4种抗类风湿性关节炎药物对佐剂性关节炎大鼠关节软骨基质金属蛋白酶表达的影响

目的观察常用抗类风湿性关节炎(RA)药物对佐荆性关节炎(AA)大鼠关节软骨基质金属蛋白酶(MMPs)的影响和对关节软骨的保护作用.方法将大鼠随机分成正常组、AA模型组、双氯芬酸钠(2mg·kg-1)组、地塞米松(0.2 mg·kg-1)组、雷公藤多苷(50 nag·kg-1)组和左旋咪唑(10 mg·kg-1)组.弗氏完全佐剂(CFA)致炎10 d,AA大鼠出现继发性炎症,腹腔注射地塞米松,其它用药组分别灌胃受试药物,正常组与模型组灌胃等容量灭菌注射用水,连续7 d.光学显微镜观察关节病理变化;用半定量RT-PCR和Western blot法分析药物对AA大鼠关节软骨MMPs表达的影响;免疫组化技术检测药物对AA大鼠关节软骨中Ⅱ型胶原蛋白合成的影响.结果各用药组均能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀;地塞米松和雷公藤多苷均能显著抑制AA大鼠关节软骨MMPs mRNA和MMPs蛋白表达,双氯芬酸钠和左旋咪唑组对MMPs无明显作用;地塞米松和雷公藤多苷均能升高AA大鼠关节软骨细胞基质成分Ⅱ型胶原表达量,双氯芬酸钠和左旋咪唑对其无明显影响.结论常用抗RA药物如地塞米松和雷公藤多苷可能通过抑制MMPs的表达进而保护关节软骨的破坏,而双氯芬酸钠和左旋咪唑对MMPs无作用.     

鸡Ⅱ型胶原对大鼠骨关节炎的防治作用

目的:评估鸡Ⅱ型胶原(chicken collagen typeⅡ,CCⅡ)对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)的防治效果。方法:参照Hayami的方法诱导大鼠OA模型。免疫组化法原位测定基质金属蛋白酶13及组织蛋白酶K水平,比较灌胃高剂量(80μg/d)与低剂量(20μg/d)CCⅡ及对照药布洛芬(10 mg/d)对大鼠OA模型关节软骨的形态学及生化改变的影响。实验分预防性研究与治疗性研究,预防性研究组,术后当日开始用药;治疗性研究组,从术后第7周开始用药;治疗时间均为8周。结果:治疗性灌胃CCⅡ不能完全阻止,但可显著延缓大鼠OA软骨降解,并能降低基质金属蛋白酶13和组织蛋白酶K水平,但远未达到正常水平。预防性灌胃CCⅡ对延缓软骨降解、降低基质金属蛋白酶13和组织蛋白酶K水平的效果比治疗性用药更佳,但仍未达到正常水平。布洛芬对软骨降解及基质金属蛋白酶13和组织蛋白酶K水平无明显影响。结论:CCⅡ可能成为治疗OA的药物。     

几种抗类风湿性关节炎药物对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道的表达影响及作用

目的：观察几种抗类风湿性关节炎（RA）药物对佐剂性关节炎（AA）大鼠关节软骨中的酸敏感离子通道（ASICs）表达的影响，探讨抗RA药物对关节软骨的保护作用。方法：将大鼠随机分成正常组、AA模型组、阿司匹林（50mg／kg）组、地塞米松（0．2mg／kg）组、雷公藤多苷（50mg／kg）组和左旋咪唑（10mg／kg）组。弗氏完全佐剂（CFA）致炎后第10天起，AA大鼠出现继发性炎症，此时地塞米松组腹腔注射地塞米松，其它用药组分别灌胃相应的受试药物，正常组与模型组灌胃等容量的无菌注射用水，连续7d。实验结束后，光学显微镜观察关节病理变化；用半定量RT-PCR和westem blotting分析常用药物对AA大鼠关节软骨细胞中ASICs表达的影响；用半定量RT-PCR方法分析常用药物对AA大鼠关节软骨中的蛋白聚糖体（aggregate proteoglycan，aggrecan）表达的影响；免疫组织化学技术检测常用药物对AA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原蛋白合成的影响。结果：经过治疗后，各用药组能明显抑制AA大鼠的继发性足肿胀。阿司匹林能显著抑制AA大鼠关节软骨细胞ASICs的表达，其它用药组对ASICs无明显抑制作用。各用药组能明显升高AA大鼠关节软骨细胞基质成分Ⅱ型胶原和aggrean表达量，其中阿司匹林作用显著。结论：阿司匹林可能通过抑制ASICs的表达而抑制AA大鼠关节软骨的破坏。     

