球分别用以检测巨噬细胞NO释放和吞噬功能。结果显示,根皮素（40、60和80 μmol·L^-1）明显抑制T淋巴细胞增殖,增殖指数（PI）从1.41 ± 0.13分别下降到1.34 ± 0.16、1.19 ± 0.12和1.07 ± 0.06。根皮素可明显抑制CD69和CD25的表达（P < 0.01）。细胞周期分析显示,根皮素可将细胞抑制在G₀/G₁期。巨噬细胞在LPS和IFN-γ的刺激下的NO释放量为（26.72 ±3.57）μmol·L^-1,而在根皮素作用下NO释放量明显下降（P < 0.01）。巨噬细胞吞噬率在根皮素作用下也明显下降（P < 0.01）。以上结果表明,根皮素有望发展成为一种新的免疫抑制药物。
     

非核苷类逆转录酶抑制剂的研究XVⅢ: 4-烯丙基和4-叠氮基取代的三嗪类化合物的合成及抗HIV活性

在已有工作基础上, 基于分子对接设计合成了8个新的4-烯丙基取代和4-叠氮基取代的二芳基三嗪类衍生物。抗HIV-1活性的测试结果表明所有新化合物均具有抗HIV-1活性。其中化合物7c不仅抑制HIV-1野生株的复制 (IC₅₀ = 0.034 μmol×L^-1, SI = 6 475), 且对Y181C和K103C双突变酶显示出较强的抑制活性, 其IC₅₀值为9.39 μmol×L^-1, 高于奈韦拉平。     

甘草次酸在人细胞色素CYP450中体外代谢研究(英)

甘草根是中医临床常用解毒草药, 其活性成分甘草次酸主要是通过肝脏代谢。本文研究了人肝微粒体以及人源性CYP450s对甘草次酸的体外代谢影响, 以及甘草次酸对几种CYP450酶活性的影响。实验结果表明, 甘草次酸体外主要代谢酶为CYP3A4。体外药代动力学参数K_m, V_max和CL_int分别为18.6 μmol·L⁻¹, 4.4 nmol·mg⁻¹(protein)·min⁻¹和0.237 mL·mg⁻¹(protein)·min⁻¹。体外抑制试验显示, 50 μmol·L⁻¹甘草次酸可以抑制CYP2C19、CYP2C9、CYP3A4酶的活性, 其抑制率可高达50%以上。     

P2Y受体介导大鼠胃体环行肌收缩反应的药理学特点

观察大鼠离体胃体环行肌和胃底环行肌不同的药理学特征，分析核苷及核苷酸类物质诱发胃体环行肌收缩反应的作用特点和受体机制。制备大鼠离体胃体环行肌和胃底环行肌标本，利用受体药理学技术观察药物诱发的收缩反应。在胃体环行肌KCl所致收缩反应与胃底环行肌无显著性差别；但是，CCh收缩胃体环行肌的EC₅₀值 [(0.45 ± 0.15) μmol·L⁻¹] 显著高于胃底环行肌 [(0.20 ± 0.09) μmol·L⁻¹, P < 0.01]。5-HT和His收缩两种标本的EC₅₀值无显著差异 (P > 0.05); 但是, 在胃体环行肌5-HT和His产生收缩反应的E_max值 [(0.81 ± 0.26) 和 (0.88 ± 0.27) g] 显著小于胃底环行肌 [(2.67 ± 0.61) 和 (1.90 ± 0.68) g, P < 0.01]。在预收缩胃体环行肌，ATP (0.1～3 000 μmol·L⁻¹) 诱发浓度依赖性收缩反应，未见舒张反应；在预收缩胃底环行肌标本，同浓度ATP诱发先舒张后收缩的双相反应，并呈浓度依赖性。ATP、UTP、ADP、2-MeSATP和α, β-MeATP浓度依赖性诱发大鼠胃体环行肌收缩反应，2-MeSATP的EC₅₀值为 (7.2 ± 5.2) nmol·L⁻¹比Ach [(3.47 ± 1.20) μmol·L⁻¹] 低500倍；各药物产生收缩反应的效价序列为：2-MeSATP>>ADP>ATP=UTP>α, β-MeATP>>腺苷。酚妥拉明、普萘洛尔、阿托品及河豚毒素不影响ATP和UTP诱发的胃体环行肌收缩反应。研究结果表明, 大鼠胃体环行肌的药理学特征明显不同于胃底环行肌; 核苷酸类物质通过某种特殊的P2Y受体介导胃体环行肌收缩反应，是调节胃体环行肌收缩功能的重要介质。
     