类风湿关节炎贫血大鼠模型的建立及评价

目的 建立类风湿关节炎贫血(rheumatoid arthritis and anemia,RA-A)的大鼠模型,为进一步研究其机制和治疗提供良好的动物模型.方法 选用雄性Wistar大鼠30只,体重150～ 170 g,随机分为正常对照组、模型Ⅰ组和模型Ⅱ组,各10只.正常对照组在大鼠左后肢足趾注射生理盐水0.625 ml/kg;模型Ⅰ组同一部位注射2.5 mg/ml的Ⅱ型胶原1.5 ml与5 ml弗氏完全佐剂乳化的乳化液0.625 ml/kg;模型Ⅱ组在模型Ⅰ组的基础上,于大鼠左侧大腿肌肉注射肿瘤坏死因子-α(TNF-α)1.25 μg/kg构建大鼠模型.分别测定干预后不同时间点血液中红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)以关节肿胀度和大鼠体重;并于造模第39天,检测血清白介素-6(IL-6)、IL-1、TNF-α、干扰素-γ(IFN-γ)含量及大鼠关节软骨组织病理学变化.结果 造模第2、5、10、17和39天模型Ⅰ组和Ⅱ组体重低于正常对照组(P＜0.01),踝关节肿胀度均高于正常对照组(P＜0.01).造模第10、17和39天,模型Ⅱ组RBC和HGB均低于正常对照组和模型Ⅰ组(P＜0 01),且模型Ⅰ组均低于正常对照组(P＜0.01).造模第39天,模型Ⅱ组IL-6、IL-1、TNF-α和IFN-γ水平均高于正常对照组和模型Ⅰ组(P＜0.01),且模型Ⅰ组均高于正常对照组(P＜0.01).模型Ⅱ组关节软骨组织病理损伤较正常对照组和模型Ⅰ组严重.结论 本研究方法成功获得RA-A的动物模型,是适合研究RA-A发病机制及其治疗的模型.     

桃仁-红花药对对动静力失衡性大鼠椎间盘软骨终板退变的影响

目的探讨桃仁-红花药对对大鼠颈椎间盘软骨终板退变的影响。方法选取清洁级健康Wistar大鼠50只,♂,随机分为对照组、模型组、假手术组、美洛昔康组、桃仁-红花药对组,每组10只。其中模型组、美洛昔康组、桃仁-红花药对组通过手术方法建立动静力失衡性大鼠椎间盘退变模型,假手术组切开皮肤后不做进一步操作。造模12周后,对照组、模型组、假手术组每日给予生理盐水灌胃,美洛昔康组、桃仁-红花药对组每日分别给予等量美洛昔康悬浊液、桃仁-红花煎剂灌胃,连续给药30 d后处死全部大鼠,完整取出C_4/5、C_6/7椎间盘。C_4/5椎间盘固定、切片,ABOG染色法观察椎间盘组织形态学变化;免疫组化法检测Ⅱ型胶原(type Ⅱ collagen,Col Ⅱ)、X型胶原(type X collagen,Col X)蛋白的表达情况;C_6/7椎间盘提取总mRNA,实时定量PCR检测Col Ⅱ、Col X基因的表达情况。结果与模型组比较,桃仁-红花药对组上调软骨终板细胞Col Ⅱ的mRNA及蛋白表达,下调软骨终板细胞Col X的mRNA及蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论桃仁-红花药对可以抑制动静力失衡性大鼠椎间盘退变中的软骨终板退变,进而延缓椎间盘退变。     