用核磁共振新技术测定川续断皂甙F和H1两个新皂甙的结构及光谱规律研究

从川续断(Dipsacus asperoides c．Y．cheng et T．M．Ai)根部的乙醇提取物中得到二个新三萜皂甙，命名为川续断皂甙(asperosaponins)F和H₁。川续断皂甙F(I)是含六个糖的皂甙，川续断皂甙H₁(II)是含八个糖的皂甙。运用化学方法及光谱(¹HNMR，¹³CNMR，¹H-¹H COSY，——维多重接力COSY，选择性远程DEPT和三重共振NOE差谱)解析，鉴定其结构分别为3-O-[β-D-吡喃木糖(1→4)-β-D-吡哺葡萄糖(1→4)][α-L-吡喃鼠李糖(1→3)]-β-D-吡喃半乳糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂甙元(I)和3-0-[β-D-吡喃木糖(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)][α-L-吡喃鼠李糖(1→3)]-β-D-吡喃半乳糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L一吡喃阿拉伯糖-常春藤皂甙元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯甙(II)。并总结出一些光谱方面的变化规律，可用于糖的鉴定，以及构型、糖链的连接顺序和糖与甙元之间的连接位置的说明。     

伊立替康与人参的相互作用研究

目的 考察联用人参对伊立替康大鼠体内药动学的影响，研究伊立替康与人参的相互作用。方法 将SD大鼠随机分成3组：长期组、单剂量组和对照组。长期组人参提取液连续灌胃给药7 d，单剂量组人参提取液灌胃给药1次，对照组给予同体积生理盐水，3组均最后1次给药0.5 h后尾静脉注射伊立替康，于给药后不同时间点取血，采用UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中伊立替康以及活性代谢产物7-乙基-10-羟基喜树碱的浓度，并以DAS 3.1软件计算药动学参数，用SPSS 21.0做统计分析。结果 伊立替康长期组主要药动学参数：t_1/2（0.933±0.080）h、AUC_0-t（3.337±0.341）μg.h.L^–1、MRT_0-t（0.541±0.013）h、MRT_0-∞（0.572±0.016）h；单剂量组：t_1/2（5.527±1.156）h、AUC_0-t（2.078±0.118）μg.h.L^–1、MRT_0-t（0.462±0.023）h、MRT_0-∞（1.405±0.212）h；对照组：t_1/2（0.296±0.011）h、AUC_0-t（2.161±0.146）μg.h.L^–1、MRT_0-t（0.360±0.026）h、MRT_0-∞（0.391±0.026）h。7-乙基-10-羟基喜树碱长期组主要药动学参数：t_1/2（1.240±0.094）h、AUC_0-t（7.810±0.252）μg.h.L^–1、MRT_0-t（2.141±0.031）h、MRT_0-∞（2.250±0.057）h；单剂量组：t_1/2（1.398±0.045）h、AUC_0-t（9.073±0.109）μg.h.L^–1、MRT_0-t（2.337±0.081）h、MRT_0-∞（2.408±0.089）h；对照组：t_1/2（0.928±0.050）h、AUC_0-t（8.933±0.434）μg.h.L^–1、MRT_0-t（1.869±0.061）h、MRT_0-∞（1.935±0.066）h。与对照组相比，长期组伊立替康的t_1/2、MRT_0-t、MRT_0-∞显著延长（P<0.05）；7-乙基-10-羟基喜树碱则单剂量组的t_1/2显著延长（P<0.05）。结论 人参使用1周后联用伊立替康，大鼠体内伊立替康的血浆半衰期、平均滞留时间明显提高。     