多粘菌素B对小鼠免疫功能的影响

多粘菌素B(PMB)0.1～10 mg/kg ip可抑制小鼠免疫功能,使小鼠碳粒廓清功能降低,抗体生成减少;抑制对SRBC的迟发型超敏反应;在体外,1.5～15.4μg/ml的PMB可抑制PHA诱导的淋巴细胞转化。对外周全血白细胞吞噬功能未见明显影响。     

苦地丁总生物碱对小鼠Ⅱ型胶原关节炎的影响

目的探讨苦地丁对小鼠Ⅱ型胶原关节炎的影响。方法小鼠尾根部皮内注射Ⅱ型胶原乳剂建立小鼠关节炎模型(CIA),苦地丁总生物碱(50,100,200mg·kg-1组灌胃给药,每日1次;模型组和空白组灌胃给予等量蒸馏水;实验结束时考察各组临床积分、发病时间、血清中抗-CⅡ抗体含量、胶原所致耳廓DTH;ELISA法检测PGE2、TNF-α、IL-1的水平。结果苦地丁剂量依赖性延迟CIA小鼠的发病时间,减少关节的肿胀和红斑,缓解CIA小鼠体质量减轻,降低小鼠血清中抗-CⅡ抗体水平,抑制CⅡ诱导的小鼠耳廓迟发型超敏反应;明显抑制巨噬细胞释放肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1(IL-1),但对前列腺素(PGE2)的产生无明显影响。结论苦地丁对小鼠CIA有明显的抑制作用。     

五甲基槲皮素对血管紧张素Ⅱ致大鼠心肌纤维化的作用

目的研究五甲基槲皮素(PMQ)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所诱导的大鼠心肌间质纤维化的作用及其机制。方法SD大鼠30只随机分为5组,试验持续21 d。①空白组:每晨生理盐水灌胃;②PMQ组:每晨PMQ 50 mg.kg-1灌胃;③AngⅡ组:于d 15开始皮下注射AngⅡ288μg.kg-1.d-1;④PMQ+AngⅡ组:PMQ和AngⅡ处理同前;⑤溶剂+AngⅡ组:每晨溶剂灌胃,AngⅡ处理同前。d 22处死大鼠,测量心肌羟脯氨酸含量,SOD活力、MDA含量,RT-PCR检测collagenⅠ、collagenⅢ及NADPH oxidase亚单位Nox2和p47phoxmRNA的表达,免疫组化测collagenⅠ、colla-genⅢ容积分数(CVF)及其比值CVFⅠ/CVFⅢ。结果AngⅡ能明显提高大鼠心肌羟脯氨酸含量,上调collagenⅠ、col-lagenⅢ及NADPHoxidase亚单位Nox2和p47phox的mRNA表达,增加collagenⅠ、Ⅲ容积分数及CVFⅠ/CVFⅢ比值,并降低心肌SOD活力、增加MDA含量。PMQ能明显抑制AngⅡ引起的上述改变。结论PMQ能对抗AngⅡ引起的心肌间质纤维化,此效应可能与其抗氧化及下调NADPH oxidasemRNA表达有关。     