中药心得宁口服液对水负荷大鼠模型的影响

摘 要 目的： 观察心得宁口服液对水负荷大鼠模型的影响。方法: 取筛选合格的大鼠70只随机分为7组,每组10只;分别灌服心得宁口服液（20,10,5 ml·kg^-1）、呋塞米片混悬液（0.033 5 mg·mL^-1）、芪苈强心胶囊混悬液（0.03 g·mL^-1）和等体积的蒸馏水（模型组）。空白组不灌服。将大鼠放入代谢笼,每隔1 h记一次尿量,共计5 h,收集给药后5 h的总尿量,测尿液中Na₊、K₊、Cl_-的浓度。结果: 与空白组比,模型组在2,3,5 h尿量均显著增加（P<0.01）,总尿量也显著增加（P<0.01）,尿液中K₊浓度明显减少（P<0.05）、尿液中Na₊、Cl_-浓度有增加趋势,说明造水负荷模型成功。与模型组比,呋塞米可显著升高大鼠1,2,3,4,5 h尿量和总尿量（P<0.01）,芪苈强心胶囊组尿液中K₊浓度明显升高（P<0.05）,呋塞米组尿液中K₊浓度明显降低（P<0.05）,大剂量心得宁口服液可显著升高大鼠5 h尿量（P<0.01）以及尿液中Na₊、Cl_-的浓度（P<0.01）;中剂量心得宁口服液可明显升高大鼠3 h及5 h尿量和总尿量（P<0.05）及尿液中Cl_-的浓度（P<0.05）;小剂量心得宁口服液组中Na₊、Cl_-的浓度均显著降低（P<0.01）。与芪苈强心胶囊组比,心得宁口服液大、中、小剂量对1,2,3,4,5 h尿量和总尿量影响无明显差异（P>0.05）;大剂量心得宁口服液可显著增加尿液中Na₊浓度（P<0.01）,中、小剂量心得宁口服液可明显增加尿液中Na₊浓度（P<0.05）;小剂量心得宁口服液可显著减少尿液中K₊浓度（P<0.01）;大、中剂量心得宁口服液可显著增加尿液中Cl_-浓度（P<0.01）,小剂量心得宁口服液可显著减少尿液中Cl_-浓度（P<0.01）。与大剂量心得宁口服液组比,中、小剂量心得宁口服液对1 h、2 h、3 h、4 h及5 h尿量影响无明显差异（P>0.05）,但均可显著增加总尿量（P<0.01）;中、小剂量心得宁口服液可显著较少尿液中Na₊浓度（P<0.01）、可显著减少尿液中Cl_-浓度（P<0.01）。结论:心得宁口服液有显著利尿作用且有量效关系。     

雌二醇在人、比格犬和大鼠的肝微粒体中体外代谢比较研究

采用体外肝微粒体孵育体系, 研究雌二醇在大鼠、比格犬和人肝微粒体中酶代谢动力学及代谢产物差异。通过对雌二醇浓度、肝微粒体蛋白含量和孵育时间等条件的考察, 优化雌二醇与肝微粒体的反应体系; 应用LC-MS/MS定量检测孵育体系中的雌二醇及代谢产物, 分析比较雌二醇在3个种属、不同性别肝微粒体中代谢产物种类和生成量的差异, 计算并比较相应的动力学参数。在3个种属肝微粒体中均发现9个I相代谢产物, 且百分比有种属差异。结果表明, 3个种属的肝微粒体对雌二醇I相代谢途径基本相同, 但是代谢产物的生成量及雌二醇的药物代谢动力学性质存在一定的差异。     

具有Src激酶和NO合酶双重抑制作用的4-芳杂胺-3-氰基喹啉类抗肿瘤化合物的设计、合成与生物活性研究

Src与iNOS为肿瘤发生、转移中位于不同通路的重要靶酶,本文采用分子拼合的药物设计原理,设计合成了全新的酪氨酸Src蛋白激酶与iNOS的双重抑制剂。所设计合成的化合物经过Src激酶和iNOS的抑制活性检测及体外抗肿瘤测试,实验结果表明大部分化合物对于两种靶酶均表现出一定的抑制活性,部分化合物对于多种肿瘤细胞的增殖有一定的抑制作用。其中化合物33对Src激酶和iNOS均有比较好的抑制活性,对于肝癌HepG2和结肠癌HT-29细胞的增殖也有明显的抑制作用。     