阿仑膦酸钠对骨质疏松大鼠关节软骨的影响

目的评价阿仑膦酸钠对骨质疏松大鼠关节软骨的保护作用。方法选取36只6月龄的SD雌鼠随机分为3组(每组12只):假手术组(SHAM)仅手术,不切除卵巢;去卵巢+生理盐水(OVX+NS)组和OVX+阿仑膦酸钠(ALEN)组切除双侧卵巢,其中OVX+ALEN组给予阿仑膦酸钠液(3mg/ml)每周36mg/kg剂量灌胃,SHAM组和OVX+NS组给予同等剂量0.9%生理盐水灌胃,于灌胃后4、8、12周时取大鼠近端胫骨常规脱钙,苏木素-伊红(HE)染色切片测量软骨厚度,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,切片用图像分析仪测量平均灰度值。结果4周时各组的软骨厚度相近;8、12周时OVX+NS组与OVX+ALEN组及SHAM组相比软骨厚度变薄(P<0.05);12周时OVX+NS组Ⅱ型胶原免疫组织化学染色灰度值低于OVX+ALEN组和SHAM组(P<0.05)。结论骨质疏松情况下关节软骨的结构、代谢会发生改变,服用阿仑膦酸钠对关节软骨具有保护作用。     

光动力疗法治疗早期类风湿关节炎的实验研究

目的观察光动力疗法(PDT)对早期类风湿关节炎(RA)大鼠的治疗效果并探讨其作用机制。方法 32只SD大鼠任选8只作为空白对照组,其余24只均注射牛源性Ⅱ型胶原蛋白以建立RA动物模型;造模成功后随机将其分为模型对照组、药物治疗组、PDT治疗组;分别对各治疗组进行不同方式的治疗;定期测量各组大鼠右后足踝关节体积变化情况;治疗14d后,获取大鼠血清和踝关节组织,分别从血清学和病理学改变等方面进行实验分析研究。结果①治疗后PDT和药物治疗组大鼠右后足体积[(1.61±0.19),(1.57±0.13)cm3]较治疗前[(1.60±0.20),(1.61±0.16)cm3]变化不明显(P>0.05),而模型对照组大鼠右后足体积(1.88±0.16)cm3较之前(1.63±0.13)cm3变化明显(P>0.05);②PDT和药物治疗组大鼠细胞因子的表达量白细胞介素(IL)-20[(37±11),(42±8)pg/ml]、转铁蛋白受体(sTfR)[(58±4),(63±5)pg/ml]较模型对照组IL-20(63±7)pg/ml、sTfR(72±4)pg/ml有明显降低(P<0.05);PDT治疗组IL-20表达水平较药物治疗组有明显下降(P<0.05);③光学显微镜下病理切片结果显示:各治疗组大鼠右后足踝关节增生的滑膜减轻明显,生成的血管翳也相对减少,骨破坏程度较模型对照组有所减轻;同时PDT治疗组的滑膜增生程度较药物治疗组减轻明显,生成的血管翳也相对较少。结论 PDT治疗可以抑制RA动物模型滑膜细胞的增生,减少血管翳的形成,同时,能抑制细胞因子IL-20和sTfR的表达。     

靶控输注异丙酚在睡眠呼吸暂停综合征患儿的应用

目的比较靶控输注异丙酚与七氟醚吸入麻醉对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructivesleep apnea syndrome,OSAS,即鼾症）患儿血流动力学的影响及苏醒期的特点。方法选择择期行悬雍垂-腭-咽成形术（uvulopalatopharyngoplasty,UPPP）的OSAS患儿36例,随机分为靶控输注（T）与七氟醚（S）两组。T组（n=18例）诱导采用芬太尼2μg/kg,异丙酚2.5mg/kg及维库溴铵0.1mg/kg后插管,维持采用瑞芬太尼0.2μg/（kg.min）＋血浆靶控输注异丙酚3μg/ml,在手术结束前5min停药。S组（n=18例）诱导采用芬太尼2μg/kg,异丙酚2.5mg/kg及维库溴铵0.1mg/kg后插管,维持采用维持采用瑞芬太尼0.2μg/（kg.min）＋七氟醚（维持呼出浓度在0.8~1.2MAC）静吸复合麻醉,手术结束前5min停药。记录诱导前、诱导后、插管后、切皮后、切皮后20、40min、拔管后、拔管后20、40min的MAP、HR;两组手术时间、手术结束至拔管的时间、术中肌松药总量及术后躁动、恶心呕吐、疼痛等不良反应。结果T组患者在术中血流动力学方面比S组患者平稳,拔管时间较S组短,且术后躁动、恶心呕吐较S组发生率低（P〈0.05）;T组与S组患者在术后疼痛评分差异无显著性。结论靶控输注异丙酚用于鼾症患儿有较明显的临床使用价值。     

阿司匹林对糖尿病模型大鼠血糖的影响

目的:探讨阿司匹林对高脂饲料喂养加链脲菌素所致糖尿病大鼠血糖的影响。方法:制备糖尿病大鼠模型,将其分为阿司匹林低剂量组、高剂量组,模型对照组和空白对照组(非糖尿病大鼠)。分别以20,80 mg.kg-1.d-1阿司匹林水溶液及生理盐水灌胃,14 d后测定小鼠空腹血糖、糖耐量、胰岛素释放。结果:大剂量阿司匹林能明显降低实验性糖尿病大鼠血糖(P<0.01),降糖率36.78﹪;能改善糖耐量(P<0.01),提高血清胰岛素含量(P<0.01)。结论:大剂量阿司匹林可降低血糖,改善糖耐量,促进胰岛素释放。     

雷公藤多苷对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的治疗作用研究Δ

目的：研究雷公藤多苷对实验性自身免疫性重症肌无力（ experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG）大鼠的治疗作用。方法：建立EAMG动物模型,依据Lennon评分法及体质量监测,初步评定雷公藤多苷对EAMG大鼠的治疗作用;并采用实时荧光定量聚合酶链式反应（ real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）方法,检测完全弗氏佐剂组、EAMG模型组、雷公藤多苷治疗组大鼠胸腺及外周血单个核细胞T细胞受体（T-cell receptor,TCR）BV基因信使核糖核酸（mRNA）的表达情况。结果：雷公藤多苷可以改善EAMG大鼠肌无力症状,降低Lennon评分,增加大鼠体质量。 EAMG模型大鼠TCR BV基因表达谱呈现偏移,而雷公藤多苷治疗组大鼠的mRNA表达量有所下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：雷公藤多苷能有效缓解EAMG大鼠的临床症状,能控制EAMG大鼠基因的偏移,可降低特异性活化的抗原反应性T细胞活性。     

番茄红素对雷公藤多苷致小鼠肝损害的保护作用

目的：建立雷公藤多苷肝损伤模型,研究番茄红素对雷公藤多苷致小鼠肝损伤的保护作用。方法：昆明种小鼠40只,随机分为空白组、模型组、番茄红素高剂量组（20mg/kg）、番茄红素低剂量组（10mg/kg）,各组预防性给药（或色拉油）6d后除空白组以外,用20倍常规剂量（270mg/kg）雷公藤多苷建立小鼠肝损伤模型,观察番茄红素对小鼠血清转氨酶（ALT、AST）、肝组织氧化指标及肝脏病理学的影响。结果：雷公藤多苷可使小鼠血清ALT、AST,肝体指数明显增高（P〈0.05）;与模型组比较,番茄红素各剂量组血清AST、ALT含量明显降低（P〈0.05）,小鼠肝组织SOD活性明显升高,降低MDA含量（P〈0.01）;肝组织的病理改变明显减轻（P〈0.05）。结论：番茄红素对雷公藤多苷致肝损伤具有良好的保护作用。     