噻吩诺啡在人、比格犬和大鼠肝微粒体中体外代谢比较

采用体外肝微粒体孵育体系, 研究噻吩诺啡在大鼠、比格犬和人肝微粒体中酶代谢动力学及代谢产物差异。通过对噻吩诺啡浓度、微粒体蛋白含量和孵育时间等条件的考察优化噻吩诺啡与肝微粒体的反应体系; 应用LC-MS/MS定量检测孵育体系中的噻吩诺啡及代谢产物, 分析比较噻吩诺啡在3种肝微粒体中代谢产物种类和生成量的差异, 计算并比较相应的动力学参数。噻吩诺啡在人肝微粒体中代谢转化最慢, 其相应的动力学参数K_m = (4.00 ± 0.59) µmol·L⁻¹、V_max = (0.21 ± 0.06) µmol·L⁻¹·min⁻¹、T_1/2 = (223 ± 6.10) min、CL_int = (117 ± 3.19) mL·min⁻¹·kg⁻¹; 比格犬和大鼠肝微粒体中相应的参数K_m、V_max、T_1/2和CL_int分别为 (3.57 ± 0.69) 和 (3.28 ± 0.50) µmol·L⁻¹、(0.18 ± 0.04) 和 (0.14 ± 0.04) µmol·L⁻¹·min⁻¹、(244 ± 1.21) 和 (70.7 ± 1.05) min、(213 ± 1.06) 和    (527 ± 7.79) mL·min⁻¹·kg⁻¹。在3个种属肝微粒体中均观察到噻吩诺啡的6个I相代谢产物, 但6个产物的相对生成百分比在不同种属肝微粒体中有一定差异。实验结果表明, 噻吩诺啡在体外人、比格犬和大鼠肝微粒体中主要的I相代谢途径相同, 但是代谢产物的生成量及噻吩诺啡的代谢动力学性质存在着一定的差异。     

花青素对IgE介导的肥大细胞活化的影响

观察花青素 (anthocyanidin) 对肥大细胞活化脱颗粒的影响。通过大鼠被动皮肤过敏反应 (PCA) 实验, 采用比色测定法检测花青素在体内对肥大细胞的影响; 体外观察花青素对肥大细胞脱颗粒, 细胞内钙摄入, 肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 及白细胞介素6 (IL-6) 释放以及p38MAPK、Akt、NF-κB磷酸化的影响。动物实验显示, 花青素 (50和100 mg·kg⁻¹) 明显抑制大鼠PCA。细胞实验显示, 花青素 (50和100 µmol·L⁻¹) 抑制肥大细胞释放组胺、TNF-α及IL-6, 并可抑制 p38MAPK、Akt和NF-κB的磷酸化。结果提示, 花青素的抗过敏作用与其抑制肥大细胞的脱颗粒, 抑制组胺、TNF-α、IL-6等炎症介质释放以及抑制细胞内钙摄入有关; 花青素抑制肥大细胞的活化可能与其抑制NF-κB、p38MAPK和Akt的活性相关。     

川芎油自微乳化软胶囊大鼠在体肠吸收研究

为了考察川芎油剂型选择的合理性,进行了原料、包合物和自微乳化软胶囊的比较吸收实验;并进一步明确自乳化软胶囊的小肠吸收特点,进行了不同浓度、不同肠段、有无胆汁分泌的在体肠吸收实验。通过药液在肠腔内循环,以藁本内酯为川芎油的指标性成分测定不同时间回流液中蒿本内酯浓度变化,得到药物的吸收情况。结果表明,自微乳化软胶囊显著提高藁本内酯的吸收 (P < 0.001), 效果最好。400 μg·mL^-1藁本内酯的吸收显著高于200和100 μg·mL^-1 (P < 0.001),而后两个浓度的吸收无差异。胆管结扎与否不影响药物吸收。自乳化软胶囊可被大鼠全肠段吸收,其中十二指肠吸收最好,各肠段K_a、P_app是十二指肠>空肠>回肠=结肠。