清胰Ⅱ号颗粒在大鼠体内药动学研究

目的:研究大鼠ig给予清胰Ⅱ号颗粒,其有效成分大黄素在大鼠体内的药动学过程。方法:大鼠分别ig给予不同剂量(2.5、5.0 g·kg~(-1))的清胰Ⅱ号颗粒,采用高效液相色谱法在不同时间点测定血浆中大黄素浓度,并计算药动学参数。结果:给予不同剂量药物的大鼠血浆中大黄素的t_(1/2α)分别为(9.468±8.46)、(21.68±17.867)h;t_(1/2β)分别为(15.388±5.46)、(39.63±24.39)h;t_(max)分别为(2.500±3.479)、(5.333±3.266)h;C_(max)分别为(0.058±0.004)、(0.101±0.007)mg·L~(-1);CL分别为(33.027±9.365)、(9.405±5.846)L·h~(-1)·kg~(-1);AUC(0-∞)分别为(0.652±0.201)、(1.364±0.267)mg·h~(-1)·L~(-1),其动力学过程符合二室模型。结论:建立了大鼠血浆中大黄素浓度检测方法,得到了相关药动学参数,可为清胰Ⅱ号颗粒后续药动学-药效学研究奠定理论基础。     

氯沙坦对慢性心力衰竭大鼠心室重塑和心功能保护作用的实验研究

目的研究氯沙坦(Los)对腹主动脉缩窄致慢性心力衰竭大鼠心室重塑和心功能的保护作用。方法SD大鼠40只,随机分为腹主动脉缩窄(COA)+Vehicle组,COA+Los组,假手术(Sham)+Vehicle组,Sham+Los组。药物干预8周后采用超声心动图和心室插管法评估心功能,计算左、右心室质量指数(LVMI、RVMI),比色法检测心肌羟脯氨酸(HYP)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量和比值,放射免疫法(RIA)检测心肌血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和醛固酮(ALD)水平。常规苏木素-伊红(HE)、Masson三色染色和透射电镜观察心肌组织形态学改变。结果与COA组相比,COA+Los组大鼠心功能和LVMI等指标明显好转,心肌HYP和Ⅰ型胶原含量降低,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值降低;心肌Ang Ⅱ和ALD水平降低;心肌组织形态改变明显好转。结论Los通过阻断Ang Ⅱ与AT1-R结合,抑制心肌Ang Ⅱ和ALD生成,从而改善心肌肥厚和胶原重构所致心室重塑,提高心功能,延缓心力衰竭进展。     

比索洛尔对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及心功能的保护作用

目的研究比索洛尔(Biso)对腹主动脉结扎所致慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和心功能的保护作用。方法 SD大鼠40只,随机分为4组,即腹主动脉缩窄(COA)+Vehicle组;COA+Biso组;假手术(Sham)+Vehicle组;Sham+Biso组。Biso干预8周后采用超声心动图和心室插管法评估各组大鼠的心功能,计算左、右心室质量指数(LVMI、RVMI),高敏酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆去甲肾上腺素(NE)水平,放射免疫法(RIA)检测血浆血管紧张素Ⅱ,AngⅡ水平。用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法观察心肌细胞的凋亡状态,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因的表达变化。结果与COA+Vehicle组相比,COA+Biso组大鼠心功能明显改善[LVEF:COA+Biso组:(67±8)%比COA+Vehicle组:(43±8)%,P<0.05],血浆NE[COA+Biso:(570±41)pg/ml比COA+Vehicle:(908±75)pg/ml,P<0.05]和AngⅡ[COA+Biso:(357±49)pg/ml比COA+Vehicle:(476±51)pg/ml,P<0.05]水平降低,未出现细胞凋亡特有的"DNAladder"现象,TUNEL检测凋亡指数减少[COA+Biso:(9.6±0.5)%比COA+Vehicle:(7.2±0.6)%,P<0.05],RT-PCR检测Bax/Bcl-2比例降低[COA+Biso:(114±9)%比COA+Vehi-cle:(137±9)%,P<0.05]。与Sham+Vehicle组相比,COA+Vehicle组大鼠各项心功能指标明显恶化,心肌细胞凋亡较为严重。结论 Biso可降低血浆NE和AngⅡ水平,并通过阻断NE与β1肾上腺素能受体(β1-AR)结合,抑制凋亡相关通路,从而抑制慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡,改善心功能,延缓心力衰竭进展。